$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Technika opisana w niniejszej pracy umożliwia obrazowanie szybko poruszających się mikropęcherzyków z wysoką rozdzielczością przestrzenną i czasową. Może potencjalnie przynieść korzyści wielu dyscyplinom naukowym, takim jak inżynieria chemiczna, stomatologia i medycyna. Zastosowania inżynieryjne obejmują obrazowanie pęcherzyków kawitacyjnych do czyszczenia powierzchni lub do obrazowania pęcherzyków w reaktorach ze złożem fluidalnym. Zastosowania biomedyczne obejmują obrazowanie kawitacji wokół instrumentów medycznych i dentystycznych oraz obrazowanie oczyszczania biofilmu z tkanek twardych i miękkich za pomocą pęcherzyków kawitacyjnych. W tym badaniu zademonstrowaliśmy tę technikę, obrazując kawitację wokół dwóch różnych końcówek dentystycznego skalera ultradźwiękowego. Wielkość kawitacji różni się między dwiema końcówkami testowanymi w tym badaniu, przy czym więcej chmur kawitacji zaobserwowano wokół wolnego końca końcówki 10P. Wcześniej wiązano to z amplitudądrgań wynoszącą 20. Filmy z dużą prędkością pokazują, że końcówka FSI 1000 ma mniejsze wibracje, co prawdopodobnie jest powodem, dla którego wokół tej końcówki jest mniejsza kawitacja.
Jednym z ograniczeń metody analizy obrazu jest to, że technika odejmowania obrazu w celu usunięcia obszaru skalera nie jest całkowicie dokładna, ponieważ skaler oscyluje, a zatem odejmowanie może pozostawić niektóre obszary skalera fałszywie podzielone na segmenty jako bąbelki. Zostało to jednak uwzględnione poprzez uśrednienie powierzchni z dużej liczby klatek (n=2000). Nie stanowiłoby to problemu w przypadku zastosowań, w których obiekt, który ma zostać odjęty, jest nieruchomy. W przypadku badań, w których poruszający się obiekt, który ma zostać odjęty, ma znacznie większą wariancję, zalecamy zsynchronizowanie ruchów w obu filmach przed odjęciem w celu uzyskania dokładnych wyników. W obecnym badaniu nie zsynchronizowaliśmy oscylacji, ale ponieważ wibracje były niskie, możemy założyć, że oscylacje dobrze sobie odpowiadają w tych dwóch pomiarach.
Progowanie obrazu jest dokładne, ponieważ oświetlenie w jasnym polu zapewnia jednolite tło o dobrym kontraście. Bardzo ważne jest, aby upewnić się, że tło jest jednolite i nie zawiera żadnych innych obiektów, które mogłyby zostać błędnie podzielone na segmenty. Metodę progowania można modyfikować przy użyciu innych progów automatycznych w zależności od zastosowania. Ręczne progowanie, w którym użytkownik ustawia wartość progową, jest również możliwe, ale nie jest zalecane, ponieważ zmniejsza odtwarzalność wyników, ponieważ różni użytkownicy wybierają różne wartości progowe.
Analiza obrazu została wykorzystana w wielu innych badaniach obrazowania pęcherzyków. Wykorzystują one również podobną metodę podświetlania, aby uzyskać optymalny kontrast między bąbelkami a tłem, oraz progowania w celu segmentacji bąbelków 21,22,23,24. Metodę przedstawioną w obecnym badaniu można również uogólnić i można ją zastosować do wielu różnych zastosowań obrazowania pęcherzykowego, które nie ograniczają się tylko do obrazowania z dużą prędkością. Szybkie obrazowanie zostało wykorzystane do pęcherzyków kawitacyjnych generowanych w wodzie, a także wokół narzędzi takich jak pilniki endodontyczne i skalery ultradźwiękowe 12,25,26,27,28. Na przykład Rivas i wsp. oraz Macedo i wsp. użyli szybkiej kamery przymocowanej do mikroskopu, z oświetleniem zapewnianym przez źródło zimnego światła, do czyszczenia obrazu za pomocą kawitacji oraz do obrazowania kawitacji wokół pilnika endodontycznego17,29. Oświetlenie jasnym polem zapewnia większy kontrast między tłem a pęcherzykami, umożliwiając zastosowanie prostych technik segmentacji, takich jak progowanie, jak wykazano przez Rivasa i in., do obrazowania i ilościowego określania erozji kawitacyjnej i czyszczenia w czasie29. Oświetlenie ciemnego pola utrudnia progowanie ze względu na większą zmienność skal szarości 4,30. Analiza obrazu została wykorzystana w innych badaniach w celu zebrania większej ilości informacji na temat pęcherzyków 1,2. Vyas i in. wykorzystali podejście uczenia maszynowego do segmentacji pęcherzyków kawitacyjnych wokół skalera ultradźwiękowego20. Metoda opisana w niniejszym artykule jest szybsza, ponieważ wykorzystuje proste progowanie, dzięki czemu jest mniej intensywna obliczeniowo, a pęcherzyki występujące powyżej i poniżej skalera mogą być analizowane. Jednak metoda progowania zastosowana w obecnym artykule jest dokładna tylko wtedy, gdy tło jest jednolite. Jeśli nie jest możliwe uzyskanie jednolitego tła podczas obrazowania, można zastosować inne techniki przetwarzania obrazu, takie jak odejmowanie tła za pomocą promienia toczącej się kuli w celu skorygowania nierównomiernego oświetlenia, filtrowanie za pomocą filtrów medianowych lub gaussowskich w celu usunięcia szumu, a także stosowanie technik opartych na uczeniu maszynowym20,31.
Podsumowując, przedstawiamy protokół szybkiego obrazowania i analizy do obrazowania i obliczania obszaru mikroskopijnego poruszającego się obiektu. Zademonstrowaliśmy tę metodę, obrazując pęcherzyki kawitacyjne wokół skalera ultradźwiękowego. Może być używany do obrazowania kawitacji wokół innych instrumentów dentystycznych, takich jak pilniki endodontyczne, i może być łatwo dostosowany do innych zastosowań obrazowania pęcherzykowego innych niż dentystyczne.