Skomputeryzowana bateria testowa do badania wpływu farmakodynamicznego leków cholinergicznych na ośrodkowy układ nerwowy we wczesnej fazie opracowywania leków

Podsumowanie

Zweryfikowana komputerowa bateria testów neuropsychologicznych i neurofizjologicznych jest używana do badania farmakodynamicznego wpływu na ośrodkowy układ nerwowy nowo opracowanych leków we wczesnej fazie rozwoju. Aby zademonstrować baterię testową, opisano ostre działanie mekamylaminy i odwrócenie tego działania przez dwa leki agonistyczne.

Streszczenie

Badanie potencjalnych efektów farmakodynamicznych we wczesnej fazie badań nad lekami na ośrodkowy układ nerwowy (OUN) może dostarczyć cennych informacji do dalszego rozwoju nowych związków. Wykazano, że skomputeryzowany i dokładnie zwalidowany zestaw testów neuropsychologicznych i neurofizjologicznych jest czuły na wykrywanie indukowanych przez leki skutków wielu nowych i istniejących związków. Bateria testowa obejmuje główne domeny OUN, które, jak wykazano, reagują na działanie leku i mogą być wielokrotnie podawane po podaniu leku w celu scharakteryzowania profilu stężenie-efekt leku.

Standardowe testy w baterii to sakkadowe ruchy gałek ocznych, płynny ruch gałek ocznych w pościgu, wizualna skala analogowa Bowdle'a (VAS), VAS Bonda i Ladyra, kołysanie ciała, adaptacyjne śledzenie, wizualne uczenie się werbalne i ilościowa elektroencefalografia (qEEG). Jednak bateria testowa ma charakter adaptacyjny, co oznacza, że można ją skomponować i dostosować za pomocą testów odpowiednich do badania określonych klas leków, a nawet określonych receptorów.

Pokazanie efektów nowych leków cholinergicznych, które mają mieć prokognitywny wynik, było trudne. Model prowokacyjny farmakologiczny jest narzędziem do wczesnego dowodu farmakologii. W tym przypadku lek sprzedawany jest stosowany w celu wywołania tymczasowych i odwracalnych objawów podobnych do choroby u zdrowych osób, poprzez mechanizm farmakologiczny związany z chorobą, który jest celem jako wskazanie dla nowego związku. Bateria testowa została wdrożona w celu zbadania potencjału antagonisty receptora nikotynowego, mekamylaminy, do wykorzystania jako model prowokacyjny dla dysfunkcji cholinergicznej, obserwowanej w zaburzeniach neurodegeneracyjnych.

Pogorszenie wyników w sposób zależny od dawki w teście wizualnego uczenia się werbalnego (VVLT; test zdolności uczenia się i pamięci) oraz teście adaptacyjnego śledzenia (miara kontroli wzrokowo-motorycznej i pobudzenia), w szczególności, wykazało, że bateria testowa jest wrażliwa na wykazanie ostrego efektu farmakodynamicznego po podaniu leków antycholinergicznych.

Wprowadzenie

Wraz ze stałym wzrostem oczekiwanej długości życia człowieka w ciągu ostatniego stulecia, częstość występowania i częstość występowania chorób starzejącego się mózgu, takich jak demencja i inne procesy neurodegeneracyjne, również rośnie. Równolegle rozwija się zatem opracowywanie nowych leków do leczenia tych chorób. Jednak wiele nowych leków, które mają być aktywne w OUN, nie trafia na rynek z powodu braku efektów centralnych lub niepożądanych skutków ubocznych w późniejszych fazach rozwoju leku¹. W tradycyjnych badaniach fazy 1 celem jest uzyskanie informacji na temat farmakokinetyki, czyli wpływu, jaki organizm ludzki wywiera na lek (na przykład poprzez metabolizowanie), a także bezpieczeństwa i tolerancji nowego leku. Wczesny dowód działania farmakodynamicznego (wpływu, jaki lek wywiera na organizm) może być jednak jeszcze ważniejszy w decyzjach o postępach w rozwoju klinicznym nowego związku i może pomóc uniknąć błędnego podejmowania decyzji z konsekwencjami w późniejszych fazach procesu rozwoju².

W ciągu ostatnich dwóch dekad, Centrum Badań nad Narkotykami na Ludziach (CHDR) opracowało komputerową baterię testów neuropsychologicznych i neurofizjologicznych wrażliwych na wpływ leków na OUN. Ta bateria testowa jest używana wielokrotnie w ciągu dnia do pomiaru efektów farmakodynamicznych nowego związku. W ten sposób dostarcza dowodów na zdolność leku do wywoływania pożądanego efektu, przenikania przez barierę krew-mózg i wnikania do mózgu, lub jej braku³. Ponadto wyniki zestawu testowego mogą dostarczyć informacji na temat mechanizmu działania związku, ponieważ poszczególne testy odpowiadają określonym domenom OUN reagującym na leki. Na przykład, jeśli efekty nowego leku są widoczne w teście uczenia się labiryntu, który jest testem na wzrokowo-przestrzenną pamięć roboczą, może to oznaczać, że lek działa na receptory w częściach mózgu zaangażowanych w wzrokowo-przestrzenną pamięć roboczą. Ponadto bateria testowa służy do badań przesiewowych pod kątem skutków ubocznych OUN dla związków, które nie są przeznaczone do pracy w OUN i w przypadku których należy wykluczyć aktywację OUN.

Bateria testowa składa się z dużej liczby testów poznawczych i neurofizjologicznych, które okazały się czułe na wykrywanie farmakodynamicznych efektów aktywnych leków na OUN^3,4,5,6. Podstawowa bateria testowa obejmuje sześć domen neuropsychologicznych: funkcjonowanie wykonawcze, uwagę, pamięć, funkcjonowanie wzrokowo-motoryczne lub koordynację, zdolności motoryczne i subiektywne działanie leków. Podstawowe testy to: sakkadowy ruch gałek ocznych⁷, płynny ruch gałek ocznych w pościgu⁸, Bowdle VAS^{9, Bond and} Lader VAS¹⁰, kołysanie ciała, adaptacyjne śledzenie¹¹, wizualne uczenie się werbalne¹² oraz qEEG, które obejmują główne domeny poznawcze i neurofizjologiczne wymienione wcześniej. Wykazano, że testy te są w stanie zmierzyć zmiany w funkcjach OUN w wyniku podawania kilku rodzajów i klas leków (patrz poniżej). Bateria może być podawana wielokrotnie (do 12 razy po podaniu leku) ze względu na 30-minutowy całkowity czas podawania, który jest niezbędny do scharakteryzowania profilu stężenie-efekt leku. Bateria testowa może być rozszerzana i dostosowywana za pomocą różnych testów odpowiednich do badania określonych klas leków, a nawet określonych receptorów. Bateria testowa została przetestowana w szerokim zakresie leków działających na różne układy OUN (np. benzodiazepiny, leki przeciwpsychotyczne, etanol i konopie indyjskie^{12,13,14,15,16,17,18,19,20,21}), aby móc wiarygodnie wykazać wpływ leku na OUN.

Chociaż istnieją inne skomputeryzowane baterie testowe (opisane na przykład w Egerhazi et al.²² oraz Underwood et al.²³) i są szeroko stosowane w badaniach klinicznych, bateria testowa opisana w tym artykule wyróżnia się tym, że obejmuje nie tylko testy neuropsychologiczne, takie jak VVLT i VASs, ale także pomiary neurofizjologiczne (np. EEG, testy ruchu gałek ocznych), łącząc w ten sposób różne aspekty funkcjonowania mózgu w jednej baterii testowej i lepiej odzwierciedlając multimodalną naturę zachowań poznawczych. Ponadto, ponieważ bateria testowa jest skomputeryzowana, wyniki testów są generowane elektronicznie. Skutkuje to wartościami wyników, które są takie same, gdy są używane w różnych badaniach przez różny personel badawczy, co pozwala na standaryzację wyników, a także wartości, które są mniej podatne na błędy w porównaniu z ręcznym ocenianiem. Pliki z wynikami można łatwo przesłać do elektronicznych systemów baz danych i wykorzystać do generowania okresowych raportów na temat skutków farmakodynamicznych nowych leków w ciągu jednego dnia.

Istnieje co najmniej jedna klasa leków, w przypadku których wczesne udowodnienie efektu farmakologicznego w mózgu było trudne; leki (pro)cholinergiczne. Acetylocholina jest jednym z głównych neuroprzekaźników OUN i wykazano, że odgrywa kluczową rolę w funkcjach poznawczych, szczególnie w procesach takich jak uczenie się i pamięć^24,25. W związku z tym wskazywane jest, że dysfunkcja cholinergiczna leży u podstaw procesów neurodegeneracyjnych, takich jak choroba Alzheimera²⁶. Nowe związki zaprojektowane w celu poprawy funkcji poznawczych, takie jak agoniści receptorów muskarynowych i nikotynowych, wchodzą obecnie w badania kliniczne.

Ponieważ badania wczesnej fazy są zazwyczaj przeprowadzane u zdrowych, często młodych osób, które poznawczo działają na normalnym poziomie, trudno jest zbadać lub nawet udowodnić farmakodynamiczne działanie nowego leku przeznaczonego do leczenia zaburzeń poznawczych u pacjentów z chorobą mózgu.

Nasza grupa opracowała narzędzie, które może być użyte do zademonstrowania wczesnego dowodu farmakologii nowego leku: model prowokacji farmakologicznej. Już zatwierdzony i wprowadzony do obrotu lek jest stosowany w celu wywołania tymczasowych i odwracalnych objawów podobnych do choroby u zdrowych ochotników, za pomocą mechanizmu farmakologicznego związanego z chorobą, który jest celem jako wskazanie dla nowego związku. W większości przypadków efekt ten jest niepożądanym skutkiem ubocznym leku, wynikającym z aktywacji receptorów w innym miejscu w organizmie człowieka niż w miejscu, w którym lek ma działać. Na przykład antagonista muskarynowego receptora acetylocholiny, skopolamina, jest stosowany w leczeniu nudności i wymiotów spowodowanych chorobą lokomocyjną. Skutki uboczne wynikające z antagonizowania muskarynowych receptorów acetylocholiny w mózgu to efekty antykognitywne, takie jak zmniejszona uwaga i pamięć, przypominające deficyty obserwowane w chorobie Alzheimera²⁷.

Ponieważ skopolamina jest używana jako muskarynowy model prowokacyjny acetylocholiny do wywołania podobnego do Alzheimera, ale tymczasowego, efektu poznawczego u zdrowych osób²⁷, CHDR opracował i zatwierdził farmakologiczny model prowokacyjny z mekamylaminą. Mekamylamina jest niekonkurencyjnym antagonistą nikotynowego receptora acetylocholiny²⁸, który powoduje dysfunkcję cholinergiczną, tj. przejściowe deficyty poznawcze, u zdrowych młodych mężczyzn^29,30.

Wyżej wspomniana skomputeryzowana bateria testowa została wykorzystana do zbadania potencjału różnych poziomów dawek mekamylaminy, aby pokazać wpływ na testy neurofizjologiczne i poznawcze. Oczekiwano, że wraz ze wzrostem dawki, wpływ na różne testy również się zwiększy. Następnie efekty te były związane ze stężeniami leku w osoczu, co skutkowało zależnością stężenie w osoczu od skutków (farmakokinetyczne-farmakodynamiczne) mekamylaminy²⁹.

Testy włączone do projektu tego badania zostały wybrane na podstawie oczekiwanych efektów znanych z literatury oraz farmakologicznego mechanizmu działania mekamylaminy na receptory nikotynowe:

Test adaptacyjnego śledzenia:

To jest zadanie polegające na śledzeniu pościgu, służące do pomiaru koordynacji wzrokowo-ruchowej i trwałej uwagi. Okrąg o znanych wymiarach porusza się losowo po ekranie. Tester musi starać się utrzymać kropkę wewnątrz poruszającego się okręgu, używając joysticka. Jeśli ten wysiłek się powiedzie, prędkość poruszającego się okręgu wzrasta. I odwrotnie, prędkość maleje, jeśli badany nie może utrzymać kropki wewnątrz koła. W przeciwieństwie do nieadaptacyjnych metod śledzenia, prowadzi to do stałego i indywidualnie dostosowanego wyzwania podczas całej procedury. Zastosowany test adaptacyjnego śledzenia został opracowany przez Hobbs & Strutt, zgodnie ze specyfikacjami Borland and Nicholson¹¹.

Testy płynnego pościgu i sakkadowych ruchów gałek ocznych:

Użycie komputera do pomiaru wychylnych ruchów gałek ocznych i płynnego pościgu zostało pierwotnie opisane przez Baloh et al.⁷, a dla płynnego pościgu przez Bittencourt et al.⁸, i został szeroko zweryfikowany w CHDR przez Van Steveninck et al.^19,20,21 Badany musi podążać oczami za źródłem światła, które porusza się poziomo na ekranie w odległości 58 cm. Źródło światła porusza się w sposób ciągły w celu pomiaru płynnego pościgu i przeskakuje z boku na bok w celu pomiaru wychylnych ruchów gałek ocznych.

VASs:

Ocena subiektywnych uczuć czujności, nastroju i spokoju została przeprowadzona przy użyciu zestawu 16 wizualnych linii analogowych, jak opisali Norris (1971) oraz Bond i Lader¹⁰. Wizualne wyniki analogowe opierają się na zdolności badanych do częściowego ilościowego określenia stanu subiektywnego. Wizualne linie analogowe składają się z 10-centymetrowych odcinków linii. Temat jest przedstawiany za pomocą 16 linii, po jednej na raz, na ekranie komputera. Na dwóch końcach wiersza przedstawione są dwa przeciwstawne słowa reprezentujące stany umysłu (np. szczęśliwy – smutny, napięty – zrelaksowany). Badani umieszczali znak w punkcie na linii, który najlepiej reprezentuje ich subiektywny stan odpowiadający badanemu warunkowi. Wynikiem jest odległość (mm) obliczona od znaku na linii.

Kołysanie ciała:

Ciąg znaków pochodzący z potencjometru, który jest wbudowany w komputer testowy, jest używany do pomiaru stabilności postawy w pojedynczej płaszczyźnie, podczas gdy badany stoi nieruchomo z zamkniętymi oczami (opisany w de Haas et al.^{Rozdział 12}).

VVLT:

VVLT to test do nauki słów i pamięci, opisany bardziej szczegółowo w de Haas et al.¹² Tematy są prezentowane za pomocą serii 30 słów, jedno po drugim na ekranie komputera. Słowa muszą być wymówione i zapamiętane. Istnieją trzy próby natychmiastowego przypomnienia, jedna opóźniona próba bezpłatnego przypomnienia sobie (tj. bez prezentacji słów) po około 20 minutach oraz próba rozpoznawania.

Farmako-EEG:

Dla standardowego farmako-EEG, elektrody są ograniczone do przewodów śródstrzałkowych (Fz, Cz, Pz i Oz), dwóch elektrod do rejestrowania ruchów gałek ocznych (zewnętrzne canthi), oraz elektrody uziemiającej umieszczonej 2 cm nad nasionem. Zmiany amplitudy następujących pasm częstotliwości są określane ilościowo za pomocą analizy widma (tj. szybkiej transformacji Fouriera): pasmo ß (13,5-35 Hz), pasmo γ (35-48,9 Hz), pasmo α (7,5-13,5 Hz) oraz pasma θ i δ (7,5 Hz lub mniej).

Protokół

Każde niezależne badanie z użyciem tej baterii testowej zostało zatwierdzone przez niezależne komisje bioetyczne, a mianowicie 'komisję etyki medycznej Centrum Medycznego Uniwersytetu w Lejdzie', Leiden, Holandia, lub 'Stichting Beoordeling Ethiek Biomedisch Onderzoek, Assen, Holandia.

1. Komputerowe testy oceny baterii

UWAGA: Bateria testowa powinna być zainstalowana w kontrolowanych warunkach (np. natężenie światła, temperatura w pomieszczeniu i hałas tła), aby zminimalizować wpływ czynników zewnętrznych na wyniki badanego. Testy, które mogą być wykonywane wielokrotnie, powinny być wykonywane co najmniej raz przed podaniem leku, aby służyły jako punkt odniesienia. Tabela materiałów zawiera przegląd materiałów i wyposażenia, z których wykonana jest bateria testowa.

1. Test śledzenia adaptacyjnego
   1. Włącz zasilanie komputera z baterią testową i włącz komputer oraz ekrany.
   2. Umieść obiekt przed ekranem komputera (obiektu) i joystickiem.
   3. Sprawdź, która ręka jest preferowana przez fotografowany i odpowiednio wyreguluj joystick.
   4. Poinstruuj badanego, aby trzymał joystick jako długopis, z ręką spoczywającą na stole.
   5. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu.
   6. Wypełnij wymagane dane szczegółowe, takie jak przedmiot i numer badania.
   7. Wykonaj test, klikając "start" na ekranie asystenta testów.
   8. Monitoruj wyniki osoby badanej na ekranie asystenta testów i zachęcaj osobę badaną do trzymania kółka wokół kropki, jeśli osoba badana nie może przekroczyć współczynnika trudności 2.
2. Sakkadowa próba ruchu gałek ocznych i płynnego pościgu
   UWAGA: Elektrody ruchu gałek ocznych należy przymocować do miejsc określonych w protokole badania klinicznego opartym na Systemie 10-20 Międzynarodowej Federacji Towarzystw Elektroencefalografii i Neurofizjologii Klinicznej.
   1. Zidentyfikuj zewnętrzną kąt prawego oka (tj. kąt na zewnętrznym końcu szczeliny między powiekami).
   2. Powtórz tę procedurę dla lewego oka.
   3. Zidentyfikuj miejsce na elektrodę uziemiającą 2 cm powyżej nasiona (tj. nasady nosa).
   4. Dokładnie przetrzyj miejsca elektrod oka za pomocą żelu do oczyszczania skóry z bawełnianą chusteczką do pomiaru bioelektrycznego (patrz krok 3.1), aby zmniejszyć impedancję skóry, i użyj bawełnianego patyczka.
   5. Uważaj, aby nie ścierać skóry, ale nie pocieraj zbyt delikatnie. Zetrzyj resztki żelu gazą.
   6. Nałóż trzy elektrody samoprzylepne w przygotowanych miejscach.
   7. Podłącz przewody do elektrod ocznych. Połóż rękę za przyciskiem elektrody, aby zapobiec jej wciskaniu się w skórę.
   8. Skieruj przewody wzdłuż uszu przez ramię fotografowanej osoby, aby zapobiec zwisaniu przewodów przed oczami.
   9. Podłącz trzy przewody do miernika impedancji elektrody.
   10. Sprawdź impedancję na wyświetlaczu: jeśli impedancja przekracza 5 kΩ, sprawdź jakość mocowania elektrody.
   11. Podłącz obiekt do systemu pomiaru ruchu gałek ocznych, podłączając wszystkie elektrody do telefektora i podłącz jego do amplifier.
   12. Poinstruuj badanego, aby położył głowę na zagłówku i zrelaksował się, podążał za światłem na ekranie, poruszając oczami i nie poruszał głową.
   13. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu. Wypełnij wymagane dane szczegółowe, takie jak przedmiot i numer badania.
   14. Rozpocznij test, naciskając spację po instrukcji "go" na ekranie asystenta testów.
3. Bond i lader VAS
   1. Poinstruuj badaną, aby oceniła, jak się aktualnie czuje, używając myszki do zaznaczenia wizualnej linii analogowej prezentowanej na ekranie.
   2. Poinstruuj badanego, że najbardziej skrajne punkty na linii reprezentują najbardziej ekstremalne doznania, jakie można sobie wyobrazić.
   3. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu. Wypełnij wymagane dane szczegółowe, takie jak przedmiot i numer badania.
   4. Poinstruuj badanego, aby rozpoczął test, klikając myszką.
4. Kołysanie nadwozia
   UWAGA: Podczas tego testu badani powinni nosić płaskie buty. Na ekranie komputera nie są wyświetlane żadne instrukcje ani inne bodźce.
   1. Poproś osobę, która stanęła przed komputerem, zachowując odległość między stopami około 10 cm, a ramiona zwisające wzdłuż ciała.
   2. Przymocuj sznurek pochodzący z potencjometru wbudowanego w komputer baterii testowej do talii ochotnika (np. paska lub spodni) za pomocą klipsa na końcu sznurka.
   3. Dostosuj wysokość stołu, na którym znajduje się komputer, aż ciąg znajdzie się poziomo; dopuszczalne jest maksymalne odchylenie 5 °. Poproś osobę, aby zamknęła oczy.
   4. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu. Wypełnij wymagane dane szczegółowe, takie jak przedmiot i numer badania.
   5. Rozpocznij test, klikając "Rozpocznij sesję próbkowania wychylania ciała" na ekranie komputera asystenta testowego.
5. VVLT
   UWAGA: Ochotnicy nie mogą zapisywać słów w żadnym momencie podczas całej procedury testowej.
   1. Poinstruuj badanego, że podczas następującej po nim automatycznej (wizualnej) prezentacji słów, powinien on nazwać słowa, gdy się pojawią i zapamiętać je, oraz że na końcu listy wszystkie słowa, które są przywoływane, powinny być nazwane, każde słowo tylko raz.
   2. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu. Wypełnij wymagane dane szczegółowe, takie jak przedmiot i numer badania.
   3. Poinstruuj badanego, aby przeczytał pisemne instrukcje wyświetlane na ekranie.
   4. Powiedz testerowi, że test rozpocznie się, gdy tester naciśnie spację.
   5. Nagraj przywołane słowa (poprawne, niepoprawne i wielokrotnie wymienione słowa), klikając przywołane słowa na ekranie asystenta testów.
6. Farmako-EEG
   UWAGA: Elektrody powinny być przymocowane w miejscach określonych w protokole, a lokalizacje są oparte na Systemie 10-20 Międzynarodowej Federacji Towarzystw Elektroencefalografii i Neurofizjologii Klinicznej.
   1. Zmierz i określ dokładne położenie elektrod na głowie badanego.
   2. Dokładnie przetrzyj to miejsce za pomocą bawełnianego patyczka i żelu do oczyszczania skóry, aby zmniejszyć impedancję skóry. Uważaj, aby nie ścierać skóry, ale nie pocieraj zbyt delikatnie.
   3. Stań za obiektem i przymocuj elektrody do oczyszczonych miejsc. Pracuj od tyłu do przodu.
   4. Przełóż nasadkę elektrody przez pudełko z pastą i wytrzyj pozostałą część, uderzając nasadką wzdłuż brzegu pudełka.
      UWAGA: Nakrętka powinna być całkowicie wypełniona, ale nie przeładowana pastą.
   5. Dociśnij elektrodę do oczyszczonego miejsca, w razie potrzeby rozprowadzając włosy na skórze głowy. Dociśnij elektrodę do skóry i uważaj, aby pod elektrodą znajdowało się jak najmniej włosów.
   6. Umieść drut elektrody przez ramię osoby badanej na kolanach osoby
   badanej.
   7. Użyj małego kawałka włosów, aby przymocować elektrodę za pomocą pasty (która pojawia się z otworu nasadki elektrody) i dodatkowego kawałka włosów (pod kątem prostym do drugiego kawałka) z odrobiną pasty, aby jeszcze bardziej przymocować elektrodę do skóry.
   8. Sprawdź, czy impedancje elektrod są poniżej 5 kΩ i wyreguluj w razie potrzeby.
   9. Użyj taśmy, aby zwinąć druty i przymocować wiązkę do ubrania osoby.
   10. Podłączyć przewody elektrod do urządzenia rejestrującego.
   11. Otwórz program EEG na komputerze.
   12. Poinstruuj badanego, aby się zrelaksował i nie poruszał się ani nie mówił przez cały okres pomiaru.
   13. Poinstruuj osobę, aby zamknęła oczy fotografowanej osoby.
   14. Uruchom skrypt testowy za pomocą zainstalowanego programu.

ocena	domena	Opis		Wartości wynikowe		Specyfiki
Test śledzenia adaptacyjnego	Koordynacja wzrokowo-ruchowa, czujność	Okrąg porusza się losowo wokół ekranu komputera. Tester musi starać się utrzymać kropkę wewnątrz poruszającego się okręgu, używając joysticka. Jeśli ten wysiłek się powiedzie, prędkość poruszającego się okręgu wzrasta. Prędkość jest zmniejszana, jeśli osoba badana nie jest w stanie utrzymać kropki wewnątrz koła.		Procent czasu poprawnie śledzonego		Czas podawania: 4 minuty
Badanie sakkadowych ruchów gałek ocznych	Sakkadowe ruchy gałek ocznych	Osoba badana musi podążać za źródłem światła tylko oczami, które porusza się poziomo na ekranie w odległości 58 cm. Źródło światła przeskakuje z boku na bok w celu pomiaru wychylnych ruchów gałek ocznych.		Procent czasu, w którym oczy badanego są w płynnym pościgu za celem, dla każdej prędkości bodźca i dla każdej częstotliwości bodźca		Czas podawania: 2 minuty.
Test płynnego pościgu	Płynny pościg	Osoba badana musi podążać za źródłem światła tylko oczami, które porusza się poziomo na ekranie w odległości 58 cm. Źródło światła porusza się w sposób ciągły w celu pomiaru płynnego pościgu.		Prędkość szczytowa (stopnie/s), czas reakcji (s), wielkość skoku (stopnie), pierwotne odchylenie sakkadowe (deg) i niedokładność (%) są obliczane dla każdego sakkadowego ruchu gałek ocznych		Czas podawania: 2 minuty.
Test kołysania ciała	Kontrola postawy w jednej płaszczyźnie	Podmiot proszony jest o stanie nieruchomo, z zamkniętymi oczami, podczas gdy jest podłączony do miernika za pomocą sznurka. Stopy powinny mieć około 10 cm części, a dłonie w zrelaksowanej pozycji wzdłuż ciała.		Ruch przednio-tylny w mm		Czas podawania: 2 minuty.
Wizualne skale analogowe (B&L)	Subiektywna ocena czujności, nastroju, spokoju	Badani proszeni są o wskazanie, co myślą o określonym stanie, klikając na linię o długości 100 mm, otoczoną dwoma przeciwstawnymi przymiotnikami (np. senny - przebudzony). Test składa się z 16 pozycji (tj. linii).		Wszystkie wyniki są mierzone w mm, od początku linii po lewej stronie do punktu, w którym znak uzyskany przez osobę badaną przecina linię. Wynik reprezentuje przymiotnik po prawej stronie linii (np. wyższy wynik na skali oznaczonej jako przebudzony - senny oznacza, że badany czuje się bardziej senny). Obliczane są wyniki złożone dla trzech domen: wynik złożony dla czujności składa się z dziewięciu wyników, nastroju pięciu i spokoju dwóch.		Czas podawania: 2 minuty.
Wizualny test uczenia się tekstu pisanego	Uczenie się, pamięć krótko- i długotrwała, wyszukiwanie	Tematy otrzymują 30 słów w trzech kolejnych próbach słownych, tj. teście nauki słów. Każda próba kończy się swobodnym przypomnieniem sobie prezentowanych słów (Immediate Rerecall – test określający przyswajanie i utrwalanie informacji). Około 30 minut po rozpoczęciu pierwszego badania, badany jest proszony o przypomnienie sobie jak największej liczby słów (Opóźnione Przypomnienie - ten test mierzy aktywne odzyskiwanie z pamięci długotrwałej). Zaraz po tym badany przechodzi test rozpoznawania pamięci, który składa się z 15 prezentowanych słów i 15 "dystraktorów" (Delayed Recognition – testowanie pamięci podręcznej).		Na próbę rejestrowana jest całkowita liczba poprawna, całkowita liczba nieprawidłowa i całkowita liczba dubli. W przypadku badania rozpoznawczego rejestruje się całkowitą liczbę prawidłowych, całkowitą liczbę nieprawidłową oraz czas reakcji (oraz SD RT).		Czas podawania: 10 minut
Farmako-EEG	ilościowa, mózgowa aktywność EEG	Badani proszeni są o relaks i, w zależności od protokołu, o otwarcie lub zamknięcie oczu.		Dla każdego przewodu (przewód czołowy: czołowy (Fz) - centralny (Cz), przewód centralny: Cz - ciemieniowy (Pz), przewód ciemieniowy: Pz - potyliczny (Oz)), przeprowadzana jest szybka analiza transformacji Fouriera w celu uzyskania sumy amplitud w zakresach częstotliwości delta- (2-4 Hz), theta (4-7,5 Hz), alfa- (7,5-13,5 Hz), beta- (13,5-35 Hz) i gamma (35-48,9 Hz)		Czas podawania: 4 minuty

Tabela 1: Opis i szczegóły ocen. Opis specyfiki poszczególnych testów, w tym opis testowanej domeny, czasu podawania i określonych zmiennych wynikowych.

Wyniki

Komputerowe testowe oceny baterii generują ustandaryzowane i elektroniczne pliki danych. Szczegółowe informacje na temat wartości wyników dla każdego testu znajdują się w tabeli 1.

Bateria testowa jest przede wszystkim używana we wczesnych fazach badań klinicznych leków, badających efekty nowych związków w porównaniu z (nieaktywnym) placebo lub (aktywnym) lekiem porównawczym. W związku z tym w analizie statystycznej danych należy uwzględnić czynnik "traktowanie". W przypadku większości testów stosowanych w protokole należy przeprowadzić ocenę przed podaniem dawki (tj. bez podania leku), aby służyła jako dane wyjściowe. VVLT można wykonać tylko w jednym punkcie czasowym po podaniu dawki (często w momencie, w którym stężenie leku jest najwyższe), bez pomiaru przed dawką, efektów uczenia się i zakłóceń procesu uczenia się dla przed i po podaniu dawki stosuje się różne listy słów. Ponieważ większość testów jest wykonywana wielokrotnie po podaniu leku w celu scharakteryzowania profilu czasowego działania leku, wpływ czasu powinien być uwzględniony w analizie statystycznej danych.

W protokole tutaj, wyniki testów były analizowane za pomocą analizy kowariancji w modelu mieszanym (ANCOVA) z podmiotem, podmiotem według leczenia i podmiotem według czasu jako efektami losowymi; a leczenie, okres badania i leczenie według czasu jako efekty stałe. Średnia wartość wyjściowa dla każdego testu została przyjęta jako współzmienna, ponieważ pomiary wyjściowe wykonano dwukrotnie, aby zapobiec utracie danych wyjściowych, jeśli jedna z ocen okazała się niewystarczająca. Przed wdrożeniem modelu mieszanego dane zostały sprawdzone pod kątem normalności rozkładu za pomocą wykresów Q-Q. W razie potrzeby dane zostaną przekształcone w logarytm w celu zapewnienia normalnego rozkładu. Analizę przeprowadza się przy użyciu metody najmniejszych kwadratów (LSM), gdzie dla każdego traktowania w analizie oszacowanie średniej jest obliczane przez model (tj. LSM). LSM nie jest tym samym, co średnia surowych danych dla leczenia, ponieważ nastąpiła korekta dla wartości wyjściowej, a brakujące wartości zostały oszacowane przez model i uwzględnione w analizie.

Analiza jest przedstawiona na wykresach LSM, które są oparte na szacunkach analizy i różnią się od średnich wykresów opartych na profilu czasowym surowych danych. Ponieważ LSM nie mają odchyleń standardowych, wykresy są tworzone z 95% słupkami błędów przedziału ufności. Aby uniknąć przepełnienia wykresu, wyświetlane są tylko słupki błędów leczenia o najwyższej wartości, a leczenia o najniższej wartości są wyświetlane w dół.

Ostre efekty farmakodynamiczne pojedynczej doustnej dawki chlorowodorku mekamylaminy w dawkach 10 mg i 20 mg, 15-minutowej infuzji 0,5 mg bromowodorku skopolaminy i podwójnego placebo (doustnie i dożylnie) są pokazane w Rysunek 1 (zmiana w stosunku do wyjściowego wykresu LSM). Ponieważ VVLT jest wykonywany tylko raz po podaniu, dane VVLT są wyświetlane w tradycyjny sposób na wykresie pudełkowym, z różnymi ramkami dla każdego zabiegu (patrz Rysunek 2).

Protokół opisany w tym artykule jest częścią większego badania opisanego w opublikowanej literaturze^29,30 oraz opublikowanym w druku. Wyniki opisane poniżej są przykładem wyników dwóch skomputeryzowanych testów baterii u 12 zdrowych młodych mężczyzn w czterokierunkowej konstrukcji krzyżowej. Więcej informacji na temat badania można znaleźć w Baakman i wsp.³⁰

Zgodnie z oczekiwaniami, na wyniki testu adaptacyjnego śledzenia (procent prawidłowo śledzonych) negatywnie wpłynęło podawanie antagonistów cholinergicznych: mekamylaminy i skopolaminy. Zarówno leczenie skupolaminą w dawce 20 mg, jak i w dawce 0,5 mg znacząco pogorszyło wynik w porównaniu z placebo. Ogólny efekt leczenia wynosił F = (3,33) 43,25, p < 0,0001, szacowana różnica w stosowaniu mekamylaminy w dawce 20 mg wynosiła -2,06% prawidłowo śledzona (95% przedział ufności [CI]: -3,97, -0,15) przy p = 0,0355, a szacowana różnica skopolaminy wynosiła -10,4% prawidłowo śledzona (95% przedział ufności [CI]: -12,4, -8,39) przy p < 0,0001.

Patrząc na VVLT, podawany raz po podaniu dawki w +3,5 h dla prób natychmiastowego przypomnienia i +5 h dla prób opóźnionych i rozpoznających, wszystkie terapie spowodowały gorszą wydajność (tj. mniej zapamiętanych słów) w trzeciej próbie natychmiastowego przypomnienia i próbie opóźnionego przypomnienia (ogólny efekt leczenia wynosił F = (3,33) 15,17, p < 0,0001 dla trzeciej próby natychmiastowego przypomnienia i F = (3,34) 9,98, p < 0,0001 dla badania z opóźnionym wycofaniem produktu). Dwa poziomy dawkowania mekamylaminy wykazały efekt zależny od dawki, ponieważ dawka 20 mg wykazała większy spadek całkowitej liczby prawidłowo wycofanych produktów w porównaniu z placebo niż dawka 10 mg w porównaniu z placebo. W trzecim badaniu dotyczącym natychmiastowego przypomnienia wyniki są następujące: średnio -2,7 słowa (95% przedział ufności [CI]: -5,1, -0,3), p = 0,0286 dla podawania mekamylaminy w dawce 10 mg i średnio -3,6 słowa (95% CI: -5,9, -1,4), p = 0,0025 dla podawania mekamylaminy w dawce 20. W przypadku badania z opóźnionym przypomnieniem wyniki są następujące: średnio -3,1 słowa (95% przedział ufności [CI]: -5,8, -0,4), p = 0,0259 dla podawania mekamylaminy w dawce 10 mg i średnio -3,8 słowa (95% przedział ufności [CI]: -6,4, -1,2), p = 0,0051 dla podawania mekamylaminy w dawce 20. Podawanie skopolaminy w dawce 0,5 mg wykazało jeszcze silniejszy negatywny wpływ na zapamiętywanie słów: średnio -7,7 słowa (95% przedział ufności [CI]: -10,1, -5,4), p < 0,0001 w trzecim badaniu dotyczącym natychmiastowego przypomnienia i średnio -7,1 słowa (95% przedział ufności [CI]: -9,8, -4,5), p < 0,0001 w badaniu opóźnionego przypominania, wszystkie w porównaniu z placebo.

Wiadomo, że podawanie skopolaminy zdrowym osobom wywołuje duży negatywny wpływ na wyniki testów poznawczych, co zostało na przykład opisane w dużym badaniu z udziałem 90 zdrowych mężczyzn⁶. Opisane powyżej wyniki pokazują, że testy skomputeryzowanej baterii były również w stanie wykazać ten znaczący efekt przeciwkognitywny 0,5 mg dożylnie podawanej skopolaminy. Jeśli chodzi o podawanie mekamylaminy, literatura donosi, że niższe dawki do 20 mg wywołują negatywny wpływ na wyniki testów poznawczych^31,32,33, mimo że rzeczywisty efekt jest znacznie mniejszy w porównaniu z efektem skopolaminy³⁰, co jest również widoczne w wynikach tego protokołu.

Te wyniki pokazują, że testy z baterii testów komputerowych są czułe na wykazanie ostrych efektów farmakodynamicznych po pojedynczym podaniu badanych leków antycholinergicznych. Testy mogą rozróżniać między podawaniem placebo a lekiem, a co ważniejsze, mogą różnicować między antagonistą muskaryny skopolaminą a antagonistą nikotyny mekamylaminą. Efekty te są wielokrotnie wykazywane w wielu testach, co widać po wynikach statystycznych i podobnych wykresach z wynikami testów (dane przedstawione w Baakman i wsp.30).

Rycina 1: Wpływ placebo, doustnej mekamylaminy w dawce 10 mg i 20 mg oraz dożylnego podania 0,5 mg skopolaminy na adaptacyjny test śledzenia u 12 zdrowych młodych mężczyzn. Przebieg w czasie średnich wartości (i SD dla najwyższych i najniższych wyników) dla testu adaptacyjnego śledzenia, mierzonego w wielu punktach czasowych po podaniu leku (przy t = 0), zmiana w stosunku do danych wyjściowych dla 12 zdrowych mężczyzn . Odsetek prawidłowo śledzonych pacjentów jest przedstawiony na osi y, punkt czasowy po podaniu dawki jest przedstawiony na osi x, z podwójnymi wynikami placebo (doustnie i dożylnie) (szare kółko), wynikami 10 mg mekamylaminy (purpurowy kwadrat), 20 mg mekamylaminy (zielone trójkąty) i 0,5 mg skopolaminy (niebieskie romby). Rysunek ten został zmodyfikowany na podstawie Baakman et al.³⁰ Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rycina 2: Wpływ placebo, doustnej mekamylaminy w dawce 10 mg i 20 mg oraz dożylnego podania 0,5 mg skopolaminy na test wizualnego uczenia się werbalnego u 12 zdrowych młodych mężczyzn. Wyniki badania VVLT z opóźnionym rozpoznawaniem (ryc. po lewej) i trzeciego badania z natychmiastowym przypomnieniem, z liczbą poprawnie zapamiętanych słów na osi y i leczeniem na osi x, dla 12 zdrowych mężczyzn płci męskiej. Ogólny efekt leczenia jest pokazany w lewym dolnym rogu, wartości p poszczególnych kontrastów leczenia w porównaniu z placebo są przedstawione za pomocą gwiazdek (*). Mediana jest reprezentowana przez grubą czarną linię w polu. Średnia jest reprezentowana przez czerwoną literę "M". Szare kółka reprezentują rzeczywiste punkty danych (tj. obserwacje). Rysunek ten został zmodyfikowany na podstawie Baakman et al.³⁰ Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Dyskusja

Dowód działania farmakodynamicznego ma kluczowe znaczenie we wczesnej fazie opracowywania leków, ponieważ gwarantuje kolejny krok, jakim jest wprowadzenie nowego leku u większej liczby pacjentów³⁴. W przypadku leków opracowanych w taki sposób, aby działały w OUN, szczególnie ważne jest wykazanie efektów, które wskazują na przenikanie bariery krew-mózg³⁵. Mimo że nakłucie lędźwiowe po otrzymaniu leku jest często wybierane jako wskaźnik penetracji bariery krew-mózg, jest to technika inwazyjna i uciążliwa, a ponadto obecność leku w płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF) nie jest równoznaczna z aktywacją leku poprzez wiązanie się z jego celem (celami) w mózgu.

Badania fazy I tradycyjnie są badaniami intensywnie wykorzystującymi dane, z wieloma seriami ocen w ściśle następujących po sobie, w celu scharakteryzowania profilu farmakokinetycznego i farmakodynamicznego nowego leku. Leki, które działają w OUN, mogą wpływać na więcej niż jedną domenę neuropsychologiczną i/lub neurofizjologiczną, ponieważ różne receptory często nie są zlokalizowane tylko w jednym regionie mózgu. Główne receptory nikotynowe biorące udział w funkcjach poznawczych znajdują się w korze przedczołowej, ruchowej i śródwęchowej, a przy mniejszej gęstości w korze obręczy i skroniowej, wzgórzu i zwojach podstawy³⁶. Ponadto pojedynczy obszar mózgu jest często połączony z wieloma innymi obszarami mózgu³⁷.

Dlatego skomputeryzowany rdzeń baterii testowej składa się z zestawu czułych testów, których skład można zmieniać (tj. testy mogą być dodawane lub usuwane z baterii) w oparciu o oczekiwane efekty OUN, aby zmaksymalizować szansę na pozytywne wyniki. Ta elastyczność sprawia, że bateria nadaje się do użytku w badaniach z różnymi rodzajami leków, ale także w różnych populacjach. Na przykład, w badaniu dotyczącym nowego leku w małej grupie 24 pacjentów z chorobą Huntingtona (neurodegeneracyjne zaburzenie ruchowe), podstawowa bateria testowa została zaktualizowana o test umiejętności motorycznych (test stukania palcem, w którym w 5 kolejnych próbach po 10 s każda, spacja musi zostać stuknięta palcem wskazującym dominującej ręki tak szybko, jak to możliwe). Jedną z cech charakterystycznych choroby Huntingtona są zaburzenia motoryki małej³⁸. Pomiar zdolności motorycznych nie jest uwzględniany w podstawowym teście, ale ma znaczenie dla badania potencjalnych zmian w funkcjonowaniu motorycznym w chorobie Huntingtona. Niemniej jednak podstawowe testy pozostały dość stabilne w czasie, co wskazuje na wrażliwość baterii na działanie dużej liczby leków.

Liczba testów w baterii powinna być zwięzła, aby umożliwić wielokrotne przeprowadzanie testów po podaniu leku, przy czym sesje testowe powinny być zaplanowane w taki sposób, aby (przypuszczalny) profil farmakokinetyczny leku był ściśle przestrzegany. Spowoduje to uzyskanie informacji o działaniu farmakodynamicznym zbiegających się z procesami farmakokinetycznymi, takimi jak wchłanianie, stężenie szczytowe i eliminacja leku, informacji, które można połączyć w modelu farmakokinetyczno-farmakodynamicznym, który został również opracowany dla protokołu opisanego w tej pracy²⁹.

W niektórych przypadkach dokładny mechanizm działania badanego związku nie jest jeszcze w pełni poznany na podstawie badań na zwierzętach. W ciągu ostatnich dwóch dekad podstawowe testy ze skomputeryzowanej baterii zostały wykorzystane do scharakteryzowania profilu działania dużej liczby różnych badanych, ale także zarejestrowanych leków, z których znany jest mechanizm działania. W ten sposób powstała baza danych profili specyficznych dla leków, w której dla różnych leków o tym samym mechanizmie działania obserwuje się porównywalne profile baterii testowych³. Pozwala to na porównanie profilu nowego leku z profilami związków, których mechanizm działania jest znany, a jeśli zostanie znalezione podobieństwo, może to dać wgląd w mechanizm działania badanego związku. Fakt, że zidentyfikowano porównywalne profile testowe dla różnych związków o podobnym mechanizmie działania, stanowi mocny dowód na czułość podstawowych testów baterii testowej na działanie leków na OUN.

Potencjał powtarzalności w krótkim czasie po podaniu leku ma kluczowe znaczenie dla sukcesu baterii, takiej jak skomputeryzowana bateria testowa opisana w tym artykule. Na OUN wpływają jednak zarówno czynniki endogenne, jak i egzogenne, zmieniając w ten sposób wyniki testu pacjenta³⁹. Podkreśla to znaczenie standaryzacji warunków środowiska testowego, wraz z innymi czynnikami specyficznymi dla przedmiotu. Dokładne warunki, które mają być zachowane podczas wykonywania testów, powinny być określone w protokole badania i jednolicie przestrzegane u wszystkich uczestników przez cały czas trwania badania. Oświetlenie i temperatura w pomieszczeniu powinny być utrzymywane na stałym poziomie przez cały okres testowania, a stopień rozproszenia uwagi (hałas, wiele osób w pomieszczeniu podczas testowania itp.) powinien być ograniczony do minimum. Inne czynniki, które można kontrolować, to pewne aspekty stylu życia badanych, takie jak rytm dobowy, odpoczynek i zmęczenie, spożycie określonego rodzaju żywności i napojów oraz stosowanie substancji psychoaktywnych.

Wiadomo również, że na wyniki testów neuropsychologicznych może mieć wpływ praktyka lub efekty uczenia się⁴⁰, zwłaszcza testy pamięciowe, takie jak uczenie się historii i listy słów⁴¹ (np. test VVLT). W związku z tym należy zwrócić szczególną uwagę na liczbę sesji szkoleniowych i wykonywanie testów.

Inne znormalizowane, skomputeryzowane baterie testowe zostały opracowane i są szeroko stosowane w opracowywaniu leków, z tymi opisanymi w Egerhazi i wsp.²² oraz Underwood i wsp.²³ są jednymi z najczęściej stosowanych w badaniach klinicznych. Jak wspomniano wcześniej, skomputeryzowana bateria testów opisana w niniejszym artykule różni się od tych systemów tym, że obejmuje również pomiary ocen neurofizjologicznych (np. źrenic, ruch gałek ocznych, EEG) za pomocą łatwych dodatków do systemu komputerowego, oprócz bardziej tradycyjnych testów neuropsychologicznych, takich jak test n-back (opisany w Alvarez-Jimenez i wsp.).²⁹). Pozostałe systemy są jednak komputerami przenośnymi, co umożliwia testowanie w wielu lokalizacjach. Obecnie konfiguracja skomputeryzowanej baterii testowej opracowanej przez CHDR nie jest przystosowana do łatwego transportu między lokalizacjami. Zaprojektowano bardziej przenośną wersję (tj. laptopa), która jest obecnie testowana. Pozwoliłoby to na przeprowadzanie testów w wieloośrodkowych badaniach klinicznych, a być może nawet w domu np. pacjentów, którzy nie mogą odwiedzić instytutu badawczego z powodu problemów z poruszaniem się.

Skomputeryzowana bateria jest elastyczną baterią w tym sensie, że inne testy neuropsychologiczne lub fizjologiczne, które okazały się wrażliwe na działanie leków na OUN, mogą być włączone do systemu. Potencjały związane ze zdarzeniami (ERP)⁴² są niedawnym przykładem tego procesu: ERP zyskują zainteresowanie badaniami klinicznymi, a zapotrzebowanie na włączenie testów mierzących różne ERP do badań klinicznych rośnie. W CHDR trwa obecnie ciągła walidacja systemów ERP pod kątem wdrożenia w skomputeryzowanej baterii testowej.

Podsumowując, standaryzowany, skomputeryzowany zestaw testów oceny neuropsychologicznej i neurofizjologicznej opisany w tym artykule ma na celu zbadanie efektów farmakodynamicznych aktywnych leków na OUN we wczesnej fazie opracowywania leków. Podstawowe testy niezawodnie i wielokrotnie wykazały, że są wrażliwe na wpływ na OUN, co wskazuje na penetrację bariery krew-mózg i farmakologiczną aktywację miejsc docelowych w OUN.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
NeuroCart ogólny sprzęt komputerowy
Amplicon Impact E70 (=komputer)
Transformator izolacji medycznej	Thalheimer Trenntransformator	ERT 230/23/6G
24-calowy panoramiczny ekran	DELL	U2412M	dla tematu
Mysz PS2	DELL		dla tematu
Klawiatura PS2 DELL			do obiektu
Aparat fotograficzny	Canon	EOS 1100D
EOS program narzędziowy	Canon	N.A.	Oprogramowanie do aparatu fotograficznego
17-calowy ekran komputera (asystent naukowy)	Monitor DELL	1708FP	dla asystenta naukowego
Klawiatura USB (asystent naukowy)	DELL		dla asystenta naukowego
Mysz USB (asystent naukowy)	DELL		dla asystenta naukowego
Nazwa<	silny>Firma	Numer katalogowy	Komentarze
>NeuroCart ogólne oprogramowanie komputerowe
Windows 7 lub nowszy	Microsoft
E-prime 2.0	Psychology Software Tools, Inc. (PST)	N.A.	Każdy test ma niestandardowy, wewnętrznie zwalidowany skrypt
Nazwa	Firma	>Numer katalogowy	Komentarze
EEG i oku sprzęt do elektrod
Grass series Systemy wzmacniaczy	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	15LT	wzmacniacz do elektrod
EEGPoczwórny, szerokopasmowy, programowalny, programowalny wzmacniacz prądu przemiennego	Grass-Telefactor, Grupa produktów Astro-Med, Inc./Natus	15A54	część wzmacniacza 15LT
Poczwórny, programowalny wzmacniacz AD o wysokim wzmocnieniu	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Skrzynka wejściowa bioelektryczna Natus	15A94
, model płytki elektrodowej BIPOLA	Grass-Telefactor, Grupa produktów Astro-Med, Inc./Skrzynka wejściowa Natus	15LT	do elektrody
Miernik impedancji elektrody	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	F-EZM5
Przetwornik A/D	Cambridge Electronic Design (CED), Cambridge, Wielka Brytania	1401 Mk1 i Mk2
Złote elektrody	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Elektrody EEG Natus	Fx-E5GH
Elektrody EKG Ambu Elektrody	EKG BlueSensor	N-OO-s/25	Elektrody do oczu
EC2 krem	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	N.A.	Krem do elektrod
Nuprep	Weaver i Spółka	N.A.	Żel do przygotowania skóry
Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
oprogramowanie EEG i eye
Grass link 15 oprogramowanie	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	N.A.
Spike 2	Cambridge Electronic Design Limited	N.A.	Każdy test ma niestandardowy, zweryfikowany skrypt
Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Adaptacyjne materiały śledzące (twarde i programowe)
Adaptacyjny joystick śledzący	Job Kneppers Ontwerp en Realisatie B.V., Delft.	Nie	Zbudowany na zamówienie
TrackerUSB	Kevin Hobbs, CarbisDesign, Wielka Brytania	N.A.	Adaptacyjne oprogramowanie śledzące
Nazwa	Firma	>Numer katalogowy	Komentarze
Bodysway hardware
Posturograph	Sentech BV	Celesco SP2 -50
Transformator izolacyjny medyczny	Thalheimer Trenntransformator	ERT 230/23/6G
Systemy wzmacniaczy serii Grass	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	15LT
Poczwórny, szerokopasmowy, programowalny wzmacniacz prądu przemiennego o wysokim wzmocnieniu	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	15A54
Poczwórny, programowalny wzmacniacz AD o wysokim wzmocnieniu	Grass-Telefactor, An Astro-Med, Inc. Grupa produktów/Natus	15A94
Skrzynka wejściowa bioelektryczna, model płytki elektrod BIPOLA	Grass-Telefactor, Grupa produktów Astro-Med, Inc./Natus	15LT