Indukcja całkowitego uszkodzenia rdzenia kręgowego typu transsection u myszy

Ronak Reshamwala; Tanja Eindorf; Megha Shah; Graham Smyth; Todd Shelper; James St. John; Jenny Ekberg

doi:10.3791/61131

Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Indukcja całkowitego uszkodzenia rdzenia kręgowego typu transsection u myszy

9.5K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/61131

⸱

6 maja 2020

Ronak Reshamwala¹^,²^,³ , Tanja Eindorf²^,³ , Megha Shah²^,³ , Graham Smyth²^,³ , Todd Shelper²^,³ , James St. John^*¹^,²^,³ , Jenny Ekberg^*²^,³

¹Griffith Institute for Drug Discovery, Griffith University, ²Menzies Health Institute Queensland, Griffith University, ³Clem Jones Centre for Neurobiology and Stem Cell Research, Griffith University

^* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół opisuje, jak stworzyć precyzyjną laminektomię do indukcji stabilnego uszkodzenia rdzenia kręgowego typu transsection w modelu mysim, z minimalnymi szkodami ubocznymi dla badań nad uszkodzeniem rdzenia kręgowego.

Streszczenie

Uraz rdzenia kręgowego (SCI) w dużej mierze prowadzi do nieodwracalnej i trwałej utraty funkcji, najczęściej w wyniku urazu. Badanych jest kilka opcji leczenia, takich jak metody przeszczepu komórek, w celu przezwyciężenia wyniszczającej niepełnosprawności wynikającej z SCI. Większość badań przedklinicznych na zwierzętach przeprowadza się na modelach SCI u gryzoni. Podczas gdy modele szczurze SCI były szeroko stosowane, modelom mysim poświęcono mniej uwagi, mimo że modele myszy mogą mieć znaczną przewagę nad modelami szczurzymi. Niewielki rozmiar myszy równa się niższym kosztom utrzymania zwierząt niż w przypadku szczurów, a dostępność wielu transgenicznych modeli myszy jest korzystna dla wielu rodzajów badań. Wywołanie powtarzalnych i precyzyjnych urazów u zwierząt jest głównym wyzwaniem dla badań nad SCI, które u małych gryzoni wymagają bardzo precyzyjnej operacji. Model urazu typu transekcyjnego był powszechnie stosowanym modelem urazu w ciągu ostatniej dekady w badaniach terapeutycznych opartych na transplantacji, jednak nie istnieje ustandaryzowana metoda wywoływania całkowitego urazu typu transekcyjnego u myszy. Opracowaliśmy protokół chirurgiczny do wywoływania całkowitego urazu typu przecięcia u myszy C57BL / 6 na poziomie kręgów piersiowych 10 (T10). W zabiegu wykorzystuje się wiertło z małą końcówką zamiast rongeurs do precyzyjnego usunięcia blaszki, po czym do wywołania przecięcia rdzenia kręgowego używa się cienkiego ostrza z zaokrągloną krawędzią tnącą. Metoda ta prowadzi do powtarzalnego urazu typu przecięcia u małych gryzoni z minimalnym pobocznym uszkodzeniem mięśni i kości, a tym samym minimalizuje czynniki zakłócające, szczególnie tam, gdzie analizowane są behawioralne wyniki funkcjonalne.

Wprowadzenie

Uraz rdzenia kręgowego (SCI) to złożony problem medyczny, który powoduje drastyczne zmiany w zdrowiu i stylu życia. Nie ma lekarstwa na SCI, a patofizjologia SCI nie jest dokładnie poznana. Zwierzęce modele SCI, w szczególności modele gryzoni, stanowią nieocenione narzędzie do testowania nowych metod leczenia i są wykorzystywane do badania SCI od dziesięcioleci. Do tej pory w ponad 72% przedklinicznych badań SCI wykorzystano modele szczurze, w porównaniu z zaledwie 16%, w których użyto myszy¹. Chociaż szczury, ze względu na ich większe rozmiary i tendencję do tworzenia jam podobnych do ludzkiego SCI, tradycyjnie były preferowanymi zwierzętami m....