Kriokonserwacja oocytów jest uznawana przez kilka międzynarodowych towarzystw naukowych za złoty standard zachowania płodności u kobiet po okresie dojrzewania. Odpowiednie strategie kliniczne i laboratoryjne zapewniają maksymalną skuteczność, efektywność i bezpieczeństwo zabiegów zachowujących płodność.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Zachowanie płodności poprzez witryfikację oocytów: perspektywy kliniczne i laboratoryjne
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Zachowanie kobiecej płodności jest kluczowe w wielofunkcyjnym systemie opieki zdrowotnej, który dba o przyszłą jakość życia pacjentów. Kriokonserwacja oocytów jest uznawana przez kilka międzynarodowych towarzystw naukowych za złoty standard zachowania płodności u kobiet po okresie dojrzewania, zarówno ze wskazań medycznych, jak i niemedycznych. Głównymi wskazaniami medycznymi są choroby onkologiczne, choroby ginekologiczne, takie jak ciężka endometrioza, choroby ogólnoustrojowe upośledzające rezerwę jajnikową oraz uwarunkowania genetyczne związane z przedwczesną menopauzą. Niniejszy artykuł opisuje całość klinicznych i laboratoryjnych badań nad leczeniem zachowania płodności, przedstawiając zalecenia dotyczące obiektywnego i opartego na dowodach poradnictwa. Ponadto skoncentrowano się na skuteczności procedury i opisano najwłaściwsze strategie, aby w pełni wykorzystać rezerwę jajnikową i zmaksymalizować liczbę pobranych komórek jajowych w jak najkrótszym czasie. Ocena rezerwy jajnikowej, definicja idealnego protokołu stymulacji, a także procedury pobierania, denudacji i witryfikacji oocytów zostały szczegółowo opisane wraz z podejściami mającymi na celu maksymalizację ich skuteczności, wydajności i bezpieczeństwa.
Wprowadzenie
Opracowanie i wdrożenie skutecznego programu kriokonserwacji ludzkich oocytów było znaczącym przełomem w medycynie reprodukcyjnej. Zgodnie z najnowszymi dowodami, witryfikacja jest najskuteczniejszą strategią kriokonserwacji oocytów metafazy II (MII), ponieważ skutkuje statystycznie wyższymi wskaźnikami przeżycia w porównaniu z powolnym zamrażaniem, niezależnie od populacji pacjentów (pacjenci niepłodni lub program dawstwa oocytów)1,2,3. Niezwykłe osiągnięcia witryfikacji oocytów skłoniły Komitety Praktyki Amerykańskiego Towarzystwa Medycyny Rozrodu (ASRM) i Towarzystwa Techn....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
1. Trening i poradnictwo kliniczne
UWAGA: W przypadku pacjentów wymagających zachowania płodności z powodów onkologicznych, upewnij się, że nie ma listy oczekujących na umówienie się na konsultację, a termin wizyty jest zapewniony tak szybko, jak to możliwe.
- Zapoznaj się z historią medyczną i dotychczasową dokumentacją oraz oceń ogólny stan zdrowia pacjenta.
- Zapisz wszystkie informacje (w tym zgodę onkologa na poddanie się stymulacji jajników w przypadku pacjentek z rakiem) w relacyjnej bazie danych.
- Udziel pacjentowi konkretnego poradnictwa na temat wykonalności zabiegu. Wyjaśnij etapy procedury (stymulacja ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Przegląd programu zachowania płodności w ośrodku
W okresie 12 lat (2008-2020) 285 kobiet przeszło co najmniej jeden zabieg pobrania oocytów, obejmujący witryfikację całej grupy zebranych dojrzałych komórek jajowych. Większość z tych kobiet (n=250) przeszła pojedyncze pobranie, a 35 przeszło wielokrotne pobrania. Przyczyny przeprowadzenia pobrania oocytów w celu witryfikacji podzielono na 4 kategorie: medyczne (z wyłączeniem nowotworów), nowotworowe, niemedyczne oraz inne. Wśró.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Rozważania kliniczne
Chociaż nowe strategie, takie jak kriokonserwacja tkanki jajnika i dojrzewanie in vitro, zostały zbadane, witryfikacja oocytów po COS jest złotym standardem w zachowaniu płodności. W tym scenariuszu liczba pobranych i kriokonserwowanych oocytów powinna być zmaksymalizowana w jak najkrótszym czasie, ponieważ większość pacjentek z rakiem może odnieść korzyści wyłącznie z jednego cyklu jajnikowego, zanim będą musiały rozpocząć leczenie raka. W związku z tym .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Collection | |||
| Equipment | |||
| Hot plate | IVF TECH | ||
| Laminar Flow Hood | IVF TECH | Grade A | |
| Stereoskop | Leica | Leica M80 | |
| Termometr | |||
| Probówka Cieplejszy | |||
| inkubator trójgazowy | Panasonic | MCO-5M-PE | 02/CO2 |
| Pompa próżniowa | Kucharz | K-MAR-5200 | |
| Materiały eksploatacyjne | |||
| CSCM (Continuos single culture complete) średni | Fujifilm Irvine Scientific | 90165 | Pożywka do hodowli IVF uzupełniona |
| olejem mineralnym HSA do hodowli zarodków | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| (pojedynczy prześwit) | Cook | K-OSN-1730-B-60 | |
| Naczynie Primaria | Corning | 353803 | Corning Primaria Standardowe naczynie do hodowli komórkowych w stylu 100x20 mm |
| Rurki z okrągłym dnem | Sokół | 352001 | Falcon 14ml Polistyrenowa probówka z okrągłym dnem i zatrzaskiem |
| Probówki z okrągłym dnem | Falcon | 352003 | Probówki do pobierania oocytów / Falcon 5ml 12x75 Probówka polipropylenowa z okrągłym dnem i zatrzaskiem |
| Gumowa żarówka | Sigma Aldrich | Z111589-12EA | |
| Pipety Pasteura ze sterylnego szkła | Hunter Scientific | PPB150-100PL | Pipeta Pasteur Cotonate, 150mm, MEA e CE |
| Denudation | |||
| Equipment | |||
| CO2 inkubator | Eppendorf | Galaxy 14S | |
| Flexipet regulowany zestaw uchwytów | Cook | G18674 | Uchwyt do ściągania izolacji Gilson |
| Pipetman | Gilson | 66003 | p20 |
| k-System Inkubator | Coopersurgical | G210Invicell | |
| Markery laboratoryjne | Sigma Aldrich | ||
| Kaptur z przepływem laminarnym | IVF TECH | Grade A przepływ powietrza | |
| Stereomikroskop | Leica Leica | M80 | |
| Consumables | |||
| Biopur epTIPS Rack | Eppendorf | 30075331 | Mikropipety epTIPS Biopur 2-200 µ l |
| Albumina surowicy ludzkiej | thermoFisher Scietific | 9988 | |
| Hialuronidaza | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | 80 IU / ml enzymu hialuronidazy w buforowanym przez HEPES |
| naczyniu do hodowli HTF IVF (60 x 15 mm) | Corning | 353802 | Corning Primaria Falcon Dish 60X15mm TC Primaria standardowe naczynie do hodowli komórkowych |
| Naczynie IVF 4-dołkowa płytka z przesuwaną pokrywką | ThermoFisher Scietific | 176740 | Naczynia wielościenne 4 dołki (Nunc) |
| IVF Naczynie jednodołkowe | Falcon | 353653 | Falcon 60 x 15 mm Olej mineralny IVF z dotyczką centralną |
| hodowli zarodków | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| Zmodyfikowany HTF Medium | Fujifilm Irvine Scientific | 90126 | Hepes-Buffered |
| Gumowa żarówka | Sigma Aldrich | Z111589-12EA | 1 ml do pipety pasteura |
| Sterylne szkło Pipety Pasteura | Hunter Scientific | PPB150-100PL | Pipeta Pasteur Cotonate, 150 mm, MEA e CE |
| końcówki do zdejmowania izolacji (140 &mikro; m) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-6 | PIPETY FLEXIPETS PER DENUDING |
| końcówki do pipet do zdejmowania izolacji (130 i mikro; m ) | Cook | K-FPIP-1130-10BS-7 | PIPETY FLEXIPETS NA DENUDING |
| końcówki do pipet do zdejmowania izolacji (170 &mikro; m) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | PIPETY FLEXIPETS NA DENUDING |
| mocny>Witryfikacja | |||
| Sprzęt | |||
| Elektroniczny timer | |||
| Regulowany zestaw uchwytów Flexipet | Cook | G18674 | Stripper uchwyt |
| Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | p200 |
| Markery laboratoryjne | Sigma Aldrich | ||
| Kaptur z przepływem laminarnym | IVF TECH | Klasa A | |
| przepływ powietrza Pojemnik ze stali nierdzewnej do stojaka chłodzącego | Kitazato | Pojemnik na ciekły azot do witryfikacji | |
| Mikroskop stereoskopowy | Leica | Leica M80 | |
| Materiały eksploatacyjne | |||
| Biopur epTIPS Stojak | Eppendorf | 30075331 | Mikropipety epTIPS Biopur 2-200 µ L |
| Albumina surowicy ludzkiej | Fujifilm Irvine Scientific | 9988 | |
| Naczynie do hodowli IVF (60 x 15 mm) | Corning | 353802 | Corning Primaria Falcon Dish 60 x 15 mm TC Primaria standardowe naczynie do hodowli komórkowych |
| Naczynie IVF 6-dołkowe | Oosafe | OOPW-SW02 | OOSAFE NACZYNIE 6-DOŁKOWE Z UCHWYTEM NA SŁOMKĘ |
| Zmodyfikowane HTF Medium | Fujifilm Irvine Scientific | 90126 | HEPES-Buforowane średnie |
| końcówki do pipet do zdejmowania izolacji (170 &mikro; m) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | PIPETY FLEXIPETS NA ZESTAW DO ZAMRAŻANIA |
| WITRYFIKACJI | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-so | 2 fiolki ES (roztwór do równoważenia, 2 x 1 ml) i 2 fiolki VS (roztwór do witryfikacji, 2 x 1 ml) |
| Vitrifit | Coopersurgical Origio | 42782001A | VitriFit Box |
| warming | |||
| Equipment | |||
| Elektroniczny timer | |||
| Flexipet regulowany zestaw uchwytów | Cook | G18674 | Stripper uchwyt |
| Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | p200 |
| Inkubator k-System | Coopersurgical | G210Markery laboratoryjne Invicell | |
| Sigma Aldrich | |||
| Kaptur z przepływem laminarnym | IVF TECH | Przepływ powietrza klasy A | |
| Pojemnik ze stali nierdzewnej do stojaka chłodzącego | Kitazato | Pojemnik na ciekły azot do witryfikacji | |
| Mikroskop stereoskopowy | Leica | Leica M80 | |
| Materiały eksploatacyjne | |||
| Biopur epTIPS Stojak | Eppendorf | 30075331 | Mikropipety epTIPS Biopur 2-200 µ L |
| Pożywka CSCM (Continuos single culture complete) | Fujifilm Irvine Scientific | 90165 | Pożywka do hodowli in vitro uzupełniona naczyniem do |
| hodowli IVF HSA (60 x 15 mm) | Corning | 353802 Corning Primaria Falcon Dish 60X15mm TC Primaria standardowe naczynie do hodowli komórkowych | |
| Naczynie IVF 4-dołkowa płytka z przesuwaną pokrywką | ThermoFisher Scietific | 176740 | Naczynia wielofunkcyjne 4 dołki (Nunc) |
| Miska IVF 6-dołkowy | Oosafe | OOPW-SW02 | OOSAFE® NACZYNIE 6-DOŁKOWE Z UCHWYTEM NA SŁOMKĘ |
| Olej mineralny do hodowli zarodków | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| SAkońcówki do pipet (300 i mikro; m) | Cook | K-FPIP-1300-10BS-5 | PIPETY FLEXIPETS NA OGOŁOCENIE |
| Zestaw do rozmrażania witryfikacji | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-so | 4 fiolki TS (roztwór do rozmrażania, 4 x 2 ml) + 1 fiolka DS (roztwór do rozcieńczania, 1 x 2 ml) + 1 fiolka WS (roztwór do mycia, 1 x 2 ml) |
Bibliografia
- Cobo, A., Diaz, C. Clinical application of oocyte vitrification: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Fertility and Sterility. 96 (2), 277-285 (2011).
- Rienzi, L., et al.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
