$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Dobrze rozwiniętą i obiecującą dziedziną badań inżynieryjnych jest mikrofabrykacja ze względu na szeroki zakres zastosowań wykorzystujących platformy mikroprzepływowe. Mikrofabrykacja to proces, w którym konstrukcje są wytwarzane o rozmiarach μm lub mniejszych przy użyciu różnych związków chemicznych. Wraz z rozwojem badań mikroprzepływowych w ciągu ostatnich 30 lat, miękka litografia stała się najpopularniejszą techniką mikrowytwarzania za pomocą mikrochipów wykonanych z poli(dimetylosiloksanu) (PDMS) lub podobnych substancji. Te mikroczipy były szeroko stosowane do miniaturyzacji powszechnych praktyk laboratoryjnych1,2,3,4 i stały się potężnymi narzędziami badawczymi dla inżynierów do naśladowania procesów reakcji5,6,7, badaj mechanizmy reakcji i naśladuj narządy znajdujące się w ludzkim ciele in vitro (np. narząd na chipie)8,9,10. Jednak wraz ze wzrostem złożoności aplikacji typowe jest, że bardziej złożona konstrukcja urządzenia mikroprzepływowego pozwala na lepszą replikację rzeczywistego systemu, który ma imitować.
Podstawowa procedura miękkiej litografii polega na pokryciu podłoża substancją fotorezystu i nałożeniu fotomaski na pokryte podłoże przed poddaniem podłoża działaniu światła UV11. Fotomaska ma przezroczyste obszary, które naśladują pożądany wzór kanałów urządzenia mikroprzepływowego. Podczas poddawania powlekanego podłoża działaniu światła UV, przezroczyste obszary umożliwiają przenikanie światła UV przez fotomaskę, powodując usieciowanie fotorezystu. Po etapie naświetlania nieusieciowany fotorezyst jest zmywany za pomocą wywoływacza, pozostawiając solidne struktury o zamierzonym wzorze. Ponieważ złożoność urządzeń mikroprzepływowych staje się coraz większa, wymagają one wielowarstwowej konstrukcji o niezwykle precyzyjnych wymiarach. Proces mikrofabrykacji wielowarstwowej jest znacznie trudniejszy w porównaniu z mikrofabrykacją jednowarstwową.
Wielowarstwowa mikrofabrykacja wymaga precyzyjnego dopasowania cech pierwszej warstwy do wzorów na drugiej masce. Zwykle proces ten jest wykonywany przy użyciu komercyjnego nakładacza do masek, który jest drogi i wymaga przeszkolenia w zakresie obsługi maszyny. W związku z tym proces wielowarstwowej mikrofabrykacji jest zazwyczaj nieosiągalny dla mniejszych laboratoriów, które nie mają funduszy lub czasu na takie przedsięwzięcia. Chociaż opracowano kilka innych niestandardowych nakładek do masek, systemy te często wymagają zakupu i montażu wielu różnych części i nadal mogą być dość złożone12,13,14. Jest to nie tylko kosztowne dla mniejszych laboratoriów, ale także wymaga czasu i szkolenia w celu zbudowania, zrozumienia i użytkowania systemu. Nakładka na maskę szczegółowo opisana w tym artykule miała na celu złagodzenie tych problemów, ponieważ nie ma potrzeby kupowania dodatkowego sprzętu, a jedynie sprzętu, który zwykle jest już obecny w laboratoriach produkujących i używających urządzeń mikroprzepływowych. Ponadto nakładka na maskę jest wytwarzana metodą druku 3D, która wraz z niedawnym postępem technologii druku 3D stała się łatwo dostępna dla większości laboratoriów i uniwersytetów po przystępnej cenie.
Protokół opisany w tym artykule ma na celu stworzenie opłacalnego i łatwego w obsłudze alternatywnego nakładki na maskę. Opisany tutaj nakładek do masek może sprawić, że wielowarstwowa mikroprodukcja stanie się możliwa dla laboratoriów badawczych bez konwencjonalnych urządzeń produkcyjnych. Za pomocą adaptera do wyrównywania maski mikroskopu (MMAA) można uzyskać funkcjonalne mikroczipy o złożonych cechach przy użyciu zwykłego źródła światła UV, mikroskopu optycznego i zwykłego sprzętu laboratoryjnego. Wyniki pokazują, że MMAA dobrze radzi sobie z przykładowym systemem wykorzystującym mikroskop pionowy i pudełko do naświetlania światłem UV. MMAA wytworzony w procesie drukowania 3D został wykorzystany do pozyskania dwuwarstwowej formy wzorcowej urządzenia mikroprzepływowego w jodełkę z minimalnymi błędami wyrównania. Korzystając z formy wzorcowej wykonanej za pomocą wydrukowanego w 3D MMAA, przygotowano urządzenia mikroprzepływowe z wielowarstwowymi strukturami zawierającymi błędy wyrównania <10 μm. Błąd wyrównania wynoszący <10 μm jest na tyle minimalny, że nie utrudnia zastosowania urządzenia mikroprzepływowego.
Ponadto, potwierdzono pomyślne wyrównanie czterowarstwowej formy wzorcowej wyprodukowanej przy użyciu MMAA, a błędy wyrównania określono na <10 μm. Funkcjonalność urządzenia mikroprzepływowego i minimalne błędy wyrównania potwierdzają udane zastosowanie MMAA w tworzeniu wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych. MMAA można dostosować do każdego mikroskopu i systemu naświetlania promieniami UV, wprowadzając drobne zmiany w pliku w drukarce 3D. Poniższy protokół przedstawia kroki niezbędne do dopracowania MMAA tak, aby pasował do sprzętu dostępnego w każdym laboratorium i wydrukowania 3D MMAA z wymaganymi specyfikacjami. Ponadto w protokole szczegółowo opisano, jak opracować wielowarstwową formę wzorcową za pomocą systemu, a następnie wyprodukować urządzenia mikroprzepływowe PDMS przy użyciu formy głównej. Generowanie formy głównej i chipów mikroprzepływowych pozwala następnie użytkownikowi przetestować skuteczność systemu.