Method Article

Wykorzystanie aktywności neuronów do wyzwalania bodźców w pętli zamkniętej w eksperymentach neurofizjologicznych

DOI:

10.3791/59812

November 12th, 2019

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół pokazuje, jak używać systemu elektrofizjologicznego do stymulacji w pętli zamkniętej wywołanej wzorcami aktywności neuronalnej. Dostępny jest również przykładowy kod Matlab, który można łatwo modyfikować dla różnych urządzeń stymulacyjnych.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Systemy neurofizjologiczne o zamkniętej pętli wykorzystują wzorce aktywności neuronalnej do wyzwalania bodźców, które z kolei wpływają na aktywność mózgu. Takie systemy zamkniętej pętli są już stosowane w zastosowaniach klinicznych i są ważnymi narzędziami do podstawowych badań mózgu. Szczególnie interesującym niedawnym osiągnięciem jest integracja podejść opartych na pętli zamkniętej z optogenetyką, dzięki czemu określone wzorce aktywności neuronalnej mogą wyzwalać stymulację optyczną wybranych grup neuronów. Jednak stworzenie systemu elektrofizjologicznego do eksperymentów w pętli zamkniętej może być trudne. W tym przypadku dostarczany jest gotowy do zastosowania kod Matlab do wyzwalania bodźców na podstawie aktywności jednego lub wielu neuronów. Ten przykładowy kod można łatwo modyfikować w zależności od indywidualnych potrzeb. Na przykład pokazuje, jak wyzwalać bodźce dźwiękowe i jak je zmienić, aby wyzwolić urządzenie zewnętrzne podłączone do portu szeregowego komputera. Prezentowany protokół przeznaczony jest do współpracy z popularnym systemem rejestracji neuronalnej do badań na zwierzętach (Neuralynx). Implementacja stymulacji w pętli zamkniętej została zademonstrowana u obudzonego szczura.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Celem tego protokołu jest pokazanie, jak zastosować stymulację w pętli zamkniętej w eksperymentach neurofizjologicznych. Typowa konfiguracja eksperymentów w pętli zamkniętej w neurobiologii polega na wyzwalaniu bodźców na podstawie internetowego odczytu aktywności neuronalnej. To z kolei powoduje modyfikacje w aktywności mózgu, zamykając w ten sposób pętlę sprzężenia zwrotnego1,2. Takie eksperymenty w pętli zamkniętej zapewniają wiele korzyści w porównaniu ze standardowymi konfiguracjami w pętli otwartej, zwłaszcza w połączeniu z optogenetyką, która pozwala naukowcom celować w określony podzbiór neuronów. Na p....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie opisane tutaj procedury zostały przeprowadzone zgodnie z Protokołem Badań na Zwierzętach zatwierdzonym przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu w Lethbridge.

1. Chirurgia

UWAGA: Procedury chirurgiczne używane do wszczepiania sond do zapisów neurofizjologicznych zostały przedstawione w innych publikacjach24,25,26. Dokładne szczegóły operacji stymulacji w pętli zamkniętej zależą od rodzaju użytych sond rejestrujących i obszarów mózgu, na które jest cel. Jednak w większości przypadków typowa operacja bę....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Szczury norweskie Fisher-Brown, urodzone i wychowane na miejscu, były przyzwyczajone do kontaktu z nimi przez dwa tygodnie przed eksperymentem. Dysk nagrywający został wszczepiony chirurgicznie, podobnie jak metody opisane wcześniej28,29,30,31,32,33,34. Sygnały neuronalne zarejestrowano z cz.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Opisany tutaj protokół pokazuje, jak wykorzystać standardowy system rejestracji neurofizjologicznej do przeprowadzenia stymulacji w pętli zamkniętej. Protokół ten pozwala neuronaukowcom z ograniczoną wiedzą w dziedzinie informatyki na szybkie wdrażanie różnorodnych eksperymentów w pętli zamkniętej przy niewielkich kosztach. Takie eksperymenty są często konieczne do zbadania interakcji przyczynowych w mózgu.

Po przygotowaniu zwierzęcia i zainstalowaniu oprogramowania (kroki 1 i 2), eksperyment .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają żadnego konfliktu interesów związanego z tą pracą.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez granty NSERC Discovery dla AL i AG.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
BaytrilBayer, Mississauga, CADIN 02169428antybiotyk; 50 mg/ml
Cheetah 6.4NeuraLynx, Tucson, AZ6.4.0.betaInterfejsy programowe do akwizycji danych 
Cyfrowy Lynx 4SXNeuraLynx, Tucson, AZSprzęt nagrywający4SX
Nadajnik sceny czołowejTBSIB10-3163-GKprzesyła sygnał neuronowy do odbiornika
IsofluraneFresenius Kabi, Toronto, CADIN 02237518znieczulenie wziewne
Jet Denture Powder & LiqudLang Dental, Wheeling, US1230akryl dentystyczny
Lacri-LubeAllergan, Markham, CADIN 00210889maść do oczu
Lido-2Rafter 8, CalgaryDIN 00654639znieczulenia miejscowego; 20 mg/ml
MatlabMathworksR2018boprogramowanie do przetwarzania sygnałów i wyzwalania zdarzeń zewnętrznych
MetacamBoehringer, Ingelheim, DEDIN 02240463przeciwbólowy; 5 mg/ml
NetcomNeuraLynxv1Interfejs programowania aplikacji (API), który komunikuje się z sondą Cheetah
SiliconeWszczepione urządzenieCambridge NeurotechASSY-156-DBC2
SpikeSort 3D NeuraLynx, Tucson, AZNarzędzia do klasyfikacji przebiegów skokowychSS3D
do komórek Bezprzewodowy odbiornik radiowyTBSI911-1062-00przesyła sygnał neuronowy do Digital Lynx

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Grosenick, L., Marshel, J. H., Deisseroth, K. Closed-loop and activity-guided optogenetic control. Neuron. 86 (1), 106-139 (2015).
  2. Armstrong, C., Krook-Magnuson, E., Oijala, M., Soltesz, I. Closed-loop optogenetic intervention in mice. Nature Protocols. 8 (8), 1475-1493 (2013).
  3. Siegle....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Closed Loop StimulationNeuron Spiking ActivityMATLAB CodeElectrophysiological RecordingSpikeSort 3DCheetah SoftwareOnline Event TriggeringAwake Rat ExperimentOptogenetics IntegrationExternal Device Triggering

Related Articles