Urazowe uszkodzenie mózgu (TBI) jest często kojarzone z zaburzeniami pamięci. W tym miejscu przedstawiamy protokół oceny przestrzennej pamięci roboczej po TBI za pomocą zadania metrycznego. Test metryczny jest przydatnym narzędziem do badania upośledzenia przestrzennej pamięci roboczej po TBI.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Test metryczny do oceny przestrzennej pamięci roboczej u dorosłych szczurów po urazowym uszkodzeniu mózgu
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Zaburzenia pamięci sensorycznej, krótkotrwałej i długotrwałej są częstymi skutkami ubocznymi po urazowym uszkodzeniu mózgu (TBI). Ze względu na ograniczenia etyczne badań na ludziach, modele zwierzęce stanowią odpowiednią alternatywę dla testowych metod leczenia oraz do badania mechanizmów i związanych z nimi powikłań tego schorzenia. Eksperymentalne modele gryzoni były historycznie najczęściej stosowane ze względu na ich dostępność, niski koszt, odtwarzalność i zwalidowane podejścia. Test metryczny, który sprawdza zdolność do przypominania sobie położenia dwóch obiektów w różnych odległościach i pod różnymi kątami od siebie, jest techniką badania upośledzenia przestrzennej pamięci roboczej (SWM) po TBI. Do istotnych zalet zadań metrycznych należy możliwość dynamicznej obserwacji, niski koszt, odtwarzalność, względna łatwość wdrożenia i środowisko o niskim poziomie stresu. W tym miejscu przedstawiamy protokół testu metrycznego do pomiaru upośledzenia SWM u dorosłych szczurów po TBI. Test ten zapewnia realny sposób na skuteczniejszą ocenę fizjologii i patofizjologii funkcji mózgu.
Wprowadzenie
Częstość występowania deficytów neurologicznych, takich jak uwaga, funkcje wykonawcze i niektóre deficyty pamięci po umiarkowanym urazowym uszkodzeniu mózgu (TBI) wynosi ponad 50 procent1,2,3,4,5,6,7,8. TBI może prowadzić do poważnych zaburzeń w pamięci przestrzennej krótkotrwałej, długotrwałej i roboczej9. Te zaburzenia pamięci zaobserwowano w modelach TBI u gryzoni. Modele gryzo....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z zaleceniami Deklaracji Helsińskiej i Tokio oraz Wytycznych dotyczących Użytkowania Zwierząt Doświadczalnych Wspólnoty Europejskiej. Eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komitet Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Ben-Guriona w Negev. Oś czasu protokołu jest zilustrowana na Rysunek 1.
1. Zabiegi chirurgiczne i płynowa terapia TBI
- Wybierz dorosłe samce i samice szczurów Sprague-Dawley, trzymane w temperaturze pokojowej 22 ± 1 °C i wilgotności 40%-60%, z 12-12 godzinnymi cyklami jasno-ciemnymi.
- Dostarczaj jedzenie w postaci karmy i wody ad ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Istotność porównań między grupami określono za pomocą testu Mann-Whitneya. Istotność statystyczną wyników przyjęto przy P < 0.05, natomiast wysoką istotność statystyczną określono przy P < 0.01.
Wyniki nie wykazały różnic w NSS pomiędzy wszystkimi grupami przed interwencją oraz 28 dni po TBI. Każda grupa składała się z 12 samic lub 12 samców szczurów. Wyniki NSS uzyskane 48 h po TBI przedstawiono w Tabeli 1. Szczury z grupy TBI, u których w 28. dniu po urazie stwierdzono.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Koncentrując się w szczególności na procesie informacji przestrzennej metrycznej, ten test metryczny zapewnia niezbędne narzędzie do zrozumienia niedoboru pamięci po TBI. Protokół przedstawiony w niniejszej pracy jest modyfikacją wcześniej opisanych zadań behawioralnych11. W jednym z wcześniej opisanych zadań metrycznych wykorzystano dwa różne paradygmaty, z których każdy składał się z trzech sesji habituacyjnych i jednej sesji testowej. Pierwszy paradygmat polegał na zbliżaniu znajomych obiektów .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Dziękujemy Pani Profesor Ołenie Siewierynowskiej; Maryna Kuscheriawa M.Sc; Maksym Krywonosow M.Sc; Daryna Yakumenko M.Sc; Evgenia Goncharyk M.Sc; oraz Olha Shapoval, doktorantka na Wydziale Fizjologii Wydziału Biologii, Ekologii i Medycyny Uniwersytetu im. Olsa Honczara w Dnieprze na Ukrainie za ich wsparcie i użyteczny wkład. Dane zostały uzyskane w ramach pracy doktorskiej Dmitrija Franka.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 2% chlorheksydyna w 70% roztworze alkoholowym | SIGMA - ALDRICH | 500 cc | Do ogólnego antyseptyku skóry w obszarze operacyjnym |
| Bupiwakaina 0,1 % | |||
| 4 płyty o różnych grubościach (1,5 cm, 2,5 cm, 5 cm i 8,5 cm) | Ma to na celu ocenę wady | ||
| 4-0 Nicz nylonowy | 4-00 | ||
| Butelki | Techniplast | ACBT0262SU | 150 ml wypełnione 100 ml wody i 100 ml 1% (w/v) roztworu sacharozy |
| Butelki (cztery) do zadań | Do przedmiotów użyto dwóch małych butelek, pierwszej okrągłej (wysokość 13,5 cm) i drugiej fasetowanej (wysokość 20 cm) oraz dwóch dużych fasetowanych butelek, pierwszej 9x6 cm (wysokość 21 cm) i drugiej 7x7 cm (wysokość 21 cm). | ||
| Wiertło diamentowe Zestaw | otwornic do szkła | Opcjonalnie. | |
| Cyfrowa waga | SIGMA - Nożyczki | Rs 4,000 | |
| SIGMA - ALDRICH | Z265969 | ||
| Etanol 99,9 % | Apteka | 5%-10% roztwór używany do czyszczenia sprzętu i usuwania zapachów | |
| EthoVision XT (oprogramowanie wideo) | Noldus, Wageningen, Holandia | Opcjonalnie | |
| Urządzenie do płynu udarowego | wykonane na zamówienie w warsztacie | Żadna konkretna marka nie jest zalecana. | |
| Gąbki z gazy | Fisher | 22-362-178 | |
| Rękawice (cienkie rękawice laboratoryjne) | Opcjonalnie. | ||
| Grzałka z termometrem | Heatpad-1 | Model: HEATINGPAD-1/2 | Żadna konkretna marka nie jest zalecana. |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| Isofluran, USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | Płyn znieczulający do inhalacji |
| Office 365 ProPlus | Microsoft-Microsoft | Office Excel | |
| Mikroskop Olympus BX 40 | Olympus | ||
| Operacja kleszcze | SIGMA - ALDRICH | ||
| Operacyjny Nożyczki | SIGMA - Komputer komputerowy ALRICH | ||
| zapisu USV i analizy danych | Intel | Intel® core i5-6500 CPU @ 3,2 GHz, 16 GB RAM, 64-bitowy system operacyjny | |
| Pudełka z pleksi połączone wąskim przejściem | Dwa przezroczyste pudełka z pleksi 30 cm & razy; 20 cm & razy; 20 cm połączone wąskim przejściem 15 cm & czasy; 15 cm & czasy; 60 cm | ||
| Purina Chow | Purina | 5001 | Karma laboratoryjna dla gryzoni podawana szczurom, myszom i chomikom to żywienie cyklu życia, które było stosowane w badaniach biomedycznych dla ponad 5 |
| Klatki dla szczurów (klatka domowa dla szczurów lub inna wybieg) | Techniplast | 2000P | Nie jest zalecana żadna konkretna marka |
| Ostrza skalpela 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| SPSS | SPSS Inc., Chicago, IL, USA | 20 pakietów | |
| Instrument stereotaktyczny | wykonany na zamówienie w warsztacie | Żadna konkretna marka nie jest zalecana | |
| Urządzenie do pomiaru czasu | Timer interwałowy | Opcjonalny. Każdy timer się nada, chociaż wygodnie jest użyć timera interwałowego, jeśli łaskoczesz wiele szczurów | |
| Urządzenie do zadań topologicznych i metrycznych | Wykonane samodzielnie na Uniwersytecie Ben Guriona w Negev | Biała okrągła platforma o średnicy 200 cm i grubości 1 cm na stole Kamera | |
| wideo | Kamera internetowa Logitech | C920 HD PRO | Cyfrowa kamera wideo do nagrywania w wysokiej rozdzielczości zachowania szczurów w ramach testu labiryntu Windows |
| 10 | Firmy Microsoft |
Bibliografia
- Binder, L. M. Persisting symptoms after mild head injury: A review of the postconcussive syndrome. Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 8 (4), 323-346 (1986).
- Binder, L. M. ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
