Celem tego artykułu jest dostarczenie podstaw do rozwoju i wykorzystania modelu raka wątroby VX2 dla królika.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Celem tego artykułu jest dostarczenie podstaw do rozwoju i wykorzystania modelu raka wątroby VX2 dla królika.
Guz królika VX2 jest modelem zwierzęcym powszechnie wykorzystywanym do badań translacyjnych dotyczących raka wątrobowokomórkowego (HCC) w dziedzinie radiologii interwencyjnej. Model ten wykorzystuje anaplastycznego raka płaskonabłonkowego, który jest łatwo i niezawodnie rozmnażany w mięśniach szkieletowych królików-dawców w celu ostatecznego pobrania i wszczepienia alloprzeszczepu do wątroby naiwnych biorców. Ten przeszczep guza szybko rośnie w wątrobie królików biorców do identyfikowalnego angiograficznie guza charakteryzującego się martwiczym rdzeniem otoczonym żywotną torebką hipernaczyniową. Fizyczny rozmiar anatomii królika jest wystarczający, aby ułatwić oprzyrządowanie naczyniowe, co pozwala na zastosowanie i testowanie różnych technik interwencyjnych. Pomimo tych korzyści istnieje niedostatek zasobów technicznych, które mogłyby stanowić konkretny punkt odniesienia dla badaczy pracujących z modelem. W niniejszym artykule przedstawiamy kompleksowy zarys wizualny technicznych aspektów rozwoju, wzrostu, rozmnażania i angiograficznego wykorzystania modelu guza królika VX2 do użytku zarówno przez początkujących, jak i doświadczonych badaczy.
Model guza królika VX2 odgrywa ważną rolę w onkologii eksperymentalnej od czasu jego opracowania w 1935 roku1,2. Guz ten jest indukowanym przez wirusa anaplastycznym rakiem płaskonabłonkowym, charakteryzującym się hiperunaczynieniem, szybkim wzrostem i łatwym rozprzestrzenianiem się w mięśniach szkieletowych3,4. Podczas gdy model guza królika VX2 został wykorzystany do zbadania wielu nowotworów5,6,7,8; Tematem artykułu jest rak wątroby9.
Celem opisanej metody jest przedstawienie modelu pierwotnego raka wątroby lub raka wątrobowokomórkowego (HCC), który może być używany przez radiologów interwencyjnych do badań translacyjnych. Może być stosowany do badań farmakokinetycznych, badań terapeutycznych i testowania metodą ablacyjną10,11,12,13,14,15.
Metoda opisana tutaj daje wiele zalet w porównaniu z innymi modelami z tej samej dziedziny, takimi jak modele gryzoni, takie jak szczury, myszy i świstaki, lub większe modele, takie jak naczelne16. Jedną z głównych korzyści jest szybki i niezawodny wzrost guza, który pozwala naukowcom ustalić aktywną linię guza w ciągu miesiąca od pierwszej propagacji kończyn tylnych17. Dodatkowo guz ten ma prostą widoczność ultrasonograficzną i peryferię przekrwienną, co pozwala zarówno na transtętnicze leczenie lokoregionalne, jak i terapie ablacyjne. Wreszcie, co najważniejsze, rozmiar układu naczyniowego królika pozwala na wykonalne i technicznie łatwe wykorzystanie oprzyrządowania naczyniowego18.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poniższy protokół jest zgodny ze wszystkimi wymaganiami i wytycznymi nałożonymi przez University of Illinois - Chicago. Został on sprawdzony i zatwierdzony przez lokalną Instytucjonalną Komisję ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania przed wykonaniem.
1. VX2 Rozwój guza kończyn tylnych
2. VX2 Wzrost i zbiór guzów kończyn tylnych
Uwaga: Zakładając udaną inokulację, w ciągu 2 tygodni powinien pojawić się wyczuwalny (3\u20124 cm) guzek guza w miejscu wstrzyknięcia. Zwykle guzek ten będzie wyczuwalny palpacyjnie około 1 tygodnia; Jednak lepiej jest pozwolić guzowi rosnąć, aby umożliwić wystarczające pobranie tkanki. Zazwyczaj guzek ten będzie twardy, utwardzony i uniesiony ponad poziom mięśnia. Jeśli
3. Implantacja guza wątroby za pomocą laparotomii
4. Przygotowanie zawiesiny guza VX2
5. Angiograficzne wykorzystanie guza wątroby VX2
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Analizując Rysunek 1, można zauważyć, że mięsień czworogłowy uda królika jest powiększony. Dodatkowo widoczne są liczne małe, oddzielne guzki, które zazwyczaj korelują z przerostem nowotworu przez powięź. Podczas palpacji wstrzyknięta kończyna powinna wydawać się większa od kończyny niewstrzykniętej. Jeśli badacz potrzebuje bardziej jednoznacznego potwierdzenia obecności guza, można zastosować obrazowanie ultradźwiękowe w celu zidentyfikowania nowotworu osadz...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Pierwszym krytycznym krokiem w metodologii leczenia guza VX2 jest pomyślne rozprzestrzenienie guza w tylnej kończynie królika-dawcy. Zapoznaj się z pierwszym akapitem w sekcji "Reprezentatywne wyniki", aby uzyskać więcej informacji na temat tego kroku.
Kolejnym krytycznym krokiem jest upewnienie się, że żywa torebka nowotworowa jest prawidłowo zidentyfikowana. Będzie to konieczne nie tylko do przygotowania zawiesiny guza, ale jest również ważne dla selekcji i generowania fragmentów guza do imp...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Prace przedstawione w tym raporcie zostały wsparte grantem badawczym firmy Guerbet LLC.
Chcielibyśmy podziękować personelowi weterynaryjnemu z University of Illinois - Laboratorium Zasobów Biologicznych w Chicago.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| MethoCult (Metyloceluloza) | Stemcell Technologies | M3134 | |
| VX2 Linia komórkowa | NCI | VX-2 | |
| mL Strzykawka | BD | 309646 | |
| 16 G Igła | BD | 305197 | |
| 22 G Igła | BD | 305155 | |
| Maszynka do strzyżenia włosów | Wahl | 41870-0438 | |
| Pianka Pudełko izolowane | Mr. Box Online | 10 x 10 x 4 | |
| Acepromazyna | Henry Schein | 003845 | |
| Buprenorfina | Par | 42023-179-05 | |
| Meloksykam | Henry Schein | 049755 | |
| Wkładki alkoholowe | Covidien | 5033 | |
| Ketamina | Henry Schein | 056344 | |
| Ksylazyna | Akorn | 59399-110-20 | |
| Pentobarbital (Fatal-Plus) | Vortech | 9373 | |
| Sterylna szalka Petriego | Thermo Fisher | 172931 | |
| DMEM | Gibco | 11965092 | |
| Saline | Baxter | 2F7124 | |
| 15-ostrzowy | Steris | 02-050-015 | |
| Rękojeść skalpela x 2 | Steris | 22-2381 | |
| Zakrzywione kleszcze atraumatyczne | |||
| Gaza | Medline | NON21430LF | |
| 11-ostrzowa | Steris | 02-050-011 | |
| Surgicel | Ethicon | 1951 | |
| 3-0 PDS / Stożek | Ethicon | Z305H | |
| Vicryl / Etyka cięcia | J392H | ||
| 40 μ m Filtr siatkowy | BD | 352340 | |
| Rurka stożkowa 50 ml | Pipeta | 339652 | |
| Thomas Scientific | HS206371B | ||
| Wirówka | Sorvall | 75004240 | |
| 1,40 ml Probówki (gwint wewnętrzny) | Micronic | MP32131-Z20 | |
| 3-F VSI Micro-HV Zestaw wprowadzający | Rozwiązania | naczynioweNa zamówienie (P15180391) | |
| .018 Drut ślizgowy kątowy 45° | Terumo | RG*GA1818SA | |
| Mikrocewnik Direxion w kształcie berna | Boston Scientific | M001195230 | |
| Omnipaque | GE | Y510 |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.