$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Mózg jest uważany za jeden z najbardziej skomplikowanych organów, a pragnienie rozwikłania jego złożonej funkcji jest niesłabnące. Jest badany w różnych skalach, od poziomu molekularnego do behawioralnego, przy użyciu szerokiej palety narzędzi2,3,4,5,6,7,8. Ilość niejednorodnych danych eksperymentalnych rośnie z niespotykaną dotąd szybkością. Świadomość potrzeby eksperymentalnego udostępniania, porządkowania i standaryzacji danych rośnie wraz z ilością pozyskiwanych danych. Stało się oczywiste, że neuroinformatyka odegra kluczową rolę w integracji danych eksperymentalnych z różnych skal w modelach funkcji i dysfunkcji mózgu9,10.
W tym celu niektóre badania, zwłaszcza badania na większą skalę, były w stanie przeznaczyć zasoby na udostępnienie swoich wyników za pośrednictwem obszernych baz danych11,12,13,14,15. Jednak ogromna ilość danych eksperymentalnych z indywidualnych badań i regularnych laboratoriów nigdy nie dotarła do szerszej społeczności naukowej. Dzieje się tak głównie z dwóch powodów: po pierwsze, potrzeba więcej czasu na zbudowanie bazy danych i stworzenie narzędzi, które umożliwiłyby użytkownikowi interakcję z bazą danych; Po drugie, potrzeba więcej pieniędzy na wsparcie tych zadań. Zmotywowany tymi wyzwaniami, oparty na MATLAB silnik graficznego interfejsu użytkownika (GUI) o nazwie Neurovascular Network Explorer 2.0 (NNE 2.0)16 został opracowany jako proste i tanie narzędzie do bazowania danych, udostępniania i eksplorowania danych obrazowania naczyń krwionośnych. Niniejszy manuskrypt zawiera instrukcję obsługi NNE 2.0 oraz związaną z nią bazę danych eksperymentalnych.
NNE 2.0 to już silnik oprogramowania drugiej generacji. Pierwsza generacja, nazwana Neurovascular Network Explorer 1.0 (NNE 1.0)17 została zbudowana do interakcji z bazą danych rozszerzenia naczyń krwionośnych wywołanego czuciowo w pierwotnej korze somatosensorycznej (SI) szczura in vivo, mierzonej za pomocą mikroskopii 2-fotonowej 18. NNE 1.0, jego kod źródłowy oraz powiązaną bazę danych można bezpłatnie pobrać jako spakowany plik o nazwie "NNE 1 Tian" ze strony internetowej UCSD Neurovascular Imaging Laboratory1. Więcej informacji na temat NNE 1.0 i związanej z nim bazy danych można znaleźć w17.
Druga generacja, NNE 2.0, współdziała z bazą danych optogenetycznie wywołanych rozszerzeń pojedynczych naczyń krwionośnych u myszy SI in vivo mierzonych za pomocą mikroskopii 2-fotonowej20. Użytkownik może przeglądać, wybierać i wizualizować dane w oparciu o kategorie wyboru, takie jak głębokość kory mózgowej, kolejność rozgałęzień, średnica naczynia, zwierzę lub konkretne drzewo tętniczki. Graficzny interfejs użytkownika dodatkowo wykonuje proste operacje matematyczne, takie jak uśrednianie i normalizacja pików w wybranych kategoriach. NNE 2.0 umożliwia przeglądanie i przeglądanie obrazów rejestrujących objętości 3D naczyń krwionośnych, a także identyfikację lokalizacji pomiaru funkcjonalnego w drzewach naczyniowych. Ta funkcja może być wykorzystana do rekonstrukcji morfologii naczyń krwionośnych w 3D i wypełnienia ich rzeczywistymi pomiarami ruchu naczyń krwionośnych jednego naczynia. Te rekonstrukcje mogą być z kolei włączone do modeli obliczeniowych funkcji mózgu21,22. NNE 2.0, jego kod źródłowy i powiązaną bazę danych można bezpłatnie pobrać jako spakowany plik o nazwie "NNE 2.0 HDbase v1.0" ze strony internetowej UCSD Neurovascular Imaging Laboratory1.
NNE 2.0 współpracuje z bazą danych o nazwie 'vdb.mat'. Baza danych ta jest matrycą zawierającą profile czasowe (przebiegi czasowe) zmian średnicy pojedynczego naczynia wywołanych bodźcem optogenetycznym i mierzonych w różnych lokalizacjach drzew tętniczych. Każdy kurs czasowy został obliczony przy użyciu specjalnie napisanego oprogramowania. Oblicza względną zmianę średnicy naczynia w wyniku rozszerzenia profilu intensywności fluorescencji uzyskanego przez skanowanie w poprzek naczynia. Kontrast fluorescencyjny przedstawiono przez donaczyniowe wstrzyknięcie dekstranu znakowanego izotiocyjanianem fluoresceiny (FITC). Aby uzyskać więcej informacji na temat danych i procedur analizy, zobacz20,23. Baza danych zawiera łącznie 305 przebiegów czasowych (tj. wpisów w bazie danych). Oprócz zmiany średnicy, każdy wpis w bazie danych zawiera szereg dodatkowych metadanych, które (1) określają ilościowo przebieg czasu, (2) opisują mierzone naczynie i (3) identyfikują miejsce pomiaru w objętości 3D kory mózgowej. Metadane obejmują czas początkowy, amplitudę szczytu, czas amplitudy szczytu, głębokość kory mózgowej, kolejność rozgałęzień, średnicę naczynia na linii podstawowej, ścieżkę do oryginalnych obrazów referencyjnych i stosy obrazów 3D dla każdego pomiaru oraz mapy unaczynienia powierzchni mózgu w małym powiększeniu. Zobacz wszystkie parametry w metadanych wymienionych i szczegółowo opisanych wcześniej w tabeli 116.
NNE 2.0 wchodzi w interakcję z obrazami referencyjnymi, które są skanami X-Y płaszczyzny, na której nastąpił pomiar średnicy. Każdy wpis bazy danych ma jeden odpowiadający mu obraz referencyjny z nazwą odniesienia wyświetlaną w graficznym interfejsie użytkownika. Każdy wpis w bazie danych ma również powiązany stos obrazów (stos 3D) przedstawiający objętość 3D drzewa naczyniowego, w którym dokonano pomiaru. Graficzny interfejs użytkownika umożliwia wybór konkretnego wpisu w bazie danych i wyświetlenie odpowiadającego mu obrazu referencyjnego, a także stosu 3D. Prowadzi również użytkownika do znalezienia pasującego obrazu referencyjnego i ramki w stosie 3D (te same funkcje można znaleźć na obu obrazach). Wszystkie obrazy stosu i obrazy referencyjne w pełnej rozdzielczości (1024 piksele x 1024 piksele) znajdują się odpowiednio w folderach hana_stk i hana_refs. Mapy unaczynienia mózgu w małym powiększeniu znajdują się w folderze 'mapy'. Wszystkie trzy foldery, jak również macierz bazy danych "vdb.mat" są pobierane w spakowanym pliku "NNE 2.0 HDbase v1.0" ze strony internetowej UCSD Neurovascular Imaging Laboratory1 i zapisywane w folderze głównym NNE 2.0 podczas procesu instalacji.
GUI zostało zaprojektowane jako zestaw czterech paneli (Panel 1 (Panel Główny) – Panel 4), które otwierają się sekwencyjnie, gdy użytkownik eksploruje bazę danych i wybiera określone dane na podstawie kategorii wyboru. Każdy panel jest podzielony na dwie główne części: (1) prawa kolumna zapewnia możliwość interakcji z bazą danych poprzez wybór parametrów i kategorii danych oraz wyświetla ważne informacje z metadanych; (2) W lewej kolumnie wyświetlane są dane w postaci przebiegów czasowych (zmiana średnicy w czasie) i wykresów punktowych. Istnieją cztery typy wykresów punktowych przedstawiających (1) czas rozpoczęcia dylatacji, (2) czas piku dylatacji, (3) maksymalną zmianę średnicy (amplituda piku) i (4) średnicę linii podstawowej (średnica przed stymulacją) w funkcji głębokości kory mózgowej. Użytkownik ma możliwość wyświetlenia średnich przebiegów czasowych i wartości dla wybranych danych pogrupowanych według głębokości kory mózgowej lub kolejności rozgałęzień. Ma to na celu podkreślenie cechy gradientu zmiany średnicy wraz ze wzrostem głębokości i kolejności rozgałęzień20. NNE 2.0 pozwala użytkownikowi na eksport wybranego podzbioru danych w formacie '.xls', '.csv' lub '.mat'.