Artykuł metodologiczny

Analiza płynu maziowego w celu identyfikacji choroby zwyrodnieniowej stawów

DOI:

10.3791/64351

⸱

20 października 2022

 ,  ,  , 
1Rheumatology Unit, Department of Medicine-DIMED, University of Padova

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Analiza płynu maziowego pod mikroskopią światła transmitowanego, spolaryzowanego i kompensowanego służy do oceny zapalnej lub niezapalnej natury próbki za pomocą prostych kroków. Jest szczególnie przydatny w chorobie zwyrodnieniowej stawów do wykrywania kryształów wapnia i identyfikacji poważniejszej podgrupy choroby zwyrodnieniowej stawów.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Analiza płynu maziowego (SF) jest ważna w diagnozowaniu choroby zwyrodnieniowej stawów (OA). Cechy makroskopowe i mikroskopowe, w tym całkowita i różnicowa liczba białych krwinek (WBC), pomagają określić niezapalny charakter SF, który jest cechą charakterystyczną choroby zwyrodnieniowej stawów. U pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów krwinki białe w próbkach SF zwykle nie przekraczają 2000 komórek na mikrolitr, a odsetek komórek zapalnych, takich jak neutrofile, jest bardzo niski lub nie ma go wcale. Kryształy wapnia są częste w SF pobranym od pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów. Chociaż ich rola w patogenezie choroby zwyrodnieniowej stawów pozostaje niejasna, wiąże się one z łagodnym procesem zapalnym i cięższym postępem choroby. Ostatnio kryształy wapnia zostały opisane zarówno we wczesnym, jak i późnym stadium choroby zwyrodnieniowej stawów, co wskazuje, że mogą odgrywać istotną rolę w diagnozowaniu różnych podgrup klinicznych choroby zwyrodnieniowej stawów i leczeniu farmakologicznym. Ogólny cel analizy SF w chorobie zwyrodnieniowej stawów jest dwojaki: ustalenie stopnia niezapalnego SF i podkreślenie obecności kryształów wapnia.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Choroba zwyrodnieniowa stawów (OA) jest złożoną i wieloczynnikową przewlekłą chorobą stawów, której łączna częstość występowania wynosi 16% u osób w wieku 15 lat i starszych, oraz 23% u osób w wieku 40 lat i starszych1. Oczekuje się, że częstość występowania choroby zwyrodnieniowej stawów wzrośnie ze względu na starzenie się populacji i wzrost czynników ryzyka, takich jak otyłość i zespół metaboliczny2.

Wśród głównych problemów związanych z chorobą zwyrodnieniową stawów są trudności w diagnozowaniu choroby we wczesnych stadiach oraz obecnie dostępne metody leczenia ograniczone do leczenia bólu i objawowych leków wolno działających (SYSADOA), takich jak glikozaminoglikany. Rozpoznanie choroby zwyrodnieniowej stawów opiera się na objawach klinicznych i wynikach badań obrazowych. Jednak brak korelacji między tymi dwiema ocenami może powodować wieloletnie opóźnienia w diagnozie choroby zwyrodnieniowej stawów i rozpoczęciu leczenia2. Choroba zwyrodnieniowa stawów charakteryzuje się procesami zwyrodnieniowymi i stanem zapalnym o niskim stopniu nasilenia, które można łatwo zbadać za pomocą analizy płynu maziowego (SF). SF to lepki dialilat plazmatyczny bogaty w kwas hialuronowy, który smaruje przestrzeń stawową, dostarcza składniki odżywcze i tlen do chrząstki oraz usuwa odpady metaboliczne. SF działa również jako amortyzator, chroniąc w ten sposób stawy podczas naprężeń i naprężeń3.

Analiza SF to prosta i niezawodna metoda, która zawsze musi być wykonywana podczas wstępnej oceny pacjentów z objawami mięśniowo-szkieletowymi i wysiękami w stawach3. Zalecenia American College of Rheumatology, British Society for Rheumatology i innych obejmują analizę SF wśród badań diagnostycznych chorób reumatycznych, które muszą być wykonywane głównie w ocenie ostrego zapalenia stawów jednostawowych4,5. Całkowita i różnicowa liczba leukocytów uzyskana z analizy SF daje obraz procesu patologicznego zachodzącego w stawie, klasyfikując w ten sposób stopień zapalenia. Identyfikacja kryształów chorobotwórczych, takich jak moczan sodu (MSU) i kryształy pirofosforanu wapnia (CPP), w świetle spolaryzowanym, ma kluczowe znaczenie w diagnostyce i leczeniu krystalicznego zapalenia stawów (np. dny moczanowej i dny rzekomej). Ponadto obecność mikroorganizmów sugeruje rozpoznanie septycznego zapalenia stawów.

Kryształy wapnia są częste w próbkach pobranych od pacjentów z OA6. Zasadowe kryształy fosforanu wapnia (BCP) i CPP stwierdzono odpowiednio w około 22% i 23% próbek SF od pacjentów z OA6. Chociaż ich rola pozostaje niejasna, kryształy te są związane z cięższymi postaciami OA7 i są uważane za epifenomen samego procesu patologicznego. Kryształy wapnia wykryto w 100% próbek tkanek pobranych od pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów kolanowych poddawanych endoprotezoplastyce8. Ponadto wysunięto hipotezę, że kryształy wapnia mogą być zaangażowane w patogenezę choroby zwyrodnieniowej stawów ze względu na ich działanie zapalne, wykazane w kilku badaniach9 i pośredniczone, przynajmniej częściowo, przez inflammasom NLRP310.

Ostatnio kryształy wapnia zostały opisane zarówno we wczesnych, jak i późnych stadiach6 choroby zwyrodnieniowej stawów, co wskazuje, że mogą one odgrywać istotną rolę w diagnozowaniu różnych podgrup klinicznych choroby zwyrodnieniowej stawów i leczenia farmakologicznego.

Ogólny cel analizy SF jest dwojaki: określenie stopnia zapalnego SF oraz zdiagnozowanie krystalicznego lub septycznego zapalenia stawów poprzez identyfikację konkretnych kryształów lub mikroorganizmów. Jest to szczególnie przydatne, proste i niezawodne narzędzie w diagnozowaniu choroby zwyrodnieniowej stawów, ze względu na typowy niezapalny wzór z bardzo niskim procentem lub brakiem neutrofili.

Zalety w porównaniu z alternatywnymi technikami
Analiza SF składa się z prostych procedur, które obejmują całkowitą i różnicową liczbę leukocytów oraz wyszukiwanie kryształów. Ręczne zliczanie komórek wykonywane przez doświadczonych techników laboratoryjnych3,11 pozostaje złotym standardem w analizie cytologicznej mazi stawowej i innych płynów ustrojowych. Jednak ze względu na czasochłonne ograniczenie oraz zmienność między i wewnątrz obserwatorów tej metody, automatyczne liczenie komórek stopniowo zastępowało ręczne liczenie w dużych rutynowych laboratoriach klinicznych, w których analizatory krwi i moczu zostały przystosowane do umożliwienia analizy SF11,12. Niemniej jednak ręczne liczenie ma pewne zalety w określonych ustawieniach: (1) w ambulatorium, aby uzyskać całkowitą i różnicową wartość WBC na czas; (2) w celu identyfikacji typów komórek, takich jak jednojądrzaste komórki cytofagocytarne (Reiter) lub komórki niehematopoetyczne, takie jak synowiocyty, których automatyczne liczniki nie są w stanie rozpoznać; (3) gdy próbka jest zbyt mała, aby mogła być obsługiwana przez przyrząd; (4) Tworzenie lokalnych rejestrów laboratoryjnych, które są łatwo dostępne dla celów badawczych. Kolejną zaletą ręcznego liczenia jest barwienie insupravital, czyli metoda, która pozwala na bardzo szybkie różnicowanie komórek i natychmiast po przygotowaniu szkiełek podstawowych. Natomiast tradycyjne barwienia, takie jak procedury Wrighta i Maya-Grünwalda-Giemsy, wymagają suszenia na powietrzu rozmazów SF i czasu na barwienie komórek13. Chociaż nie nadają się do rutynowych analiz, w których liczy się czas, te metody barwienia ujawniają bardziej szczegółowe populacje komórek w próbce, w tym erytrocyty, bazofile, eozynofile, leukocyty wielojądrzaste, limfocyty i płytki krwi.

Na koniec, rutynowa analiza SF dla kryształów jest wykonywana przy użyciu prostej techniki opartej na mikroskopii światła spolaryzowanego, która zapewnia szybkie wyniki14. Metody alternatywne, takie jak mikroskopia skaningowa i elektronowa, dają dokładniejsze i bardziej czułe wyniki, ale ich zastosowanie w codziennej praktyce klinicznej nie jest możliwe ze względu na wysokie koszty oraz czasochłonne przygotowanie i analizę próbek.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Niniejszy protokół jest zgodny z wytycznymi Komisji Etyki Szpitala Uniwersyteckiego w Padwie. SF pobrano za zgodą pacjenta ze stawów kolanowych pacjentów otrzymujących terapeutyczną artrocentezę z powodu wysięku stawowego podczas ich pierwszej prezentacji w klinice lub w odpowiedzi na zaostrzenie choroby zwyrodnieniowej stawów. Przeciwwskazaniami do zabiegu były: koagulopatia, leki przeciwzakrzepowe, zmiany skórne, zapalenie skóry, czy cellulit nad stawem. Wszystkie próbki SF zostały pozbawione elementów pozwalających na identyfikację.

1. Przygotowanie płynu maziowego

  1. Przenieś próbki SF pobrane podczas artrocentezy obrzękniętych stawów15 do probówki zawierającej antykoagulant (najlepiej EDTA; patrz Tabela Materiałów) i do drugiej probówki niezawierającej dodatku (Rysunek 1).
  2. W przypadku podejrzenia zakażenia należy aseptycznie przenieść część próbki SF (~ 1 ml) do butelek hodowlanych w celu przeprowadzenia badań mikrobiologicznych.
    UWAGA: Zakażenie można podejrzewać zarówno w wyniku objawów klinicznych (ciężki guz, dolor, calor, functio laesa, a czasami gorączka), jak i makroskopowego wyglądu SF (zmętnienie, kolor). W takim przypadku lekarz przepisuje analizę mikrobiologiczną, która jest wykonywana przez laboratorium mikrobiologiczne.
  3. Przeprowadzić analizę SF (kroki 2-5) zaraz po pobraniu próbki.

2. Badanie makroskopowe

UWAGA: Makroskopowa ocena próbek SF składa się z ocen subiektywnych, jakościowych i półilościowych. Nie ma wzorcowych wag odniesienia i nie stosuje się próbek kontrolnych.

  1. Opisz objętość SF wyrażoną w mililitrach. Określ kolor próbki, który może wahać się od bladego do ciemnożółtego. Rejestruj obecność krwi.
  2. Zdefiniuj stopień przejrzystości, obserwując próbkę w podświetleniu i określając łatwość odczytania wydrukowanej strony przez rurkę z płynem (Rysunek 2A).
  3. Ocenić lepkość, wlewając próbkę z jednorazowej pipety. Długa formacja struny lub kropli wskazuje odpowiednio na dobrą lub słabą lepkość (Rysunek 2B).
  4. Ocenić obecność materiałów w postaci cząstek stałych, w tym fragmentów tkanek lub fibryny, obserwując próbkę przez rurkę i w świetle podświetlenia.

3. Badanie mikroskopowe

UWAGA: Analiza mikroskopowa SF składa się z badania cytologicznego, w tym całkowitej i różnicowej liczby białych krwinek (WBC) oraz poszukiwania kryształów.

  1. Określ łączną liczbę komórek, wykonując poniższe czynności.
    1. Określić całkowitą liczbę leukocytów w SF zebranych w probówce EDTA za pomocą hemocytometru (patrz tabela materiałów).
    2. Pobrać 0,5 μl SF z probówki EDTA za pomocą pipety Malassez-Potain (oznaczenie 0,5; patrz tabela materiałów) (rysunek uzupełniający 1). Tą samą pipetą pobierz 9,5 μl 0,1% roztworu błękitu metylenowego (znak 11). Końcowe rozcieńczenie jest 20-krotne.
    3. Wymieszaj pipetę przez delikatne odwrócenie, wyrzuć pierwsze krople i wlej płyn maziowy + roztwór błękitu metylenowego do komory liczącej.
    4. Policz komórki w dwóch kolejnych kwadratach z dziewięciu i pomnóż otrzymaną liczbę przez 100 (uproszczona formuła; Rysunek uzupełniający 2). Wyraź WBC jako liczbę leukocytów na milimetr sześcienny.
      UWAGA: Uproszczona formuła: Leukocyty (N/mm3) = liczba zliczonych komórek w dwóch kolejnych kwadratach x 100.
    5. Sklasyfikuj SF zgodnie z całkowitą liczbą WBC zgodnie z wcześniej opublikowanymi raportami16,17 (Tabela 1).
  2. Wykonaj różnicowe zliczanie komórek.
    1. Określ procent komórek wielojądrzastych (PMN), monocytów i limfocytów za pomocą barwienia supravitalnego lub tradycyjnego13,18.
    2. W przypadku barwienia supravital umieść jedną małą kroplę SF na środku gotowego do użycia szkiełka wstępnie pokrytego fioletem krezylowym i błękitem metylenowym (rysunek uzupełniający 3; patrz tabela materiałów).
    3. Przykryj szkiełkiem nakrywkowym i umieść kroplę olejku immersyjnego do mikroskopu.
    4. Przygotuj wysuszony na powietrzu rozmaz SF do tradycyjnego barwienia (mniej odpowiedni do rutynowej analizy). Umieść małą kroplę SF na końcu czystego slajdu. Za pomocą drugiego szkiełka lub szkiełka nakrywkowego rozprowadź go wzdłuż szkiełka ruchem do przodu. Pozostaw rozmaz do wyschnięcia.
    5. Wybarwić próbkę zgodnie ze standardową procedurą May-Grünwald-Giemsa18.
    6. Przyjrzyj się szkiełku pod obiektywem zanurzającym w oleju (1,000x).
    7. Policz 100 kolejnych komórek i rozróżnij komórki wielojądrzaste, monocyty i limfocyty (Rysunek 3, Rysunek uzupełniający 4).
    8. Wyraż całkowitą liczbę w każdej kategorii w procentach.
      UWAGA: Aby uzyskać dokładne wyniki, badania cytologiczne należy wykonać zaraz po pobraniu SF lub w ciągu 24-48 godzin od artrocentezy, jeśli są prawidłowo przechowywane (4 °C).

4. Wykrywanie kryształów

  1. Określ obecność patologicznych kryształów za pomocą mikroskopu światła spolaryzowanego wyposażonego w dodatkowy filtr polaryzacyjny i czerwony kompensator19 (patrz Tabela materiałów).
  2. Wykonaj przygotowanie szkiełek do wykrywania kryształów.
    1. Ostrożnie wyczyść szkiełko papierem optycznym lub miękkim papierem nasączonym etanolem. Nałóż niewielką kroplę SF na szklane szkiełko.
    2. Przykryj szkiełkiem nakrywkowym i umieść szkiełko pod mikroskopem.
  3. Zidentyfikuj kryształy.
    1. Ustaw ostrość szkiełka pod mikroskopem za pomocą obiektywu powiększającego o małej mocy. Dokładnie przyjrzyj się szkiełku w jasnym polu za pomocą obiektywu 40x. Zajrzyj do środka i na zewnątrz komórek.
    2. Zidentyfikuj kryształy według ich wielkości i kształtu (np. romboidalne, w kształcie igły, w kształcie pręcika).
    3. Włóż filtr polaryzacyjny między źródło światła a próbkę. Obróć polaryzator, aż jego oś optyczna będzie prostopadła do analizatora (umieszczonego nad obiektywami), aby utworzyć ciemne tło.
    4. Po zidentyfikowaniu kryształu dwójłomnego włóż kompensator między polaryzator a próbkę i przesuń go równolegle lub prostopadle do osi optycznej kryształu.
    5. Obserwuj kolor ujawniony przez kryształ (Tabela 2).
      UWAGA: Kryształy MSU mają kształt igły, są jasno dwójłomne w ciemnym polu i mają żółto-pomarańczowy kolor, gdy ich oś jest równoległa do kompensatora. I odwrotnie, są niebieskie, gdy są ustawione prostopadle (znak ujemny) (tabela 2; Rysunek 4). Kryształy CPP są kryształami podobnymi do prętów lub rombów, słabo dwójłomnymi w świetle spolaryzowanym i mają kolor niebieski lub żółty, gdy są ustawione równolegle lub prostopadle do osi kompensatora (znak dodatni) odpowiednio (tabela 2; Rysunek 5).

5. Czerwone zabarwienie alizaryny

  1. Przygotować 2% roztwór czerwieni alizarynowej S (pH 4,1-4,3), przefiltrować roztwór przez filtr 0,22 μm i przechowywać z dala od światła.
    1. W celu przygotowania szkiełka należy zmieszać kroplę SF z tą samą objętością roztworu czerwieni alizarynowej (1:1) na czystym szkiełku. Przykryj szkiełkiem nakrywkowym i obejrzyj w powiększeniu 400x.
    2. Zidentyfikuj kryształy pod mikroskopem.
      UWAGA: Test jest pozytywny, gdy w świetle przechodzącym widoczne są jasne, ciemnoczerwone osady o okrągłym kształcie i koncentrycznych warstwach. W świetle spolaryzowanym wydają się one silnie dwójłomne20 (Rysunek 6).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Duże stawy dotknięte chorobą zwyrodnieniową stawów są często spuchnięte i wytwarzają znaczne ilości SF, które są odprowadzane przez artrocentezę15. Makroskopowe cechy SF oceniane bezpośrednio po artrocentezie obejmują zasadniczo ilość, kolor, klarowność i lepkość17. Mimo niskiej swoistości dostarczają wstępnych danych na temat stopnia zapalenia. Kolor zależy od komórkowości SF i stopnia rozdrobnienia makrocząsteczek macierzy zewnątrzkomórkowej. SF pobrany od pacjen...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W chorobie zwyrodnieniowej stawów analiza SF pomaga zdefiniować charakterystykę choroby poprzez proste kroki: całkowitą i różnicową liczbę leukocytów oraz poszukiwanie kryształów, w tym CPP i BCP. Co więcej, wykrycie kryształów MSU może uwidocznić ważne choroby współistniejące.

Pomimo niskich kosztów i prostego wykonania, na czułość testów i wiarygodność wyników mogą mieć wpływ niedoświadczeni analitycy - głównie w odniesieniu do identyfikacji kryształów. Wykształcenie i doświadczenie analityk...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszyscy autorzy nie ujawniają konfliktu interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy pragną podziękować profesorowi Leonardo Punzi za jego cenne mentorstwo w dziedzinie analizy płynu maziowego oraz Szpitalowi Uniwersyteckiemu w Padwie za wsparcie.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Alizaryna czerwona SMerckA5533Do wyszukiwania kryształów BCP
Komora BurkeraMerckBR718905Do całkowitej liczby białych krwinek
Okulary ochronneMerckC7931Do badania mikroskopowego 
Rurki EDTABD368861Do kolekcji SF 
Szkiełka szklane MerckS8902Do wyszukiwania kryształów
Filtr lambda (kompensator)Dowolny Skontaktuj się z firmą zajmującąmikroskopami w celu identyfikacji kryształów 
Pipeta Malassez-PotainArtiglass54830000Do rozcieńczania płynu maziowego
Roztwór błękitu metylenowegoMerck3978Do całkowitej liczby białych krwinek
Mikroskop spolaryzowany Leica, Nikon, inneW zależności od modelu i firmyDo pełnej analizy płynu maziowego
Soczewka polaryzacyjnaDowolna Skontaktuj się z firmą zajmującąmikroskopami w celu identyfikacji kryształów 
Testsimplet Waldeck14386Barwienie Supravital do różnicowania komórek
się się

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cui, A., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29, 100587(2020).
  2. Hunter, D. J., Bierma-Zeinstra, S. Osteoarthritis. Lancet. 393 (10182), 1745-1759 (2019).
  3. Mandell, B. F. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , Springer. Cham. (2022).
  4. Schmerling, R. H. Guidelines for the initial evaluation of the adult patient with acute musculoskeletal symptoms. Arthritis & Rheumatism. 39 (1), 1-8 (1996).
  5. Coakley, G., et al. RCGP and BSAC guidelines for management of the hot swollen joint in adults. Rheumatology. 45 (8), 1039-1041 (2006).
  6. Frallonardo, P., et al. Basic calcium phosphate and pyrophosphate crystals in early and late osteoarthritis: relationship with clinical indices and inflammation. Clinical Rheumatology. 37 (10), 2847-2853 (2018).
  7. Nalbant, S., et al. Synovial fluid features and their relations to osteoarthritis severity: new findings from sequential studies. Osteoarthritis Cartilage. 11 (1), 50-54 (2003).
  8. Fuerst, M., et al. Calcification of articular cartilage in human osteoarthritis. Arthritis & Rheumatism. 60 (9), 2694-2703 (2009).
  9. Campillo-Gimenez, L., et al. Inflammatory potential of four different phases of calcium pyrophosphate relies on NF-κB activation and MAPK pathways. Frontiers in Immunology. 9, 2248(2018).
  10. Pazár, B. Basic calcium phosphate crystals induce monocyte/macrophage IL-1β secretion through the NLRP3 inflammasome in vitro. The Journal of Immunology. 186 (4), 2495-2502 (2011).
  11. Martín, M. J. A., et al. Automated cell count in body fluids: a review. Advances in Laboratory Medicine. 2, 149-161 (2021).
  12. Seghezzi,, et al. Optimization of cellular analysis of synovial fluids by optical microscopy and automated count using the Sysmex XN body fluid mode. Clinica Chimica Acta. 462, 41-48 (2016).
  13. Reginato, A. J., Maldonado, I., Reginato, A. M., Falasca, G. F., O'Connor, C. R. Supravital staining of synovial fluid with Testsimplets. Diagnostic Cytopathology. 8 (2), 147-152 (1992).
  14. Lumbreras, B., et al. Analysis for crystals in synovial fluid: training of the analysts results in high consistency. Annals of the Rheumatic Diseases. 64 (4), 612-615 (2005).
  15. Tieng, A., Franchin, G. Knee arthrocentesis in adults. Journal of Visualized Experiments. , e63135(2022).
  16. Punzi, L., Oliviero, F. Arthrocentesis and synovial fluid analysis in clinical practice: value of sonography in difficult cases. Annals of the New York Academy of Sciences. 1154 (1), 152-158 (2009).
  17. Schumacher, H. R., Reginato, A. J. Atlas of Synovial Fluid Analysis and Crystal Identification. , Lea & Febiger. Philadelphia. (1991).
  18. Mopin, A., Driss, V., Brinster, C. A. Detailed protocol for characterizing the murine C1498 cell line and its associated leukemia mouse model. Journal of Visualized Experiments. (116), e54270(2016).
  19. Oliviero, F., Punzi, L. Basics of Polarized Light Microscopy. Synovial Fluid Analysis and the Evaluation of Patients with Arthritis. , Springer. Cham. 79-90 (2022).
  20. Paul, H., Reginato, A. J., Schumacher, H. R. Alizarin red S staining as a screening test to detect calcium compounds in synovial fluid. Arthritis & Rheumatism. 26 (2), 191-200 (1983).
  21. Favero, M., et al. Synovial fluid fetuin-A levels in patients affected by osteoarthritis with or without evidence of calcium crystals. Rheumatology. 58 (4), 729-730 (2019).
  22. Frallonardo, P., et al. Detection of calcium crystals in knee osteoarthritis synovial fluid: a comparison between polarized light and scanning electron microscopy. Journal of Clinical Rheumatology. 22 (7), 369-371 (2016).
  23. Peffers, M. J., Smagul, A., Anderson, J. R. Proteomic analysis of synovial fluid: current and potential uses to improve clinical outcomes. Expert Review of Proteomics. 16 (4), 287-302 (2019).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Diagnostyka choroby zwyrodnieniowej staw wliczba bia ych krwinekkryszta y wapniarozmaz r nicowy krwinekartrocentezabarwienie alizaryn czerwonmikroskopia w wietle spolaryzowanympodstawowy fosforan wapniacytokiny zapalne

Powiązane artykuły