W tym badaniu, zachowanie podobne do zespołu stresu pourazowego (PTSD) jest wywoływane u myszy za pomocą dwóch sesji nieuniknionego elektrycznego wstrząsu stopy. Zwierzęta podobne do PTSD i odporne są identyfikowane za pomocą kilku testów na zachowania specyficzne dla PTSD.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Protokół indukcji zachowania podobnego do zespołu stresu pourazowego (PTSD) u myszy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Zespół stresu pourazowego (PTSD) jest wyniszczającym stanem psychicznym, który występuje u ~10% osób narażonych na traumatyczne wydarzenie (TE). Objawy obejmują nawracające i natrętne myśli, zaburzenia snu, nadmierną czujność, przesadne zaskoczenie oraz lekkomyślne lub destrukcyjne zachowanie. Biorąc pod uwagę złożoną i niejednorodną naturę choroby, modele zwierzęce symptomatologii podobnej do PTSD cieszą się rosnącym zainteresowaniem w dziedzinie badań nad PTSD. Ponieważ odporność na symptomatologię podobną do PTSD jest ważnym aspektem epidemiologicznym PTSD, modele zwierzęce, które rozwiązują problem wrażliwych i odpornych zwierząt, mają szczególną wartość. Ze względu na złożoną naturę fenotypu PTSD i potencjalne nakładanie się zachowań podobnych do PTSD i zachowań związanych z innymi psychopatologiami wywołanymi stresem, takimi jak lęk lub depresja, modele zwierzęce, które wykorzystują wiele odczytów dla zachowań podobnych do PTSD, mają również rosnącą wartość. Wykorzystujemy paradygmat opracowany przez Lebow i in. 2012 do indukcji i identyfikacji symptomatologii podobnej do PTSD u myszy. Paradygmat ten wykorzystuje nieunikniony elektryczny wstrząs stopy, podawany w dwóch wyrwanych z kontekstu sesjach przez dwa kolejne dni. Zestresowane myszy wykonują cztery testy behawioralne - przenoszenie ciemności / światła, zakopywanie marmuru, akustyczne przerażenie i aktywność klatki domowej - aby wygenerować pięć odczytów behawioralnych zachowań podobnych do PTSD: % oceny ryzyka (%RA), % zakopanych kulek (%MB), % hamowania przedimpulsowego (%PPI), opóźnienie do szczytowej amplitudy przerażenia (LPSA) i % aktywności fazy światła (%LPA). Symptomatologia podobna do PTSD charakteryzuje się zmniejszonym %RZS, zwiększonym %MB, zmniejszonym %PPI, zmniejszonym LPSA i zwiększonym %LPA. 20% zwierząt wykazujących najwięcej zachowań podobnych do PTSD w każdym teście otrzymuje określoną liczbę punktów w zależności od testu, a zwierzęta, które uzyskały wystarczającą liczbę punktów, są oznaczone jako podobne do PTSD, podczas gdy zwierzęta, które nie zdobyły żadnych punktów, są oznaczone jako odporne na PTSD. Ten paradygmat identyfikuje zachowanie podobne do PTSD u ~15% zwierząt, wskaźnik porównywalny do obserwowanego u ludzi. Protokół ten stanowi solidny i powtarzalny paradygmat indukcji zachowań podobnych do PTSD u myszy.
Wprowadzenie
Zespół stresu pourazowego (PTSD) jest wyniszczającą psychopatologią, która może przyspieszyć u osób, które były narażone na traumatyczne wydarzenie (TE)1. Zgodnie z DSM-V, narażenie na TE może przybierać różne formy, w tym bezpośrednie lub powtarzające się pośrednie narażenie na rzeczywiste lub domniemane zagrożenie śmiercią, uszkodzeniem ciała lub przemocą seksualną wobec siebie lub innej osoby2. Symptomatologia PTSD charakteryzuje się natrętnymi negatywnymi myślami i wspomnieniami, nadmiernym pobudzeniem, nadmierną czujnością, zwiększonymi zachowaniami ryzykownymi i zakłóconymi cyklami snu3. Roz....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie opisane tutaj procedury są zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (IACUC) w Mayo Clinic.
1. Zwierzęta i pomieszczenia
- Trzymanie 10-tygodniowych samców myszy C57BL/6J w klatkach 4 do klatki w standardowych warunkach inwentarskich (standardowa klatka z mikroizolatorem, temperatura pokojowa 70 °F (RT), jedzenie i woda ad libitum, 12 godzin/12 godzin cyklu światła/ciemności).
2. Indukcja PTSD
- Sesja traumatyczna
- Przygotuj sprzęt i komorę kondycjonowania strachu.
- Zaprogramu....
- Przygotuj sprzęt i komorę kondycjonowania strachu.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Oczekujemy, że zwierzęta wykazujące zachowania przypominające PTSD będą równomiernie rozłożone we wszystkich kohortach w każdym teście behawioralnym. Koncentracja zwierząt z objawami przypominającymi PTSD w jednej kohorcie może wskazywać na artefakty wprowadzone podczas indukcji PTSD lub testów behawioralnych. Zwierzęta zdobywające punkty w każdym odczycie behawioralnym są równomiernie rozłożone we wszystkich badanych kohortach (Rysunek 2). 7 z 48 zwierząt (14,6%) poddanych paradygmatowi ind.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
PTSD jest złożoną i niejednorodną chorobą psychiczną. Niestety, obecnie nie ma wiarygodnego modelu zwierzęcego dla zachowań podobnych do PTSD, a paradygmaty behawioralne dla indukcji zachowań podobnych do PTSD są najbardziej wiarygodnymi sposobami generowania zwierząt wykazujących fenotyp behawioralny podobny do PTSD. Opisany tutaj paradygmat zapewnia solidny i niezawodny sposób na wywołanie fenotypu behawioralnego podobnego do PTSD ze względu na zastosowanie ostrej traumy w celu przyspieszenia zachowania podobnego do PT.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Żaden z autorów nie ma żadnych konfliktów do ujawnienia.
Podziękowania
Ta praca była możliwa dzięki hojności Fundacji Hayward i rodziny Marriot. Chcielibyśmy również wyrazić uznanie dla ciężkiej pracy i wiedzy specjalistycznej komitetów IACUC i Wydziałów Medycyny Porównawczej Uniwersytetu Tulane i Mayo Clinic, a także Ośrodka Badań Behawioralnych Gryzoni Mayo Clinic.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Kwas octowy, lodowaty | Sigma Aldrich | AX0073 | |
| Benchtop Balance | Fisher Scientific | 01-913-925 | |
| Pakiet do zbierania danych Clocklab | Actimetrics-Home | ||
| Deciblemeter | |||
| Oprogramowanie Ethovision XT14 | Oprogramowanie do śledzenia ruchu | Noldus-Movement | |
| Alkohol etylowy | Sigma Aldrich | 443611 | |
| Jasne/ciemne pudełko | Noldus-Jasna | /ciemna skrzynka rozdzielcza | |
| Miernik | |||
| Monochromatyczna kamera GigE | Noldus-Wymaga | sprzętu do montażu na suficie Dostępne w Noldus | |
| NIR Video Fear Conditioning Package dla myszy [Standard, USB] | Med Associates | MED-VFC2-USB-M | Sprzęt i komora kondycjonująca strach. Pakiet zawiera cały sprzęt potrzebny do oznaczania 1 zwierzęcia na raz. |
| Butelka z rozpylaczem | Thermo Scientific | BirA500 | |
| SR LAB Software | San Diego Instruments-Oprogramowanie | do reagowania na przestraszenie | |
| SR LAB Startle Response Unit | San Diego Instruments-Akustyczna | jednostka przestraszenia | |
| Wideo Fear Coniditioning "Video Freeze | Oprogramowanie Med Associates | SOF-843 | Oprogramowanie do kondycjonowania strachu |
| Biały szum maszyna | Med Associates | ENV-230 |
Bibliografia
- Yehuda, R., et al. Post-traumatic stress disorder. Nature Reviews Disease Primers. 1 (1), 15057(2015).
- Flory, J. D., Yehuda, R. Comorbidity between post-traumatic stress disorder and major depressive d....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
