Artykuł metodologiczny

Metoda uzyskiwania wzorca oddychania u starzejących się myszy za pomocą nieskrępowanej pletyzmografii barometrycznej

DOI:

10.3791/59393

⸱

28 kwietnia 2020

 ,  ,  ,  , 
1Department of Biological Sciences, Le Moyne College, 2Department of Mathematics, Statistics and Computer Science, Le Moyne College

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nieskrępowana pletyzmografia barometryczna służy do ilościowego określenia wzorca oddychania u obudzonych myszy. Pokazujemy, że 15-sekundowe segmenty w ustandaryzowanym protokole wyświetlają podobne wartości do wydłużonego czasu cichego oddychania. Metodologia ta pozwala również na ilościowe określenie bezdechu i przyspieszonych oddechów w ciągu pierwszej godziny w komorze.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nieskrępowana pletyzmografia barometryczna (UBP) to metoda ilościowego określania wzorca oddychania u myszy, gdzie częstotliwość oddychania, objętość oddechowa i minutowa wentylacja są rutynowo raportowane. Ponadto można zbierać informacje na temat wyjścia neuronalnego oddychania, w tym istnienia centralnych bezdechów i wzmocnionych oddechów. Ważną kwestią dla UBP jest uzyskanie segmentu oddechowego o minimalnym wpływie zachowań lękowych lub aktywnych, aby wyjaśnić reakcję na wyzwania związane z oddychaniem. W tym miejscu przedstawiamy protokół, który pozwala na uzyskanie krótkich, cichych linii bazowych u starszych myszy, porównywalnych z oczekiwaniem na dłuższe napady cichego oddychania. Stosowanie krótszych odcinków czasowych jest cenne, ponieważ niektóre szczepy myszy mogą być coraz bardziej pobudliwe lub niespokojne, a dłuższe okresy spokojnego oddychania mogą nie zostać osiągnięte w rozsądnych ramach czasowych. Umieściliśmy 22-miesięczne myszy w komorze UBP i porównaliśmy cztery 15-sekundowe segmenty cichego oddychania między minutami 60-120 z dłuższym 10-minutowym okresem spokojnego oddychania, który trwał 2-3 godziny. Uzyskaliśmy również liczbę centralnych bezdechów i wzmocnionych oddechów przed segmentami spokojnego oddychania, po 30-minutowym okresie zapoznawczym. Pokazujemy, że 10 minut spokojnego oddychania jest porównywalne ze znacznie krótszym czasem trwania wynoszącym 15 sekund. Dodatkowo, czas prowadzący do tych 15-sekundowych segmentów spokojnego oddychania może być wykorzystany do zebrania danych dotyczących bezdechów pochodzenia centralnego. Protokół ten pozwala badaczom zbierać dane dotyczące wzorca oddychania w określonym czasie i umożliwia ciche pomiary wyjściowe dla myszy, które mogą wykazywać zwiększoną ilość pobudliwego zachowania. Sama metodologia UBP zapewnia użyteczny i nieinwazyjny sposób zbierania danych o wzorcu oddychania i pozwala na testowanie myszy w kilku punktach czasowych.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

UBP to powszechna technika oceny wzorców oddychania1,2,3,4. W tej metodzie myszy umieszcza się w zamkniętej komorze, w której różnice ciśnień między komorą główną (w której trzymane jest zwierzę) a komorą referencyjną są filtrowane przez pneumotachograf w celu uzyskania wartości. Uzyskana w ten sposób konfiguracja UBP jest nieinwazyjna i nieskrępowana oraz pozwala na ocenę środków oddechowych bez konieczności znieczulenia lub operacji. Ponadto technika ta jest odpowiednia dla badań wymagających wielu pomiarów na tej samej myszy w czasie. Zmienne, takie jak częstotliwość oddychania, objętość oddechowa i wentylacja minutowa, można określić ilościowo za pomocą tej metody, podczas pojedynczej próby lub w kilku próbach. UBP dla całego ciała zapewnia również pomiary przepływów szczytowych i czasu trwania cyklu oddechowego. Razem parametry te określają ilościowo wzorzec oddychania. Zarejestrowane ślady oddechowe umożliwiają również przeglądanie danych i zliczanie liczby centralnych bezdechów wyświetlanych w danym okresie czasu. Liczba ta może być używana wraz z analizą objętości oddechowej i czasu wdechu, aby ocenić inne zmiany we wzorcu oddychania.

Chociaż istnieje kilka nieinwazyjnych technik pletyzmografii do bezpośredniej oceny parametrów fizjologicznych płuc, UBP całego ciała pozwala na badanie przesiewowe funkcji oddechowych przy minimalnym niepotrzebnym obciążeniu myszy. Pletyzmografia typu head-out, która wykorzystuje pomiary przepływu śródwydechowego w połowie oddechu i jest również nieinwazyjna, opiera się na powściągliwości, podobnie jak wiele innych rodzajów pletyzmografii (np. Pletyzmografia dwukomorowa). Podczas gdy metody te były stosowane w modelach gryzoni do pomiaru reakcji dróg oddechowych5, użycie obroży na szyję lub małych rurek ograniczających może zająć myszom (w porównaniu z innymi gatunkami) więcej czasu, aby przyzwyczaić się i przywrócić oddech do poziomu spoczynkowego.

Uzyskanie optymalnego segmentu oddychania powietrzem jest ważnym czynnikiem przy porównaniach linii bazowych. Coraz częstsze stosowanie dostępnych na rynku systemów pletyzmograficznych umożliwia zbieranie danych dotyczących wzorca oddychania w wielu laboratoriach. Co ważne, wzorzec oddychania jest zmienny przez cały okres zbierania, szczególnie u myszy. Mając to na uwadze, konieczna jest standaryzacja analizy wyjściowej jako sposób na zapewnienie, że poziom wyszkolenia eksperymentatorów nie zakłóca wyników. Istnieje wiele sposobów zbierania segmentu oddychania powietrzem, który służy jako jeden z obszarów różnic między projektami eksperymentalnymi. Jednym z przykładów jest uśrednienie danych z ostatnich 10–30 minut zgodnie z wcześniej zdefiniowanym zestawem czasu w chamber1, podczas gdy inna metoda polega na czekaniu, aż mysz będzie widocznie spokojna przez 5–10 minut6. Osiągnięcie tego ostatniego może zająć 2-3 godziny, a w niektórych przypadkach może być konieczne przerwanie próby, jeśli mysz nie jest spokojna wystarczająco długo. Ten problem jest szczególnie ważny w przypadku szczepów myszy, u których obserwowane zachowania są bardziej niespokojne i pobudliwe7. Myszy te mogą potrzebować więcej czasu, aby przystosować się do środowiska komory i zachować spokój tylko przez krótkie okresy czasu. Ograniczenie czasu poświęconego na zbieranie danych z linii bazowej standaryzuje czas pracy w komorze dla każdej myszy.

Kluczowe jest, aby eksperymentatorzy uzyskali odpowiedni punkt odniesienia, który obejmuje wartości zachowania spoczynkowego u myszy, ale także występuje w odpowiednim czasie. W związku z tym celem niniejszego raportu jest przedstawienie opisu metod stosowanych do uzyskania krótkich, cichych wartości wyjściowych parametrów oddychania u myszy. Co więcej, donosimy, że bezdechy i wzmocnione oddechy można określić ilościowo w ciągu pierwszej godziny w komorze.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Le Moyne College Institutional Animal Care and Use Committee. Wykorzystanie zwierząt było zgodne z zasadami opisanymi w Przewodniku po opiece i użytkowaniu zwierząt laboratoryjnych8.

UWAGA: (Krytyczne) Przed eksperymentami uzyskaj wszystkie niezbędne zgody i szkolenia wymagane do stosowania na zwierzętach. Ważne jest, aby eksperymentatorzy byli zaznajomieni z zachowaniami i poziomami aktywności myszy, w tym z oznakami snu, niepokoju i/lub artefaktami ruchowymi w porównaniu z normalnym wąchaniem i oddychaniem.

1. Komora pletyzmografii barometrycznej całego ciała

  1. Zapoznaj się z odpowiednimi instrukcjami obsługi komory pletyzmografii barometrycznej, w tym złączami, O-ringami itp., i utwórz standardowy plik protokołu do definiowania analizatorów (np. metabolicznych) i parametrów specyficznych dla oprogramowania.
  2. Upewnij się, że wszystkie węże i rurki są podłączone do komory. Podłączyć rurkę przepływu gazu (wlotową) i rurę próżniową (wypływającą) bezpośrednio do komory pletyzmografii barometrycznej.
    nuta: Dopływ musi być dołączony do otworu z zaznaczonym przepływem diagonalnym.
  3. Podłączyć zbiorniki gazu CO2, O2 i N2 do mieszalnika gazów. Przed eksperymentowaniem upewnij się, że wszystkie zbiorniki gazu są w pozycji otwartej.

2. Kalibracja komory pletyzmografu barometrycznego

  1. Skalibruj wysoki i niski przepływ gazu, wybierając 7700-Amplifier Setup (Konfiguracja wzmacniacza 7700) na karcie Hardware (Sprzęt) w oprogramowaniu do pletyzmografii barometrycznej.
  2. Ustawić podciśnienie (wypływ z komory) odpowiednie dla projektu eksperymentalnego i analizatorów gazów (~0,1 l/min).
    nuta: Szybkość wypływu musi pozostać taka sama przez cały czas kalibracji i eksperymentu w celu uzyskania dokładnych zapisów metabolicznych.
  3. Ustaw niski przepływ powietrza, wyjmując rurkę przepływową z komory i wyłączając podciśnienie.
  4. Zapisz przepływ zerowy, wprowadzając 0 do komórki Low Unit dla odpowiedniej komory. Kliknij dwukrotnie komórkę Low Cal, zmień czas na 3 s i naciśnij Zmierz.
  5. Ponownie podłączyć rurkę przepływową i pozwolić, aby gaz (20,93%O2, zrównoważony N2) przepłynął przez komorę pletyzmografii barometrycznej z mieszalnika gazów.
  6. Przelicz dopływ z litrów/minut na mililitry/sekundę. Kliknij komórkę Wysoka jednostka dla odpowiedniej komory i wprowadź wartość w mililitrach/sekundę. Kliknij dwukrotnie pozycję High Cal, zmień czas na 3 s, a następnie kliknij przycisk Measure (Zmierz).
  7. Pozostaw otwartą kartę 7700-Amplifier Setup (Ustawienia wzmacniacza 7700), aby skalibrować analizatory metaboliczne z oprogramowaniem pletyzmografii barometrycznej.

3. Kalibracja analizatora metabolicznego

  1. W programie mieszalnika gazów ustawić mieszalnik gazów tak, aby uwalniał strumień gazu zawierającego 20,93%O2 i 79,07% N2.
  2. W analizatorach metabolicznych ustaw poziom kalibracji O2 na 20,93%, a CO2 na 0%. Przekręć pokrętło z powrotem na Sample po wprowadzeniu odpowiednich wartości.
  3. Ustaw wysoką wartość procentową O2. Kliknij zakładkę ABCD-4 w oprogramowaniu pletyzmografii barometrycznej, a następnie wprowadź 20.93 w polu Wysoka jednostka linii C2. W obszarze Wysoka kalibracja zmień czas na 3 s i naciśnij Zmierz.
  4. Ustaw niską wartość procentową CO2 . Wprowadź wartość 0 w polu Mała kalibracja w wierszu C3, a następnie zmień czas na 3 s i kliknij opcję Zmierz w obszarze Mała kalibracja.
  5. W programie mieszalnika gazów zmień wartość O2 na 10%, a wartość CO2 na 5%. Poczekaj kilka minut, aż przepływ gazu dostosuje się do tych wartości. W analizatorach metabolicznych przekręć pokrętła regulacyjne, aby skalibrować CO2 równy 5%. Pamiętaj, aby przekręcić pokrętło z powrotem na Sample po skalibrowaniu wartości.
  6. Ustaw wysoką wartość procentową CO2 . Upewnij się, że odczyty analizatora są stabilne przed wprowadzeniem odpowiednich wartości do O2 i CO2 w oprogramowaniu pletyzmografii barometrycznej. Kliknij opcję Wysoka jednostka w obszarze C3 i wprowadź wartość 5. Zmień High Cal na 3 s i naciśnij Measure.
  7. Ustaw dolną wartość procentową O2. Kliknij opcję Low Unit (Niska jednostka) w opcji C2 (C2) i wprowadź wartość 10. Kliknij opcję Low Cal, wprowadź 3 s, a następnie kliknij pozycję Measure (Miara).
  8. Zmień wartości gazu w mieszalniku gazów z powrotem na 20,93%O2 i 79,07% N2. Poczekaj kilka minut, aż komora dostosuje się do tych wartości. Powtórz kroki 3.1\u20123.7, jeśli analizatory metaboliczne nie odczytują automatycznie 20.93% O2 i 0% CO2 , aby zapewnić prawidłową kalibrację. Rutynowo potwierdzaj prawidłową kalibrację za pomocą certyfikowanych zbiorników gazu.
  9. Ponownie sprawdź przepływomierze podłączone do komory pletyzmografii barometrycznej. Dostosuj przepływ powietrza do i z komory do szybkości odpowiedniej dla eksperymentu (zwykle 0,1–0,3 l/min).
  10. Po zastosowaniu wszystkich ustawień w oprogramowaniu pletyzmografii barometrycznej kliknij przycisk OK, aby rozpocząć nagrywanie.

4. Nieskrępowana pletyzmografia barometryczna

  1. Zapisz wagę myszy i początkową temperaturę ciała. Odczekaj 10 minut przed umieszczeniem myszy w komorze, aby zebrać dane oO2 i CO2 z pustej komory. Pracuj w cichym miejscu znanym myszom, aby hałas i zapachy nie przeszkadzały w zbieraniu danych. Unikaj wszelkich możliwych zakłóceń, w tym otwierania i zamykania drzwi lub personelu wchodzącego/wychodzącego z pomieszczenia gromadzenia danych.
    nuta: W tym konkretnym protokole wykorzystano 22-miesięcznego samca myszy C57BL/6J.
  2. W ciągu pierwszej godziny dokumentuj zachowania myszy i rób szczegółowe notatki, w tym konkretne wartości przepływu do/z komory.
  3. Po 60 minutach habituacji w komorze obserwuj segmenty spokojnego oddychania przez następne 60 minut. Wymień wszystkie segmenty trwające co najmniej 15 s długości bez wąchania i pielęgnacji. Wykonuj pomiary temperatury ciała co 10 minut podczas korzystania z urządzenia do implantacji.
  4. Pod koniec eksperymentu wyjmij mysz z komory i umieść ją z powrotem w klatce. Cały sprzęt należy dokładnie wyczyścić i wytrzeć. Jeśli pozostaną kropelki wody, użyj sprężonego powietrza, aby je usunąć.

5. Analiza wzorca oddychania i metabolizmu

  1. Otwórz plik przeglądu pletyzmografii barometrycznej i zapoznaj się z zapisanymi notatkami dla interesującego Cię zwierzęcia.
  2. Otwórz panel metaboliczny w oprogramowaniu i zmierz średnią z pierwszych 10 minutO2 i CO2 , kiedy komora była pusta. Zapisz te wartości jako FiO2 i FiCO2.
  3. Wyświetl panel Przepływ w oprogramowaniu pletyzmografii barometrycznej. Kliknij prawym przyciskiem myszy pozycję Analizuj atrybuty i ustaw odpowiednie parametry. Na karcie Meta 1 wprowadź FiO2 i FiCO2 z kroku 5.2, a także przepływ do komory w Meta 2, aby obliczyć VO2 i VCO2.
  4. Aby zapoznać się z analizą wzorca oddychania, potwierdź czasy dla 15 sekund cichego oddychania, korzystając z notatek na temat zachowania zwierząt, a także śledzenia na panelu przepływu. Wprowadź czasy dla 15-sekundowych interwałów cichego oddychania w obszarze Otwórz okno dialogowe parsera danych na karcie Parser danych. Kliknij opcję Tryb widoku parsera, aby wyświetlić tylko określone interesujące Cię segmenty 15 sekund.
  5. Kliknij Zapisz przeanalizowane dane pochodne. Otwórz plik danych w arkuszu kalkulacyjnym, aby uzyskać dane z kosza.

6. Analiza bezdechów i przyspieszonych oddechów

  1. W otwartym pliku recenzji wyjdź z trybu widoku analizatora składni. Przejdź do opcji Graph Setup (Ustawienia wykresu) w obszarze Setup (Ustawienia > Ustawienia P3) i wybierz opcję Page View (Widok strony) w obszarze Type (Typ). Wybierz wartość 5 dla liczby okienek. Wprowadź -2 w polu oznaczonym Niski i 2 w polu oznaczonym Wysoki, aby uzyskać pomiary przepływu w mililitrach/sekundę. Zastosuj zmiany.
  2. Przewiń do znaku 30 minut na panelu śledzenia przepływu.
  3. Policz bezdechy i wzmocnione oddechy przez 30-60 minut po umieszczeniu myszy w komorze. Określ ilościowo okresy wstrzymanego oddychania trwające dłużej lub równe 0,5 s, wskazujące na bezdech. Wzmocnione oddechy są wskazywane przez gwałtowny wzrost śladu oddechowego powyżej 1,25 ml / s, po którym następuje gwałtowny spadek poniżej -0,75 ml / s.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wyniki UBP jako ocena wzorca oddychania u 16 starszych (22-miesięcznych) myszy wykonanych przy normalnym gazie powietrznym (20,93%O2 przy zrównoważonym N2) są raportowane. Analiza obejmowała najpierw porównanie dłuższego, 10-minutowego segmentu cichego oddychania (którego uzyskanie zajęło ponad 2 godziny) ze średnią z czterech krótkich 15-sekundowych segmentów (określonych ilościowo w ciągu minut 60-120). Reprezentatywne śledzenie przepływu cichego oddychania, w którym oddychanie jest zgodne z braki...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół dostarcza informacji na temat linii bazowej cichego oddychania u myszy, a także gromadzi dane na temat centralnych bezdechów i rozszerzonych oddechów. Reprezentatywne wyniki pokazują, że 10-minutowa cicha linia bazowa ma podobny wzorzec oddychania w porównaniu ze średnią z czterech 15-sekundowych napadów dla kohorty starych myszy. Co ważne, 15-sekundowe walki nie różnią się statystycznie, ani też te grupy nie różnią się od siebie różnicami za pomocą testu Levene'a. Dane te pokazują, że nawet jeden krótki atak je...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy chcieliby podziękować Angeli Le, Sarah Ruby i Marisie Mickey za ich pracę na rzecz utrzymania kolonii zwierząt. Praca ta została sfinansowana przez 1R15 HD076379 (L.R.D.), 3R15 HD076379 (L.R.D. wspierające CNR) oraz McDevitt Undergraduate Research Fellowship in Natural Sciences (BEE).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Analizator dwutlenku węglaAEI TechnologiesCD-3A 
Czujnik dwutlenku węgla AEITechnologies  Komputer P-61B
musi być zgodny z wymaganiami Ponemah
ZbiornikiHaun100% tlenu, 100% dwutlenku węgla, 100% azotu - dopuszczone do kontaktu z żywnością lub wstępnie zmieszane zbiorniki do normalnych wyzwań związanych z powietrzem w pomieszczeniu i gazem
Analizator tlenuAEI TechnologiesS-3A
Czujnik tlenuAEI Technologies 
SMCTUS 0604 Y-20
Ponemah SoftwareDSI
Mała komora na gryzonieTermometr Buxco / DSI
(LifeChip System)Destron-FearingKażdy rodzaj termometru do pomiaru dokładnej temperatury ciała jest odpowiedni, ale użycie wszczepialnych chipów pozwala na minimalne zakłócenia dla zwierzęcia podczas pobierania kilka pomiarów temperatury ciała podczas przebywania zwierzęcia w komorze UBP 
PrzetwornikiValidyneDP45wymagają jednego na komorę 
System Pletyzmografii Całego Ciała Data Science International (DSI)Obejmuje ACQ-7700, sondy ciśnienia/temperatury itp. 
Koraliki Drierite PermaPure LLC DM-AR Kontrola przepływu AEI Technologies R-1 przepływomierz próżniowy TSI 4100 potrzebuje jednego na komorę i jednego do próżni Mieszalnik gazów MCQ Instruments GB-103 Gaz Rurki poliuretanowe N-22M

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. DeRuisseau, L. R., et al. Neural deficits contribute to respiratory insufficiency in Pompe disease. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (23), 9419-9424 (2009).
  2. Ogier, M., et al. Brain-derived neurotrophic factor expression and respiratory function improve after ampakine treatment in a mouse model of Rett syndrome. Journal of Neuroscience. 27 (40), 10912-10917 (2007).
  3. Ohshima, Y., et al. Hypoxic ventilatory response during light and dark periods and the involvement of histamine H1 receptor in mice. American Journal of Physiology-Regulatory Integrative and Comparative Physiology. 293 (3), 1350-1356 (2007).
  4. van Schaik, S. M., Enhorning, G., Vargas, I., Welliver, R. C. Respiratory syncytial virus affects pulmonary function in BALB/c mice. Journal of Infectious Diseases. 177 (2), 269-276 (1998).
  5. Glaab, T., Taube, C., Braun, A., Mitzner, W. Invasive and noninvasive methods for studying pulmonary function in mice. Respiratory Research. 8, (2007).
  6. Loeven, A. M., Receno, C. N., Cunningham, C. M., DeRuisseau, L. R. Arterial Blood Sampling in Male CD-1 and C57BL/6J Mice with 1% Isoflurane is Similar to Awake Mice. Journal of Applied Physiology. , Bethesda, MD. (2018).
  7. Receno, C. N., Eassa, B. E., Reilly, D. P., Cunningham, C., DeRuisseau, L. R. The pattern of breathing in young wild type and Ts65Dn mice during the dark and light cycle. FASEB Journal. 32 (1), (2018).
  8. Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Inistitute fpr Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , National Academies Press. Washington, DC. (2011).
  9. Receno, C. N., Glausen, T. G., DeRuisseau, L. R. Saline as a vehicle control does not alter ventilation in male CD-1 mice. Physiological Reports. 6 (10), (2018).
  10. Shanksy, R. M. Sex differences in behavioral strategies: Avoiding interpretational pitfalls. Current Opinion in Neurobiology. 49, 95-98 (2018).
  11. Kopp, C. Locomotor activity rhythm in inbred strains of mice: implications for behavioural studies. Behavioural Brain Research. 125 (1-2), 93-96 (2001).
  12. Teske, J. A., Perez-Leighton, C. E., Billington, C. J., Kotz, C. M. Methodological considerations for measuring spontaneous physical activity in rodents. American Journal of Physiology-Regulatory Integrative and Comparative Physiology. 306 (10), 714-721 (2014).
  13. Kabir, M. M., et al. Respiratory pattern in awake rats: Effects of motor activity and of alerting stimuli. Physiology & Behavior. 101 (1), 22-31 (2010).
  14. Terada, J., et al. Ventilatory long-term facilitation in mice can be observed during both sleep and wake periods and depends on orexin. Journal of Applied Physiology. 104 (2), 499-507 (2008).
  15. Friedman, L., et al. Ventilatory behavior during sleep among A/J and C57BL/6J mouse strains. Journal of Applied Physiology. 97 (5), 1787-1795 (2004).
  16. Drorbaugh, J. E., Fenn, W. O. A barometric method for measuring ventilation in newborn infants. Pediatrics. 16 (1), 81-87 (1955).
  17. Seifert, E. L., Mortola, J. P. The circadian pattern of breathing in conscious adult rats. Respiration Physiology. 129 (3), 297-305 (2002).
  18. Receno, C. N., Roffo, K. E., Mickey, M. C., DeRuisseau, K. C., DeRuisseau, L. R. Quiet breathing in hindlimb casted mice. Respiratory Physiology & Neurobiology. , 10(2018).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Unrestrained Barometric PlethysmographyPattern Of BreathingSenescent MiceBreathing FrequencyTidal VolumeMinute VentilationCentral ApneasAugmented BreathsGas ChallengesNoninvasive Technique

Powiązane artykuły