Protokół ten przedstawia praktyczny przewodnik po operacji tworzenia niedomykalności aorty (AR) u myszy. Ocena myszy AR za pomocą echokardiografii i inwazyjnego pomiaru hemodynamicznego podsumowuje jej klinicznie istotne cechy hipertrofii ekscentrycznej wywołanej przeciążeniem objętościowym, co sugeruje jej obiecujące zastosowanie w badaniu przerostu mięśnia sercowego.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Chirurgicznie wywołane przeciążenie objętości serca przez niedomykalność zastawki aortalnej u myszy
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Niedomykalność zastawki aortalnej (AR) jest powszechną chorobą zastawkową serca, która wywiera przeciążenie objętościowe na serce i stanowi globalny problem zdrowia publicznego. Chociaż myszy są szeroko stosowane do rzucania światła na mechanizmy chorób sercowo-naczyniowych, mysie modele AR, zwłaszcza te wywołane przez operację, nadal są rzadkie. W tym przypadku szczegółowo opisano mysi model AR, który jest indukowany chirurgicznie przez przerwanie zastawki aortalnej w echokardiografii o wysokiej rozdzielczości. Zgodnie z zwróconym przepływem krwi, serca myszy AR mają charakterystyczny i klinicznie istotny fenotyp przeciążenia objętościowego, który charakteryzuje się ekscentrycznym przerostem i dysfunkcją serca, o czym świadczy echokardiograficzna i inwazyjna ocena hemodynamiczna. Nasza propozycja, w wiarygodny i powtarzalny sposób, stanowi praktyczny przewodnik po tworzeniu i ocenie mysiego modelu AR dla przyszłych badań nad mechanizmami molekularnymi i celami terapeutycznymi kardiomiopatii przeciążeniowej objętością.
Wprowadzenie
W przypadku zwiększonego przeciążenia objętościowego (obciążenie wstępne) lub przeciążenia ciśnieniowego (obciążenie następcze) serce ulega powiększeniu, stanowi określonemu jako hipertrofia. Chociaż przerost mięśnia sercowego jest reakcją kompensacyjną mającą na celu utrzymanie perfuzji narządów obwodowych przed niewydolnością serca, jest również niezależnym czynnikiem ryzyka poważnych zdarzeń sercowo-naczyniowych 1,2. Przeciążenie objętościowe jest jednym z ważnych przejawów zwiększonego obciążenia mechanicznego. Przeciążenie objętościowe występuje podczas rozkurczu serca i wywołuje ekscentryczny przerost mi....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Protokół ten otrzymał etyczną aprobatę Komitetu ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Szpitala Zhongshan na Uniwersytecie Fudan i jest zgodny z zaleceniami Przewodnika dotyczącego opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych (nr 85-23, poprawiony w 2011 r.; National Institutes of Health, Bethesda, MD, Stany Zjednoczone).
UWAGA: Eksperymenty na zwierzętach przeprowadzono na samcach myszy C57BL/6J w wieku >10 tygodni. Chirurg w tym protokole powinien być zręczny w manipulowaniu echokardiografią myszy, zanim wykona operację AR u myszy. Jednak w większości instytucji badawczych echokardiografia małych gryzoni jest obsługiwana przez podsta....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Aby zagwarantować pomyślne wywołanie niedomykalności zastawki aortalnej (AR), potwierdzono obecność cofającego się przepływu krwi za pomocą echokardiografii z wykorzystaniem kolorowego Dopplera oraz Dopplera falowego. U myszy z AR widmo kolorowego Dopplera w łuku aorty wykazało przepływ wsteczny (kolor czerwony) bezpośrednio po operacji, który nie występował u myszy z grupy sham (brak przepływu w rozkurczu; Rycina 3A). Spójnie z tym, Doppler falowy wykazał wyraźnie zwiększony przepływ wstecz.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Chirurgiczna indukcja AR u myszy jest technicznie trudną, nową techniką, ale ma znaczące znaczenie translacyjne. Aby opanować tę technikę, chirurg powinien przynajmniej wcześniej zapoznać się z mysią anatomią szyjki macicy i serca, obsługą myszy i echokardiografią. Umiejętne działanie w inwazyjnym pomiarze hemodynamicznym jest plusem. Aby operacja AR zakończyła się sukcesem, należy zwrócić szczególną uwagę na kilka krytycznych kroków.
Rozcięcie RCCA jest najważniejszym krokiem. Otwór w RCCA ni.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.
Podziękowania
Praca ta była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (81941002, 82170389, 82170255, 81730009, 81670228 i 81500191), Fundację Nauk o Zwierzętach Laboratoryjnych Komisji Nauki i Technologii Gminy Szanghaj (201409004300 i 21140904400), Projekt Nauki i Technologii o Zdrowiu Komisji Zdrowia Shanghai Pudong New Area (PW2019A-13) oraz Program Doskonałych Młodych Talentów Medycznych "Rising Sun" Szpitala Wschodniego w Szanghaju (2019xrrcjh03).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Blacha miedziana | JD.com Inc. | Dostosowane | Rozmiar 20 X 15 cm lub większy |
| Zakrzywione kleszcze do wiązania | 66 Technologia wizyjna | 53324A | do rozciągania i izolowania mięśni, tkanek i naczyń |
| Poduszka grzewcza | JD.com Inc. | ul. Changzhi 55 | Przy okazji ogrzej miedzianą płytkę i mysz |
| Zakrzywione kleszcze do wiązania z długimi rękami | MECHANICZNY | TS-15 | do rozciągania naczynia |
| Drut metalowy (stal nierdzewna) | JD.com Inc. | Średnica 0,18 mm | Praca z plastikowym cewnikiem do nakłuwania zastawek aortalnych |
| Uchwyt igły | Szanghaj Jinzhong | 131110 | szew skóry |
| Plastikowy cewnik | Oprogramowanie Anilab & Instrumentów | PE-0402 | Pracuj metalowym drutem do nakłuwania zastawek aortalnych |
| Cewnik ciśnieniowy | Instrumenty Millar | Zobacz materiał SPR 835 | Rozmiar 1.4F |
| Urządzenie do akwizycji danych o ciśnieniu i przetwornik analogowo-cyfrowy | Instrumenty AD | Wykres laboratoryjny 5 | połączony z cewnikiem ciśnieniowym |
| Nożyczek | Suzhou Shiqiang | Mocniejszy 13Cr | do cięcia skóry |
| Nożyczki do małych szczypiec | Szanghaj Jinzhong | YBE030 powiedział: | do cięcia naczynia |
| Mikroskop stereoskopowy | Korporacja Olympus | Zobacz materiał SMZ845 | do nacinania i intubacji naczynia |
| Proste kleszcze do wiązania | 66 Technologia wizyjna | 53320A | do rozciągania i izolowania mięśni, tkanek i naczyń |
| Detergent enzymatyczny Tergazyme | Alconox, Inc. | 13051.0 | Usuwa materiały białkowe, tkanki i krew z cewnika |
| Kleszcze do kciuków | Suzhou Shiqiang | 5307 mld | do zaciskania i rozciągania skóry i mięśni |
| Żel do ultradźwięków | PARKER | Aquasonic-100 powiedział: | do przesyłania sygnału ultradźwiękowego |
| System obrazowania ultrasonograficznego | Technologia VisualSonics | 2100 | obejmuje tryb B, model M, kolorowy Doppler i Dopper z falą pulsacyjną |
| Odparowalnik | RWD Nauki przyrodnicze | Czynnik R540 | do znieczulenia |
Bibliografia
- You, J., et al. Differential cardiac hypertrophy and signaling pathways in pressure versus volume overload. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 314 (3), 552-562 (2018).
- Wu, J., et al.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
