Przedstawiamy chirurgiczną metodę wywoływania przerostu i niewydolności prawej komory u szczurów.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Model pasma pnia płucnego przeciążenia ciśnieniem wywołanego przerostem i niewydolnością prawej komory
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Niewydolność prawej komory (RV) wywołana długotrwałym przeciążeniem ciśnieniowym jest głównym czynnikiem przyczyniającym się do zachorowalności i śmiertelności w kilku chorobach krążeniowo-oddechowych. W związku z tym uzasadnione jest posiadanie wiarygodnych i powtarzalnych modeli zwierzęcych niewydolności RV w celu zbadania mechanizmów chorobowych i skutków potencjalnych strategii terapeutycznych. Prążkowanie pnia płucnego jest powszechną metodą indukowania izolowanego przerostu RV, ale ogólnie rzecz biorąc, wcześniej opisane modele nie zdołały stworzyć stabilnego modelu przerostu i niewydolności RV.
Prezentujemy szczurzy model hipertrofii RV wywołanej przeciążeniem ciśnieniowym spowodowanej pasmami płuc (PTB), który umożliwia różne fenotypy hipertrofii RV z awarią RV i bez niej. Używamy zmodyfikowanego aplikatora zacisku podwiązkowego, aby ścisnąć tytanowy klips wokół pnia płucnego do wstępnie ustawionej średnicy wewnętrznej. Używamy różnych średnic klipsów, aby wywołać różne etapy progresji choroby, od łagodnego przerostu RV do nieskompensowanej niewydolności RV.
Przerost RV rozwija się konsekwentnie u szczurów poddanych procedurze PTB i w zależności od średnicy zastosowanego klipsa do opaski, możemy dokładnie odtworzyć różne nasilenia choroby, od kompensowanego przerostu do ciężkiej nieskompensowanej niewydolności RV z objawami pozasercowymi.
Prezentowany model PTB jest prawidłowym i solidnym modelem hipertrofii i awarii RV wywołanej przeciążeniem ciśnieniowym, który ma kilka zalet w porównaniu z innymi modelami pasmowymi, w tym wysoką odtwarzalność i możliwość wywołania ciężkiej i nieskompensowanej awarii RV.
Wprowadzenie
Prawa komora (RV) może dostosować się do ciągłego przeciążenia ciśnieniowego. Z czasem jednak mechanizmy adaptacyjne nie są w stanie utrzymać rzutu serca, RV rozszerza się i ostatecznie RV zawodzi. Funkcja RV jest głównym czynnikiem prognostycznym kilku zaburzeń krążeniowo-oddechowych, w tym tętniczego nadciśnienia płucnego (PAH), zakrzepowo-zatorowego nadciśnienia płucnego (CTEPH) i różnych postaci wrodzonych wad serca z przeciążeniem ciśnieniowym (lub objętościowym) RV. Pomimo intensywnego leczenia, niewydolność kampera pozostaje główną przyczyną zgonów w tych stanach.
W wyniku unikalnych właściwości1,
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie szczury traktowano zgodnie z duńskimi wytycznymi krajowymi opisanymi w duńskiej ustawie o eksperymentach na zwierzętach oraz rozporządzeniu ministerialnym w sprawie eksperymentów na zwierzętach. Wszystkie eksperymenty zostały zatwierdzone przez Instytucjonalną Komisję Etyczną i przeprowadzone zgodnie z duńskim prawem dotyczącym badań nad zwierzętami (numer zezwolenia 2012-15-2934-0384, duńskie Ministerstwo Sprawiedliwości).
1. Regulacja aplikatora klipsów ligujących
UWAGA: Bandażowanie pnia płucnego wykonuje się za pomocą zmodyfikowanego aplikatora do otwartych klipsów ligujących z kątowy....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Stosując opisaną procedurę PTB z poprzednich badań naszej grupy12,13, wywołaliśmy przerost RV (PTB łagodny) poprzez założenie klipsa o średnicy 1,0 mm, umiarkowany stopień niewydolności RV (PTB umiarkowany) poprzez założenie klipsa o średnicy 0,6 mm oraz ciężki stopień niewydolności RV (PTB ciężki) poprzez założenie klipsa o średnicy 0,5 mm. U szczurów poddanych ciężkiemu zaciskaniu rozwinęły się pozasercowe objawy niewydolności R.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Opisujemy dostępną i wysoce powtarzalną metodę opasywania pnia płucnego przy użyciu zmodyfikowanego aplikatora zaciskowego do podwiązywania w celu ściśnięcia tytanowego klipsa wokół tułowia płucnego. Dostosowując aplikator w celu skompresowania klipsa do różnych średnic wewnętrznych, można wywołać różne fenotypy przerostu i niewydolności RV, w tym ciężką niewydolność RV z pozasercową manifestacją dekompensacji.
Chociaż protokół jest prosty, zawiera kilka krytycznych kroków. Co ważne, szczury n.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia
Podziękowania
Ta praca była wspierana przez Duńską Radę ds. Niezależnych Badań [11e108410], Duńską Fundację Serca [12e04-R90-A3852 i 12e04-R90-A3907] oraz Fundację Novo Nordisk [NNF16OC0023244].
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 17 G IV Kaniula Venflon | Becton Dickinson, US | 393228 | Dystalne 2 mm igły zostały odcięte |
| 1 ml strzykawka + igła 26 G | Becton Dickinson, US | 303172 & 303800 | |
| 4-0 wchłanialny szew wielowłókienkowy | Covidien, US | GL-46-MG | Polysorb, fioletowy, 5x18" |
| 4-0 ligatura wielowłókienkowa | Covidien, US | LL-221 | Polysorb, fioletowy, 98" |
| Buprenorfina | Indivior UK Limited Zamówienia | lokalne, Temgesic 0,3 mg/ml | |
| Karprofen | ScanVet, DK | 27693 | Norodyl 50 mg/ml |
| Chlorheksydyna | Faaborg Pharma, DK | Lokalny wykonawca | |
| zamówień Aesculap, Niemcy | BV010R | Blunt, samowystarczalny, 70 mm | |
| Zaczep do ucha | Lawton, Niemcy | 66-0261 | Mały, 14 cm, końcówka zmodyfikowana do kąta 85° |
| Żel do oczu | Decra, Wielka Brytania | Lubrithal, Kleszcze do zaopatrzenia lokalnego | |
| , delikatna tkanka | Lawton, Niemcy | 09-0020 | |
| Kleszcze, preparowanie | Lawton, Niemcy | 09-0013 | 1 regularny, 1 z końcówką zmodyfikowaną do kąta 100° |
| System znieczulenia gazowego | Penlon Limited, Wielka Brytania | SD0217SL | Sigma Delta Vaporizer |
| Maszynka do strzyżenia włosów | Oster | 76998-320-051 | |
| Horizon Open Ligating Clip Applier | Teleflex, US | 137085 | Zmodyfikowany z regulowanym mechanizmem zatrzymującym |
| Horizon Titanium Clips | Teleflex, US | 001200 | |
| Mała komora indukcyjna | N/A | ||
| Irys Nożyczki | Lawton, Niemcy | 05-1450 | |
| Irys Nożyczki | Aesculap, Niemcy | BC060R | |
| Wentylator mechaniczny | Ugo Basile, Włochy | 7025 | |
| Microscissor | Lawton, Niemcy | 63-1406 | |
| Mikroskop | Carl Zeiss, Niemcy | 303294-9903 | |
| Uchwyt igły | Lawton, Niemcy | 08-0011 | TITEGRIP |
| Pean | Lawton, Niemcy | 06-0100 | Halsted-Mosquito, prosty |
| Pro-Optha | Lohmann & Rauscher, Niemcy | 16515 | do tamponów |
| 9 mg/ml | Fresenius Kabi, DK | 209319 | |
| Sevoflurane | AbbVie, USA | Sevorane, Zaopatrzenie lokalne | |
| Hak chirurgiczny | Lawton, Niemcy | 51-0665 | Cushing, 19 cm, końcówka zmodyfikowana do kąta 90& |
| Taśma chirurgiczna | 3M, US | 1530-0 | Mikroporowy |
| regulator temperatury | CMA Microdializa; Szwecja | 8003760 | CMA 450 |
| Maszyna ważąca | VWR, USA | ||
| Wistar warchlaki odsadzone od szczura | Janvier Labs, Francja | RjHan:WI, 100-120 g |
Bibliografia
- Kaufman, B. D., et al. Genomic profiling of left and right ventricular hypertrophy in congenital heart disease. Journal of Cardiac Failure. 14 (9), 760-767 (2008).
- Zungu-Edmondson, M., Suzuki, Y. J. Diffe....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
