Główną zaletą tego modelu infuzji SMA dla szczurów jest jego niezłomność i trwałość przez co najmniej 24 godziny u zdecydowanej większości zwierząt. Wlew antykoagulantu może wydłużyć ten odstęp czasu. Model umożliwia niezawodną selektywną infuzję leków w okolicy krezki, ukierunkowaną na jelito cienkie i bliższą część jelita grubego.
Kluczowe znaczenie dla powodzenia tej techniki ma kilka kroków. Aby uzyskać kaniulację w bardzo małym naczyniu, ważne jest, aby wybrać szczury o wadze co najmniej 400 g; Płeć i wiek nie mają znaczenia. Ważne jest również, aby wybrać odpowiednie narzędzia chirurgiczne i rodzaj kaniuli. W tym przypadku mniejsza kaniula poliuretanowa (0,4 mm średnicy zewnętrznej, średnica wewnętrzna 0,25 mm) jest wprowadzana na 1 cm do większej kaniuli (średnica zewnętrzna 0,93 mm, średnica wewnętrzna 0,5 mm), aby uzyskać funkcjonalny i użyteczny cewnik, który umożliwia zarówno połączenia z małą tętnicą, jak i z większym systemem infuzyjnym.
Pierwszym krytycznym krokiem chirurgicznym jest oczyszczenie SMA i gałęzi zidentyfikowanej do kaniulacji z otaczającej tkanki tłuszczowej (krok 3.5). Pomaga to uniknąć wprowadzenia kaniuli między tkankę a tętnicę, co jest częstym błędem. Jednak ten etap czyszczenia jest trudny, ponieważ mała gałąź SMA jest delikatna i łatwa do uszkodzenia. Jeśli gałąź jest uszkodzona, można zatamować krwawienie za pomocą podwiązania i wybrać inną bliższą gałąź, aby nie marnować zwierzęcia.
Aby zapobiec tworzeniu się pęcherzyków powietrza w kaniuli i uniknąć zatoru gazowego, kaniulę należy napełnić solą fizjologiczną aż do końcówki przed włożeniem do gałęzi. Aby zamocować kaniulę na miejscu, nałożenie nici chirurgicznej (jedwabiu 4-0) musi odbywać się między punktem wprowadzenia do tętnicy a końcówką kaniuli, bezpośrednio na górze naczynia wokół cewnika. Węzeł chirurgiczny musi być wystarczająco ciasny, aby zamocować kaniulę, ale nie za ciasny, aby ją zatkać (krok 3.12).
Najlepszym sposobem na zapewnienie prawidłowej kaniulacji jest obserwowanie przepływu krwi z powrotem przez kaniulę (krok 3.10). Jeśli chodzi o rozwiązywanie problemów, jeśli tak się nie stanie, może to być spowodowane następującymi przyczynami:
kaniula nie została prawidłowo wprowadzona do tętnicy;
kaniula znajduje się wewnątrz tętnicy, ale jest niedrożna przez węzeł w nieprawidłowej pozycji;
kaniula znajduje się wewnątrz tętnicy, a pęcherzyk powietrza w kaniuli spowalnia przepływ;
W kaniuli utworzył się skrzep.
Nieprawidłowe wprowadzenie może być spowodowane ułożeniem kaniuli w przestrzeni między tętnicą a tkanką tłuszczową. W takim przypadku konieczne jest ponowne włożenie. Gdy węzeł nad naczyniem zatka kaniulę, można ją bardzo ostrożnie rozwiązać i przerobić. Małe pęcherzyki powietrza w cewniku na ogół nie zagrażają kaniulacji i nie zagrażają życiu; Ale jeśli w kaniuli znajduje się duży pęcherzyk powietrza, konieczne jest cofnięcie kaniuli za pomocą strzykawki lub ponowne umieszczenie cewnika w innej gałęzi. Zwykle można uniknąć tworzenia się skrzepów i zachować patent na kaniulę, podając 0,2 ml bolusów soli fizjologicznej raz na jakiś czas podczas operacji.
Ograniczeniem tego badania jest niedoszacowanie drożności kaniuli w dłuższym czasie infuzji: w tym przypadku przeprowadzono 24-godzinną infuzję, podczas gdy szczury były trzymane w klatce metabolicznej. Aby uzyskać dłuższy okres infuzji, przydatne może być zastosowanie terapii przeciwzakrzepowej, która nie jest stosowana w tym badaniu. Jednak podczas infuzji szczur musi być trzymany w klatce metabolicznej, ponieważ jest to jedyna osoba, która wspomaga układ infuzyjny. To miejsce jest niewygodne dla zwierzęcia, które może być zestresowane, jeśli jest leczone przez dłuższy czas. Ponadto do infuzji używano tylko roztworu soli fizjologicznej, więc nie ma wyników dotyczących podawania konkretnych leków. Jednym z ograniczeń metody jest niemożność podania w gałęziach tętniczych (jeśli występują) powyżej tych, które są używane do cewnika. Z tego powodu zaleca się kaniulację najbliższej gałęzi od aorty.
W literaturze nie jest dostępny żaden inny model długotrwałej infuzji SMA u szczurów u nieskrępowanych zwierząt. W porównaniu z modelem kaniulacji IMA opisanym wiele lat temu4, opisana tutaj technika ma szerszy cel eksperymentalny, ponieważ umożliwia infuzję leku w obszarze perfuzji SMA i nie jest ograniczona do jelita grubego. Niedawno, po raz pierwszy, selektywna kaniulacja gałęzi SMA została zastosowana do infuzji toksyny botulinowej bezpośrednio w tętniczą okolicę krezkową w celu zbadania wpływu na mięśnie gładkie jelit10, ale w przyszłości można przetestować wiele innych leków. Na przykład leki przeciwzakrzepowe mogą być podawane w infuzji w celu zbadania zakrzepicy krezki lub leki o działaniu na mikrobiotęjelitową 11 , a nawet leki na choroby zapalne jelit12. Wlew dotętniczy jest przydatny w szczególności w badaniach metabolizmu jelitowego, ponieważ działanie leku jest oceniane, zanim krew przejdzie przez krążenie wrotne, gdzie podlega metabolizmowi wątrobowemu.