Przedstawiono protokół mikroprzepływowego przędzenia i charakterystyki mikrostruktury regenerowanego jedwabnego włókna fibroinowego.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Przedstawiono protokół mikroprzepływowego przędzenia i charakterystyki mikrostruktury regenerowanego jedwabnego włókna fibroinowego.
Protokół demonstruje metodę naśladowania procesu przędzenia jedwabnika. W natywnym procesie przędzenia kurczący się kanał przędzalniczy umożliwia zwarcie i uporządkowanie białek jedwabiu przez siły ścinające i wydłużające. W tym przypadku zaprojektowano biomimetyczny kanał mikroprzepływowy, aby naśladować specyficzną geometrię przędzącego się przewodu jedwabnika. Przędzenie zregenerowanej fibroiny jedwabnej (RSF) domieszkowanej wysokim stężeniem, wytłaczano przez mikrokanaliki w celu przędzenia na sucho włókien w temperaturze i ciśnieniu otoczenia. W procesie obróbki końcowej włókna przędzone były pobierane i przechowywane w wodnym roztworze etanolu. Do zbadania mikrostruktury pojedynczych włókien RSF, które zostały przymocowane do uchwytu na próbkę z osią włókna RSF prostopadłą do mikrowiązki promieniowania rentgenowskiego (SR-WAXD), wykorzystano technologię szerokokątnej dyfrakcji promieniowania rentgenowskiego (SR-WAXD). Krystaliczność, wielkość krystalitu i krystaliczna orientacja włókna zostały obliczone na podstawie danych WAXD. Łuki dyfrakcyjne w pobliżu równika dwuwymiarowego wzoru WAXD wskazują, że włókno RSF poddane obróbce końcowej ma wysoki stopień orientacji.
Pająk i jedwabnik mogą wytwarzać wyjątkowe włókna jedwabiu z wodnego roztworu białka w temperaturze otoczenia i ciśnieniu. Ścinanie i rozciąganie może indukować tworzenie się ciekłokrystalicznej tekstury w gruczole jedwabnym1. W ostatnich latach pojawiło się duże zainteresowanie naśladowaniem procesu przędzenia pająka w celu wytworzenia włókien sztucznych o wysokiej wytrzymałości. Jednak duże ilości białka jedwabiu pajęczego nie mogą być produkowane wydajnie i ekonomicznie przez hodowlę pająków ze względu na kanibalizm. Znaczne ilości jedwabiu jedwabnika można łatwo uzyskać w rolnictwie. W przeciwnym razie jedwabnik i pająk mają podobny proces przędzenia i skład aminokwasowy. Dlatego fibroina jedwabiu jedwabnika jest wybierana przez wielu badaczy jako substytut przędzenia sztucznego jedwabiu zwierzęcego.
Pająk i jedwabnik wytłaczają roztwór białka przez swój kanał przędzalniczy do włókna w powietrzu. Duże siły naprężeń generowane wzdłuż kanału przędzalniczego najprawdopodobniej rozciągają cząsteczki fibroiny jedwabiu do bardziej rozszerzonej konformacji2. Włókna sztucznego jedwabiu zostały przędzone przy użyciu konwencjonalnych procesów przędzenia na mokro i na sucho3,4, które nie uwzględniają sił płynu generowanych w kanale przędzalniczym.
Po pierwsze, zastosowano metody mikroprzepływowe do zbadania składania białka jedwabiu5,6. Następnie badano mikroprzepływowe wytwarzanie RSF poprzez modelowanie sił ścinających i rozciągających7,8. Moduł i średnicę włókien RSF Younga można dostroić za pomocą mikroprzepływowego przędzenia na mokro, ale wytrzymałość na rozciąganie ciągnionego włókna była mniejsza niż 100 MPa7. Ostatecznie udało się przygotować włókna RSF o wysokiej wytrzymałości przy użyciu mikroprzepływowej metody przędzenia na sucho, ale średnica włókna wynosi tylko 2 μm8. Ostatnio mikroprzepływowe przędzenie na mokro było z powodzeniem stosowane w produkcji rekombinowanego włókna jedwabiu pajęczego o wysokiej wytrzymałości. Ciągnienie w powietrzu po przędzeniu poprawiło powierzchnię i wewnętrzne wady włókna sztucznego9.
W tym badaniu wprowadzono ulepszony proces przędzenia mikroprzepływowego dla włókien RSF. Ma na celu naśladowanie procesu przędzenia jedwabiu jedwabnika, w tym przędzenia domieszkowego, sił ścinających i procesu przędzenia na sucho. Ta metoda przędzenia może nie tylko wytwarzać sztuczne włókno jedwabne o wysokiej wytrzymałości, ale także może regulować średnicę włókna. Po pierwsze, domieszka przędząca RSF została ścięta i wydłużona w kanale biomimicznym z rozkładem wykładniczym drugiego rzędu. Po drugie, badano wpływ wilgotności względnej (RH) na morfologię i właściwości włókien w mikroprzepływowym procesie przędzenia na sucho10. W porównaniu z konwencjonalną przędzarką przędzalniczą, nasz system mikroprzepływowy jest wysoce biomimetyczny i może być używany do wytwarzania włókna o wysokiej wytrzymałości z roztworów w temperaturze otoczenia metodą przędzenia na sucho lub na mokro.
Ze względu na wysoką rozdzielczość, wysoką jasność i wysoką energię promieniowania rentgenowskiego z mikrofokusem promieniowania synchrotronowego, może być ono użyte do scharakteryzowania mikrostruktury pojedynczego włókna o średnicy kilku mikrometrów4,11,12,13,14. W tym przypadku zastosowano technikę SR-WAXD do obliczenia krystaliczności, wielkości krystalitów i orientacji krystalicznej włókien RSF.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
OSTRZEŻENIE: Przed użyciem należy zapoznać się ze wszystkimi odpowiednimi kartami charakterystyki materiałów. Kilka z odczynników chemicznych stosowanych do przygotowania formy jest silnie toksycznych. Należy stosować środki ochrony indywidualnej (okulary ochronne, rękawice, fartuch laboratoryjny, długie spodnie i pełne obuwie).
1. Mikrofluidyczne przędzenie wodnego roztworu RSF
2. Charakterystyka struktury krystalicznej włókna RSF za pomocą promieniowania synchrotronowego

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Włókna RSF o wysokiej wytrzymałości zostały pomyślnie wytworzone przy użyciu metody przędzenia mikroprzepływowego. Krzywe naprężenie-odkształcenie oraz obrazy SEM rozciągniętych włókien RSF C44R40 przedstawiono na Rysunku 2. W próbie rozciągania zmierzono co najmniej 10 włókien. Krzywe naprężenie-odkształcenie wybrano na podstawie średniej wartości naprężenia i odkształcenia przy zerwaniu włókien. Dane WAXD włókien przedstawiono na Rysunk...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Podczas dializy roztworu RSF wartość pH ma kluczowe znaczenie dla następnego procesu zatężania. Jeśli wartość pH wody dejonizowanej jest mniejsza niż 6, roztwór RSF będzie łatwiejszy do żelowania podczas procesu zatężania. Aby uniknąć żelowania, CaCl2 dodaje się do roztworu RSF. Stężenie CaCl2 wynosi 1 mmol na masę RSF.
Nasze wcześniejsze prace wykazały możliwość mikroprzepływowego wirowania na sucho wodnego roztworu RSF8. Geometria kanału mikroprz...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Ta praca jest sponsorowana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (21674018), Narodowy Kluczowy Program Badań i Rozwoju Chin (2016YFA0201702 /2016YFA0201700), oraz "Program Shuguang" wspierany przez Shanghai Education Development Foundation i Shanghai Municipal Education Commission (15SG30), DHU Distinguished Young Professor Program (A201302), Fundusze Badań Podstawowych dla Uniwersytetów Centralnych oraz Projekt 111 (No.111-2-04).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| B. mori Rolnik kokonów | w Tongxiang, prowincja Zhejiang, Chiny | ||
| Węglan sodu, bezwodny, 99,8% | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., Chiny | Analitycznie czysty | |
| bromek litu, 99,1% | Shanghai China Lithium Industrial Co., Ltd., Chiny | Analitycznie czysty | |
| chlorek wapnia, bezwodny, 96,0% | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., Chiny | Analitycznie czysty | |
| etanol, bezwodny, 99,7% | Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., Chiny | 10009218 | Analitycznie czysty |
| fotorezystor SU-8 | MicroChem Corp., Stany Zjednoczone | ||
| Opracowywanie rozwiązania | MicroChem Corp., Stany Zjednoczone | ||
| Sylgard 184 | Dow Corning, Stany Zjednoczone | ||
| Isopropanol | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., Chiny | Analitycznie czysty | |
| stężony kwas siarkowy | Fabryka odczynników chemicznych Pinghu, Chiny | Analitycznie czysty | |
| nadtlenek wodoru 30% obj | Shanghai Jinlu Chemical reagent Co., Ltd., Chiny | Analitycznie czysty | |
| aceton | Shanghai Zhengxing Chemical Reagent Factory, Chiny | Analitycznie czysty | |
| Obróbka plazmą tlenową | DT-01, Suzhou Omega Machinery Electronic Technology Co., Ltd., Chiny | ||
| Pompa strzykawkowa | KD Scientific, USA | Nawilżacz KDS 200P | |
| Wiertarka | elektryczna | ||
| Hangzhou Bo Yang Machinery Co., Ltd., Wiertarka stołowa w Chinach | Z406c | ||
| System testowania materiałów | Instron, USA | Model: 5565 | |
| PeakFit | Systat Software, Inc., USA | Wersja 4.12 |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.