Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Odwrotna sekcja i DiceCT ujawniają ukryte dane dotyczące ewolucji twarzy naczelnych

6.6K wyświetleń

DOI:

10.3791/58394

7 stycznia 2019

W tym artykule

Podsumowanie

Mimika twarzy to sposób komunikacji wizualnej wytwarzany przez mięśnie mimetyczne. W tym miejscu przedstawiamy protokoły dla nowatorskich technik odwrotnej sekcji i DiceCT w celu pełnej wizualizacji i oceny mięśni mimetycznych. Te połączone techniki mogą badać zarówno morfologiczne, jak i fizjologiczne aspekty mięśni mimetycznych w celu określenia aspektów funkcjonalnych.

Streszczenie

Wyrazy twarzy lub pokazy twarzy wyrażające intencje społeczne lub emocjonalne są wytwarzane przez wiele taksonów ssaków jako sposób wizualnego komunikowania się z przedstawicielami tego samego gatunku z bliskiej odległości. Pokazy te osiąga się poprzez skurcz mięśni mimetycznych, które są mięśniami szkieletowymi przyczepionymi do skóry właściwej twarzy. Odwrotna sekcja, usunięcie pełnej maski twarzowej z czaszki i zbliżenie się do mięśni mimetycznych w odwrotnej kolejności, jest skutecznym, ale destrukcyjnym sposobem ujawnienia morfologii mięśni mimetycznych, ale jest destrukcyjny. DiceCT to nowatorski mechanizm wizualizacji mięśni szkieletowych, w tym mięśni mimetycznych, oraz izolowania poszczególnych pęczków mięśniowych w celu pomiaru ilościowego. Dodatkowo DiceCT zapewnia nieniszczący mechanizm wizualizacji mięśni. Połączone techniki odwrotnej dysekcji i DiceCT mogą być wykorzystane do oceny ewolucyjnej morfologii mięśni mimetycznych, a także potencjalnej siły i prędkości skurczu w tych mięśniach. Badanie to pokazuje ponadto, że DiceCT może być używany do dokładnej i niezawodnej wizualizacji mięśni mimetycznych, a także do odwrotnej sekcji i zapewnienia nieniszczącej metody pobierania próbek mięśni mimetycznych.

Wprowadzenie

Mimetyczna muskulatura lub muskulatura mimiczna to mięsień szkieletowy i występuje w całej klasie Mammalia1. Podczas gdy większość mięśni szkieletowych ssaków przyczepia się do dyskretnych punktów orientacyjnych na kości, muskulatura mimetyczna jest wyjątkowa w swoich przyczepach głównie do skóry twarzy, skóry głowy i brzusznej części szyi1,2,3,4. Mimetyczny skurcz mięśni deformuje "maskę na twarz" w wyraz twarzy lub wyraz twarzy wyrażający intencje społeczne i emocjonalne, zmienia rozmiar i kształt zwieraczy oka, jamy nosowej i jamy ustnej używanych w karmieniu, oddychaniu i wokalizacjach, i jest częścią ogólnego mechanizmu komunikacji wzrokowej w bliskiej odległości występującego u większości ssaków2, 3,4,5. W całej populacji Mammalia pokazy twarzy generowane przez mięśnie mimetyczne pomagają w regulowaniu i utrzymywaniu granic terytorialnych, więzi społecznych i grupy społecznej, wskazując współplemieńców na emocjonalne i behawioralne intencje nadawcy2,5.

Wśród ssaków, naczelne charakteryzują się częściowo wysokim poziomem zachowań społecznych przez cały cykl życia, przy czym wszystkie gatunki żyją w grupie społecznej2,5. Podczas gdy niektóre taksony, takie jak nocne galagos i lorysy, mogą żyć w grupach składających się tylko z matki i potomstwa, inne taksony, takie jak makaki dzienne i pawiany, mogą żyć w grupach liczących ponad 100 osobników6. Bez względu na wielkość grupy społecznej, naczelne często stosują stereotypowe zachowania społeczne związane z rangą i terytorialnością, a zachowania te zazwyczaj zawierają element wyświetlania twarzy. Pokazywanie twarzy jest częścią procesu utrzymywania więzi między członkami grup społecznych, hierarchii dominacji, reprodukcji i komunikacji, która jest częścią codziennego życia, zwłaszcza u gatunków dziennych2,5,7. Chociaż od pewnego czasu było jasne, że muskulatura twarzy jest wykorzystywana do tworzenia tych pokazów twarzy, dopiero niedawno stało się jasne, że forma i fizjologia muskulatury twarzy są związane z funkcjonalnymi wymaganiami zmiennych społecznych2,8. Wcześniejsze badania nad filogenetycznie i behawioralnie zróżnicowanymi zakresami naczelnych wykazały, że dzienne gatunki żyjące w dużych, złożonych grupach społecznych mają zwykle dużą liczbę dyskretnych pokazów twarzy, które koncentrują się na ruchu warg, brwi i powiek z dużą liczbą mięśni twarzy skupionych wokół warg i okolicy oczodołu9. W przeciwieństwie do tego, przeprowadzono niewiele badań nad gatunkami nocnymi żyjącymi w małych grupach, ale gatunki te mają dużą liczbę dyskretnych mięśni twarzy z przyczepami wokół ucha zewnętrznego i warg, co może być związane z ruchami ucha i warg (co zostało udokumentowane u niektórych gatunków nocnych w agonistycznych spotkaniach z przedstawicielami tego samego gatunku i lokalizowaniu dźwięków)2, 9,10,11. Ponadto ludzie mają stosunkowo wyższy procent wolnokurczliwych włókien miozyny w mięśniach mimetycznych niż makaki rezusy lub szympansy, co może być związane ze "spowolnieniem" skurczu ludzkiej mięśni mimetycznych wokół ust używanej podczas produkcji dźwięków mowy lub z ogólną odpornością mięśni na zmęczenie8.

Ludzie są, prawdopodobnie, najbardziej społecznymi ze wszystkich naczelnych i rozwinęli język jako jeden z elementów komunikacji społecznej. Nadal jednak ludzie używają wyrazu twarzy jako środka komunikacji wizualnej i mają największy znany repertuar pokazów twarzy wśród naczelnych. W celu pełniejszego zrozumienia zmiennych otaczających ewolucję zachowań społecznych ludzi i ogólnie naczelnych, wysoce pożądane jest lepsze zrozumienie morfologii i fizjologii mimetycznej muskulatury naczelnych. Ponieważ mimetyczna muskulatura jest przyczepiona do samej skóry i może być u niektórych gatunków wyjątkowo cienka i trudna do uwidocznienia, opracowaliśmy unikalną metodę wizualizacji tej muskulatury zarówno dla procesów rejestrowania ogólnej obecności/nieobecności i przyczepów, jak i pobierania próbek do przetwarzania mikroanatomicznego.

"Odwrócona sekcja" to metoda zachowania mimetycznej muskulatury poprzez usunięcie całej maski na twarz z głowy i zwiększenie widoczności nawet małych mięśni. Ponieważ odwrotna sekcja jest procesem destrukcyjnym, rzadkie i cenne okazy mogą nie zawsze być dostępne dla tej metodologii. DiceCT to skuteczna metoda, która może uwidocznić wiele mięśni mimetycznych nawet u maleńkich gatunków12,13,14. Metoda ta może być stosowana w połączeniu z odwrotną sekcją lub w przypadkach, gdy rzadkie, cenne okazy mogą nie zostać poddane sekcji i mogą dostarczyć wielu informacji bez konieczności zdejmowania maski na twarz w "odwrotnej sekcji"12,13,14. Niniejszy protokół opisuje zestaw metod łączenia odwrotnej sekcji z DiceCT w celu zbadania mimetycznej muskulatury naczelnych.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Ponieważ te procedury wykorzystują zwierzęta, które zmarły z przyczyn naturalnych w ogrodach zoologicznych lub zostały uśmiercone w laboratoriach badawczych, gdzie były częścią niepowiązanych badań, te protokoły nie wymagają zatwierdzeń IACUC.

1. Odwrotna sekcja

Uwaga: Protokół odwrotnej sekcji jest skuteczny zarówno dla bardzo małych ssaków, takich jak myszy laboratoryjne, aż do dużych ssaków lądowych, takich jak koń domowy. Mięśnie mimetyczne są często najlepiej zachowane i najlepiej uwidocznione, gdy pozostawia się je z leżącą nad nimi skórą właściwą, zamiast pozostawiać je na czaszce. Zobacz Rysunek 1-3.

  1. Odłączona głowa od części szyjnej kręgosłupa przed zabiegami preparacyjnymi. Jeśli zwłoki są zamrożone, pozwól im całkowicie się rozmrozić przed przejściem przez ten krok.
    1. Niezależnie od stanu zachowania należy wykonać badanie palpacyjne okolicy potylicznej czaszki i wyrostka kolczystego drugiego kręgu szyjnego (C2). Należy zauważyć, że pierwszy kręg szyjny (C1) nie ma wyrostka kolczystego, więc badanie palpacyjne C2 i okolicy potylicznej czaszki da przybliżoną lokalizację C1.
    2. Za pomocą skalpela wykonaj poziome nacięcia między potyliczną częścią czaszki a C2, aby rozpocząć oddzielanie czaszki od kręgosłupa w C1. Kontynuuj wykonywanie cięć, aż czaszka zostanie odłączona od kręgosłupa.
    3. Jeżeli próbka jest świeża i nieutrwalona, kroki 1.1.2-1.2 muszą zostać wykonane w stosunkowo krótkim czasie. Dodatkowo, jeśli mózg pozostaje nienaruszony w jamie czaszki, martwica tkanki nerwowej może postępować szybko, dlatego zdecydowanie zaleca się usunięcie mózgu ze zwłok, jeśli próbka ma pozostać niezamocowana.
      UWAGA: Opcjonalnie próbkę można zanurzyć w 10% buforowanej formalinie na 24 godziny w celu utrwalenia próbki. Pozwoli to na niespieszną procedurę zbierania danych.
    4. Jeśli próbka jest już utrwalona alkoholem etylowym lub 10% buforowaną formaliną, płukać przez kilka godzin świeżą wodą.
  2. Wykonaj nacięcia, aby uwolnić maskę na twarz z czaszki. Jeśli mózg i leżąca nad nim kalwaria zostały usunięte podczas sekcji zwłok, wykonaj jedno nacięcie w pobliżu obszaru gładzizny czoła czaszki, a drugie wzdłuż ogonowej części czaszki, gdzie kość czaszki jest nienaruszona.
    1. Po płukaniu próbki przez kilka godzin osuszyć ręcznikami papierowymi i przenieść do stanowiska pracy.
    2. Badanie palpacyjne zewnętrznej wypukłości potylicznej na ogonowej (lub tylnej) krawędzi czaszki. Oznacza to obszar, w którym czaszka styka się z kręgosłupem. Używając skalpela #4 w przypadku dużych próbek lub skalpela #3 w przypadku małych próbek, wykonaj nacięcie w linii środkowej, zaczynając od zewnętrznej wypukłości potylicznej i biegnąc rostralnie (lub do przodu) nad obszarem ciemieniowym i czołowym czaszki, nad obszarem oczodołu i między oczami, w dół okolicy nosa, aż do zewnętrznego obszaru nosa między nozdrzami.
    3. Wykonaj nacięcie na żuchwie między dolnymi, centralnymi siekaczami i poruszaj się doogonowo (lub do tyłu) w kierunku obojczyka.
    4. Wybierz jedną stronę maski na twarz, którą chcesz zdjąć, a drugą pozostaw na miejscu.
  3. Zdejmij jedną stronę maski na twarz z czaszki.
    1. Zaczynając w okolicy potylicznej, użyj skalpela, aby odciąć maskę na twarz, w tym mięśnie mimetyczne, z dala od kości potylicznej czaszki, ciągnąc maskę rostralnie (lub do przodu) i na bok (na bok). Odetnij mięsień potyliczny od czaszki, pozostawiając niewielką ilość mięśnia na czaszce, aby jego przyczep można było nadal uwidocznić po zdjęciu maski na twarz. Pozostawiając część mięśnia na kostnej/chrzęstnej czaszce, można zachować przyczepy do nagrania w późniejszym czasie.
    2. Po uderzeniu w ucho zewnętrzne zlokalizuj mięśnie małżowiny usznej. Przetnij je tak, aby niewielka część każdego z nich pozostała z czaszką. Przeciąć elastyczną chrząstkę mocującą ucho zewnętrzne do czaszki.
    3. Kontynuuj ciągnięcie maski rostralnie i uwalniaj każdy mimetyczny mimień z czaszki, pozostawiając niewielką część każdego mięśnia na czaszce.
    4. Gdy maska na twarz jest nienaruszona z jednej strony czaszki, pozwól jej siedzieć na zewnątrz, wystawiona na działanie powietrza, przez godzinę (w przypadku małych okazów, takich jak szczur laboratoryjny) do trzech godzin (w przypadku dużego okazu, takiego jak koń domowy), stroną muskulaturową skierowaną do góry. Ten krok wysusza część tkanki łącznej na masce na twarz i zwiększa kontrast kolorów między mięśniami a tkanką łączną.
  4. Usuń wystarczającą ilość tkanki łącznej, aby uwidocznić muskulaturę.
    1. Za pomocą skalpela #3, kleszczy i mikronożyczek oderwij tkankę łączną, która oddziela mięśnie mimetyczne od siebie.
    2. Aby uzyskać dostęp do powierzchownej warstwy mięśni mimetycznych w tej "odwrotnej sekcji", delikatnie podnieś i oddziel głęboką warstwę mięśni od warstwy powierzchownej i usuń tkankę łączną otaczającą powierzchowną muskulaturę. Powstałą maskę na twarz można przywrócić do formaliny, a procedurę można tutaj wstrzymać przed przejściem do dalszej sekcji lub barwienia (krok 2). Na każdym etapie dalszej sekcji pozwól masce na twarz wyschnąć na tyle, aby można było łatwo odróżnić tkankę łączną od tkanki mięśniowej.

2. Proces barwienia dla DiceCT

UWAGA: Próbki muszą być utrwalone w 10% buforowanej formalinie, jeśli DiceCT ma być użyty w celu zachowania tkanki podczas długotrwałej procedury barwienia. Jeśli próbka nie została jeszcze utrwalona, umieść ją w pojemniku z wystarczającą ilością 10% buforowanej formaliny, aby zanurzyć całą tkankę i pozostaw na 48 godzin.

  1. Przygotować 1,75% (m/v) płyn Lugola (I2KI) do barwienia maski na twarz.
    UWAGA: Przygotuj wystarczającą ilość roztworu I2KI, aby całkowicie zanurzyć maskę na twarz w wybranym pojemniku. Uzyskać mniej więcej roztwór, skalując równo wartości zarówno substancji rozpuszczonych, jak i rozpuszczalnika w krokach 2.1.1 i 2.1.2.
    1. Pod wyciągiem dodaj 3,50 g jodku potasu (KI) do 200 ml wody destylowanej w dużej szklanej zlewce. Mieszać za pomocą szklanego pręta mieszającego aż do całkowitego rozpuszczenia.
      UWAGA: Jodek potasu (KI) może powodować podrażnienie lub uszkodzenie oczu, skóry i dróg oddechowych. Nosić okulary ochronne i uchwyt pod wyciągiem.
    2. Powoli dodawać 1,75 g kryształków jodu (I2), mieszając aż do całkowitego rozpuszczenia. Zajmie to kilka minut.
      UWAGA: Kryształy jodu (I2) mogą powodować podrażnienie lub uszkodzenie oczu, skóry i dróg oddechowych. Podczas obchodzenia się z tą substancją chemiczną należy nosić ochronę oczu i skóry oraz pracować pod wyciągiem.
    3. Przefiltruj roztwór do butelki ze szkła bursztynowego za pomocą bibuły filtracyjnej o wielkości porów 11 mikronów, aby usunąć wszelkie nierozpuszczone kryształy, które mogłyby powodować niespójne zabarwienie.
      UWAGA: To rozwiązanie jest wysoce toksyczne dla organizmów wodnych. Nie wylewać roztworu do kanalizacji. W przypadku rozlania zneutralizować wodny trijodek (I3-) w jodek (I-) za pomocą 5% (m/v) tiosiarczanu sodu (Na2S2O3). Sprawdź instytucjonalne zasady usuwania odpadów dla jodku i odpowiednio zutylizuj te odpady.
  2. Plamić maskę na twarz.
    1. Umieść maskę na twarz ściętą stroną do dołu w bursztynowym szkle lub zaciemnionym pojemniku (aby chronić przed światłem) wystarczająco dużym, aby maska na twarz mogła spoczywać w naturalnym kształcie i była całkowicie zanurzona.
    2. Wlej płyn Lugola Jodu na maskę do twarzy, aż do całkowitego zanurzenia. Może być potrzebny ciężarek, aby maska na twarz była całkowicie zanurzona i nie unosiła się na wierzch roztworu. Uszczelnij pojemnik, aby zapobiec parowaniu i chronić przed światłem.
    3. Pojemnik należy mieszać w sposób ciągły na elektrycznym bujaku lub regularnie ręcznie, aby ułatwić równomierne barwienie i zapobiec osadzaniu się kryształów przez co najmniej dwa tygodnie. Jeśli potrzeba więcej czasu, aby odpowiednio zabarwić pęczki mięśniowe, zastąp płyn Lugola świeżym roztworem.
    4. Po dwóch tygodniach usuń maskę na twarz z roztworu. Wlej niewielką ilość wody destylowanej na obie powierzchnie maski do spłukania. Zawiń maskę na twarz w wilgotne ręczniki papierowe i umieść w szczelnie zamkniętej plastikowej torbie na co najmniej 24 godziny, aby umożliwić lekkie wyschnięcie przed przejściem do następnego kroku.
      UWAGA: Protokół może zostać wstrzymany na okres do tygodnia. Upewnij się, że w tym okresie maska na twarz pozostaje lekko wilgotna.

3. Skanowanie DiceCT

  1. Przygotuj maskę na twarz do badania tomografią komputerową.
    1. Zamontuj maski na twarzy na materiale o niskiej gęstości, takim jak pianka florystyczna, aby wyeliminować wszelkie zmarszczki na masce i ograniczyć ruchy maski, ponieważ maska lekko wysycha podczas skanowania. Przymocuj maskę na twarz do pianki za pomocą drewnianych wykałaczek.
  2. Ustawianie parametrów tomografii komputerowej i skanowanie.
    1. Do tych skanów należy używać wysokiej rozdzielczości, ponieważ małe pęczki będą zasłonięte w niższej rozdzielczości. Użyj odstępów między przekrojami i odległości między pikselami około 0,05 mm.
    2. Zeskanuj zamontowaną maskę na twarz na skanerze rentgenowskiej tomografii komputerowej o wysokiej rozdzielczości.
    3. Jeśli pęczki nie mogą być w pełni uwidocznione z powodu nadmiernego barwienia, umieść maskę na twarz w 10% roztworze formaliny lub w 5% tiosiarczanie sodu, aby usunąć część plamy. Jeśli pęczki nie są wystarczająco zabarwione, wróć do płynu Lugola z jodem. Po dopasowaniu zabarwienia ponownie zeskanuj maskę na twarz. Kontynuuj dokonywanie niezbędnych regulacji i skanuj, aż pęczki będą mogły być w pełni uwidocznione.

4. Przygotuj maskę na twarz do długotrwałej konserwacji.

  1. Chemicznie zneutralizuj plamę jodu w maseczce na twarz, usuwając przebarwienia z procesu barwienia.
    1. Umieść poplamioną maskę na twarz w 5% (m/v) roztworze tiosiarczanu sodu, aby chemicznie zneutralizować próbkę. Może to potrwać kilka godzin lub dni. Mieszaj regularnie podczas odbarwiania.
    2. Odbarwioną maskę na twarz należy umieścić z powrotem w 10% roztworze formaliny w celu konserwacji. Jeśli plama będzie nadal wypłukiwać się z próbki do roztworu, zastąp odbarwioną formalinę świeżą formaliną, aż pozostanie przezroczysta do długotrwałej konserwacji.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W tej sekcji przedstawiono przykłady wyników dotyczących budowy mięśni twarzy, które można uzyskać dzięki zastosowaniu „odwróconej dyssekcji” w połączeniu ze skanowaniem DiceCT. Dzięki wykorzystaniu „odwróconej dyssekcji” do stworzenia maski twarzy, czasami można uzyskać pełniejszą reprezentację mięśni mimicznych (twarzowych) niż w przypadku tradycyjnej metodologii sekcji. Metoda ta sprawdza się przy różnych rozmiarach ciała – od niewielkich naczelnych, takich jak sajemka zwyczajna Ca...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Postępowanie zgodnie z procedurami protokołu "odwrotnej sekcji" zazwyczaj powoduje powstanie maski na twarz, którą można powoli i metodycznie preparować, aby odsłonić mimetyczną muskulaturę, niezależnie od wielkości głowy. Szczególnie ważne jest, aby poruszać się powoli i stale oceniać, czy mięśnie nie zostały przypadkowo całkowicie przecięte, zwłaszcza u mniejszych gatunków.

Aby określić, gdzie znajduje się muskulatura, szczególnie ważne jest, aby rozwijająca się maska wyschła etapami, aby st...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają żadnych ujawnień do przekazania.

Podziękowania

Autorzy pragną podziękować Yerkes National Primate Research Center za dostęp do okazów szympansów i makaków rezusów oraz Chrisowi Vinyardowi (Northeast Ohio Medical University) za dostęp do pospolitych okazów marmozet. Dziękujemy Marissie Boettcher, Kaitlyn Leonard i Antonii Meza z Uniwersytetu Karoliny Północnej za pomoc w procesie skanowania. Prace te zostały częściowo wykonane w Duke University Shared Materials Instrumentation Facility (SMIF), członku North Carolina Research Triangle Nanotechnology Network (RTNN), która jest wspierana przez National Science Foundation (grant ECCS-1542015) w ramach National Nanotechnology Coordinated Infrastructure (NNCI). Jest to publikacja Duke Lemur Center numer 1405.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Nikon XTH 225 STNikonbrak numerów katalogowych
10% buforowana formalinaFisher ScientificSF98-4
Jod, ACSGrade Lab Chem, Inc.
Tiosiarczan soduAcros OrganicsAC450620010
Jodek potasuAlfa AesarA1270430
LC155901

Bibliografia

  1. Gregory, W. K. Our face from fish to man. , G.P. Putnam's Sons. New York. (1929).
  2. Burrows, A. M. The facial expression musculature in primates and its evolutionary significance. BioEssays. 30, 212-215 (2008).
  3. Santana, S. E., Dobson, S. D., Diogo, R. Plain faces are more expressive: comparative study of facial colour, mobility and in primates. Biology Letters. , (2014).
  4. Burrows, A. M., Cohn, J. F. Comparative anatomy of the face. Encyclopedia of Biometrics. Li, S. Z., Jain, A. K. , Springer. New York. (2014).
  5. Liebal, K., Waller, B. M., Burrows, A. M., Slocombe, K. Primate Communication. , Cambridge University Press. Cambridge. (2013).
  6. Rowe, N., Myers, M. All the World's Primates. , Pogonias Press. Charlestown, RI. (2016).
  7. Burrows, A. M., Waller, B. M., Micheletta, J. Mimetic muscles in a despotic macaque (Macaca mulatta) differ from those in a closely related tolerant macaque (M. nigra). Anatomical Record. 299, 1317-1324 (2016).
  8. Burrows, A. M., Parr, L. A., Durham, E. L., Matthews, L. C., Smith, T. D. Human faces are slower than chimpanzee faces. PLoS One. 9, 0110523(2014).
  9. Burrows, A. M. Functional morphology of mimetic musculature in primates: how social variables and body size stack up to phylogeny. Anatomical Record. 301, 202-215 (2018).
  10. Burrows, A. M., Smith, T. D. Muscles of facial expression in Otolemur, with a comparison to Lemuroidea. Anatomical Record. 274, 827-836 (2003).
  11. Burrows, A. M., Li, L. What's inside tarsier faces. Yearbook of Physical Anthropology. 60, 96(2015).
  12. Dickinson, E., Stark, H., Kupczik, K. Non-destructive determination of muscle architectural variables through the use of DiceCT. Anatomical Record. 301, 363-377 (2018).
  13. March, D., Hartstone-Rose, A. Functional morphology and behavioral correlates to postcranial musculature. Anatomical Record. 301, 419-423 (2018).
  14. Santana, S. E. Comparative anatomy of bat jaw musculature via diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography. Anatomical Record. 301, 267-278 (2018).
  15. Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A., Bonar, C. J. Muscles of facial expression in the chimpanzee (Pan troglodytes): descriptive, comparative and phylogenetic contexts. Journal of Anatomy. 208, 153-167 (2006).
  16. Burrows, A. M., Waller, B. M., Parr, L. A. Facial musculature in the rhesus macaque (Macaca mulatta): evolutionary and functional contexts with comparisons to chimpanzees and humans. Journal of Anatomy. 215, 320-334 (2009).
  17. Cox, P. G., Jeffery, N. Reviewing the Morphology of the Jaw-Closing Musculature in Squirrels, Rats, and Guinea Pigs with Contrast-Enhanced MicroCt. Anatomical Record. 294, 915-928 (2011).
  18. Gignac, P. M., Kley, N. J., Clarke, J. A., Colbert, M. W., Morhardt, A. C., et al. Diffusible iodine-based contrast-enhanced computed tomography (diceCT): An emerging tool for rapid, high-resolution, 3-D imaging of metazoan soft tissues. Journal of Anatomy. 228, 889-909 (2016).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Mięśnie mimicznemuskulatura twarzytomografia komputerowa (CT)barwienie jodempęczki mięśniowebiologia ewolucyjnaobrazowanie nieniszczące