$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Gdy aktywność elektryczna mózgu jest rejestrowana ze skóry głowy, jest obserwowana jako ciągłe i regularne zmiany napięcia w czasie. Ta aktywność elektryczna nazywa się elektroencefalogramem (EEG) i została po raz pierwszy opisana przez Hansa Bergera pod koniec lat dwudziestych ubiegłego wieku1. Późniejsze badania naukowe opisywały EEG jako złożony szereg czasowy, w którym można zaobserwować różne rytmiczne lub powtarzające się wzorce2,3,4. Obecnie EEG jest zwykle podzielone na pięć dobrze ustalonych pasm częstotliwości: delta, theta, alfa, beta i gamma, które są związane z różnymi procesami sensorycznymi i poznawczymi.
Przez lata badanie oscylacji mózgu za pomocą EEG ograniczało się albo do analizy spektrum w trwającej aktywności, albo do zmian w aktywności oscylacyjnej wywołanych przez nieokresowe zdarzenia sensoryczne. W ostatnich dziesięcioleciach wdrożono różne metodologie modulacji trwających oscylacji EEG i badania wpływu takich modulacji na procesy percepcyjne i poznawcze, w tym prezentacji rytmicznej stymulacji sensorycznej w celu wywołania porywania neuronów. Termin porywanie neuronów odnosi się do synchronizacji aktywności neuronalnej z okresowymi właściwościami bodźców sensorycznych. Proces ten prowadzi do generowania potencjałów wywołanych w stanie ustalonym (tj. oscylacji EEG związanych z okresowymi właściwościami bodźców sterujących). Potencjały wywołane w stanie ustalonym są najczęściej wywoływane przez stymulację wzrokową, słuchową i wibrodotykową, przy użyciu bodźców przejściowych prezentowanych ze stałą szybkością lub ciągłej stymulacji modulowanej amplitudą przy interesującej częstotliwości. Podczas gdy somatosensoryczne potencjały wywołane w stanie ustalonym (SSSEP) są rejestrowane w odpowiedzi na powtarzającą się stymulację dotykową5,6, wizualne potencjały wywołane w stanie ustalonym (SSVEPs) są zazwyczaj wywoływane przez okresową prezentację migotania luminancji, obrazów i twarzy7,8. Słuchowe reakcje w stanie ustalonym (ASSR) są zwykle generowane przez ciągi przejściowych bodźców akustycznych lub przez ciągłą prezentację tonów modulowanych amplitudą9,10.
Ekstrakcja potencjałów wywołanych w stanie ustalonym z mierzonego EEG zasadniczo polega na uśrednianiu następnie nabytych epok EEG związanych z bodźcem11. Ze względu na okresowość odpowiedzi można je analizować zarówno w dziedzinie czasu, jak i częstotliwości. Po transformacji w dziedzinie częstotliwości, odpowiedź sensoryczna jest obserwowana jako piki amplitudy przy szybkości prezentacji lub częstotliwości modulacji bodźców zewnętrznych i odpowiadających im harmonicznych. Procedury te (uśrednianie w dziedzinie czasu i późniejsza transformacja w dziedzinie częstotliwości) były niezbędne do opracowania testu słuchu opartego na wykrywaniu metod ASSR w celach klinicznych12,13,14,15,16.
Ponadto, klasyczne uśrednianie epok EEG w dziedzinie czasu było niezwykle przydatne do analizy procesów fizjologicznych, takich jak powstawanie i wymieranie SSVEP17,18. Prezentując kolejne ciągi migotania świateł i uśredniając kolejne epoki w obrębie nagrania, Wacker i in.19 zaobserwowali, że wskaźnik blokowania fazy SSVEP gwałtownie wzrósł podczas pierwszych 400 ms stymulacji i utrzymywał się później na wysokim poziomie. Poinformowali również, że silne porywanie wzrokowe zostało ustalone między 700-1 100 ms po nadejściu bodźca. Pewien stopień porywania pozostał skuteczny po przesunięciu ciągu stymulacji, co trwało około trzech okresów odpowiedzi oscylacyjnej17,19. Zachowania te zostały zinterpretowane jako efekt włączania/wyłączania obserwowanych oscylacji, który jest konsekwencją nieliniowego przetwarzania informacji w ludzkim systemie wzrokowym17. Alternatywnie, wiadomo, że w pewnych warunkach eksperymentalnych stymulacja migotania może wywoływać reakcje włączania na początku i reakcje wyłączenia na końcu pociągów stymulacji zamiast porywania neuronów18.
Głównym założeniem do uśredniania kolejno nabytych epok EEG jest to, że sygnał EEG stanowi liniową kombinację odpowiedzi sensorycznej i szumu tła20. Ponadto zakłada się, że amplituda, częstotliwość i faza odpowiedzi oscylacyjnej są stacjonarne, podczas gdy szum tła jest uważany za aktywność losową. Jednak w przypadkach, w których założenie to nie jest spełnione, amplituda odpowiedzi obliczona po kilku epokach niekoniecznie odpowiada chwilowej amplitudzie potencjału wywołanego.
Ostatnio doniesiono, że ASSR generowany w pniu mózgu szczurów dostosowuje się do ciągłej prezentacji tonów modulowanych amplitudą (tj. amplituda odpowiedzi maleje wykładniczo w czasie)21,22. Adaptacja została zinterpretowana jako mechanizm neuronalny, który odzwierciedla utratę nowości monotonnie powtarzającego się bodźca sensorycznego, zwiększając wrażliwość na odpowiednie fluktuacje w środowisku akustycznym23,24. W ścieżce słuchowej adaptacja może poprawić rozumienie mowy w hałaśliwym otoczeniu. Co więcej, proces ten może być częścią istniejących mechanizmów monitorowania słuchowego sprzężenia zwrotnego własnego głosu w celu kontrolowania produkcji mowy.
Analizując ewolucję czasową ASSR 40 Hz u ludzi, Van Eeckhoutte et al.25 zaobserwowali znaczący, ale niewielki spadek amplitudy odpowiedzi w czasie (około -0,0002 μV/s na podstawie analizy grupowej, zakładając liniowy spadek w czasie). W związku z tym autorzy ci doszli do wniosku, że ASSR 40 Hz u ludzi nie dostosowuje się do stymulacji. U ludzi zaobserwowano zachowania niestacjonarne podczas analizy stabilności SSVEP26. Autorzy ci zaobserwowali, że amplituda częstotliwości podstawowej i druga harmoniczna SSVEP były stacjonarne odpowiednio tylko u 30% i 66,7% badanych. Fazy obu składowych częstotliwości SSVEP, choć względnie stabilne w czasie, wykazywały niewielkie dryfty26.
Dlatego, mimo że klasyczne uśrednianie w dziedzinie czasu kolejnych nabytych epok pozwala na badanie stacjonarnych właściwości porywania neuronów, ta metodologia musi zostać zrewidowana, gdy długoterminowa dynamika porywania jest przedmiotem badań, lub gdy uśrednianie krótkoterminowej dynamiki jest zniekształcone przez występowanie długoterminowej dynamiki. Aby scharakteryzować niestacjonarne zachowania reakcji w stanie ustalonym, odpowiedź wywołana obliczona w danym oknie czasowym nie powinna być zagrożona przez odpowiedzi obliczone w poprzednich segmentach EEG. Innymi słowy, potencjał wywołany powinien być wydobyty z szumu tła bez uśredniania epok w dziedzinie czasu z poprzedzającymi je segmentami EEG.
W tym badaniu przedstawiono metodę oceny dynamiki porywania neuronów. Reakcje w stanie ustalonym są powtarzalnie rejestrowane w odpowiedzi na tę samą stymulację, gdzie kolejne nagrania są przeplatane interwałem spoczynkowym trzykrotnie dłuższym niż długość przebiegu eksperymentalnego. Biorąc pod uwagę, że jeśli ewolucja w czasie reakcji fizjologicznej jest taka sama w różnych niezależnych seriach eksperymentalnych (niezależnych nagraniach), nagrania są uśredniane kolumnowo. Innymi słowy, epoki odpowiadające tej samej lokalizacji w różnych nagraniach są uśredniane, bez uśredniania epok w obrębie nagrania. W związku z tym amplituda odpowiedzi obliczona w dowolnym interwale stymulacji będzie odpowiadać chwilowej amplitudzie wywołanego potencjału. Reakcje sensoryczne mogą być analizowane w dziedzinie czasu lub przekształcane w dziedzinę częstotliwości, w zależności od celu eksperymentu. W każdym razie amplitudy można wykreślić jako funkcję czasu, aby przeanalizować ewolucję w czasie odpowiedzi w stanie ustalonym. Generowanie i ekstynkcja potencjałów wywołanych w stanie ustalonym może być oceniona poprzez ograniczenie analizy do pierwszej i ostatniej epoki nagrań.
Dynamika porywania neuronów może być analizowana za pomocą innych podejść, takich jak wąskopasmowe filtrowanie pojedynczych prób pomiarów wokół interesującej nas częstotliwości i obliczanie obwiedni sygnału mocy za pomocą filtrowania dolnoprzepustowego25 i transformacja Hilberta27. W porównaniu z tymi metodologiami, kolumnowe uśrednianie epok umożliwia obliczanie parametrów stanu ustalonego na podstawie sygnałów o wyższym stosunku sygnału do szumu (SNR). Ostatnio filtrowanie Kalmana okazało się obiecującą techniką szacowania amplitud ASSR 40 Hz28,29,30. Implementacja filtrowania Kalmana może poprawić wykrywanie reakcji w stanie ustalonym bliżej progu elektrofizjologicznego i skrócić czas testu słuchu29. Co więcej, nie trzeba zakładać odpowiedzi stacjonarnych, gdy do oszacowania amplitudy ASSR stosuje się podejście filtrujące Kalmana30. Niemniej jednak tylko w jednym badaniu przeanalizowano ewolucję ASSR w czasie przy użyciu Kalman filtering25. Wniosek z badania jest taki, że amplituda ASSR 40 Hz jest stabilna w okresie stymulacji. Dlatego filtrowanie Kalmana musi być testowane w warunkach, w których ASRR nie jest nieruchomy.
Chociaż czasochłonna, metoda uśredniania kolumn nie wymaga modelu i nie wymaga wartości inicjalizacji i/lub apriorycznych definicji zachowania szumu. Ponadto, ponieważ nie obejmuje czasów zbieżności, uśrednianie kolumnowe może zapewnić bardziej wiarygodną reprezentację początku porywania neuronów. W związku z tym wyniki uzyskane metodą uśredniania kolumnowego można uznać za podstawową prawdę do analizy dynamiki porywania neuronów za pomocą filtrowania Kalmana.
Ten opis protokołu jest oparty na przykładzie SSVEP. Należy jednak zauważyć, że przedstawiona tutaj metoda jest niezależna od modalności, dzięki czemu może być również wykorzystana do analizy ewolucji w czasie SSSEP i ASSR.