Prezentowany tutaj jest protokół do ustalenia ostrego zawału mostu w modelu szczurzym za pomocą stymulacji elektrycznej za pomocą pojedynczego impulsu.
Artykuł metodologiczny
Prezentowany tutaj jest protokół do ustalenia ostrego zawału mostu w modelu szczurzym za pomocą stymulacji elektrycznej za pomocą pojedynczego impulsu.
Zawał Mostu jest najczęstszym podtypem udaru w krążeniu tylnym, podczas gdy brakuje modelu gryzonia naśladującego zawał Pontine. Poniżej znajduje się protokół pomyślnego ustalenia szczurzego modelu ostrego zawału mostu. Wykorzystuje się szczury o wadze około 250 g, a sondę z izolowaną osłoną wstrzykuje się do mostu za pomocą aparatu stereotaktycznego. Zmiana chorobowa jest wytwarzana przez stymulację elektryczną pojedynczym impulsem. Do oceny deficytów neurologicznych stosuje się wynik Longa, wynik Bertersona i test równowagi belki. Dodatkowo test somatosensoryczny usuwania kleju służy do określenia funkcji sensomotorycznych, a test ułożenia kończyn służy do oceny propriocepcji. Skany MRI są następnie wykorzystywane do oceny zawału in vivo, a barwienie TTC służy do potwierdzenia zawału in vitro. Tutaj identyfikuje się udany zawał, który znajduje się w przednio-bocznej podstawie mostu rostralnego. Podsumowując, opisano nową metodę mającą na celu ustalenie modelu szczura z ostrym zawałem mostu.
Od 1980 roku, model niedrożności tętnicy środkowej mózgu (MCAO) indukowany przez włókna silikonowe jest szeroko stosowany w podstawowych badaniach nad udarem1. Zastosowano również inne metody (tj. zszycie jednej gałęzi klasy MCA2 i fotochemicznie indukowany zawał ogniskowy). Modele te zostały nazwane modelami udaru opartymi na MCA i w znacznym stopniu przyczyniły się do badań nad mechanizmami patofizjologicznymi leżącymi u podstaw udaru i potencjalnymi terapiami. Chociaż istnieją ograniczenia tych eksperymentalnych modeli3,4, metody te były używane wiele labs5,6. Modele udaru oparte na MCA reprezentują udar w krążeniu przednim; Jednak w niewielu raportach zbadano modele naśladujące udar w krążeniu tylnym7.
Istnieją znaczące różnice między etiologią, mechanizmami, objawami klinicznymi i rokowaniem między udarami krążenia przedniego i tylnego8. W związku z tym wyniki uzyskane z modeli udaru krążenia przedniego nie mogą być stosowane do udaru krążenia tylnego. Na przykład okno czasowe reperfuzji dla krążenia przedniego zostało wydłużone do 6 godzin, przy czym niewielka część badań została wydłużona do 24 godzin na podstawie wyników obrazowania9. Jednak okno czasowe dla krążenia tylnego może być dłuższe niż 24 godziny, zgodnie z wcześniejszymi raportami10 i naszymi własnymi doświadczeniami klinicznymi. To wydłużone okno czasowe reperfuzji musi być dalej badane i potwierdzone w modelach eksperymentalnych.
Jeśli chodzi o udary krążenia tylnego, najczęstszym podtypem jest zawał mostu, stanowiący 7% wszystkich przypadków udaru niedokrwiennego11,12. Zgodnie z topografią zawału, zawały mostu dzielą się na izolowane i nieizolowane zawały mostu13. Izolowane zawały mostu dzielą się na trzy typy w oparciu o podstawowe mechanizmy: choroba dużej tętnicy (LAD), choroba gałęzi tętnicy podstawnej (BABD) i choroba tętnicy małej (SAD). Wiedza na temat mechanizmów, objawów i rokowania zawału mostu została uzyskana z badań klinicznych przypadków14. Jednak model gryzonia naśladujący zawał mostu został mniej zbadany.
W poprzednich badaniach badano rozlane uszkodzenie nakrywki pnia mózgu obejmujące most7. Jedna grupa próbowała stworzyć model zawału mostu poprzez podwiązanie tętnicy podstawnej (BA)15. Inna grupa użyła nylonowego szwu monofilamentowego 10-0 do selektywnego podwiązywania czterech punktów bliższego BA selektywnie16. Model ten naśladuje LAD, ale większość zawałów mostu wynika z BABD i SAD. Ponadto selektywne podwiązanie BA jest skomplikowaną operacją i ma wysoką śmiertelność.
Dostępny jest tutaj szczegółowy protokół łatwego do wykonania, łatwego do odtworzenia i udanego szczurzego modelu ostrego zawału mostu za pomocą stymulacji elektrycznej.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół został sprawdzony i zatwierdzony przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Zwierząt Drugiego Szpitala Stowarzyszonego Uniwersytetu Medycznego w Kantonie, instytucji akredytowanej przez AAALACi. Szczury zostały dostarczone przez Centrum Zwierząt Południowego Uniwersytetu Medycznego.
1. Zwierzę
2. Ustalenie zawału w moście
3. Testy behawioralne
4. Potwierdzenie zawału za pomocą rezonansu magnetycznego
5. Potwierdzenie zawału przez barwienie TTC
6. Statystyki
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Sześć zwierząt zostało poddanych opisanemu powyżej protokołowi chirurgicznemu. Grupa kontrolna, jak pokazano na Rysunek 4, składała się z sześciu szczurów. Wycinki mózgu pokazane w Rysunek 4 pochodziły od jednego szczura z każdej grupy.
Rezonans magnetyczny wykazał, że zawał znajdował się w podstawie mostu (Rysunek 4A). Ponieważ sonda została wstrzyknięta 2 mm na lewo od linii środkowej, zawał był zlokalizowany z bo...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
W niniejszym badaniu przedstawiono protokół generowania modelu szczura z ostrym zawałem mostu. Model ten może być wykorzystany do badań nad rokowaniem i rehabilitacją (w tym przewlekłym bólem poudarowym) u pacjentów z udarem mostu.
Istnieje kilka mocnych stron tej metody. Po pierwsze, dostarcza szczurzego modelu ostrego zawału mostu do przyszłych badań. Jak wspomniano powyżej, zawał mostu jest częstym podtypem udaru, któremu poświęca się mniej uwagi. Poważnym mankamentem badań nad udarem mózgu...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Brak konfliktu interesów.
To badanie było wspierane finansowo przez Narodową Fundację Nauki Chin (81471181 i 81870933) dla Y. Jiang oraz Chińską Narodową Fundację Naukową (nr 81601011), Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Jiangsu (No. BK20160345) J. Zhu oraz w ramach Programu Naukowego Miejskiej Komisji Zdrowia w Kantonie (20191A011083) do Z. Qiu.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 4-0 ssanie | Szanghaj Jinzhong | Instrumenty chirurgiczne | |
| Taśma klejąca | Szanghaj Jinzhong | Instrumenty chirurgiczne | |
| System znieczulenia zwierząt | RWD | Nosić maskę podczas korzystania z systemu | |
| Cement kostny | Szanghaj Jinzhong | Instrument chirurgiczny | |
| Utwardzony zacisk | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Ogólne nożyczki do tkanek | Szanghaj Jinzhong | Instrument chirurgiczny | |
| IndoPhors | Guoyao z Chin | Sterylizacja | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| Urządzenie do tworzenia zmian | Szanghaj Yuyan | Tworzenie zmian | |
| System MRI | Bruker Biospin | Potwierdzenie zawału in vivo | |
| Uchwyt igły | Shanghai Jinzhong | Instrument chirurgiczny | |
| Penicilin | Guoyao z Chin | Sonda zapobiegająca infekcjom | |
| Anke | Potrzebujesz modyfikacji | ||
| Q-tips | Shanghai Jinzhong | Instrument chirurgiczny | |
| Nożyczki do strzyżenia | Shanghai Jinzhong | Instrument | |
| chirurgicznyAparat stereotaktyczny | Igła do szwów RWD | ||
| Shanghai Jinzhong | Instrument chirurgiczny | ||
| Przechowywanie tkanek Forcepts | Shanghai Jinzhong | Instrument chirurgiczny | |
| TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | Do potwierdzenia zawału in vitro |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie