Nieszczelność zespolenia lub awaria po operacji jest główną przyczyną zachorowalności i śmiertelności pooperacyjnej. Nasz zabieg chirurgiczny do tworzenia zespolenia jelita grubego jest wiarygodną i powtarzalną metodą badania mechanizmów gojenia się zespoleń.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Tworzenie zespolenia okrężnicy u myszy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Zespolenia jelitowe są powszechnie wykonywane zarówno w operacjach planowych, jak i nagłych. Mimo to nieszczelności zespolenia są bardzo przerażającym powikłaniem operacji okrężnicy i mogą wystąpić nawet w 26% zespoleń chirurgicznych, a śmiertelność wynosi do 39% u pacjentów z takim wyciekiem. Obecnie nadal brakuje danych szczegółowo opisujących komórkowe mechanizmy gojenia się zespoleń. Opracowanie strategii zapobiegawczych i metod leczenia nieszczelności zespolenia może być znacznie wzmocnione dzięki lepszemu zrozumieniu prawidłowego gojenia zespolenia.
Model mysi jest idealny, ponieważ poprzednie badania wykazały, że zespolenie mysie jest klinicznie najbardziej podobne do ludzkiego przypadku w porównaniu z innymi modelami zwierzęcymi. Oferujemy łatwy do odtworzenia mysi model zespolenia okrężnicy u myszy, który pozwoli na dalsze zobrazowanie gojenia zespolenia.
Wprowadzenie
Wysoce obawiającym się powikłaniem operacyjnego zespolenia jelita jest uszkodzenie lub nieszczelność zespolenia. Nieszczelność zespolenia, która powoduje rozlanie się treści śródświetlnej do jamy brzusznej, zagraża życiu i może szybko doprowadzić do sepsy wewnątrzbrzusznej; Częstość wstrząsów waha się od 0,3% do 5,5% po zespoleniach jelita cienkiego i wzrasta do 0,5% do 26% w przypadku zespoleń okrężnicy1,2. Śmiertelność po wyciekach może sięgać nawet 39% ze względu na szybki początek sepsy i szybką progresję do zgonu po zakażeniu wewnątrzbrzusznym3. Strategie zapobiegawcze i metody lec....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Następujący protokół został zatwierdzony przez University of Oklahoma Health Sciences Center, Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) i jest zgodny ze wszystkimi instytucjonalnymi wytycznymi etycznymi dotyczącymi wykorzystywania zwierząt badawczych. Ponadto wszystkie eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z przepisami instytucjonalnymi, stanowymi i federalnymi dotyczącymi badań na zwierzętach doświadczalnych.
UWAGA: Do tego protokołu użyliśmy samic i samców kongenicznych myszy C57BL6/J w wieku od 12 do 72 tygodni. Wszystkie myszy użyte do tej procedury były trzymane w naszym ośrodku bez barier przez co najmniej tydzień prze....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
W 7. dniu po operacji anastomoza powinna być dobrze zagojona. Anastomozę można pobrać w punktach czasowych przed i po siedmiu dniach, aby lepiej zobrazować etapy gojenia anastomozy. Na Rysunku 9 analiza histologiczna wykazuje odpowiedź włóknistą (kolagen uwidoczniony za pomocą barwienia trichromowego) zapośredniczoną przez myofibroblasty dodatnie pod kątem alfa-aktyny mięśni gładkich. Stwierdziliśmy jednak, że wyniki analiz histologicznych różnią się między m.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Istnieje kilka kluczowych kroków, które mają zapewnić powodzenie i zminimalizować zachorowalność/śmiertelność związaną z tą procedurą. Po pierwsze, należy ostrożnie obchodzić się z tkanką jelitową i uważać, aby zapobiec uszkodzeniom trakcyjnym podczas obracania wnętrzności w celu odsłonięcia okrężnicy. Nadmierne napięcie w jelitach lub krezka mogą uszkodzić jelito lub naczynia krwionośne i spowodować martwicę jelit z dala od miejsca zespolenia. Dodatkowo do obsługi jelit nie należy używać ostrych kleszczy lub kleszczy z .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Myszy C57BL6/J | Jackson Labs | #00664 | |
| Podkładki chłonne Fisherbrand, 20 "x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterylne pole, 18" x 24" | Busse Hospital Jednorazówki | 696 | Wytnij prostokątny otwór |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterylna bawełniana gazika, 4 "x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Maść okulistyczna Puralube wazelina, tubka 1/8 uncji | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Krem do depilacji Nair | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorfina 0,3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| Strzykawka insulinowa o pojemności 1 cm3, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Szampon Chloraprep | Medline | APL82287 | |
| Waciki nasączone alkoholem Webcol Rękawice | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI | Mö lnlycke Mikrokleszcze | do ALA42675Z | |
| z zębami | Roboz | RS-5150 | |
| Cienkie nożyczki - ostre | Narzędzia do nauki | 14060-09 | |
| Kleszcze proste ząbkowane | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Sterownik igłowy Castro-Viejo | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0,9% Nawadnianie | chlorkiem soduBaxter | BHL2F7121 | Ciepły do 37 & stopni; C przed użyciem |
| 10 ml strzykawka | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl wchłanialny szew pleciony, 18", PS-2 igła | Henry Schein | ||
| Niebieski szew monofilamentowy 24" Igła BV-1 | Henry Schein | 8305H | Zwykle jest dostarczany z podwójnym uzbrojeniem. Przetnij szew w połowie drogi, aby wygenerować dwa użyteczne szwy. |
| Nożyczki Cole-Parmer, klasy standardowej, proste, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterylna galaretka smarująca | Medline | MDS032273H |
Bibliografia
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J. Reoperation for anastomotic failure. Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomo....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
