Method Article

Przyrostowe zmiany temperatury dla maksymalnej hodowli i tarła w Astyanax mexicanus

DOI:

10.3791/61708

February 14th, 2021

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten artykuł przedstawia podstawowe warunki laboratoryjne i protokoły dla reżimu przyrostu temperatury w celu stymulowania maksymalnego tarła u meksykańskiej tetra Astyanax mexicanus, która jest nowym modelem do badań rozwojowych i ewolucyjnych.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Meksykańska tetra, Astyanax mexicanus, jest nowym modelowym systemem do badań nad rozwojem i ewolucją. Istnienie u tego gatunku morfów powierzchniowych (ryb powierzchniowych) i ślepych jaskiń (ryb jaskiniowych) stwarza okazję do zbadania mechanizmów leżących u podstaw ewolucji morfologicznej i behawioralnej. Ryby jaskiniowe wykształciły nowe cechy konstrukcyjne i regresywne. Konstruktywne zmiany obejmują wzrost kubków smakowych i szczęk, narządów zmysłów linii bocznej i tkanki tłuszczowej. Zmiany regresywne obejmują utratę lub zmniejszenie wzroku. pigmentacja melaniny, zachowania szkolne, agresja i sen. Aby eksperymentalnie zbadać te zmiany, kluczowe jest uzyskanie dużej liczby zarodków, z których powstało ikrę. Odkąd pierwotne ryby powierzchniowe i jaskiniowe A. mexicanus zostały zebrane w Teksasie i Meksyku w latach 90., ich potomkowie byli rutynowo stymulowani do rozmnażania i składania ikry dużej liczby zarodków co dwa miesiące w laboratorium Jeffery'ego. Chociaż hodowla jest kontrolowana przez obfitość i jakość pożywienia, cykle jasne-ciemne i temperaturę, odkryliśmy, że przyrostowe zmiany temperatury odgrywają kluczową rolę w stymulowaniu maksymalnego tarła. Stopniowy wzrost temperatury z 72 °F do 78 °F w pierwszych trzech dniach tygodnia lęgowego zapewnia dwa-trzy kolejne dni tarła z maksymalną liczbą wysokiej jakości zarodków, po których następuje stopniowy spadek temperatury z 78 °F do 72 °F w ciągu ostatnich trzech dni tygodnia tarłowego. Procedury pokazane w tym filmie przedstawiają przebieg pracy przed i w trakcie tygodnia hodowli laboratoryjnej w celu stopniowego tarła stymulowanego temperaturą.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Teleost Astyanax mexicanus ma formę ryby zamieszkującej powierzchnię (ryby powierzchniowe) i wiele różnych form ślepych zamieszkujących jaskinie (ryby jaskiniowe)1,2. Ryby jaskiniowe ewoluowały w wiecznej ciemności i pod ograniczeniami żywieniowymi, co spowodowało pojawienie się nowych cech konstruktywnych i regresywnych3. Cechy konstruktywne obejmują wzrost kubków smakowych i wielkości szczęki, narządów zmysłów linii bocznej i rezerw tłuszczu. Cechy regresywne obejmują utratę lub zmniejszenie pigmentacji melaniny, oczu i zachowań, takich jak sen, nauka i agresja. Cechą systemu....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta procedura została zatwierdzona przez wytyczne Institutional Animal Care Uniwersytetu Maryland, College Park (obecnie IACUC 469 #R-NOV-18-59; Projekt 1241065-1).

figure-protocol-1
Rysunek 1. Kalendarze w tygodniu lęgowym i tygodniu nielęgowym. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

1. Poniedziałek

  1. W godzinach 9-10 wykonaj te....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Generalnie hodujemy i rozmnażamy potomków ryb powierzchniowych pierwotnie zebranych w Nacimiento del Rio Choy w San Luis Potosi w Meksyku (ryby powierzchniowe Rio Choy) i San Solomon Springs w Parku Stanowym Balmorhea w Teksasie (ryby powierzchniowe z Teksasu) oraz ryby jaskiniowe pochodzące z Cueva de El Pachón (ryba jaskiniowa Pachón) w Tamaulipas, Meksyk oraz Cueva de los Sabinos (ryba jaskiniowa Los Sabinos) i Sotano de la Tinaja (ryba jaskiniowa Tinaja) w San Luis Potosi w Meksyku.  

Prz.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Astyanax mexicanus to nowy model biologiczny, który często składa ikrę i może być łatwo rozmnażany w laboratorium 1,2. Ponieważ interesują nas mechanizmy rozwojowe, które leżą u podstaw zmian ewolucyjnych u ryb jaskiniowych A. mexicanus, produkcja i wykorzystanie zarodków ma kluczowe znaczenie dla naszych celów badawczych. Podstawowym celem utrzymania dorosłego stada ryb jest produkcja zarodków i młodego narybku do wykorzystania w doświadczeniac.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dziękujemy Davidowi Martasianowi, Diedre Heyser, Amy Parkhurst, Craigowi Foote'owi i Mandy Ng za cenny wkład w ośrodek hodowli A. mexicanus w laboratorium Jeffery'ego. Badania w laboratorium Jeffery'ego są obecnie wspierane przez grant NIH EY024941.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
BlackwormsEastern Aquatics, Lancaster, PABrak
Siatki hodowlaneWykonane na zamówienie
jaja krewetek solankowychAquaCave Lake Forest, IL.Brak
Zestaw do testów kolorymetrycznychPetcoSKU:11916API Zestaw do badania pH słodkowodnego
Płatki żółtka jajaPentair, Minneapolis, MNBrak
Miseczki na palceCarolina Zaopatrzenie biologiczne741004Naczynia hodowlane, 4,5 cala, 250 ml
Siatki ręczneDowolny sklep
Inkubator dla zarodkówFisher Scientific51-029-321HPM405 L
Instant Ocean Sole morskieSpectrum Brands, Blacksburg, VABrak
Methylene BlueSigma-Aldrich, St. Louis, MOM9140
Pipety PasteuraFisher Scientific13-678-205.75 in.
Roztwór do namaczania siatkiDowolny sklep
Cykl NutrafinAmazonBrakWzmocnienie bakteryjne
Lodówka do karmienia na żywoDowolne źródło
Mikroskop stereoskopowyDowolne źródło
TermometrDowolne źródło
Tetra Tropical CrispsSpectrum Brands, Blacksburg, VABrak
zoologicznyzoologiczny

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jeffery, W. R. Cavefish as a model system in evolutionary developmental biology. Developmental Biology. 231, 1-12 (2001).
  2. Jeffery, W. R. Emerging model systems in evo-devo: cavefish and mechanisms of microevolution. Evolution & Development....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Astyanax mexicanusSurface FishCave FishIncremental TemperatureEmbryo CollectionBreeding ProtocolSpawning StimulationEmbryo StagingIncubator SetupWater Temperature

Related Articles