Artykuł metodologiczny

Egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test

DOI:

10.3791/56705

⸱

17 sierpnia 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania, 2Monell Chemical Senses Center, 3Department of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery, Division of Rhinology, Hospital of the University of Pennsylvania

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół mierzy ludzkie reakcje smakowe i obejmuje krótką ocenę anatomiczną, krótki test smaku oraz metodę walidacji przy użyciu zgłoszonego przez badanego genotypu odczucia i receptora smaku.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rosnące znaczenie smaku w medycynie i badaniach biomedycznych oraz nowa wiedza na temat jego genetycznych podstaw, zmotywowały nas do uzupełnienia klasycznych metod testowania smaku na dwa sposoby. Po pierwsze, wyjaśniamy, jak przeprowadzić krótką ocenę jamy ustnej, w tym języka, aby upewnić się, że brodawki smakowe są obecne i odnotować oznaki odpowiedniej choroby. Po drugie, opieramy się na genetyce, aby zweryfikować dane z testów smaku, porównując doniesienia o odczuwanej intensywności goryczy i wrodzonych genotypach receptorów. Rozbieżność między obiektywnymi pomiarami genotypu a subiektywnymi raportami dotyczącymi doznań smakowych może zidentyfikować błędy w zbieraniu danych, rozproszenie uwagi osób lub osoby, które nie zrozumiały lub nie postępowały zgodnie z instrukcjami. Oczekujemy, że szybkie i wiarygodne testy smaku mogą przekonać badaczy i klinicystów do regularnej oceny smaku, dzięki czemu testowanie smaku będzie tak powszechne, jak badanie słuchu i wzroku. Wreszcie, ponieważ wiele tkanek ciała wyraża receptory smaku, reakcje smakowe mogą stanowić wskaźnik wrażliwości tkanek w innych częściach ciała, a tym samym służyć jako szybki test przyłóżkowy do kierowania diagnozą i narzędzie badawcze do oceny funkcji białka receptora smaku.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Miary percepcji ludzkiego smaku mogą być zarówno częścią opieki medycznej, jak i celem badań biomedycznych, jednak smakowi poświęcono niewiele uwagi w porównaniu ze słuchem i wzrokiem (Tabela 1). Z medycznego punktu widzenia, kiedy klinicyści oceniają pacjentów skarżących się na utratę smaku, w większości przypadków rzeczywista utrata dotyczy węchu1, co doprowadziło do odrzucenia utraty smaku jako rzadkiej i często nieuzasadnionej dolegliwości. Zniekształcenia smaku (zaburzenia smaku) są częstsze i często wynikają z wtórnych skutków leków lub uszkodzenia nerwów obwodowych2,3, ale żadna z form nie ma skutecznego leczenia (innego niż odstawienie leku). Klinicyści ignorują również utratę smaku, ponieważ do tej pory miała ona niewielką wartość diagnostyczną lub prognostyczną. Jednak, mimo że pomiar smaku był zaściankiem, może teraz wejść do głównego nurtu medycyny wraz z odrodzeniem historycznego uznania, że smak może być narzędziem diagnostycznym lub prognostycznym4,5. Na przykład, percepcja goryczy może przewidywać funkcję immunologiczną6 lub gotowość pacjenta do przyjmowania leków7. Niemniej jednak badacze biomedyczni w dużej mierze zaniedbali smak. Ta nieuwaga może częściowo odzwierciedlać fakt, że wczesny postęp w zrozumieniu tego systemu sensorycznego ma swoje korzenie w psychologii eksperymentalnej8, dziedzinie, z którą osoby zajmujące się medycyną mogą być stosunkowo mało zaznajomione. Co więcej, ponowne zainteresowanie smakiem zapoczątkowało ustandaryzowane metody smaku9, które opierają się na wcześniejszych metodach10, które, choć kompleksowe, są długie i nieodpowiednie dla warunków klinicznych. Wreszcie, zaufanie do miar smaku może być słabe, ponieważ badani informują o własnych doświadczeniach i dotychczas brakowało walidacji ich obserwacji. Mamy nadzieję, że prosty środek, który badacze lub klinicyści mogą łatwo zastosować, zyska na popularności wśród obu składników. Tutaj opisujemy prosty protokół badania smaku, który składa się z trzech części: oceny jamy ustnej, testu smaku i etapu walidacji przy użyciu wrodzonego genotypu. Po pierwsze, przedstawiamy biologiczny kontekst dla tych procedur, które łączą proste praktyki w medycynie, pomiary sensoryczne z psychologii eksperymentalnej i walidację odpowiedzi za pomocą genotypu i genetyki.

Percepcja smaku zaczyna się w ustach, więc skuteczne badanie smaku musi zawierać krótką ocenę kliniczną oczywistych chorób jamy ustnej, zaczerwienienia, obrzęku i innych przebarwień. Jama ustna składa się z siedmiu podmiejsc: języka, dziąseł, dna jamy ustnej, błony śluzowej policzków, błony wargowej, podniebienia twardego i trygonu zatrzonowego. Wcześniejsze badania ludzkiego smaku koncentrowały się na zdrowych uczestnikach lub osobach z dobrze zdefiniowanymi chorobami, ale ponieważ testowanie smaku staje się rutyną w badaniach lekarskich, ważne jest, aby rejestrować stan jamy ustnej jako część procedury.

Język sam w sobie jest muskularną strukturą otoczoną błoną śluzową; na jego grzbietowej powierzchni znajdują się brodawki, małe wypukłe struktury, które nadają językowi unikalną teksturę i zawierają komórki receptorów smaku. Klasyfikujemy brodawki według ich kształtu: grzybowate, nitkowate, listowate i obwodowe. Brodawki grzybowate (FP) znajdują się przednio-bocznie na języku i są okrągłe, o kształcie grzyba11. Badacze opublikowali kilka przydatnych metod ilościowego określania FP i kierujemy czytelników do tych źródeł w celu zapoznania się z protokołami pomiarowymi12,13,14,15,16. Brodawki liściaste, w kształcie stron książki (folia), znajdują się wyłącznie na bocznej tylnej powierzchni języka11. Brodawki obwodowe, znajdujące się w bruździe końcowej podstawy języka, to duże struktury w kształcie kopuły otoczone ścianami błony śluzowej (łac. circum, "otaczać", + vallum, "ściana")11. Najliczniejsze brodawki, nitkowate, są długie i cienkie i nie zawierają receptorów smaku.

Ludzie różnią się anatomią języka. Chociaż źródła tej zmienności anatomicznej są nieznane, jest ona częściowo determinowana przez wrodzoną zmienność genetyczną, przy czym badacze zgłaszają 31% zgodności anatomii języka wśród bliźniąt dwujajowych i 60% zgodności wśród bliźniąt jednojajowych17. Gęstość brodawkowatych również różni się u ludzi i chociaż rzadko, co najmniej jedna choroba genetyczna (rodzinna dysautonomia) powoduje wrodzony brak brodawek smakowych18,19,20. Dlatego przed wykonaniem testów psychofizycznych pomocne jest potwierdzenie obecności FP w ramach krótkiej oceny i zwrócenie uwagi na względny rozmiar i kolor języka oraz dowody na chorobę jamy ustnej.

Brodawki smakowe zawierają komórki czuciowe, które po stymulacji inicjują odczuwanie smaku. Ludzie są w stanie wyczuć co najmniej pięć klas smaku: słony, kwaśny, gorzki, słodki i umami. Podczas gdy smaki słony, słodki i umami sygnalizują obecność cennych źródeł żywności zawierających odpowiednio chlorek sodu, glukozę i aminokwasy, gorycz i kwaskowatość sygnalizują obecność potencjalnych toksyn i kwasów pochodzących z bakteryjnego rozkładu żywności i wywołują zachowania awersyjne21. Słony i kwaśny smak jest transdukowany poprzez aktywację kanałów jonowych znajdujących się w niektórych typach komórek smakowych, chociaż zrozumienie transdukcji soli ewoluuje i może wymagać również komórek typu I22,23. Gorzki, słodki i umami powstają w wyniku aktywacji receptorów sprzężonych z białkiem G na komórkach smakowych typu II, z których każdy jest dostrojony do określonego smaku. Heterodimery podjednostek trzech konkretnych receptorów transdukują słodkie i umami, podczas gdy związki gorzkie aktywują grupę 25 różnych receptorów gorzkich24. Te gorzkie receptory mogą reagować na wiele gorzkich związków, a pojedynczy gorzki związek często stymuluje więcej niż jeden receptor25. Pomimo niedawnego poszerzenia wiedzy na temat molekularnych podstaw smaku, przed nami mogą być nowe szlaki26 oraz nowe odkrycia wykraczające poza tradycyjne pięć jakości smakowych (np. calcium27 lub sup acid28 percepcja).

Istnieją co najmniej dwa zaskakujące aspekty rodzin smakowych receptorów: geny kodujące te receptory mogą znacznie różnić się sekwencją DNA, a tym samym funkcjonować wśród ludzi, a wiele tkanek ciała wyraża te geny21,29,30,31. Te miejsca zewnątrzustne obejmują między innymi mózg, tarczycę, górne i dolne drogi oddechowe oraz przewód pokarmowy21,29,30,31. Chociaż receptory smaku w tych miejscach nie uczestniczą w percepcji smaku w tradycyjnym sensie, prawdopodobnie wyczuwają lokalne środowisko chemiczne29,32. Na przykład nabłonek rzęskowy górnych dróg oddechowych wyraża receptor goryczy T2R38 (Receptor Gorzkiego Smaku 38), który reaguje na związki chemiczne wytwarzane przez bakterie i wpływa na wrodzoną odpowiedź immunologiczną32, np. zwiększając klirens śluzowo-rzęskowy oraz poziom peptydów przeciwdrobnoustrojowych i tlenku azotu. Odkrycie to ma implikacje medyczne dla przewlekłego zapalenia zatok przynosowych, choroby przewlekłej infekcji bakteryjnej i zapalenia górnych dróg oddechowych i zatok przynosowych.

Szczególnie istotne dla opisywanego tutaj badania smaku jest to, że receptor gorzkiego smaku T2R38, kodowany przez gen TAS2R38, wykazuje zmienność genetyczną, a zatem zmienną wrażliwość smakową. Różnice percepcyjne dla gorzkiego związku fenylotiokarbamidu (PTC) zostały po raz pierwszy opisane przez chemika Arthura Foxa33; później związek ten został zidentyfikowany jako agonista receptora T2R3834. Różnice indywidualne wynikają z sekwencji DNA genu TAS2R38, który ma trzy polimorfizmy pojedynczego nukleotydu, z których każdy daje podstawienia aminokwasów (A49P, A262V i I296V; A: alanina, P: prolina, V: walina, I: izoleucyna). Powstają dwa powszechne haplotypy, PAV i AVI, przy czym osoby PAV/PAV są bardzo wrażliwe na PTC ("degustatorzy"), osoby AVI/AVI są stosunkowo niewrażliwe ("niedegustatorzy"), a heterozygotyczne osobniki AVI/PAV są bardziej zmienne pod względem wrażliwości35. Przykładów zmienności genetycznej wpływającej na gorzką percepcję jest więcej, np. receptor smaku T2R19, kodowany przez gen TAS2R19, podobnie wykazuje zmienność genetyczną i różną wrażliwość smakową na gorzki związek chininy36. Podobnie, zróżnicowanie TAS2R31 wpływa na postrzeganą goryczkę jednego ze słodzików o dużej mocy37,38,39.

Tutaj opisujemy szybką metodę charakteryzowania zmysłu smaku pacjenta, która opiera się na protokołach wysokiej wydajności w medycynie klinicznej, psychologii eksperymentalnej i genetyce.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Komisja Przeglądu Instytucjonalnego Uniwersytetu Pensylwanii zatwierdziła ten protokół. Wykluczyliśmy osoby, które miały mniej niż 18 lat lub były w ciąży.

1. Ocena jamy ustnej: ocena choroby i identyfikacja brodawek

  1. Poinstruuj badanego, aby otworzył usta.
  2. Za pomocą źródła światła, takiego jak latarka długopisowa lub czołówka, oświetl jamę ustną i zbadaj siedem podmiejsc tego obszaru (język, dno jamy ustnej, błona śluzowa policzka, błona śluzowa warg, dziąsło, podniebienie twarde i trygon zatrzonowy).
    1. Wizualizuj grzbietową powierzchnię języka. Poinstruuj pacjenta, aby podniósł język i zbadał brzuszną powierzchnię języka i dno jamy ustnej, upewniając się, że badanie rozciąga się do tyłu na zęby trzonowe.
    2. Za pomocą depresora języka zlateralizuj policzek badanego, aby uwidocznić błonę śluzową policzka, a także boczne dziąsło obustronnie otaczające górne i dolne zęby.
    3. Rozszerz badanie do przodu, unosząc górną i dolną wargę, aby uwidocznić powierzchnie błony śluzowej warg sromowych i dziąsła przedniego.
    4. Na koniec wyobraź sobie podniebienie twarde i trygon zatrzonowy.
    5. Zwróć uwagę na zmiany chorobowe, otarcia i masy lub oznaki stanu zapalnego.
    6. Ponownie poproś badanego, aby otworzył usta i wysunął język.
    7. Użyj źródła światła, aby uwidocznić grzbietową powierzchnię języka.
    8. Zidentyfikować obecność lub brak FP, np. gładką powierzchnię języka
  3. Zanotuj wyniki badania jamy ustnej przed przystąpieniem do badania smaku. Jeśli badacze przeprowadzą ten test smaku w kontekście medycznym, nieoczekiwane wyniki powinny skłonić do dalszych badań.

2. Psychofizyczne testy smaku

UWAGA: Zasoby i opisy do poniższych testów smaku psychofizycznego są również dostępne na następującej stronie internetowej: https://osf.io/hn87s/.

  1. Przygotowanie do degustacji
    1. Przygotuj roztwory zgodnie z poniższymi wskazówkami. Przygotować każdy roztwór za pomocą kolby miarowej, aby zapewnić precyzję stężeń do ± 0,0002 M. Rozpuścić próbki przy użyciu ultraczystej wody. Dostosuj dobór związków do celów badawczych. Zawarte tutaj związki mają być jednym z przykładów.
      1. Benzoesan denatonium (gorzki): przygotować roztwór podstawowy 4,99 x 10-3 M benzoesan denatonium, rozpuszczając 2,228 g benzoesanu denatonium w 1 l wody. Dodać 180 μl tego roztworu podstawowego do kolby miarowej o pojemności 500 ml. Dodać wodę, aby doprowadzić objętość do 500 ml, tworząc roztwór o końcowym stężeniu 1,8 μM.
      2. PTC (gorzki): Umieścić 0,0135 g PTC w kolbie miarowej o pojemności 500 ml. Dodaj wodę, aby zwiększyć objętość do 500 ml. PTC jest trudny do rozpuszczenia, dlatego umieść mieszadło w kolbie i podgrzej roztwór do 70 °C na płycie grzejnej. Użyj mieszadła, aby wymieszać roztwór, aż cała substancja rozpuszczona się rozpuści (~15 min). W ten sposób powstaje roztwór o końcowym stężeniu 180 μM.
      3. Chinina (gorzka): Umieścić 0,011 g dwuwodnego HCl chininy w kolbie miarowej o pojemności 500 ml. Dodać wodę, aby doprowadzić objętość do 500 ml, tworząc roztwór o końcowym stężeniu 56 μM.
      4. Chlorek sodu (słony): Umieścić 7,5 g chlorku sodu w kolbie miarowej o pojemności 500 ml. Dodać wodę, aby zwiększyć objętość do 500 ml, tworząc roztwór o końcowym stężeniu 0,25 M.
      5. Sacharoza (słodka): Umieścić 60 g sacharozy w kolbie miarowej o pojemności 500 ml. Dodać wodę, aby doprowadzić objętość do 500 ml, tworząc roztwór o końcowym stężeniu 0,35 M.
    2. Roztwory smakowe przechowywać w temperaturze 4 °C. Niektóre powszechnie stosowane związki smakowe są wrażliwe na światło, a badacze powinni owinąć je folią lub innymi materiałami, aby zmniejszyć ich ekspozycję na światło.
    3. Aby zidentyfikować typowe błędy w przygotowaniu roztworu, napełnij jedną filiżankę degustacyjną starym roztworem, a drugą nowym roztworem. Spróbuj każdego roztworu, aby sprawdzić, czy mają identyczną moc.
    4. Uwzględnij wodę jako roztwór kontrolny, przedstawiony w pierwszej pozycji, aby sprawdzić, czy badani rozumieją procedurę testowania. Przedstaw badanym każdy degustator i degustator kontrolny dwukrotnie, uważając, aby nie prezentować tego samego smaku po kolei. Na przykład, aby przetestować pięć unikalnych degustacji, w kwestionariuszu należy uwzględnić dwanaście próbek (zob. 2.2): pięć degustatorów i wodę, z których każda jest prezentowana dwukrotnie. Porcję 5 ml wody rozlać do pojedynczych szklanych fiolek scyntylacyjnych. Oznaczyć kapsle fiolki ciemnoniebieską naklejką z numerem 1.
    5. Powtórz ten proces dla każdego degustatora. Oznacz nakrętki fiolek okrągłą naklejką zgodnie z kolejnością prezentacji i kodem kolorystycznym, przykład opisany poniżej; Dopasować etykiety fiolek do etykiet w kwestionariuszu smaku (patrz 2.2).
      Woda (ciemnoniebieska)
      Chinina (jasnoniebieska)
      NaCl (zielony)
      PTC (żółty)
      Sacharoza (pomarańczowa)
      Benzoesan denatonium (czerwony)
      NaCl (ciemnoniebieski)
      Benzoesan denatonium (jasnoniebieski)
      Woda (zielona)
      Chinina (żółta)
      Sacharoza (pomarańczowa)
      PTC (czerwony)
    6. Próbki należy zapakować, umieszczając je w dwóch pudełkach, próbki 1–6 i 7–12 w pudełkach oznaczonych odpowiednio "pudełko A" i "pudełko B" (Rysunek 1); możliwe są inne strategie pakowania.

figure-protocol-1
Rysunek 1: Zestaw smakowy. Badani używają zestawu do oceny smaku, intensywności i jakości różnych degustacji oznaczonych kolorami. Pudełko A zawiera próbki 1–6, pudełko B zawiera 7–12. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

  1. Kwestionariusz smaku
    1. Przygotuj kwestionariusz smaku, korzystając ze skali kategorii do oceny intensywności smaku i wymuszonego wyboru w celu określenia jakości smaku każdego degustatora (Rysunek 2).
    2. Umieścić okrągłe etykiety o odpowiednim kolorze i numerze obok odpowiedniej próbki w kwestionariuszu smaku (patrz 2.1.6).

figure-protocol-2
Rysunek 2: Wypełnienie kwestionariusza smaku, obejmującego skalę kategorii dla oceny intensywności i odpowiedzi na wymuszony wybór jakości smaku. Kwestionariusz smaku będzie zawierał po jednym wpisie dla każdego z testowanych degustatorów oznaczonych kolorami. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

  1. Administracja testu smaku
    1. Zapewnij badanym pudełko A, pudełko B, butelkę wody, pusty kubek, długopis oraz kwestionariusz smaku długopisu i papieru zawierający wpisy dotyczące 12 próbek. Używaj wody butelkowanej tej samej marki przez cały czas trwania danego badania. Jako alternatywę dla kwestionariusza papierowego, przenieś materiał do oprogramowania ankietowego online i zarządzaj nim za pomocą tabletu lub komputera stacjonarnego/laptopa. Przykładowy szablon jest dostępny na stronie https://osf.io/hn87s/.
    2. Poinstruuj badanych, że zostaną poproszeni o ocenę zarówno intensywności, jak i jakości (np. słony, kwaśny, gorzki, słodki lub bez smaku) każdego smaku. Poinformuj również badanych, że mogą nie doświadczać wszystkich cech.
    3. Wyjaśnij procedurę testowania w następujący sposób: Wypłucz usta dwukrotnie wodą i wypluj ją do dołączonego kubka. Wlej całą próbkę 1 do ust i przytrzymaj ją tam przez 5 sekund przed wypluciem roztworu do kubka. Nie płukać gardła ani nie połykać roztworu. Zakreśl jedną z 13 pionowych linii odpowiadających intensywności próbki, w skali od 0 do 12, od "brak intensywności" do "wyjątkowo intensywna" i wybierz jedną cechę opisującą smak. Następnie dwukrotnie przepłucz usta wodą przed przejściem do następnej próbki.
    4. Obserwuj temat degustacji i oceny próbki 1 (woda). Jeśli ocena odbiega od "brak intensywności" i "brak smaku", powtórz instrukcje kwestionariusza przed dopuszczeniem do kontynuowania testu.
    5. Przejrzyj gotowy kwestionariusz pod kątem kompletności.
    6. Oceniaj oceny intensywności w skali od 0 do 12 na podstawie pionowych linii, które okrążali badani. Uśrednić dwie oceny intensywności dla każdego degustatora; Ta wartość zostanie wykorzystana do analizy.

3. Genotyp

  1. Zbierz ślinę od każdego pacjenta za pomocą zestawu do pobierania DNA ze śliny.
  2. Oczyść genomowe DNA z próbki, postępując zgodnie z instrukcjami producenta.
  3. Określ TAS2R38 genotyp za pomocą testów genotypowania SNP (rs713598,rs1726866, rs10246939)40.
  4. Określ TAS2R19 genotyp za pomocą testów genotypowania SNP (rs10772420)36.

4. Walidacja genotypu i fenotypu

  1. Przejrzyj dostępne zbiorcze dane kontrolne od ponad 800 osób zgenotypowanych pod kątem TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) i TAS2R19 (rs10772420) na następującej stronie internetowej: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.
  2. Opierając się na TAS2R38 genotypie badanego, porównaj jego psychofizyczną reakcję smakową na gorzki związek PTC z normami dla osób o tym samym genotypie. Odpowiedzi powinny się zgadzać; jednak w rzadkich przypadkach TAS2R38 genotyp nie przewiduje idealnie wyników sensorycznych PTC35.
  3. Jeśli odpowiedzi wykazują znaczną rozbieżność, porównaj reakcję smakową badanego na chininę z normami dla osób o tym samym TAS2R19 genotypie. Odpowiedzi dotyczące intensywności i genotypu chininy powinny być zgodne36. Jeśli wszystkie wyniki smaku nie zgadzają się z genotypem, możliwe jest, że badany (a) nie rozumie zadania, (b) dostarcza fałszywe oceny lub manipuluje lub (c) wystąpił błąd w zbieraniu danych ze strony badacza.
  4. Zidentyfikuj wartości odstające punktów danych i być może wyłącz je z analizy (Rysunek 3). Zgodność wyników sensorycznych z obiektywnym genotypowaniem potwierdza wiarygodność procedury badań psychofizycznych.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wyniki testu smaku zostały zebrane dla wszystkich badanych (n = 840) i są prezentowane po segregacji według genotypu. Pełny zestaw danych jest dostępny pod adresem https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ i można go przeglądać dla każdego ocenianego degustatora oraz dla TAS2R38 i TAS2R19 genotypów. Wyniki potwierdzają istnienie percepcyjnych różnic w smaku PTC wśród osób pogrupowanych według genotypu receptora TAS2R38 (Ryc. 3). Oceny inte...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Znaczenie tej metody polega na tym, że wykorzystuje ona podejście multidyscyplinarne z cechami medycyny (egzamin ustny), psychologii eksperymentalnej (test smaku) i genetyki (etap walidacji). Informacje o smaku prawdopodobnie rozwiną się jako narzędzie diagnostyczne i prognosttyczne, ponieważ smak zapewnia wgląd w funkcję białek w innych częściach organizmu. Z punktu widzenia psychologii eksperymentalnej, dodanie prostego egzaminu może zidentyfikować osoby, które nie są odpowiednie do badania normatywnych funkcji smaku. ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

NAC i DRR są współtwórcami w ramach recenzowanego patentu (Therapy and Diagnostics for Respiratory Infection 61/697,652, WO2013112865).

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nagrody od National Institutes of Health wsparły te badania (R01DC013588 do NAC, R21DC013886 do NAC i DRR, oraz NIDCD Administrative Research Supplement to Promote Emergence of Clinician-Scientists in Chemosensory Research do JED). Zebraliśmy dane genotypowe ze sprzętu zakupionego częściowo ze środków PZH od OD018125.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Jednorazowa latarka diagnostycznaPrimacareDL-9223
UltraLite Pro Latarka czołowaIntegra LifeSciencesAX2100BIF
System oczyszczania wody Millipore Q-Gard 2 EMBMilliporeQGARD00D2
Benzoesan denatonu Sigma AldrichD5765
FenylotiokarbamidSigma AldrichP7629
Chlorowodorek chininy dwuwodnySigma AldrichQ1125
Chlorek soduSigma AldrichS1679
SacharozaSigma AldrichS0389
Fiolki scyntylacyjne szklaneThomas Scientific1230L59Taki sam jak Wheaton nr katalogowy 986580
Oragene Odkryj zestaw do pobierania DNA OGR-500DNA GenotekOGR-500
prepIT L2P Protocol odczynnikiDNA GenotekPT-L2P-5
rs713598 TaqMan SNP test genotypowaniaThermoFisher ScientificC___8876467_10
rs1726866 Test genotypowania SNP /emTaqManThermoFisher TestC___9506827_10<
/em>emTaqMan /em
ThermoFisher Scientific
genotypowania SNP ><>rs10772420 TaqMan SNP C___1317426_10 ThermoFisher Scientific C___9506826_10

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cowart, B. J., Young, I. M., Feldman, R. S., Lowry, L. D. Clinical disorders of smell and taste. Occupational Medicine. 12 (3), 465-483 (1997).
  2. Ackerman, B. H., Kasbekar, N. Disturbances of taste and smell induced by drugs. Pharmacotherapy. 17 (3), 482-496 (1997).
  3. Kveton, J. F., Bartoshuk, L. M. The effect of unilateral chorda tympani damage on taste. Laryngoscope. 104, 25-29 (1994).
  4. Fischer, R. A., Griffin, F. Pharmacogenetic aspects of gustation. Drug Research. 14 (14), 673-686 (1964).
  5. Joyce, C. R., Pan, L., Varonos, D. D. Taste sensitivity may be used to predict pharmacological effects. Life Science. 7 (9), 533-537 (1968).
  6. Adappa, N. D., et al. Genetics of the taste receptor T2R38 correlates with chronic rhinosinusitis necessitating surgical intervention. International Forum of Allergy & Rhinology. , (2013).
  7. Lipchock, S. V., Reed, D. R., Mennella, J. A. Relationship between bitter-taste receptor genotype and solid medication formulation usage among young children: a retrospective analysis. Clinical Therapeutics. 34 (3), 728-733 (2012).
  8. Bartoshuk, L. M. Handbook of perception: Tasting and smelling. Carterette, E. C., Friedman, M. P. , Academic Press. Vol. VIA 2-18 (1978).
  9. Coldwell, S. E., et al. Gustation assessment using the NIH Toolbox. Neurology. 80 (11 Suppl 3), S20-S24 (2013).
  10. Mueller, C., et al. Quantitative assessment of gustatory function in a clinical context using impregnated "taste strips". Rhinology. 41 (1), 2-6 (2003).
  11. Reed, D. R., Tanaka, T., McDaniel, A. H. Diverse tastes: Genetics of sweet and bitter perception. Physiological Behavior. 88 (3), 215-226 (2006).
  12. Miller, I. J. Jr, Reedy, F. E. Jr Variations in human taste bud density and taste intensity perception. Physiological Behavior. 47 (6), 1213-1219 (1990).
  13. Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue. Brain Research. 1052 (2), 196-201 (2005).
  14. Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to collect fungiform (taste) papillae from human tongue. Journal of Visualized Experiments. 18 (42), 2201(2010).
  15. Nuessle, T. M., Garneau, N. L., Sloan, M. M., Santorico, S. A. Denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae. Journal of Visualized Experiments. (100), e52860(2015).
  16. Sanyal, S., O'Brien, S. M., Hayes, J. E., Feeney, E. L. TongueSim: development of an automated method for rapid assessment of fungiform papillae density for taste research. Chemical Senses. 41 (4), 357-365 (2016).
  17. Spielman, A. I., Brand, J. G., Buischi, Y., Bretz, W. A. Resemblance of tongue anatomy in twins. Twin Research and Human Genetics. 14 (3), 277-282 (2011).
  18. Kalmus, H., Smith, S. M. The antimode and lines of optimal separation in a genetically determined bimodal distribution, with particular reference to phenylthiocarbamide sensitivity. Annals of Human Genetics. 29 (2), 127-138 (1965).
  19. Pearson, J., Finegold, M. J., Budzilovich, G. The tongue and taste in familial dysautonomia. Pediatrics. 45 (5), 739-745 (1970).
  20. Fukutake, T., et al. Late-onset hereditary ataxia with global thermoanalgesia and absence of fungiform papillae on the tongue in a Japanese family. Brain. 119 (Pt 3), 1011-1021 (1996).
  21. Kinnamon, S. C. Taste receptor signalling - from tongues to lungs. Acta physiologica. 204 (2), Oxford, England. 158-168 (2012).
  22. Lewandowski, B. C., Sukumaran, S. K., Margolskee, R. F., Bachmanov, A. A. Amiloride-insensitive salt taste is mediated by two populations of type iii taste cells with distinct transduction mechanisms. Journal of Neuroscience. 36 (6), 1942-1953 (2016).
  23. Vandenbeuch, A., Clapp, T. R., Kinnamon, S. C. Amiloride-sensitive channels in type I fungiform taste cells in mouse. BMC Neuroscience. 9, 1(2008).
  24. Margolskee, R. F. The biochemistry and molecular biology of taste transduction. Current Opinions in Neurobiology. 3 (4), 526-531 (1993).
  25. Meyerhof, W., et al. The molecular receptive ranges of human TAS2R bitter taste receptors. Chemical Senses. 35 (2), 157-170 (2010).
  26. Yee, K. K., Sukumaran, S. K., Kotha, R., Gilbertson, T. A., Margolskee, R. F. Glucose transporters and ATP-gated K+ (KATP) metabolic sensors are present in type 1 taste receptor 3 (T1r3)-expressing taste cells. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. , (2011).
  27. Tordoff, M. G. Calcium: taste, intake and appetite. Physiological Review. 81, 1567-1597 (2001).
  28. Reed, D. R., Xia, M. B. Recent advances in fatty acid perception and genetics. Advances in Nutrition. 6 (3), 353S-360S (2015).
  29. Blekhman, R., et al. Host genetic variation impacts microbiome composition across human body sites. Genome Biology. 16, 191(2015).
  30. Hoon, M. A., et al. Putative mammalian taste receptors: a class of taste-specific GPCRs with distinct topographic selectivity. Cell. 96 (4), 541-551 (1999).
  31. Laffitte, A., Neiers, F., Briand, L. Functional roles of the sweet taste receptor in oral and extraoral tissues. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic. 17 (4), 379-385 (2014).
  32. An, S. S., et al. Tas2r activation promotes airway smooth muscle relaxation despite beta2-adrenergic receptor tachyphylaxis. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular. , (2012).
  33. Fox, A. L. The relationship between chemical composition and taste. Science. 74, 607(1931).
  34. Fox, A. L. The relationship between chemical constitution and taste. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 18, 115-120 (1932).
  35. Bufe, B., et al. The molecular basis of individual differences in phenylthiocarbamide and propylthiouracil bitterness perception. Current Biol.ogy. 15 (4), 322-327 (2005).
  36. Reed, D. R., et al. The perception of quinine taste intensity is associated with common genetic variants in a bitter receptor cluster on chromosome 12. Human Molecular Genetics. 19 (21), 4278-4285 (2010).
  37. Bobowski, N., Reed, D. R., Mennella, J. A. Variation in the TAS2R31 bitter taste receptor gene relates to liking for the nonnutritive sweetener Acesulfame-K among children and adults. Science Reports. 6, 39135(2016).
  38. Allen, A. L., McGeary, J. E., Knopik, V. S., Hayes, J. E. Bitterness of the non-nutritive sweetener acesulfame potassium varies with polymorphisms in TAS2R9 and TAS2R31. Chemical Senses. 38 (5), 379-389 (2013).
  39. Roudnitzky, N., et al. Genomic, genetic, and functional dissection of bitter taste responses to artificial sweeteners. Human Molecular Genetics. 20 (17), 3437-3449 (2011).
  40. Guo, S. W., Reed, D. R. The genetics of phenylthiocarbamide perception. Annals in Human Biology. 28 (2), 111-142 (2001).
  41. Bartoshuk, L. M., et al. Labeled scales (e.g., category, Likert, VAS) and invalid across-group comparisons: what we have learned from genetic variation in taste. Food Quality Prefererences. 14 (2), 125-138 (2003).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

test smakubadanie jam jamy ustnejroztwory smakoweintensywno PTCgenotyp TAS2R38zwi zek gorzkiprzewlek e zapalenie zatok przynosowychtest w punkcie opieki POCTfunkcja receptora smakukwestionariusz dla uczestnika

Powiązane artykuły