Method Article

Kwantyfikacja funkcji i morfologii dwukomorowej za pomocą obrazowania rezonansu magnetycznego serca u myszy z pasmem tętnicy płucnej

DOI:

10.3791/60837

May 13th, 2020

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Aby zrozumieć patofizjologię adaptacji prawej komory (RV) do nieprawidłowego obciążenia, kluczowe są modele eksperymentalne. Jednak ocena wymiarów i funkcji RV jest złożona i trudna. Protokół ten zapewnia metodę wykonywania obrazowania metodą rezonansu magnetycznego serca (CMR) jako nieinwazyjną procedurę wzorcową u myszy poddanych obciążeniu ciśnieniowemu RV.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Funkcja i niewydolność prawej komory (RV) są głównymi determinantami wyników w nabytych i wrodzonych chorobach serca, w tym nadciśnieniu płucnym. Ocena funkcji i morfologii RV jest złożona, częściowo ze względu na złożony kształt RV. Obecnie obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego serca (CMR) jest złotym standardem w nieinwazyjnej ocenie funkcji i morfologii RV. Obecny protokół opisuje obrazowanie CMR w mysim modelu obciążenia ciśnieniowego RV indukowanego przez pasmo tętnicy płucnej (PAB). PAB wykonuje się poprzez założenie szwu 6-0 wokół tętnicy płucnej za pomocą igły 23 G. Gradient PAB określa się za pomocą echokardiografii po 2 i 6 tygodniach. Po 6 tygodniach morfologię i funkcję prawej i lewej komory ocenia się, mierząc zarówno końcowoskurczową, jak i końcoworozkurczową objętość i masę przez dziesięć do jedenastu plastrów cine o grubości 1 mm za pomocą skanera rezonansu magnetycznego 9,4 T wyposażonego w gradient 1,500 mT/m. Reprezentatywne wyniki pokazują, że PAB indukuje znaczny wzrost obciążenia ciśnieniem RV, co ma znaczący wpływ na morfologię dwukomorową i funkcję RV. Wykazano również, że po 6 tygodniach obciążenia ciśnieniem RV pojemność minutowa serca jest utrzymywana. Przedstawiono tutaj powtarzalny protokół kwantyfikacji morfologii i funkcji dwukomorowej w mysim modelu obciążenia ciśnieniem RV i może służyć jako metoda do eksperymentów badających determinanty przebudowy i dysfunkcji RV.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pacjenci z nabytymi i wrodzonymi chorobami sercowo-naczyniowymi, w tym nadciśnieniem płucnym (PH), są narażeni na dysfunkcję i niewydolność prawej komory (RV)1. Adaptacja RV w wyniku zwiększonego obciążenia ciśnieniowego charakteryzuje się koncentrycznym przerostem we wczesnych stadiach i postępującym poszerzeniem w końcowym stadium choroby. Ponadto wiąże się z zaburzeniami metabolizmu i macierzy zewnątrzkomórkowej, procesami zapalnymi i ostatecznie niewydolnością RV2,3,4,5,6. Opraco....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie eksperymenty i opieka nad zwierzętami są prowadzone zgodnie z Holenderską Ustawą o Zwierzętach Doświadczalnych i są zgodne z Przewodnikiem Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych opublikowanym przez amerykańskie Narodowe Instytuty Zdrowia. Komitet ds. Doświadczeń na Zwierzętach Uniwersytetu w Groningen w Holandii zatwierdził obecny protokół eksperymentalny (numer zezwolenia: 2014-041/3005).

1. Zakwaterowanie i aklimatyzacja

  1. Użyj 20–30 g dzikich myszy C57 black 6 (C57BL/6) (instytucjonalna linia hodowlana opisana wcześniej47), samce i samice, wszystkie w wieku powyżej 8 tygodni. Trzymaj mys....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Śmiertelność zabiegu chirurgicznego PAB wynosi około 10%. Przedstawione wyniki pokazują charakterystykę myszy w grupie pozorowanej (n = 5) i PAB (n = 8). Jak pokazano na Rysunek 3, wartości gradientu PAB znacznie wzrosły w porównaniu ze zwierzętami pozorowanymi po 2 i 6 tygodniach od PAB. Ten wzrost obciążenia spowodował dylatację RV wyrażoną jako wzrost RV, EDV i RV ESV (Rysunek 4A,B). Dysfunkcja RV występowała, gdy RV EF zmniejszało się (

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół ten zapewnia powtarzalną metodę PAB u myszy oraz późniejszą ocenę przebudowy serca i adaptacji funkcjonalnej za pomocą CMR.

PAB różni się od innych modeli zwiększonego obciążenia ciśnieniem RV tym, że polega na bezwzględnym i statycznym wzroście obciążenia następczego bez obecności innych wyzwalaczy. Obciążenie ciśnieniem RV w modelach niedotlenienia, monokrotaliny, zastawki lub kombinacji tych induktorów opiera się na przebudowie układu naczyniowego płuc. Ta przebudowa jest napędzana.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uniwersyteckie Centrum Medyczne w Groningen zawarło umowę z Actelion i Lilly na działalność doradczą R.M.F. Bergera wykraczającą poza treść niniejszego manuskryptu. Pozostali autorzy deklarują, że nie mają sprzecznych interesów.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Chcielibyśmy podziękować P. Da Costa-Martins za jej wsparcie w eksperymentach na zwierzętach w tym badaniu.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Przetwornik echokardiograficzny 14,0 MHz i13LGE Healthcare, Waukesha, WI, USA
Kaniula 20G Igła
23G
Skaner rezonansu magnetycznego 9,4T z zestawem gradientu 1,500 mT/mBruker BioSpin, Ellingen, Niemcy
Komora
Blunt 25G
Buprenorfina
Chlorek i heksydyna
Oprogramowanie do post-processingu CMRMedis Medical Imaging Systems, Lejda, HolandiaQmass wersja 7.6
Oprogramowanie do wizualizacji danych i statystykiGraphPad Prism Inc, La Jolla, CA, USAwersja oprogramowania 7.02
Aparat do echokardiografiiGE Healthcare, Waukesha, WI, USAVivid Dimension 7
Maść
Mata grzewcza
Inkubator (37° C)
Isofluran
Parownik
Miniwentylator dla gryzoniHugo Sachsmodel 687
monofilament polipropylen 5-0 szwy
monofilamentowe polipropylenowe 6-0 Igła
i strzykawka do podskórnego zastrzyki
Naklejki z elektrokardiogramem u dzieci Czysty
kwas poliglikolowy 5-0 Szwy
Sterylne narzędzia
Maska wentylacyjna
indukcyjna anestezjologicznaIgłado oczuizofluranuchirurgiczne

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Norozi, K., et al. Incidence and Risk Distribution of Heart Failure in Adolescents and Adults With Congenital Heart Disease After Cardiac Surgery. The American Journal of Cardiology. 97 (8), 1238-1243 (2006).
  2. Borgdorff, M. A. J., et al.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Cardiac Magnetic ResonanceBiventricular FunctionPulmonary Artery BandingRight Ventricular FunctionMouse Heart ImagingVentricular MorphologyCine MRIPulmonary HypertensionEchocardiography AssessmentRV Remodeling
Video Coming Soon

Related Articles