Method Article

Pirosekwencjonowanie: prosta metoda dokładnego genotypowania

DOI:

10.3791/630

January 8th, 2008

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Piroquencing(R) jest jedną z najdokładniejszych, a jednocześnie najprostszych metod stosowanych do analizy polimorfizmów. Metoda ta doprowadziła do szybkiej i efektywnej oceny polimorfizmu pojedynczego nukleotydu, w tym wielu klinicznie istotnych polimorfizmów. Wyjaśniono technikę i metodologię pirosekwencjonowania.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Badania farmakogenetyczne czerpią korzyści z obfitości informacji dostarczonych przez realizację Projektu Poznania Ludzkiego Genomu. Przy tak ogromnej ilości dostępnych danych następuje eksplozja metod genotypowania. Pirosekwencjonowanie (R) jest jedną z najdokładniejszych, a jednocześnie najprostszych metod stosowanych do tej pory do analizy polimorfizmów. Ma również możliwość identyfikacji polimorfizmów triallelicznych, indeli, krótkich powtórzeń, a także określania procentów alleli do metylacji lub oceny próbki zbiorczej. Ponadto istnieje ustandaryzowana sekwencja kontrolna, która zapewnia wewnętrzną kontrolę jakości. Metoda ta doprowadziła do szybkiej i efektywnej oceny polimorfizmu pojedynczego nukleotydu, w tym wielu klinicznie istotnych polimorfizmów. Wyjaśniono technikę i metodologię pirosekwencjonowania.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kompletny protokół tekstowy dla tego eksperymentalnego podejścia jest dostępny w Protokoły Springera.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

PyrosequencingSNP AnalysisGenotyping MethodDNA MethylationAllele QuantificationPCR PreparationBiotinylated PrimerInternal PrimerNucleotide DispensationLight Detection

Related Articles