Długość pęczka jest ważnym parametrem architektury mięśni szkieletowych, który ogólnie wskazuje na zdolność mięśnia do wytwarzania siły1,2. W szczególności długość pęczka mięśnia zapewnia wgląd w bezwzględny zakres długości, na których mięsień może generować aktywną siłę3,4. Na przykład, biorąc pod uwagę dwa mięśnie o identycznych wartościach dla wszystkich izometrycznych parametrów generujących siłę (tj. średnia długość sarkomeru, kąt pennacji, fizjologiczne pole przekroju poprzecznego, stan skurczu itp.) z wyjątkiem długości pęczka, mięsień z dłuższymi pęczkami wytwarzałby swoją szczytową siłę przy większej długości i wytwarzałby siłę w szerszym zakresie długości niż mięsień z krótszymi pęczkami3. Kwantyfikacja długości pęczka mięśniowego jest ważna dla zrozumienia zarówno zdrowej funkcji mięśni, jak i zmian w zdolności mięśni do generowania siły, które mogą wystąpić w wyniku zmienionego użycia mięśni (np. unieruchomienie5,6, interwencja w ćwiczeniach7,8,9, noszenie wysokich obcasów10) lub zmiana w otoczeniu mięśnia (np. operacja transferu ścięgna11, rozproszenie uwagi kończyny12). Pomiary długości pęczka mięśniowego zostały pierwotnie uzyskane za pomocą eksperymentów ex vivo ze zwłokami, które pozwalają na bezpośredni pomiar wypreparowanych pęczków13,14,15,16. Cenne informacje dostarczone przez te eksperymenty ex vivo doprowadziły do zainteresowania wdrożeniem metod in vivo17,18,19 w celu rozwiązania pytań, na które nie można było odpowiedzieć w zwłokach; Metody in vivo pozwalają na ilościowe określenie parametrów mięśni w stanie natywnym, a także w różnych pozycjach stawów, różnych stanach skurczu mięśni, różnych stanach obciążenia lub rozładowania oraz w populacjach o różnych stanach (tj. zdrowych/rannych, młodych/starych itp.). Najczęściej ultradźwięki są metodą stosowaną do uzyskania długości pęczków mięśniowych in vivo18,19,20; jest szybsza, tańsza i łatwiejsza do wdrożenia niż inne techniki obrazowania, takie jak obrazowanie tensora dyfuzji (DTI)18,21.
Wykazano, że ultrasonografia o rozszerzonym polu widzenia (EFOV-US) jest ważną i niezawodną metodą pomiaru długości pęczka mięśniowego in vivo. Chociaż powszechnie stosowane, tradycyjne ultrasonografie (T-US) mają pole widzenia, które jest ograniczone długością matrycy przetwornika ultradźwiękowego (zwykle od 4 do 6 cm, chociaż istnieją sondy, które rozciągają się do 10 cm10)18,20. Aby przezwyciężyć to ograniczenie, Weng i in. opracowali technologię EFOV-US, która automatycznie rejestruje złożony, dwuwymiarowy obraz "panoramiczny" (o długości do 60 cm) z dynamicznego skanowania na dużą odległość22. Obraz jest tworzony poprzez dopasowanie do siebie, w czasie rzeczywistym, sekwencji tradycyjnych obrazów ultrasonograficznych w trybie B, podczas gdy przetwornik dynamicznie skanuje obiekt zainteresowania. Ponieważ sekwencyjne obrazy T-US mają duże, nakładające się na siebie obszary, niewielkie różnice między jednym obrazem a drugim można wykorzystać do obliczenia ruchu sondy bez użycia zewnętrznych czujników ruchu. Po obliczeniu ruchu sondy między dwoma kolejnymi obrazami, "bieżący" obraz jest kolejno łączony z poprzednimi obrazami. Metoda EFOV-US umożliwia bezpośredni pomiar długich, zakrzywionych pęczków mięśniowych i wykazano, że jest wiarygodna w przypadku mięśni, prób i ultrasonografów23,24,25 i ważna zarówno dla płaskich, jak i zakrzywionych powierzchni23,26.
Implementacja ultradźwięków do pomiaru długości pęczka mięśniowego in vivo nie jest trywialna. W przeciwieństwie do innych technik obrazowania, które obejmują bardziej zautomatyzowane protokoły (np. MRI, CT), ultrasonografia zależy od umiejętności ultrasonografa i wiedzy anatomicznej27,28. Istnieje obawa, że niewspółosiowość sondy z płaszczyzną pęczka może spowodować znaczny błąd w pomiarach pęczków. Jedno z badań wykazało niewielką różnicę (średnio < 3 mm) w pomiarach długości pęczków wykonanych za pomocą ultrasonografii i rezonansu magnetycznego DTI, ale pokazuje również, że precyzja pomiaru jest niska (odchylenie standardowe różnicy ~12 mm)29. Mimo to wykazano, że początkujący ultrasonografista, z praktyką i wskazówkami doświadczonego ultrasonografa, może uzyskać prawidłowe pomiary za pomocą EFOV-US23. W związku z tym należy dołożyć starań, aby zademonstrować odpowiednie protokoły w celu zmniejszenia błędu ludzkiego i poprawy dokładności pomiarów uzyskanych za pomocą EFOV-US. Ostatecznie, opracowanie i udostępnienie odpowiednich protokołów może zwiększyć liczbę eksperymentatorów i laboratoriów, którzy mogą odtworzyć dane dotyczące długości pęczków z literatury lub uzyskać nowe dane w mięśniach, które nie były jeszcze badane in vivo.
W tym protokole pokazujemy, jak zastosować metodę EFOV-US w celu uzyskania wysokiej jakości obrazów układu mięśniowo-szkieletowego, które mogą być użyte do ilościowego określenia długości pęczka mięśniowego. W szczególności zajmujemy się (a) zbieraniem obrazów EFOV-US pojedynczej kończyny górnej i pojedynczego mięśnia kończyny dolnej, (b) określaniem, w czasie rzeczywistym, "jakości" obrazu EFOV-US oraz (c) ilościowym określaniem parametrów architektury mięśni w trybie offline. Udostępniamy ten szczegółowy przewodnik, aby zachęcić do przyjęcia metody EFOV-US do uzyskiwania danych o długości pęczka mięśniowego w mięśniach, które nie zostały zbadane in vivo ze względu na ich długie pęczki.