Ten protokół opisuje powtarzalne podejście do chirurgii nerwu twarzowego w modelu szczurzym, w tym opisy różnych indukowalnych wzorców urazów.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Chirurgia nerwu twarzowego w modelu szczurzym w celu zbadania hamowania i regeneracji aksonów
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Ten protokół opisuje spójne i powtarzalne metody badania regeneracji i hamowania aksonów w modelu uszkodzenia nerwu twarzowego szczura. Nerw twarzowy może być manipulowany na całej swojej długości, od odcinka wewnątrzczaszkowego do przebiegu pozaskroniowego. Istnieją trzy podstawowe typy uszkodzeń nerwów stosowane w eksperymentalnym badaniu właściwości regeneracyjnych: zmiażdżenie nerwu, przecięcie i przerwa nerwowa. Zakres możliwych interwencji jest ogromny, w tym chirurgiczna manipulacja nerwem, dostarczanie neuroaktywnych odczynników lub komórek oraz manipulacje narządów centralnych lub końcowych. Zalety tego modelu do badania regeneracji nerwów obejmują prostotę, powtarzalność, spójność międzygatunkową, wiarygodne wskaźniki przeżywalności szczura oraz zwiększony rozmiar anatomiczny w porównaniu z modelami mysimi. Jego ograniczenia obejmują bardziej ograniczoną manipulację genetyczną w porównaniu z modelem mysim i doskonałą zdolność regeneracyjną szczura, tak że naukowiec zajmujący się nerwem twarzowym musi dokładnie ocenić punkty czasowe do powrotu do zdrowia i czy przełożyć wyniki na wyższe badania na zwierzętach i ludziach. Szczurzy model uszkodzenia nerwu twarzowego pozwala na określenie parametrów funkcjonalnych, elektrofizjologicznych i histomorfometrycznych w celu interpretacji i porównania regeneracji nerwów. W ten sposób ma ogromny potencjał w zakresie pogłębiania zrozumienia i leczenia niszczycielskich konsekwencji uszkodzenia nerwu twarzowego u ludzi.
Wprowadzenie
Uszkodzenie nerwu czaszkowego w okolicy głowy i szyi może być wtórne do etiologii wrodzonej, zakaźnej, idiopatycznej, jatrogennej, urazowej, neurologicznej, onkologicznej lub ogólnoustrojowej1. Często dotknięty jest nerw czaszkowy VII, czyli nerw twarzowy. Częstość występowania dysfunkcji nerwu twarzowego może być znacząca, ponieważ dotyka ona od 20 do 30 na 100 000 osób rocznie2. Głównymi gałęziami motorycznymi nerwu twarzowego są gałęzie skroniowe, jarzmowe, policzkowe, brzeżne żuchwy i szyjki macicy; W zależności od gałęzi, której dotyczy problem, konsekwencje mogą obejmować niewydolność jamy ustnej lub ślinotok, such....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie interwencje zostały przeprowadzone w ścisłej zgodności z wytycznymi National Institutes of Health (NIH). Protokół eksperymentalny został zatwierdzony przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (IACUC) Uniwersytetu Michigan przed wdrożeniem. Wykorzystano dziesięciotygodniowe dorosłe samice szczurów Sprague-Dawley.
1. Przed dniem operacyjnym
- Przed dniem operacji należy zapewnić odpowiedni zapas wysterylizowanych narzędzi chirurgicznych, leków przeciwbólowych, leków znieczulających i tlenu. Pełna lista znajduje się w Tabeli Materiałów.
2. Przygotowanie....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Po wstępnym zabiegu chirurgicznym stosuje się dwa główne rodzaje miar efektów: pomiary seryjne u żywego zwierzęcia oraz pomiary wymagające uśmiercenia zwierzęcia. Przykładami pomiarów seryjnych są testy elektrofizjologiczne, takie jak pomiar złożonego potencjału czynnościowego mięśnia30, ocena ruchomości mięśni twarzy za pomocą laserowej analizy lub wideografii9, a nawet powtarzalne obrazowanie in vivo odrastania nerwu twarzowego u fluoresce.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Model uszkodzenia nerwu twarzowego szczura okazał się najbardziej wszechstronnym systemem oceny czynników neurotroficznych ze względu na jego dostępność chirurgiczną, wzór rozgałęzień i znaczenie fizjologiczne 27,29,33,34,35,36. Połączenie demonstracji wideo i zastosowania danych o zwierzętach transgenicznych otwiera nowe moż.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
S.A.A. jest finansowany przez Amerykańską Akademię Chirurgii Plastycznej i Rekonstrukcyjnej Lesliego Bernsteina Grants Program.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 1,8% izofluran | VetOne | 13985-030-40 | |
| 11-0 mikroszwy nylonowe | AROSuture | TK-117038 | |
| 4-0 szew monokrylowy | VWR | 75982-084 | |
| Buprenorfina SR | ZooPharm | MIF 900-006 | |
| Karprofen | Sigma-Aldrich | MFCD00079028 | |
| Chlorheksydyna | VWR | ||
| Kleszczyki jubilerskie | VWR | 21909-458 | |
| Zwijacz Micro Weitlaner | VWR | 82030-146 | |
| Mikronożyczki | VWR | 100492-348 | |
| Mini nożyczki do tenotomii | VWR | 89023-522 | |
| Ostrze skalpela numer 15 | VWR | 102097-834 | |
| Mikroskop operacyjny | Leica | ||
| Żel pod oczy Petrolatum | Pharmaderm | B002LUWBEK | |
| Sterylna woda | VWR | 89125-834 | |
| Klej tkankowy | Vetbond, 3M | NC9259532 | |
| Podkładka pod przewód wodny | Aqua Relief System | ARS2000B | |
| Bupiwakaina | Stosuj jako miejscowy środek przeciwbólowy |
Bibliografia
- Chan, J. Y. K., Byrne, P. J. Management of facial paralysis in the 21st century. Facial Plastic Surgery. 27 (4), 346-357 (2011).
- Razfar, A., Lee, M. K., Massry, G. G., Azizzadeh, B. Facial Paralysis Reconstruction. Otolaryngologic Clinics of North America. 49 (2), 459....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
