Celem tej pracy jest opisanie protokołu tworzenia praktycznego fantomu tłusto-wodnego, który można dostosować do produkcji fantomów o różnej zawartości tłuszczu i objętości.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Fantomy tłuszczowo-wodne do walidacji obrazowania metodą rezonansu magnetycznego: elastyczny i skalowalny protokół
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Wraz z rozwojem nowych technik obrazowania tkanki tłuszczowej, metody walidacji takich protokołów stają się coraz ważniejsze. Fantomy, eksperymentalne repliki tkanki lub narządu będącego przedmiotem zainteresowania, stanowią tanie, elastyczne rozwiązanie. Jednak bez dostępu do drogiego i specjalistycznego sprzętu konstruowanie stabilnych fantomów o wysokiej zawartości tłuszczu (np. >50% frakcji tłuszczowej, takich jak te obserwowane w brunatnej tkance tłuszczowej) może być trudne ze względu na hydrofobowy charakter lipidów. W pracy przedstawiono szczegółowy, niskokosztowy protokół tworzenia 5 fantomów o pojemności 100 ml z frakcjami tłuszczowymi 0%, 25%, 50%, 75% i 100% przy użyciu podstawowych materiałów laboratoryjnych (płyta grzewcza, zlewki itp.) oraz łatwo dostępnych komponentów (woda destylowana, agar, rozpuszczalny w wodzie środek powierzchniowo czynny, benzoesan sodu, środek kontrastowy z pentoctanem gadolinu i dietylenotriaminy (DTPA), olej arachidowy i rozpuszczalny w oleju środek powierzchniowo czynny). Protokół został zaprojektowany tak, aby był elastyczny; Może być używany do tworzenia fantomów o różnych frakcjach tłuszczowych i szerokim zakresie objętości. Fantomy stworzone tą techniką oceniono w studium wykonalności, w którym porównano wartości frakcji tłuszczu z rezonansu magnetycznego tłuszcz-woda z wartościami docelowymi w skonstruowanych fantomach. W badaniu tym uzyskano współczynnik korelacji zgodności wynoszący 0,998 (95% przedział ufności: 0,972-1,00). Podsumowując, badania te wykazują przydatność fantomów tłuszczu do walidacji technik obrazowania tkanki tłuszczowej w szeregu istotnych klinicznie tkanek i narządów.
Wprowadzenie
Zainteresowanie ilościowym określaniem zawartości tkanki tłuszczowej i trójglicerydów za pomocą metod obrazowania, takich jak rezonans magnetyczny (MRI), rozciąga się na wiele dziedzin. Obszary badawcze obejmują badanie magazynów białej i brązowej tkanki tłuszczowej oraz ektopowe magazynowanie lipidów w narządach i tkankach, takich jak wątroba1, pancreas2 i skeletal muscle3. Wraz z rozwojem tych nowatorskich technik kwantyfikacji tkanki tłuszczowej potrzebne są metody potwierdzające, że parametry obrazowania są odpowiednie do zastosowań badawczych i klinicznych.
Fantomy, eksperymentalne repliki tkanki lub organu, dostarczają taniego, elastycznego i kontrolowanego narzędzia do rozwijania i walidacji technik obrazowania4. W szczególności fantomy mogą być skonstruowane tak, aby składały się z tłuszczu i wody w stosunku objętościowym lub frakcji tłuszczowej (FF) porównywalnym z tkanką będącą przedmiotem zainteresowania klinicznego. Klinicznie wartości FF w tkankach i narządach mogą się znacznie różnić: FF w brunatnej tkance tłuszczowej mieści się w przedziale od 29,7% do 93,9%5; średnia FF wątroby u pacjentów ze stłuszczeniem wątroby wynosi 18,1 ± 9,0%6; FF trzustki u dorosłych zagrożonych cukrzycą typu 2 waha się od 1,6% do 22,2%7; a w niektórych przypadkach zaawansowanej choroby, pacjenci z dystrofią mięśniową Duchenne'a mogą mieć wartości FF prawie 90% w niektórych mięśniach8.
Ponieważ niepolarne cząsteczki, takie jak lipidy, nie rozpuszczają się dobrze w roztworach złożonych z polarnych cząsteczek, takich jak woda, tworzenie stabilnych fantomów o wysokim docelowym FF pozostaje wyzwaniem. Dla FF do 50% można użyć wielu istniejących metod do tworzenia fantomów wody tłustej9,10,11,12. Inne metody, które pozwalają osiągnąć wyższe FF, zazwyczaj wymagają drogiego sprzętu, takiego jak homogenizator lub ultradźwiękowy zakłócacz komórek13,14. Chociaż techniki te stanowią mapę drogową dla fantomów o wysokim FF, ograniczenia sprzętowe i różna ilość szczegółów eksperymentalnych ograniczają wysiłki zmierzające do stworzenia powtarzalnych i wytrzymałych fantomów wody tłustej.
Opierając się na tych poprzednich technikach, opracowaliśmy metodę konstruowania opłacalnych i stabilnych fantomów wody tłuszczowej w konfigurowalnym zakresie wartości FF. Protokół ten szczegółowo opisuje kroki potrzebne do wytworzenia 5 x 100 ml fantomów tłuszczu o wartościach FF 0%, 25%, 50%, 75% i 100% przy użyciu jednej płyty grzejnej. Można go łatwo dostosować, aby uzyskać różne objętości (od 10 do 200 ml) i procentową zawartość tłuszczu (od 0 do 100%). Skuteczność techniki fantomowej oceniono w studium wykonalności, w którym porównano wartości FF w rezonansie magnetycznym wody tłuszczowej z docelowymi wartościami FF w skonstruowanych fantomach.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
1. Przygotuj stanowisko pracy i materiały
- Przestrzegaj wszystkich zasad bezpieczeństwa w laboratorium. Nosić okulary ochronne i rękawice. Należy zapoznać się z kartą charakterystyki dla każdego ze stosowanych odczynników i podjąć odpowiednie środki ostrożności. Zapoznaj się z listą materiałów i sprzętu, procedurami postępowania z chemikaliami i środkami ostrożności dotyczącymi wyrobów szklanych.
Uwaga: Ten protokół wymaga użycia płyty grzejnej w wysokich temperaturach. Zachowaj ostrożność i noś rękawice odporne na ciepło podczas interakcji z gorącymi pojemnikami i nie dotykaj powierzchni płyty grzejnej. - Oczyść miejsce pracy i wyczyść powierzchnie środkiem dezynfekującym. Umyj ręce i załóż rękawiczki.
- Wysterylizuj wszystkie narzędzia i wnętrze wszystkich szklanych słoików, aby zmniejszyć potencjalne ryzyko zanieczyszczenia i wydłużyć żywotność fantomu.
UWAGA: Jeśli fantom będzie używany dłużej niż kilka dni, należy okresowo czyścić powierzchnię gotowego fantomu etanolem, aby zapobiec rozwojowi bakterii.
2. Przygotuj roztwór wodny
- Przygotuj miejsce pracy na roztwór wodny. Na stole ustaw następujące materiały i sprzęt: cylinder miarowy, zlewkę 400 ml, mieszadło, wagę, 2x łódki wagowe, szpatułkę, 2x strzykawki 1,0 ml z igłą, wodę destylowaną, środek kontrastowy do pentoctanu gadolinu dietylenotriaminy (DTPA), rozpuszczalny w wodzie środek powierzchniowo czynny, agar i benzoesan sodu.
UWAGA: Strzykawki mogą być używane z igłami lub bez. Jednak użycie igieł poprawi dokładność pomiaru i pomoże zapobiec rozpryskiwaniu się podczas dodawania zawartości do roztworów wody lub oleju. - Umieść mieszadło w zlewce o pojemności 400 ml. Za pomocą cylindra z podziałką o pojemności 100 lub 200 ml odmierzyć 300 ml wody destylowanej i wlać wodę do zlewki. Umieścić zlewkę na płycie grzejnej i ustawić w temperaturze 90 °C z szybkością mieszania 100 obr./min.
UWAGA: W tym protokole stosowane są wysokie temperatury, aby osiągnąć szybkie rezultaty. Ponieważ roztwory nie są pozostawiane na płycie grzejnej przez dłuższy czas, temperatura zadana płyty grzejnej nie odzwierciedla temperatury roztworu. - Użyj skalibrowanej wagi, aby odmierzyć 0.30 g benzoesanu sodu do łodzi wagowej. Dodaj benzoesan sodu do roztworu wodnego.
- Za pomocą strzykawki odmierz 0,6 ml rozpuszczalnego w wodzie środka powierzchniowo czynnego. Upewnij się, że nie ma pęcherzyków powietrza. Przytrzymaj igłę kilka milimetrów nad środkiem roztworu i powoli uwalniaj rozpuszczalny w wodzie środek powierzchniowo czynny, aby uniknąć rozpryskiwania się na ściankach zlewki.
- Za pomocą czystej strzykawki odmierz 0,24 ml środka kontrastowego gadolin-DTPA. Dodać go do zlewki, stosując tę samą technikę, co w kroku 2.4.
UWAGA: Gadolin-DTPA służy do dostosowania właściwości relaksacyjnych MRI fantomu do właściwości relaksacyjnych tkanki będącej przedmiotem zainteresowania. Czytnik może dostosować objętość dodanego gadolinu-DTPA, aby lepiej dopasować właściwości relaksacyjne interesującej go tkanki. - Odmierz 9,0 g agaru do łódki wagowej. Powoli wlej agar szpatułką do zlewki z wodą.
- Gdy wszystko zostanie dodane do roztworu wodnego, zwiększ temperaturę płyty grzejnej do 350 °C i mieszaj z prędkością pręta do 1100 obr./min przez 5-10 minut, aby stopić agar.
- Aby sprawdzić, czy agar się rozpuścił, na krótko usuń roztwór wodny z płyty grzejnej, przestań mieszać i sprawdź kolor roztworu. Roztopiony agar powinien być klarowny (bez wstążek i grudek) i koloru żółtego lub bursztynowego.
- Gdy agar całkowicie się rozpuści, użyj strzykawki lub wlej około 3,5 ml roztworu wodnego do małej fiolki. Jeśli roztwór badany nie zastygnie lub oddzieli się po 5-10 minutach, agar nie topi się. Zwiększ temperaturę płyty grzejnej z powrotem do 350 °C i kontynuuj podgrzewanie roztworu.
- Powtarzać krok 2.8, aż roztwór wodny w fiolce testowej stężeje prawidłowo.
- Pozostaw roztwór wodny na płycie grzejnej w temperaturze 50 °C i 100 obr./min. Oczyść przestrzeń roboczą i przygotuj się na roztwór olejowy.
- Usuń następujące materiały z ławki: wagę, 2x łódeczki wagowe, szpatułkę, 2x strzykawki 1,0 ml z igłą (używane), wodę destylowaną, środek kontrastowy gadolin-DTPA, rozpuszczalny w wodzie środek powierzchniowo czynny, agar i benzoesan sodu.
- Na stole umieść następujące materiały i sprzęt: zlewkę 400 ml (czystą), mieszadło (czyste), strzykawkę 2,0 ml z igłą, olej arachidowy i rozpuszczalny w oleju środek powierzchniowo czynny.
3. Roztwór oleju
- Umieść nową kostkę mieszającą w czystej zlewce o pojemności 400 ml. Za pomocą cylindra z podziałką odmierz 300 ml oleju arachidowego i wlej do zlewki. Wyjmij zlewkę z roztworem wodnym i umieść zlewkę z roztworem oleju na płycie grzejnej. Ustawić na 90 °C z szybkością mieszania 100 obr./min przez 1 min.
UWAGA: Olej arachidowy jest używany, ponieważ ma podobne spektrum magnetycznego rezonansu jądrowego w porównaniu do trójglicerydów w ludzkiej tkance tłuszczowej15.- Nie pozostawiaj oleju na płycie grzejnej bez nadzoru. Jeśli olej stanie się zbyt gorący i zacznie dymić, wyjmij go z płyty grzejnej i obniż temperaturę przed powrotem oleju do płyty grzejnej.
- Odmierz 3,0 ml rozpuszczalnego w oleju środka powierzchniowo czynnego za pomocą czystej strzykawki. Stosując tę samą technikę opisaną w kroku 2.4, dodać rozpuszczalny w oleju środek powierzchniowo czynny do zlewki. Ustaw płytę grzejną na 150 °C i 1100 obr./min na 5 minut, aby w pełni wymieszać roztwór olejowy.
- Zdejmij roztwór oleju z płyty grzejnej i wyczyść miejsce pracy, przygotowując się do stworzenia fantomu.
- Usuń następujące materiały z ławki: strzykawkę 2,0 ml z igłą (używana), olej arachidowy i rozpuszczalny w oleju środek powierzchniowo czynny.
- Na stole ułóż następujące materiały i sprzęt: kolbę Erlenmeyera o pojemności 250 ml, miarkę mieszadła (czystą), pipety miarowe, uchwyt na pipety miarowe i 5 szklanych słoików o pojemności 120 ml.
4. Utwórz emulsję fantomową
- Przygotuj pipety miarowe do roztworów wodnych i olejowych. Pipety powinny być używane wyłącznie z odpowiednim roztworem, aby zapobiec zanieczyszczeniu krzyżowemu.
- Dopasuj rozmiar pipety do objętości używanej w protokole. Na przykład użyj 2 pipet miarowych o pojemności 50 ml (50 ml roztworu wodnego + 50 ml roztworu oleju), aby utworzyć fantom o pojemności 100 ml z docelowym FF wynoszącym 50% tłuszczu.
- Umieść roztwór wodny na płycie grzejnej i ustaw płytę grzejną na 300 °C i 1100 obr./min. Po 4-5 minutach wyłącz mieszadło.
- Za pomocą pipety miarowej sprawdź, czy roztwór wodny jest gotowy do ekstrakcji, częściowo wypełniając pipetę niewielką ilością (5-10 ml) roztworu i uwalniając go z powrotem do zlewki. Jeśli roztwór wodny można łatwo usunąć i uwolnić bez nadmiernych pozostałości w pipecie, przejdź do następnego kroku, w przeciwnym razie pozostaw go na płycie grzejnej i sprawdź ponownie za 2-3 min.
UWAGA: Składniki roztworu wodnego są bardziej podatne na osadzanie się i oddzielanie, dlatego najlepiej jest mieszać roztwór wodny i/lub utrzymywać go w cieple tak często, jak to możliwe. Jeśli roztwór wodny nie zostanie podgrzany i wymieszany przed przeniesieniem, bardzo trudno będzie zmierzyć dokładne objętości ze względu na tendencję agaru do zastygania po schłodzeniu. - Ostrożnie dodać czystą mieszadło do kolby Erlenmeyera o pojemności 250 ml. Zdjąć roztwór wodny z płyty grzejnej, odmierzyć odpowiednią objętość (Tabela 2) i przenieść ją do kolby Erlenmeyera.
- Umieść roztwór oleju na płycie grzejnej i ustaw na 90 °C i 1100 obr./min, aby upewnić się, że roztwór jest jednorodny. Po 1-2 minutach usunąć roztwór oleju z płyty grzejnej i zastąpić go kolbą Erlenmeyera.
- Odmierzyć odpowiednią ilość roztworu oleju (Tabela 2) i powoli dodawać do roztworu wodnego w kolbie Erlenmeyera.
- Po dodaniu całego roztworu olejowego zwiększyć temperaturę do 300 °C i utrzymać mieszanie na poziomie 1100 obr./min. Mieszaj połączone roztwory przez 4-5 minut (z mieszadła powinien wydobywać się wir). Emulsja powinna być biała, o kremowej konsystencji.
- Użyj magnetycznego narzędzia do pobierania mieszadeł, aby usunąć mieszadło.
UWAGA: Do usunięcia mieszadeł ze wszystkich przyszłych emulsji należy użyć mieszadła. Wyczyść go dokładnie między każdym użyciem. - Za pomocą rękawic żaroodpornych ostrożnie przelej mieszaninę z kolby Erlenmeyera do czystego szklanego słoika o pojemności 120 ml. Powoli wlej mieszaninę po boku szklanego słoika, aby zapobiec powstawaniu pęcherzyków w mieszaninie podczas stygnięcia.
- Oczyścić kolbę Erlenmeyera i mieszadło, a następnie powtórzyć kroki 4.2-4.8, dostosowując ilość roztworów wody i oleju, aż utworzą się wszystkie fantomy.
UWAGA: Przed czyszczeniem upewnij się, że szkło jest chłodne.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Jeśli roztwór wodny został przygotowany prawidłowo, niewielka ilość roztworu powinna szybko stężeć w probówce testowej (Rycina 1, lewa). Jeśli roztwór rozwarstwia się (Rycina 1, prawa), należy go przygotować ponownie (zgodnie z instrukcjami w kroku 3.8 protokołu). Jeśli emulsja rozwarstwia się (przykłady na Rycynie 2, lewa i prawa), fantom nie nadaje...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Opisujemy solidną metodę tworzenia fantomów wody tłuszczowej odpowiednich do walidacji technik obrazowania medycznego stosowanych do ilościowego określania zawartości tkanki tłuszczowej i trójglicerydów in vivo. Dzięki stworzeniu dwóch zbiorników (jednego na roztwór olejowy i jednego na roztwór wodny) zbudowano stabilne fantomy o różnych wartościach FF – w tym przekraczających 50% – bez konieczności stosowania drogiego sprzętu. Fantomy o wysokim FF (>50%) zapewniają użyteczność zapewniającą, że techniki obrazowa...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy deklarują, że badanie zostało przeprowadzone przy braku jakichkolwiek powiązań handlowych lub finansowych, które mogłyby być interpretowane jako potencjalny konflikt interesów.
Podziękowania
Wsparcie finansowe dla tych badań zostało zapewnione przez National Institutes of Health (NIH) oraz National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIDDK)/NIH R01-DK-105371. Dziękujemy dr Houchun (Harry) Hu za rady i sugestie dotyczące tworzenia fantomów w tłustej wodzie.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Woda destylowana | Amazon | B000P9BY38 | Baza roztworu wodnego |
| Agar | Sigma Aldrich Incorporated | A1296-100G | Środek żelujący |
| Rozpuszczalny w wodzie środek powierzchniowo czynny | Sigma Aldrich Incorporated | P1379-500ML | Środek powierzchniowo czynny/emulgujący |
| Gadolin-DTPA Środek kontrastowy | Bayer Healthcare | 50419-0188-01 | Obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego Środek kontrastowy. |
| Benzoesan sodu | Sigma Aldrich Incorporated | 71300-250G | Konserwant |
| Olej arachidowy | Amazon | 54782-LOU | Baza roztworu oleju |
| Rozpuszczalny w oleju środek powierzchniowo czynny | Sigma Aldrich Incorporated | S6760-250ML | Środek powierzchniowo czynny/emulgujący |
| Płyta grzejna z mieszadłem | Fisher Scientific | 07-770-152 | |
| Batony mieszające (w kształcie jajka) | Sigma Aldrich Incorporated | Z127116-1EA | |
| 400 ml zlewka | Sigma Aldrich Incorporated | CLS1003400-48EA | |
| 250 ml kolba Erlenmeyera | ilość Aldrich Incorporated | CLS4450250-6EA | |
| 25 ml Fisher | Scientific | 13-650-2P | = 2 |
| 50 ml szklana pipeta miarowa | Fisher Scientific | 13-650-2S | Ilość = 2 |
| 75 ml szklana pipeta miarowa | Fisher Scientific | 13-650-2T | Ilość = 2 |
| 3,0 ml Strzykawka | Sigma Aldrich Incorporated | Z248002-1PAK | |
| 1,0 ml Strzykawka | Sigma Aldrich Incorporated | Z230723-1PAK | |
| Szpatułka | Sigma Aldrich Incorporated | S3897-1EA | |
| (rozdzielczość 100 g x 0,01 g) | Amazonka | AWS-100-BLK | |
| Łodzie wagowe | Sigma Aldrich Incorporated | Z740499-500EA | |
| 120 ml Szklane słoiki | McMaster Carr Supply Co | 3801T73 | |
| Rękawice żaroodporne (para) | Amazon | B075GX43MN | |
| Igły do strzykawek | Sigma Aldrich Incorporated | Z192341-100EA | |
| 18-calowy mieszadło | retriver Fisher Scientific | 14-513-70 | |
| 1 Dram fiolka z przezroczystego szkła | Fisher Scientific | 03-339-25B |
Bibliografia
- Franz, D., et al. Association of proton density fat fraction in adipose tissue with imaging-based and anthropometric obesity markers in adults. Int J Obes. , 1-8 (2017).
- Chai, J., et al. MRI chemical shift imaging of the fat content of the pancreas and liver of patients with type 2 diabetes mellitus. Exp Ther Med. 11 (2), 476-480 (2016).
- Hogrel, J. Y., et al. NMR imaging estimates of muscle volume and intramuscular fat infiltration in the thigh: variations with muscle, gender, and age. Age (Omaha). 37 (3), 1-11 (2015).
- Hoskins, P. R. Simulation and Validation of Arterial Ultrasound Imaging and Blood Flow. Ultrasound Med Biol. 34 (5), 693-717 (2008).
- Hu, H. H., Perkins, T. G., Chia, J. M., Gilsanz, V. Characterization of human brown adipose tissue by chemical-shift water-fat MRI. Am J Roentgenol. 200 (1), 177-183 (2013).
- d'Assignies, G., et al. Noninvasive quantitation of human liver steatosis using magnetic resonance and bioassay methods. Eur Radiol. 19 (8), 2033-2040 (2009).
- Schwenzer, N. F., et al. Quantification of pancreatic lipomatosis and liver steatosis by MRI: comparison of in/opposed-phase and spectral-spatial excitation techniques. Invest Radiol. 43 (5), 330-337 (2008).
- Wokke, B. H., et al. Quantitative MRI and strength measurements in the assessment of muscle quality in Duchenne muscular dystrophy. Neuromuscul Disord. 24 (5), 409-416 (2014).
- Fischer, M. A., et al. Liver Fat Quantification by Dual-echo MR Imaging Outperforms Traditional Histopathological Analysis. Acad Radiol. 19 (10), 1208-1214 (2012).
- Hayashi, T., et al. Influence of Gd-EOB-DTPA on proton density fat fraction using the six-echo Dixon method in 3 Tesla magnetic resonance imaging. Radiol Phys Technol. , (2017).
- Hines, C. D. G., Yu, H., Shimakawa, A., McKenzie, C. A., Brittain, J. H., Reeder, S. B. T1 independent, T2* corrected MRI with accurate spectral modeling for quantification of fat: Validation in a fat-water-SPIO phantom. J Magn Reson Imaging. 30 (5), 1215-1222 (2009).
- Fukuzawa, K., et al. Evaluation of six-point modified dixon and magnetic resonance spectroscopy for fat quantification: a fat-water-iron phantom study. Radiol Phys Technol. , 1-10 (2017).
- Bernard, C. P., Liney, G. P., Manton, D. J., Turnbull, L. W., Langton, C. M. Comparison of fat quantification methods: A phantom study at 3.0T. J Magn Reson Imaging. , (2008).
- Poon, C., Szumowski, J., Plewes, D., Ashby, P., Henkelman, R. M. Fat/Water Quantitation and Differential Relaxation Time Measurement Using Chemical Shift Imagin Technique. Magn Reson Imaging. 7 (4), 369-382 (1989).
- Yu, H., Shimakawa, A., Mckenzie, C. a, Brodsky, E., Brittain, J. H., Reeder, S. B. Multi-Echo Water-Fat Separation and Simultaneous R2* Estimation with Multi-Frequency Fat Spectrum Modeling. Spectrum. 60 (5), 1122-1134 (2011).
- Peri, C. The extra-virgin olive oil handbook. , John Wiley & Sons, Ltd. Chichester, UK. (2014).
- Kell, G. S. Density, Thermal Expansivity, and Compressibility of Liquid Water from 0° to 150°C: Correlations and Tables for Atmospheric Pressure and Saturation Reviewed and Expressed on 1968 Temperature Scale. J Chem Eng Data. 20 (1), 97-105 (1975).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
