Artykuł metodologiczny

Chirurgia stereotaktyczna do implantacji układów mikroelektrod w marmozecie zwyczajnej (Callithrix jacchus)

9.5K wyświetleń

DOI:

10.3791/60240

29 września 2019

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ta praca przedstawia protokół do przeprowadzenia stereotaktycznego, neurochirurgicznego wszczepienia matryc mikroelektrod u marmozety pospolitej. Metoda ta umożliwia zapisy elektrofizjologiczne u swobodnie zachowujących się zwierząt, ale może być łatwo dostosowana do każdej innej podobnej interwencji neurochirurgicznej u tego gatunku (np. kaniula do podawania leków lub elektrody do stymulacji mózgu).

Streszczenie

Marmozety (Callithrix jacchus) to małe naczelne, które zyskują popularność w badaniach biomedycznych i przedklinicznych, w tym w neuronaukach. Filogetycznie zwierzęta te są znacznie bliższe ludziom niż gryzonie. Wykazują również złożone zachowania, w tym szeroki zakres wokalizacji i interakcji społecznych. W tym artykule opisano skuteczną stereotaktyczną procedurę neurochirurgiczną polegającą na wszczepieniu matryc elektrod rejestrujących w marmozecie pospolitej. Protokół ten wyszczególnia również przed- i pooperacyjne etapy opieki nad zwierzętami, które są wymagane do pomyślnego przeprowadzenia takiej operacji. Wreszcie, protokół ten pokazuje przykład lokalnego potencjału pola i zapisów aktywności skoków u swobodnie zachowującej się marmozety 1 tydzień po zabiegu chirurgicznym. Ogólnie rzecz biorąc, metoda ta daje możliwość zbadania funkcji mózgu u rozbudzonych i swobodnie zachowujących się marmozet. Ten sam protokół może być z łatwością stosowany przez badaczy pracujących z innymi małymi naczelnymi. Ponadto można go łatwo zmodyfikować, aby umożliwić inne badania wymagające implantów, takie jak elektrody stymulujące, mikroiniekcje, implantacja optrodów lub kaniul prowadzących lub ablacja dyskretnych obszarów tkanki.

Wprowadzenie

Marmozety zwyczajne (Callithrix jacchus) zyskują uznanie jako ważny organizm modelowy w wielu dziedzinach badań, w tym w neurobiologii. Te naczelne z Nowego Świata stanowią ważny uzupełniający model zwierzęcy zarówno dla gryzoni, jak i innych naczelnych innych niż ludzie (NHP), takich jak makak rezus. Podobnie jak gryzonie, zwierzęta te są małe, łatwe w obsłudze i stosunkowo ekonomiczne w utrzymaniu i hodowli1,2,3,4, w porównaniu z większymi NHP. Co więcej, zwierzęta te mają skłonność do bliźniaków i wysoką płodność w porównaniu z i....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Eksperymenty na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z Przewodnikiem National Institutes of Health dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych oraz zatwierdzone przez Komitet Etyki Instytutu Santos Dumont (protokół 02/2015AAS).

1. Przygotowanie do operacji

  1. Przymocuj każdy układ elektrod do uchwytu elektrod kompatybilnego z ramą stereotaktyczną, która ma być używana.
  2. Podłącz jeden uchwyt elektrody do stereotaktycznego mikromanipulatora i ustaw jeden mikroprzewód na współrzędne międzyuszne. W razie potrzeby powtórz to dla dodatkowych matryc elektrod i uchwytów.
    UWAGA: Współrzędne międzyuszne dow....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Celem niniejszej pracy było opisanie stereotaksycznej procedury neurochirurgicznej implantacji macierzy mikroelektrod do rejestracji elektrofizjologicznej u posumaty marmoseta. Typowy zabieg (od indukcji znieczulenia do wybudzenia) trwa około 5−7 h, w zależności od liczby implantowanych macierzy. W tym przypadku dwie macierze zostały implantowane symetrycznie, po jednej w każdej półkuli mózgu. Każda macierz zawierała 32 mikrodruty ze stali nierdzewnej rozmieszczone w siedmiu wiązkach skierowanych do kilku struktur obwodu.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Praca ta zawiera szczegółowy opis procedur związanych z implantacją matryc rejestrujących mikroelektrody w mózgu marmozety. Ten sam protokół może być z łatwością stosowany podczas wszczepiania elektrod, zarówno domowych, jak i dostępnych na rynku, innym małym naczelnym. Dodatkowo można go łatwo dostosować do innych celów eksperymentalnych, które wymagają precyzyjnego celowania w struktury mózgu. Dlatego ten protokół jest celowo niejasny w odniesieniu do współrzędnych stereotaktycznych i technik wiercenia czaszki, poniewa.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Autorzy chcieliby podziękować Bernardo Luizowi za pomoc techniczną przy filmowaniu i montażu. Prace te były wspierane przez Instytut Santosa Dumonta (ISD), brazylijskie Ministerstwo Edukacji (MEC) oraz Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Equipments
683 Wentylator dla małych zwierzątHarvard Apparatus, Inc.55-0000
Zespół anestezjologicznyBRASMEDCOLIBRI
Maszynki do strzyżenia fryzjeraMundialHC-SERIES
NorgenB07-201-M1KG
Homeotermiczna podkładka grzewcza i monitorHarvard Apparatus, Inc.50-7212
Marmozetka Stereotaktyczna ramaNarishige Scientific Instrument LabSR-6C-HT
Monitor pacjenta i pulsoksymetrBionet Co., LtdBM3
Stereotaktyczny mikromanipulatorNarishige Scientific Instrument LabSM-15R
Mikroskop chirurgicznyOptoSM PLUS IBZ
Instruments
Allis kleszczyki do tkanekSklar36-2275
Alm Retraktor, zaokrąglony koniec, zęby 4x4RhosseRH11078
Kątowe kleszcze McPhersonaOftalmologiabr11301A
Zakrzywione nożyczki chirurgiczneHarvard Apparatus, Inc.72-8422
Zakrzywione kleszczyki do tkanekSklar47-1186
Delikatne kleszcze preparacyjneWPIWP5015
Wiertło dentystyczneMicrodontISO.806.314.001.524.010
Kleszczyki do tkanek EssringSklar19-2460
FG 1/4 Wiertło dentystyczneMicrodontISO.700.314.001.006.005
Uchwyt igły HalseyWPI15926-G
Halstead Kleszcze do komarówWPI503724-12
Kleszcze hemostatyczne, prosteSklar17-1260
Kleszcze do żużuteriiSklar66-7436
McPherson-Vannas Mikroskop optatalmiczny, 3 mm punktowyArgos InstrumentalARGOS-4004
Pereosteal RaspatoryGolgran38-1
Rękojeść skalpalowaHarvard Apparatus, Inc.72-8354
WkrętakiEurotoolSCR-830.00
Sodering IronHikari21K006
Nożyczki chirurgiczneHarvard Apparatus, Inc.72-8400
Kleszcze zębateWPI501266-G
Jednorazowe/Jednorazowe
1 ml sterylna strzykawka z igłą 26 GDescarpack7898283812785
pole operacyjne 130 cm x 140 cm, wstępnie sterylizowaneProtDesc7898467276344
Igła 24G, wstępnie sterylizowanaDescarpack7898283812846
pole operacyjne 50 cm x 50 cm, wstępnie sterylizowaneEsterili-med110100236
z bawełnianą końcówką, wstępnie sterylizowaneJiangsu Suyun Medical Materials Co. LTD23007
Bawełniane końcówki QutipsHigie Topp7898095296063
Elektroda domowejroboty
Rurka dotchawicza bez mankietu, średnica wewnętrzna 2,0 mm, średnica zewnętrzna 2,9 mmSolidor7898913077201
Drut miedziany cynowany, średnica
M1,4x3 ze stali nierdzewnejUSMICROSCREWM14-30M-SS-P
Taśma medycznaMissner7896544910102
Nylonowe szwy chirurgiczneShalonN540CTI25
Ostrze skalpalowe, wstępnie sterylizowaneAdvantiVe1037
lutKesterSN63PB37
Sterylna sól fizjologiczna 0,9%Isofarma7898361700041
Sterylne rękawice chirurgiczneMaxitex7898949349051
Sterylny fartuch chirurgicznyProtDesc7898467281208
Gaza chirurgiczna, 15 cm x 26 cm wstępnie sterylizowanyHé ika7898488470315
GelfoamPfizer
Leki/Chemikalia
0,25 mg/ml AtropineIsofarma
wsprayu Produtos Quí micos Farmacê uticos Sp. z o.o.
2,5% Enrofloxacino antybiotyk weterynaryjnyChemitec0137-02
Dexametasona Weterynaryjny przeciwzapalnyMSDR06177091A-00-15
Nadtlenek wodoruFarmax7896902211537
IzoflouranBioChimico7897406113068
Jet Roztwórdo polimeryzacji akrylowejArtigos Odontoló gicos Clá ssico
Jet Auto Polimeryzacja akrylowaArtigos Odontoló gicos Clá ssico
Ketamina 10%Syntec
Lidokaina i Fenylefryna 1,8 ml znieczulenie miejscoweSS Biały7892525041049
roztwór powidonowo-jodowyFarmax7896902234093
Riohex 2% mydło chirurgiczneRioquí mica7897780209418
Farba srebrna SPISupplies05002-AB
Chlorek tramadolu 50 mg/mlUniã o Quí mica7896006245452
Żel odświeżający (kwas poliakrylowy)Allergan
Wiertło dentystyczne sondy 0,15 mm 10% lidokaina 7896676405644

Bibliografia

  1. Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
  2. Harris, R. A., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Implantacja macierzy mikroelektrodrejestracja elektrofizjologicznakonstrukcja nak adki na g owprocedura kraniotomiiusuwanie opony twardejaplikacja akrylu dentystycznegoopieka pooperacyjna

Powiązane artykuły