Poprzez badanie architektury biologicznych struktur nośnych (LBBS), takich jak muszle i kości, inżynierowie opracowali nowe materiały kompozytowe, które charakteryzują się jednocześnie wysoką wytrzymałością i odpornością na pękanie 1. Wykazano, że niezwykłe właściwości mechaniczne struktur LBBS oraz ich bioinspirowanych odpowiedników są związane z ich złożoną wewnętrzną architekturą 2. Jednakże zależności między architekturą LBBS a właściwościami mechanicznymi nie są w pełni zrozumiałe. Pomiar odpowiedzi mechanicznej struktury LBBS jest pierwszym krokiem do zrozumienia, w jaki sposób jej architektura poprawia właściwości mechaniczne.
Ważne jest jednak, aby rodzaj testu wykorzystywanego do pomiaru odpowiedzi mechanicznej LBBS była zgodna z jego funkcją mechaniczną. Na przykład, ponieważ pióra muszą znosić obciążenia aerodynamiczne, główną funkcją rachis pióra jest zapewnienie sztywności zginania 3. Dlatego do pomiaru jego odpowiedzi mechanicznej preferowany jest test zginania zamiast jednowymiarowej próby rozciągania. W rzeczywistości wiele LBBS-ów — takich jak rachis piór 3, łodygi traw 4 oraz spikule 5,6,7,8 — ulega przede wszystkim odkształceniom poprzez zginanie. Wynika to z faktu, że struktury te są smukłe — tzn. ich długość jest znacznie większa niż szerokość lub głębokość. Przeprowadzenie testów zginania na tych LBBS-ach jest jednak trudne, ponieważ siły i przemieszczenia, które są one w stanie wytrzymać przed zniszczeniem, mieszczą się odpowiednio w zakresie od 10-2 do 102 N oraz od 10-4 do 10-3 m 3,4,5,7,8. W konsekwencji urządzenie używane do przeprowadzania tych testów mechanicznych powinno posiadać rozdzielczość siły i przemieszczenia wynoszącą odpowiednio ≈10-5 N i ≈10-7 m (tzn. 0,1% maksymalnej mierzalnej siły i przemieszczenia czujnika).
Dostępne komercyjnie, wielkoskalowe systemy badań mechanicznych zazwyczaj nie pozwalają na pomiar sił i przemieszczeń z taką rozdzielczością. Choć urządzenia testowe oparte na mikroskopii sił atomowych 9,10 lub systemach mikroelektromechanicznych 11 posiadają odpowiednią rozdzielczość, maksymalna siła (odpowiednio przemieszczenie), jaką mogą zmierzyć, jest mniejsza niż maksymalna siła (odpowiednio przemieszczenie), jaką może wytrzymać LBBS. W związku z tym, aby przeprowadzić testy zginania tych LBBS, inżynierowie i naukowcy muszą polegać na specjalistycznych, budowanych na zamówienie urządzeniach do badań mechanicznych 5,7,12,13. Główną zaletą tych dedykowanych urządzeń jest możliwość obsługi szerokich zakresów sił i przemieszczeń. Jednakże konstrukcja i zasada działania tych urządzeń nie są dobrze udokumentowane w literaturze.
Opisano protokół przeprowadzania testów zginania trójpodporowego przy użyciu specjalnie skonstruowanego urządzenia do badań mechanicznych, które umożliwia pomiar sił w zakresie od 10-5 do 101 N oraz przemieszczeń w zakresie od 10-7 do 10-2 m. Rysunki techniczne komponentów urządzenia do badań mechanicznych, zawierające wszystkie wymiary, znajdują się w materiałach uzupełniających. Główną zaletą tego urządzenia jest możliwość łatwego dostosowania zakresów siły i przemieszczenia do różnych LBBSs. Zasada działania urządzenia jest podobna do zasady działania mikroskopu sił atomowych 9. W urządzeniu tym próbka jest umieszczana w poprzek szczeliny wyciętej w płycie ze stali nierdzewnej (patrz Rysunek 1A-C). Rozpiętość szczeliny, zmierzona na podstawie mikrografii optycznych, wynosi 1278 ± 3 µm (średnia ± odchylenie standardowe; n = 10). Krawędzie szczeliny podtrzymują próbkę podczas testu zginania (patrz Rysunek 1C oraz D). Stołik z próbką jest przymocowany do trójosiowego stołu translacyjnego i ustawiony pod aluminiowym klinem w taki sposób, aby klin znajdował się w połowie rozpiętości szczeliny (patrz Rysunek 1C). Poprzez przesuwanie stołu w kierunku
(patrz Rysunek 1A oraz C), próbka jest dociskana do klina, co powoduje jej zgięcie.
Klin określamy mianem grotu punktu obciążenia (LPT), a element urządzenia zawierający klin jako punkt obciążenia (LP). LP jest przymocowany do końca wspornika, którego przemieszczenie jest mierzone przez światłowodowy czujnik przemieszczeń (FODS). FODS emituje światło podczerwone, które odbija się od lustra znajdującego się na górnej powierzchni LP (patrz Rysunek 1B) i jest odbierane przez światłowód w FODS. Jako lustro LP wykorzystuje się polerowany fragment płytki krzemowej o boku ≈5 mm, który jest przytwierdzony do LP za pomocą żywicy epoksydowej. FODS mierzy przemieszczenia poprzez porównywanie intensywności światła emitowanego i odbitego. Sztywność i przemieszczenie wspornika służą do obliczenia siły,
, działającej na klin w wyniku jego oddziaływania z próbką. Przemieszczenie wspornika jest również wykorzystywane do obliczenia przemieszczenia przekroju poprzecznego próbki pod klinem,
. Czujniki siły oparte na wspornikach były stosowane w wielu badaniach mechanicznych w mikro- i makroskali 10,11,12,13,14. Przedstawiona tutaj konkretna konstrukcja została zaadaptowana z urządzenia do badań mechanicznych stosowanego w eksperymentach dotyczących kontaktu adhezyjnego 14. Podobna konstrukcja została wykorzystana również w dostępnym komercyjnie mikrotrybometrze 15,16.

Rysunek 1: Przegląd specjalnie skonstruowanego urządzenia do badań mechanicznych. (A) Rendering urządzenia wykonany w programie wspomaganego projektowania komputerowego. Elementy stołu są wyróżnione na zielono. Podzespół czujnika siły (wspornik, punkt obciążenia (LP)) jest wyróżniony na czerwono. (B) Powiększony widok (A). Lustro LP jest zaznaczone na niebiesko na górnej powierzchni LP pod FODS i jest opisane jako LPM. (C) Układ współrzędnych używany do opisu ruchu stołu translacyjnego. Poprzez wypoziomowanie stołu w kroku 1.9 protokołu, kierunek
zostaje dopasowany do wektora normalnego do powierzchni lustra LP. (D) Schemat konfiguracji zginania trójpunktowego pokazujący odkształcenie spikuli oraz zmierzone przemieszczenia
oraz
. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.
Możliwości urządzenia zostały zademonstrowane poprzez przeprowadzenie testów zginania trójpodporowego na elementach szkieletowych gąbki morskiej Euplectella aspergillum6,7. Szkielet tej gąbki stanowi zespół włókien, zwanych spikulami (patrz Rysunek 2A). Spikule mają grubość ≈50 µm i składają się głównie z krzemionki 6. Spikule oparte na biosilice występują u gąbek należących do klas Demospongiae, Homoscleromorpha i Hexactinellida. Gąbki, takie jak E. aspergillum, które należą do klasy Hexactinellida, są znane również jako „gąbki szklane”. Chociaż spikule gąbek szklanych składają się głównie z krzemionki, wykazano, że krzemionka ta często zawiera macierz organiczną składającą się z kolagenu 17,18 lub chityny 19,20,21. Macierz organiczna ta odgrywa istotną rolę w biomineralizacji krzemionki 18,20. Ponadto w niektórych spikulach macierz organiczna służy również jako matryca dla biomineralizacji wapnia 22. Oprócz rozmieszczenia wewnątrz krzemionki, macierz organiczna może również tworzyć wyraźne warstwy, które dzielą krzemionkę spikuli na koncentryczne, cylindryczne lamelki 6,23. Wykazano, że ta koncentryczna, lamelarna architektura może wpływać na zachowanie spikul podczas deformacji 6,7,8,24,25,26. W konsekwencji właściwości mechaniczne spikul są determinowane przez kombinację ich składu chemicznego (t.j. struktury chemicznej kompozytu krzemionkowo-białkowego) oraz ich architektury 27. Zarówno struktura chemiczna, jak i architektura spikul gąbek szklanych są nadal przedmiotem badań 24,28,29.
Większość spikuli u E. aspergillum jest ze sobą scementowana, tworząc sztywną klatkę szkieletową. Jednak u podstawy szkieletu znajduje się pęczek bardzo długich (≈10 cm) spikuli, znanych jako spikule kotwiczące (patrz Rysunek 2A). Opisujemy protokół przeprowadzania testów zginania trójpunktowego na małych fragmentach spikul kotwiczących.
W kroku 1 protokołu opisano procedurę montażu i wyrównania komponentów niestandardowego urządzenia do badań mechanicznych. Kroki 2 i 4 protokołu zawierają instrukcje dotyczące generowania danych kalibracyjnych wykorzystywanych do obliczania sił i przemieszczeń w teście zginania. Kroki podjęte w celu przygotowania fragmentu spikuli i jego zamocowania w uchwycie testowym opisano w kroku 3. Procedura przeprowadzania testu zginania fragmentu spikuli opisana jest w kroku 5. Na koniec, w sekcji Reprezentatywne wyniki, dane kalibracyjne uzyskane w krokach 2 i 4 są wykorzystywane wraz z danymi z testu zginania uzyskanymi w kroku 5 do obliczenia
oraz
.

Rysunek 2: Procedura sekcjonowania i inspekcji spikul E. aspergillum. (A) Szkielet E. aspergillum. U podstawy szkieletu widoczny jest pęczek wolnostojących spikul kotwicowatych. Pasek skali wynosi ~25 mm. (B) Pojedyncza spikula kotwicowata unieruchomiona na szkiełku mikroskopowym za pomocą pędzla z czerwonego kuna nr #00000 i sekcjonowana za pomocą żyletki. Pasek skali wynosi ~12 mm. (C) Przekrój spikuli E. aspergillum umieszczony w poprzek rowka na stole preparatowym. Krawędzie rowka i krawędź grzbietu rowka są wyróżnione odpowiednio kolorem turkusowym i pomarańczowym. Spikulę dociska się do grzbietu rowka, aby zapewnić, że jej oś jest prostopadła do krawędzi rowka. (D) Mikrografia spikuli, która przeszła procedurę inspekcji opisaną w kroku 3.4 protokołu, w którym wyjaśniono, jak określić, czy przekrój spikuli jest uszkodzony i powinien zostać odrzucony. (E) Mikrografia spikuli zawierającej wiele pęknięć i brakujące duże fragmenty warstw krzemionki, która nie przeszłaby procedury inspekcji opisanej w kroku 3.4 protokołu. Paski skali = 250 µm (C), 100 µm (D) oraz 100 µm (E). Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.