Tutaj prezentujemy kombinację laserowego obrazowania perfuzji dopplerowskiej (LDPI) i laserowego monitorowania perfuzji dopplerowskiej (LDPM) do pomiaru lokalnych przepływów krwi w rdzeniu kręgowym i nasycenia tlenem (SO2), a także ustandaryzowaną procedurę wprowadzania urazu rdzenia kręgowego u szczura.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Wykorzystanie laserowego obrazowania dopplerowskiego i monitorowania do analizy mikrokrążenia rdzenia kręgowego u szczurów
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Laserowa dopplerowska przepływomierz (LDF) jest nieinwazyjną metodą pomiaru przepływu krwi (BF), co czyni ją preferowaną do pomiaru zmian mikrokrążenia w rdzeniu kręgowym. W tym artykule naszym celem było wykorzystanie zarówno laserowego obrazowania dopplerowskiego, jak i monitorowania do analizy zmiany BF po urazie rdzenia kręgowego. Zarówno laserowy skaner obrazu dopplerowskiego, jak i sonda/monitor były używane do uzyskania każdego odczytu. Dane z LDPI dostarczyły lokalnego rozkładu BF, który dał przegląd perfuzji wokół miejsca urazu i udostępnił go do analizy porównawczej BF w różnych lokalizacjach. Poprzez intensywny pomiar obszaru sondowania przez pewien okres czasu, użyto połączonej sondy do jednoczesnego pomiaru BF i nasycenia tlenem rdzenia kręgowego, pokazując ogólną perfuzję rdzenia kręgowego i dopływ tlenu. Sam LDF ma kilka ograniczeń, takich jak strumień względny, wrażliwość na ruch i biologiczny sygnał zerowy. Jednak technologia ta została zastosowana w badaniach klinicznych i eksperymentalnych ze względu na prostą konfigurację i szybki pomiar BF.
Wprowadzenie
Tkanka rdzenia kręgowego jest wysoce unaczyniona i niezwykle wrażliwa na niedotlenienie wywołane uszkodzeniem rdzenia kręgowego (SCI). Nasze wcześniejsze badania wykazały, że przepływ krwi w rdzeniu kręgowym był znacznie zmniejszony po wstrząśnieniu mózgu1,2, co może być związane z deficytem funkcji motorycznych. Ostatnie badania wykazały, że integralność naczyń krwionośnych po SCI jest dobrze skorelowana z poprawą funkcji czuciowo-motorycznych3. Doniesiono, że poprawa unaczynienia może uratować istotę białą, pośrednio prowadząc do poprawy funkcji4. W związku z t....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Protokoły na zwierzętach doświadczalnych były zgodne z wytycznymi ustalonymi przez National Institutes of Health (NIH) i zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Stołecznego Uniwersytetu Medycznego.
Procedury wprowadzania SCI i pomiaru BF rdzenia kręgowego za pomocą laserowego sprzętu dopplerowskiego opisane poniżej zostały wykorzystane w opublikowanym badaniu1.
1. Przygotowanie do operacji
- Przygotować pentobarbital roztwór sodu 3% (w/v) w soli fizjologicznej i podawać w dawce 35 mg/kg.
Uwaga: pentobarbital sodu jest substancją kontrolowaną. S....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Metodą LDPI zmierzono BF w rdzeniu kręgowym, a następnie określono jego wartość wzdłuż osi rostralno-kaudalnej rdzenia poprzez wyekstrahowanie profili liniowych (Rysunek 4). Rysunek 5A oraz Rysunek 5B przedstawiają obrazowanie przepływu w rdzeniu kręgowym odpowiednio w grupie pozorowanej oraz grupie z SCI. Rysunek 5C i Rysunek 5D przedstawia.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Podczas wykonywania tego protokołu należy zwrócić uwagę na kilka szczegółów. Po pierwsze, proces znieczulenia i operacji powinien być przeprowadzony tak szybko i elegancko, jak to możliwe, aby zminimalizować wprowadzany stres u zwierzęcia. Aby zmniejszyć zakłócenia wyników, utrzymuj zwierzę w stosunkowo spokojnym i stabilnym stanie. Po drugie, należy zwrócić większą uwagę na krwawienie podczas pomiaru za pomocą laserowego sprzętu dopplerowskiego, ponieważ krew może potencjalnie zakłócać odczyt. Wreszcie, podczas rejestro.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Autorzy nie mają żadnych podziękowań.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Laserowy skaner linii dopplerowskiej | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
| Laserowy monitor dopplerowski | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
| Sonda do monitora | Moor Instruments | VP3 | Sonda z końcem igły |
| Impaktor | Precyzyjne systemy i oprzyrządowanie | IH-0400 | |
| Fenobarbital sodu | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Buprenorphine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| Strzykawka | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd 300841 | ||
| Igły do szwów chirurgicznych z gwintem | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (numer partii) /4-0 | |
| Skalpel | Fabryka instrumentów do operacji Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4 # | |
| Ostrze skalpela | Fabryka przyrządów operacyjnych Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20 # | |
| Kleszcze okulistyczne | Fabryka przyrządów operacyjnych Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
| Kleszcze hemostatyczne | Fabryka przyrządów operacyjnych Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
| Penicylina benzylowa sodowa | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (numer partii) | |
| 75% alkohol | Produkty do dezynfekcji Dezhou Anjie Gaoke Co., Ltd | 150421R (numer partii) | |
| Jod | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (numer partii) | |
| Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Szczurów, Akademia Medyczna Millitery Sciences | Sprague-Dawly (szczep szczura) |
Bibliografia
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
