Method Article

Zmodyfikowana prosta metoda indukcji zawału mięśnia sercowego u myszy

DOI:

10.3791/63042

⸱

December 3rd, 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, 2Department of Cardiology, Ren Ji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pod odpowiednim znieczuleniem, serce myszy zostało uzewnętrznione przez przestrzeń międzyżebrową, a zawał mięśnia sercowego został skutecznie wywołany przez podwiązanie lewej przedniej tętnicy zstępującej (LAD) przy użyciu materiałów łatwo dostępnych w większości laboratoriów.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zawał mięśnia sercowego (MI) stanowi jedną z głównych przyczyn zgonów. Modele zawału mięśnia sercowego są szeroko stosowane do badania patomechanizmów przebudowy po zawale mięśnia sercowego i oceny nowych metod leczenia. Do wywołania zawału mięśnia sercowego stosowano różne metody (np. leczenie izoproterenolem, kriouraz, podwiązanie tętnic wieńcowych itp.). W porównaniu z leczeniem izoproterenolem i kriouszkodzeniem, podwiązanie tętnicy wieńcowej może lepiej odzwierciedlać odpowiedź niedokrwienną i przewlekłą przebudowę po zawale mięśnia sercowego. Jednak tradycyjne metody podwiązywania naczyń wieńcowych u myszy są technicznie trudne. Obecne badanie opisuje prosty i skuteczny proces indukcji MI u myszy przy użyciu łatwo dostępnych materiałów. Skóra klatki piersiowej myszy została rozcięta w stabilnym znieczuleniu. Serce zostało natychmiast uzewnętrznione przez przestrzeń międzyżebrową po oddzieleniu mięśnia piersiowego większego i piersiowego mniejszego. Lewa przednia gałąź zstępująca (LAD) została podwiązana szwem 6-0 w odległości 3 mm od jej początku. Po podwiązaniu LAD barwienie chlorkiem 2,3,5-trifenylotetrazolu (TTC) wykazało pomyślną indukcję MI i czasowe zmiany wielkości blizny po zawale mięśnia sercowego. Tymczasem wyniki analizy przeżycia wykazały jawną śmiertelność w ciągu 7 dni po zawale serca, głównie z powodu pęknięcia serca. Ponadto ocena echokardiograficzna po zawale mięśnia sercowego wykazała skuteczną indukcję dysfunkcji skurczu i przebudowy komór. Po opanowaniu, model MI można ustalić u myszy w ciągu 2-3 minut przy użyciu łatwo dostępnych materiałów.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zawał mięśnia sercowego (MI) stanowi jedną z najczęstszych przyczyn zgonów i niepełnosprawności na całym świecie1,2,3,4,5. Pomimo szybkiej reperfuzji, obecnie brakuje skutecznych terapii leczenia przebudowy serca po zawale mięśnia sercowego. W związku z tym włożono znaczne wysiłki w celu mechanistycznego zbadania i wykorzystania terapii dla MI6,7,8. Warto zauważyć, że ustanowienie modeli MI jest warunkiem wstępnym ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Eksperymenty z udziałem zwierząt są przeprowadzane za zgodą Komisji Etyki Laboratorium Dobrostanu Zwierząt Szpitala Renji, Uniwersytetu Jiao Tong w Szanghaju, Szkoły Medycznej (R52021-0506). W badaniu wykorzystano samice i samce myszy C57BL/6J w wieku od 8 do 10 tygodni.

1. Przygotowanie uproszczonego sprzętu do znieczulenia (OPCJONALNIE)

UWAGA: Jest to opcjonalna konfiguracja przedoperacyjna i może być zastąpiona znieczuleniem miareczkowym, jak wspomniano w sekcji 2. Przed dostosowaniem tego układu do procedur dotyczących zwierząt należy skonsultować się z instytucjonalną komisją etyczną ds. zwier....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokół eksperymentalny i niektóre z krytycznych kroków są pokazane w Rysunek 1. Uproszczony sprzęt anestezjologiczny indukował znieczulenie. Jak pokazano w Rysunek 2A, znieczulenie indukowane było stabilne, co odzwierciedlały regularne częstości oddechów (wahały się od 90 do 107 oddechów/min u badanych myszy). Po podwiązaniu tętnicy wieńcowej analiza barwienia TTC wykazała pomyślną indukcję zawału mięśnia sercowego i zmiany skroniowe wielkości blizny po zawale mięśnia s.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Niniejszy raport zademonstrował prosty protokół indukcji MI u myszy z łatwo dostępnymi materiałami, który został zmodyfikowany w stosunku do metody opisanej przez Gao16. Mysie modele MI są niezbędne do eksploracji mechanistycznej i badań przesiewowych leków pod kątem dysfunkcji i przebudowy po zawale mięśnia sercowego12. Spośród istniejących technik indukcji zawału mięśnia sercowego podwiązanie tętnic wieńcowych jest najczęściej praktykowane. Podwiązanie tętnicy wieńcowej w.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), Shanghai Outstanding Academic Leaders Program (18XD1402400), Komisji Nauki i Technologii Gminy Shanghai (201409005200), Shanghai Pujiang Talent Program (2020PJD030) oraz China Postdoctoral Science Foundation (2020M671161, BX20190216).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Chlorek 2,3,5-trifenylotetrazoluSIGMAT8877-25GBarwienie TTC
4-0 szew jedwabnyYUANKANG4-0Autoklaw chirurgiczny
HIRAYAMAHVE-50Sterylizacja stałej
buprenorfinyQinghai FACTORY Co., Ltd.H10940181zmniejszyć ból pooperacyjny
Probówka wirówkowaBiological Hope1850-K15ML
Krem do depilacjiZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701Środek do depilacji zwierząt laboratoryjnych
KleszczRWDF12028Instrument chirurgiczny
Filtr gazowyZHAOXINSA-493Ochrona operatora
IzofluranRWD20071302Używany do znieczulenia Źródło
światłaBeijing PDVLG-150BLampa operacyjna
Mikro-komar hemostatFST13011-12Instrument chirurgiczny
Igła BINXIONG42180104Instrument chirurgiczny
Igła i jedwabny szew 6-0JIAHESC086Instrument chirurgiczny
Uchwyt na igłęShangHaiJZJ32030Instrument chirurgiczny
Uchwyt igłyShangHaiJZJ32010Instrument chirurgiczny
Waciki powidonowo-jodoweSingleLadyGB26368-2010Nożyczki do dezynfekcji skóry
CNSTRONGJYJ1030Instrument chirurgiczny
Sterylny krem pod oczyShenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd.H10940177zapobiegają wysuszeniu rogówki
System obrazowania ultrasonograficznego o ultrawysokiej rozdzielczości dla małych zwierzątVisualSonicsVevo 2100Analiza echokardiograficzna

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Myocardial InfarctionCoronary Artery LigationMouse MI ModelVentricular RemodelingTTC StainingPost MI RemodelingContractile DysfunctionEchocardiographic AssessmentCardiac RuptureIntramyocardial Injection

Related Articles