Angiografia fluorescencyjna do oceny perfuzji tętniaka i drożności tętnicy rodzicielskiej w modelach tętniaków szczurów i królików

Summary

Przedstawiamy protokół do efektywnej oceny perfuzji tętniaka tętniaka i drożności naczyń tętniaka ściany bocznej u szczurów i królików, przy użyciu fluorescencji opartej na fluoresceinie wideoangiografii (FVA). Przy dodatniej wartości predykcyjnej wynoszącej 92,6% jest to prosta, ale bardzo skuteczna i ekonomiczna metoda, która nie wymaga specjalnego sprzętu.

Abstract

Leczenie tętniaka mózgu skupia się na osiągnięciu całkowitej okluzji, jak również na zachowaniu przepływu krwi w tętnicy macierzystej. Fluoresceina sodowa i zieleń indocyjaninowa są stosowane w celu umożliwienia obserwacji odpowiednio przepływu krwi i stanu perfuzji naczyń. Celem tego badania jest zastosowanie FVA do weryfikacji przepływu krwi w czasie rzeczywistym, stanu perfuzji naczyń i niedrożności tętniaków po indukcji tętniaków ściany bocznej u królików i szczurów, a także walidacja procedury u tych gatunków.

Dwadzieścia tętniaków ściany bocznej powstało u 10 królików poprzez zszycie pozbawionej komórek torebki naczynia tętniczego na tętnicy szyjnej królika-dawcy. Ponadto u 48 szczurów stworzono 48 mikrochirurgicznych tętniaków ściany bocznej. Podczas obserwacji po miesiącu od stworzenia, kompleks tętnica/tętniak macierzysty został wypreparowany, a FVA wykonano przy użyciu dożylnego wstrzyknięcia fluoresceiny (10%, 1 ml) przez cewnikowanie żyły usznej u królików i cewnikowanie żyły udowej u szczurów. Następnie pobrano tętniaki, a drożność oceniono makroskopowo.

Makroskopowo, 14 z 16 tętniaków u królików nie wykazało pozostałości perfuzji tętnicy rodzicielskiej z całkowicie zamkniętymi światłami, jednak 11 (79%) zostało wykrytych przez FVA. Cztery tętniaki zostały wykluczone z powodu problemów technicznych. U szczurów resztkową perfuzję tętniaka obserwowano makroskopowo w 25 z 48 przypadków. Spośród 23 osób, u których nie stwierdzono makroskopowych objawów perfuzji, FVA potwierdziło występowanie 22 tętniaków (96%). Nie stwierdzono żadnych działań niepożądanych związanych ze stosowaniem FVA. Fluoresceina jest łatwa w aplikacji i nie jest potrzebny żaden specjalny sprzęt. Jest to bezpieczna i niezwykle skuteczna metoda oceny integralności tętnicy rodzicielskiej i drożności tętniaka/perfuzji resztkowej tętniaka w warunkach eksperymentalnych z udziałem królików i szczurów. FVA stosująca fluoresceinę jako środek kontrastowy wydaje się być skuteczna w kontrolowaniu drożności tętniaków i leżącego poniżej naczynia, a nawet może być dostosowana do operacji pomostowania.

Introduction

Dowód całkowitego zniszczenia tętniaka i integralności tętnicy rodzicielskiej ma ogromne znaczenie w operacji tętniaka. Istnieje kilka opcji potwierdzenia drożności tętnicy macierzystej i niedrożności tętniaka, takich jak ultrasonografia dopplerowska, konwencjonalna angiografia mózgu (DSA), angiografia tomografii komputerowej (CTA) lub angiografia rezonansu magnetycznego (MRA)^1,2. Są to jednak drogie i czasochłonne metody, które często nie są dostępne w warunkach laboratoryjnych. Ponadto mogą mieć istotne skutki uboczne, takie jak narażenie na promieniowanie lub konieczność dodatkowego uspokojenia zwierząt doś....

Protocol

Gryzonie były trzymane w ośrodku opieki nad zwierzętami, a eksperymenty zostały sprawdzone i zatwierdzone przez Komitet ds. Dobrostanu Zwierząt na Uniwersytecie w Bernie, Szwajcaria (BE 108/16) i (BE65/16). Wszystkie zwierzęta były utrzymywane na standardowej diecie laboratoryjnej ze swobodnym dostępem do pożywienia i wody. Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone z dokładnym uwzględnieniem zasady 3R (wymiana, redukcja i udoskonalenie). Uwzględniono 10 samic królików rasy białej nowozelandzkiej i 48 samców szczura rasy Wistar. Wytyczne ARRIVE były ściśle przestrzegane⁸.

UWAGA: Dwadzieścia tętniakó....

Results

Tętno i ciśnienie krwi były monitorowane podczas operacji. Średnie tętno wynosiło 193/min u królików i 196/min u szczurów. Masa ciała królików wahała się w granicach 3,05-4,18 kg, a szczurów 335-690 g.

Udało nam się przeprowadzić FVA u ośmiu z dziesięciu królików (Rysunek 1). Cztery badania tętniaków u dwóch królików nie zostały zarejestrowane kamerą z powodu problemów technicznych. Nie zgłoszono żadnych trudności technicznych związanych z FVA u szczurów. Jednak FVA nie moż.......

Discussion

FVA jest obiecującą i nieskomplikowaną metodą badania naczyń krwionośnych u gryzoni i może być wykonywana za pomocą urządzeń komercyjnych i sprzętu z półki. FVA może być wdrożona podczas każdej operacji, w której potrzebna jest śródoperacyjna ocena integralności naczyń, ponieważ naczynia wymagają najpierw odpowiedniego rozwarstwienia.

Autorzy preferowali wstrzyknięcie dożylne od wstrzyknięcia tętniczego ze względu na mniejsze ryzyko niezamierzonych zdarzeń, takich jak infekcja, niedokrwienie i.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Dla królików
Folia
Golarka
taśma
Niebieski filtr	Thorlabs MF475-35
Ciepła płyta
	Aparat Sony NEX-5R
Cewnik	22G Vasofix Safety
Disynfictant
sodowa	Fluoresceina Faure 10%
Glas płytka
Zielony filtr	Thorlabs MF539-43
Wkładka
Pompa infuzyjna	Perfusor Secura
Chlorowodorek			wszelkie produkty generyczne
Igła	25G
Tlen
Roztwór
Sterylne prześcieradła
Narzędzia			mikro kleszcze, mikro nożyczki, nożyczki chirurgiczne
Mikroskop chirurgiczny	OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Niemcy
Strzykawka 2 ml, 5 ml, 50 ml
Taśma
Trójdrożny kran
Latarka lekka
Xylazin			wszelkie produkty generyczne
Dla szczurów< / silny>
Folia
Golarka
taśma
Niebieski filtr	Thorlabs MF475-35
Ciepła płyta
Aparat	Sony NEX-5R
Disinfictant
Fluoresceina sodowa	Fluoresceina Faure 10%
Zielony filtr	Thorlabs MF539-43
Wkładka
Izofluran
Chlorowodorek			wszelkie produkty generyczne
Chlorowodorek			wszelkie produkty
Igła	25G
Płytka
tlenowa
Roztwór
Sterylne arkusze
Narzędzia			mikro kleszcze, mikro nożyczki, nożyczki chirurgiczne
Mikroskop chirurgiczny	OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Niemcy
Strzykawka 2 ml, 5 ml
Taśma Latarka