Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Model zwierzęcy danio pręgowanego do badania reakcji alergicznych w odpowiedzi na biomolekuły śliny kleszczy

1.9K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/64378

⸱

16 września 2022

 ,  , 
1SaBio. Instituto de Investigación en Recursos Cinegéticos IREC (CSIC-UCLM-JCCM), 2Department of Veterinary Pathobiology, College of Veterinary Medicine, Oklahoma State University

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj danio pręgowany (Danio rerio) jest używany jako model do badania reakcji alergicznych i odpowiedzi immunologicznych związanych z zespołem alfa-Gal (AGS) poprzez ocenę reakcji alergicznych na ślinę kleszczy i spożycie mięsa ssaków.

Streszczenie

Kleszcze to wektory stawonogów, które wywołują chorobę poprzez przenoszenie patogenów i których ukąszenia mogą być związane z reakcjami alergicznymi wpływającymi na zdrowie ludzi na całym świecie. U niektórych osób wysoki poziom przeciwciał immunoglobuliny E przeciwko glikanowi Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R (α-Gal) został wywołany przez ukąszenia kleszczy. Reakcje anafilaktyczne, w których pośredniczą glikoproteiny i glikolipidy zawierające glikan α-Gal, obecny w ślinie kleszczy, są związane z zespołem alfa-Gal (AGS) lub alergią na mięso ssaków. Danio pręgowany (Danio rerio) stał się szeroko stosowanym modelem kręgowców do badania różnych patologii. W tym badaniu danio pręgowany został wykorzystany jako model do badania reakcji alergicznych w odpowiedzi na spożycie α-Gal i mięsa ssaków, ponieważ, podobnie jak ludzie, nie syntetyzują one tego glikanu. W tym celu oceniono wzorce zachowań i krwotoczne reakcje alergiczne typu anafilaktycznego w odpowiedzi na ślinę kleszcza Ixodes ricinus i spożycie mięsa ssaków. To eksperymentalne podejście pozwala na uzyskanie ważnych danych, które wspierają model zwierzęcy danio pręgowanego do badania alergii przenoszonych przez kleszcze, w tym AGS.

Wprowadzenie

Kleszcze są wektorami patogenów, które wywołują choroby, a także są przyczyną reakcji alergicznych, wpływając na zdrowie ludzi i zwierząt na całym świecie1,2. Podczas żerowania kleszczy biomolekuły w ślinie kleszczy, zwłaszcza białka i lipidy, ułatwiają odżywianie się tych ektopasożytów, unikając obrony żywiciela3. Niektóre biomolekuły śliny z modyfikacjami glikanu Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R (α-Gal) prowadzą do wytwarzania wysokiego poziomu przeciwciał anty-α-Gal IgE po ukąszeniu kleszcza, tylko u niektórych osób, co jest znane jako zespół α-Gal (AGS)4. Jest to choroba związana z alergią IgE-zależną, która może prowadzić do anafilaksji na ukąszenia kleszczy, spożycie mięsa ssaków innych niż naczelne i niektóre leki, takie jak cetuximab5. Reakcje na α-Gal są często ciężkie, a czasami mogą być śmiertelne6,7,8,9,10,11,12,13,14,15.

α-Gal występuje u wszystkich ssaków z wyjątkiem małp, małp człekokształtnych i ludzi, którzy nie mają zdolności syntezy α-Gal13. Jednak patogeny, takie jak bakterie i pierwotniaki, wyrażają ten glikan na swojej powierzchni, co może indukować wytwarzanie dużych ilości przeciwciał anty-α-Gal IgM/IgG i może być mechanizmem ochronnym przed tymi patogenami16,17. Jednak wytwarzanie przeciwciał anty-α-Gal zwiększa ryzyko rozwoju alergii anty-α-Gal zależnych od IgE7,13. Naturalne przeciwciała anty-α-Gal wytwarzane u ludzi, głównie podtypów IgM/IgG, mogą być związane z tą modyfikacją obecną u bakterii z mikrobioty jelitowej klasy 16. AGS może być trudną diagnozą kliniczną, ponieważ obecnie główna metoda diagnostyczna opiera się na wywiadzie klinicznym opóźnionych reakcji alergicznych, szczególnie związanych z alergiami pokarmowymi (tj. świąd, zlokalizowana pokrzywka lub nawracający obrzęk naczynioruchowy do anafilaksji, pokrzywki i objawów żołądkowo-jelitowych) oraz pomiarze poziomu przeciwciał IgE anty-α-Gal9. Obecne odkrycia sugerują, że ukąszenia kleszczy stanowią jedno z głównych zagrożeń związanych z pojawieniem się AGS18,19, 20-krotny lub większy wzrost poziomu IgE do α-Gal po ukąszeniu kleszcza19, historia ukąszeń kleszczy u pacjentów z AGS20,21,22, istnienie przeciwciał reagujących na antygeny kleszczowe u pacjentów z AGS19, a te anty-α-Gal IgE są silnie powiązane z poziomami anty-kleszczowych IgE19,23 ale potrzebne są dalsze badania, aby ocenić, które biomolekuły są faktycznie zaangażowane.

Ponadto, innym możliwym scenariuszem są pacjenci, którzy wykazują silne reakcje alergiczne na ukąszenia kleszczy i wysoki poziom przeciwciał anty-α-Gal IgE, ale są tolerancyjni na spożycie mięsa ssaków12. Dlatego alergia na mięso ssaków może być szczególnym rodzajem alergii związanej z ukąszeniami kleszczy. Główne gatunki kleszczy związane z AGS to Amblyomma americanum (USA), Amblyomma sculptum (Brazylia), Amblyomma testudinarium i Haemaphysalis longicornis (Japonia), Ixodes holocyclus (Australia) i Ixodes ricinus (główny wektor boreliozy z Lyme w Europie)11,24.

Jedynym modelem, który został użyty do oceny produkcji IgE związanej z ukąszeniami kleszczy, jest model mysi zmodyfikowany genetycznie genetycznie dla myszy α−1,3-galaktozylotransferazy (α-Gal KO)25,26, ponieważ podobnie jak inne ssaki, myszy również wyrażają α-Gal na białkach i lipidach i nie wytwarzają IgE do α-Gal. Jednak danio pręgowany (Danio rerio) jest użytecznym modelem do badań biomedycznych stosowanych u ssaków, ponieważ ma wiele podobieństw anatomicznych ze ssakami i, podobnie jak ludzie, nie jest również w stanie syntetyzować α-Gal. Ponieważ α-Gal nie jest wytwarzany naturalnie u danio pręgowanego, jest to model przystępny cenowo, łatwy w manipulacji i pozwala na dużą wielkość próbki do badania reakcji alergicznych związanych z α-Gal.

W tym badaniu, danio pręgowany jest używany jako organizm modelowy do charakteryzowania i opisywania lokalnych reakcji alergicznych, wzorców zachowań i mechanizmów molekularnych związanych z reakcją na przezskórne uczulenie na ślinę kleszcza26,27 i późniejsze spożycie mięsa ssaków. W tym celu ryby są wystawiane na działanie śliny kleszcza poprzez wstrzyknięcie śródskórne, a następnie są karmione karmą dla psów, która zawiera produkty pochodzące z mięsa ssaków odpowiednie do stosowania u zwierząt, która zawiera α-Gal27, a następnie oceniane są możliwe powiązane reakcje alergiczne. Metoda ta może być stosowana do badania innych biomolekuł związanych z procesami alergicznymi, zwłaszcza tych związanych z AGS.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie opisane tutaj metody zostały zatwierdzone przez Komitet Etyki ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Kastylii-La Manchy w ramach badania "Ocena odpowiedzi immunologicznej na inaktywowaną szczepionkę M. bovis i prowokację M. marinum w modelu danio pręgowanego numer PR-2017-05-12."

Kleszcze zostały uzyskane z kolonii laboratoryjnej, gdzie reprezentatywne próbki kleszczy w kolonii zostały przetestowane metodą PCR na obecność typowych patogenów kleszczy w celu potwierdzenia braku patogenów, i przechowywane w Instytucie Parazytologii, Centrum Biologii Czeskiej Akademii Nauk (IP BC CAS), Republika Czeska.Wszystkie doświadczenia na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z Ustawą o ochronie zwierząt Republiki Czeskiej nr 246/1992 Sb (aprobata etyczna nr 34/2018).

1. Leczenie danio pręgowanego

UWAGA: Badanie ma na celu ocenę reakcji alergicznych i odpowiedzi immunologicznej u danio pręgowanego leczonego śliną kleszcza w odpowiedzi na spożycie mięsa ssaków.

  1. Traktować ryby (jak wyjaśniono w sekcji 4) śliną kleszczy, handlową Gala1-3Gal-BSA 3 (α-Gal) (patrz Tabela materiałów), stosowaną jako kontrola pozytywna, z solą fizjologiczną buforowaną fosforanami (PBS) jako kontrolą ujemną. Dorosły danio pręgowany jest losowo przydzielany do trzech zrównoważonych płciowo grup (Rysunek 1).
    UWAGA: Każdy inny pożądany związek związany z AGS może być oceniany przy użyciu tego modelu.

2. Ekstrakcja śliny kleszcza Ixodes ricinus

  1. Używaj częściowo nabrzmiałych, wolnych od patogenów samic kleszczy karmionych przez 6-7 dni na świnkach morskich.
  2. Leczyć kleszcza 5 μl 2% (wag./obj.) roztworu chlorowodorku pilokarpiny w PBS (patrz tabela materiałów) o pH 7,4 do hemokleu za pomocą strzykawki o pojemności 50 μl z igłą 0,33 mm, jak opisano wcześniej28 w celu wywołania produkcji śliny kleszcza.
    UWAGA: Z kleszczami obchodzi się za pomocą kleszczy; Uważaj, aby nie używać zbyt dużej siły podczas ich chwytania.
  3. Zebrać ślinę za pomocą końcówki o pojemności 10 μl umieszczonej na mikropipecie.
    1. Ostrożnie wprowadź końcówkę do wnętrza hipostomimu kleszcza.
    2. Trzymaj ślinę w probówce o pojemności 1,5 ml na lodzie, zbierz ją i przechowuj w temperaturze -80 °C, jak opisano wcześniej27.
  4. Określ stężenie białka śliny, aby ustalić ilość białka, które należy wstrzyknąć rybie, tak jak w poprzednich badaniach27 za pomocą zestawu do oznaczania białek BCA (patrz tabela materiałów) zgodnie z zaleceniami producenta.

3. Utrzymanie danio pręgowanego

  1. Utrzymuj danio pręgowanego w przepływowym systemie wodnym w temperaturze 27 °C z cyklem światła/ciemności wynoszącym 14 godzin/10 godzin (Rysunek 2).
  2. Karm ryby dwa razy dziennie o 9:30 i 13:30 suchą karmą dla ryb (50-70 μg/rybę) do 2 dnia.
  3. Karm ryby dwa razy dziennie o 9:30 i 13:30 suchą karmą dla psów (50-70 μg/rybę) od 2 dnia po wstrzyknięciu leku do końca eksperymentu

4. Iniekcja danio pręgowanego

  1. Wybierz 10 ryb w grupie o podobnym stosunku samic do samców i podobnej wadze.
    UWAGA: Grupa 1 zawiera ryby, którym wstrzyknięto PBS, grupa 2 zawiera ryby, którym wstrzyknięto ślinę kleszcza, a grupa 3 zawiera ryby, którym wstrzyknięto α-Gal.
  2. Znieczulić rybę na krótko, zanurzając ją w 0,02% metanosulfonianu trikainy (MS-222) (film 1).
    UWAGA: Odpowiednio znieczulone ryby wykazują normalny oddech i nie pływają, podczas gdy mogą być umieszczone na dnie zbiornika wodnego lub pływające. Każda ryba musi być indywidualnie znieczulona, aby uniknąć ewentualnych uszkodzeń fizjologicznych.
  3. Złap znieczuloną rybę za pomocą sieci rybackiej.
  4. Ostrożnie ułożyć rybę na pół boku, używając kleszczy lub rąk, na mokrej gąbce, z płetwą ogonową po prawej stronie, aby wstrzyknąć związki w tym samym kierunku w celu kontrolowania zmian chorobowych.
  5. Wstrzyknąć grupy ryb śródskórnie, tak jak w poprzednich badaniach26, w mięsień w odległości 5 mm od płetwy ogonowej i pod kątem 45° w stosunku do ciała ryby (film 2). Zastosuj odpowiednie leczenie w dniach 0, 3 i 8, jak opisano wcześniej27 za pomocą strzykawki 100 μL wyposażonej w igłę o długości 1 cm, 29 G z 1 μL (z 9 μg/μL białka) śliny I. ricinus w 10 μL PBS (ślina kleszcza), 5 μg α-Gal w 10 μL PBS (α-Gal)27, i 10 μL PBS (Rysunek 3).
    UWAGA: Obchodzenie się z nim należy wykonywać szybko i ostrożnie, aby uniknąć jakichkolwiek fizycznych uszkodzeń zwierzęcia.
    Inne biomolekuły w ślinie kleszczy można ocenić zgodnie z tym protokołem.
  6. Umieść leczoną rybę z powrotem w zbiorniku słodkowodnym bez znieczulenia w celu odzyskania zdrowia.
    UWAGA: Wszystkie ryby z tej samej grupy można umieścić w tym samym zbiorniku na wodę w celu odzyskania.

5. Karmienie danio pręgowanego

  1. Rozgnieć karmę dla psów za pomocą moździerza i tłuczka.
  2. Karm 50-70 μg/ryby dwa razy dziennie o 9:30 i 13:30 suchą karmą dla ryb do 2 dnia.
  3. Karm 50-70 μg/rybę dwa razy dziennie o 9:30 i 13:30 puree dla psów od 2 dnia po wstrzyknięciu leku do końca eksperymentu 8.
    UWAGA: Jeśli mają być oceniane markery odporności lub miana przeciwciał przeciwko przeciwciałom α-Gal lub IgE w odpowiedzi na leczenie lub paszę w różnych inokulacjach, karmienie byłoby konieczne do końca eksperymentu.

6. Ocena reakcji alergicznych, zmian chorobowych i zachowania u danio pręgowanego

  1. Zbadaj krwotoczny rodzaj reakcji alergicznych (zaczerwienienie skóry, przebarwienia i krwotok) za pomocą lupy lub mikroskopu stereoskopowego w celu uzyskania dokładności i wskaż lokalizację ich pojawienia się na rybach zgodnie z kategoryzacją zawartą w Tabeli 1 (Rysunek 4A).
    UWAGA: Reakcje alergiczne przedstawione w Rycina 4 pojawiły się po wstrzyknięciu śliny kleszcza i spożyciu paszy zawierającej czerwone mięso. W związku z tym opisane reakcje są typami reakcji związanych z AGS, ponieważ podobne reakcje pojawiają się w kontekście klinicznym.
    1. Obserwuj, czy po zabiegach i podczas podawania pokarmu dwa razy dziennie, gdy ryby znajdują się w zbiorniku wodnym, pojawia się jakakolwiek reakcja.
  2. Zbadaj zachowanie ryb, oceniając zmiany27 we wzorcach pływania (mobilność, prędkość, stanie bez ruchu na dnie zbiornika wodnego i pływanie zygzakiem) zgodnie z kategoryzacją zawartą w Tabeli 1.
  3. Oceń skumulowaną śmiertelność, podając liczbę martwych ryb, w tym czas/dzień zgonu (Rysunek 4B).
    UWAGA: Wszystkie parametry są oceniane zaraz po podaniu substancji lub po zmianie paszy i monitorowane codziennie do końca eksperymentu w 8 dniu, kategoryzując zmienne jakościowe (Tabela 1). Jako zalecenie, ocena ta powinna zostać przeprowadzona przez specjalistę posiadającego wiedzę na temat danio pręgowanego, aby rozważyć zmiany behawioralne w oparciu o jego pochodzenie i doświadczenie w pracy z tym modelem zwierzęcym.
  4. Oblicz liczbę danio pręgowanego dziennie ze zgłoszonymi reakcjami alergicznymi, nieprawidłowym zachowaniem i zmianami żywieniowymi w każdej grupie i porównaj między grupami za pomocą jednoczynnikowego testu ANOVA.

7. Pobieranie próbek

  1. Poddać rybę eutanazji przez zanurzenie w 0,04% MS-222 w 8,
    UWAGA: Zbierz również próbki od ryb, które zmarły z powodu reakcji alergicznych podczas badania.
  2. Przymocuj rybę do talerza parafinowego za pomocą szpilek.
  3. Pobrać surowicę z naczyń krwionośnych skrzeli29 ryb natychmiast po eutanazji, gdy skrzela są nadal irygowane krwią, używając strzykawki o pojemności 0,5 ml wyposażonej w igłę o długości 1 cm, 29 G. Przechowuj go w probówce o pojemności 1,5 ml w temperaturze -20 °C do czasu użycia (film 3).
  4. Przetnij rybę strzałkowo ostrzem skalpela i oceń zmiany wewnętrzne (zmiany krwotoczne lub ziarninaki)27,30, jeśli się pojawią.
    UWAGA: Zmiany chorobowe nie muszą się pojawić, ale muszą zostać zarejestrowane, jeśli tak się stanie.
  5. Zbierz jelito (Film 4) i nerkę (Film 5) od każdej ryby w oddzielnych pustych probówkach o pojemności 1,5 ml, jak opisano wcześniej31, i przechowuj je w temperaturze -80 C (Rysunek 4C).
  6. Ekstrahować całkowite RNA z próbek jelita danio pręgowanego i nerek za pomocą zestawu do oczyszczania RNA (patrz tabela materiałów).
  7. Przeanalizuj ekspresję genów związanych z odpowiedzią immunologiczną, jak opisano wcześniej30,32 (patrz Tabela 2 dla sekwencji starterów) u danio pręgowanego, przeprowadzając ilościową reakcję łańcuchową polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT-qPCR) przy użyciu mieszaniny odwrotnej transkrypcji dla RT-qPCR (patrz Tabela materiałów), zgodnie z instrukcjami producenta. Znormalizuj wartości cT mRNA w stosunku do D. rerio GAPDH i porównaj grupy (ryby leczone śliną, α-Gal i grupy leczone PBS) za pomocą testu t Studenta o nierównej wariancji.
  8. Określ miana przeciwciał IgM, które rozpoznają α-Gal u danio pręgowanego w próbkach surowicy za pomocą testu ELISA, jak opisano wcześniej27,30. Zapisz miana przeciwciał jako wartości OD.450 nm, używając czytnika płytek, i porównaj między grupami (ryby traktowane śliną, α-Gal i grupy leczone PBS) za pomocą testu t Studenta o nierównej wariancji.
    UWAGA: Oznaczanie miana przeciwciał IgM i analiza genów ekspresji jest opcjonalna i przeprowadzana tylko wtedy, gdy wymagana jest informacja immunologiczna. Mieszanina RT-qPCR to zestaw do syntezy pierwszej nici cDNA do analizy ekspresji genów przy użyciu qPCR w czasie rzeczywistym.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Protokół przedstawiony w niniejszej pracy opiera się na kilku aspektach wcześniej opublikowanych eksperymentów27,30 oraz wynikach uzyskanych w naszym laboratorium, gdzie model danio pręgowanego został ustanowiony i zwalidowany do badania AGS oraz odpowiedzi immunologicznej na α-Gal, ponieważ ani ludzie, ani danio pręgowane nie syntetyzują tej cząsteczki13. Model ten umożliwia charakteryzację i ocenę różnych reakcji alergicznych będących wy...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Danio pręgowany to ekonomiczny i łatwy w obsłudze model, który jest również bardzo użytecznym narzędziem do badania molekularnych mechanizmów odpowiedzi immunologicznej, chorób chorobotwórczych, testowania nowych leków oraz szczepień i ochrony przed infekcjami 33,34,35. Badanie zachowania danio pręgowanego jest przydatne, ponieważ poprzednie badania wykazały, że niektóre gatunki ryb pozostają nieruchome na dnie zbiornika, gdy są...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Chcielibyśmy podziękować członkom grupy SaBio za współpracę w projektowaniu eksperymentu i pomoc techniczną z obiektem doświadczalnym ryb oraz Juanowi Galceránowi Sáezowi (IN-CSIC-UMH, Hiszpania) za dostarczenie danio pręgowanego. Prace te były wspierane przez Ministerio de Ciencia e Innovación/Agencia Estatal de Investigación MCIN/AEI/10.13039/501100011033, Hiszpanię i EU-FEDER (grant BIOGAL PID2020-116761GB-I00). Marinela Contreras jest finansowana przez Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades, Hiszpania, grant IJC2020-042710-I.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Probówka 1,5 mlVWR525-0990
All Prep DNA/RNAQiagen80284
do nauki w akwarystyce
Zestaw do oznaczania białek BCA Thermo Fisher Scientific23225
Zestaw rozsekcyjnyVWR631-1279
Karma dla psa - czerwona KlasycznaAcana
ELISA płytki-96dołków Thermo Fisher Scientific10547781
Gala1-3Gal-BSA 3 (α-Gal) DextraNGP0203
iScript Odwrotna transkrypcja Supermix1708840
Strzykawki mikrolitroweHamilton7638-01
Czytnik płytekdowolny
Sól fizjologiczna buforowana fosforanamiSigmaP4417-50TAB
chlorowodorek pilokarpiny SigmaP6503
Końcówka do pipet P10 VWR613-0364
Końcówka do pipet P1000VWR613-0359
Wysokiej jakości pokarm dla ryb tropikalnychDAPC
Gąbka Uchwyt dla zwierząt Wykonane z pianki złomowej
Mikroskop stereoskopowydowolny
termocykler Real-Time PCRdowolny
metanosulfonian trikainy (MS-222)SigmaE10521
Urządzenia

Bibliografia

  1. de la Fuente, J., Estrada-Pena, A., Venzal, J. M., Kocan, K. M., Sonenshine, D. E. Overview: Ticks as vectors of pathogens that cause disease in humans and animals. Frontiers in Bioscience: A Journal and Virtual Library. 13 (18), 6938-6946 (2008).
  2. de la Fuente, J., et al. Tick-pathogen interactions and vector competence: identification of molecular drivers for tick-borne diseases. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 7, 114(2017).
  3. Villar, M., et al. Characterization of tick salivary gland and saliva alphagalactome reveals candidate alpha-gal syndrome disease biomarkers. Expert Review of Proteomics. 18 (12), 1099-1116 (2021).
  4. Chmelař, J., Kotál, J., Kovaříková, A., Kotsyfakis, M. The use of tick salivary proteins as novel therapeutics. Frontiers in Physiology. 10, 812(2019).
  5. Chung, C. H., et al. Cetuximab-induced anaphylaxis and IgE specific for galactose-alpha-1,3-galactose. The New England Journal of Medicine. 358 (11), 1109-1117 (2008).
  6. Van Nunen, S. A., O'Connor, K. S., Clarke, L. R., Boyle, R. X., Fernando, S. L. An association between tick bite reactions and red meat allergy in humans. The Medical Journal of Australia. 190 (9), 510-511 (2009).
  7. Cabezas-Cruz, A., et al. Environmental and molecular drivers of the α-Gal syndrome. Frontiers in Immunology. 10, 1210(2019).
  8. de la Fuente, J., Pacheco, I., Villar, M., Cabezas-Cruz, A. The alpha-Gal syndrome: new insights into the tick-host conflict and cooperation. Parasites & Vectors. 12 (1), 154(2019).
  9. Platts-Mills, T. A. E., et al. On the cause and consequences of IgE to galactose-α-1,3-galactose: A report from the National Institute of Allergy and Infectious Diseases workshop on understanding IgE-mediated mammalian meat allergy. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 145 (4), 1061-1071 (2020).
  10. Commins, S. P., et al. Delayed anaphylaxis, angioedema, or urticaria after consumption of red meat in patients with IgE antibodies specific for galactose-alpha-1,3-galactose. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 123 (2), 426-433 (2009).
  11. Platts-Mills, T. A. E., Schuyler, A. J., Tripathi, A., Commins, S. P. Anaphylaxis to the carbohydrate side chain alpha-gal. Immunology and Allergy Clinics of North America. 35 (2), 247-260 (2015).
  12. Mateos-Hernández, L., et al. Tick-host conflict: immunoglobulin E antibodies to tick proteins in patients with anaphylaxis to tick bite. Oncotarget. 8 (13), 20630-20644 (2017).
  13. Galili, U. Evolution in primates by "Catastrophic-selection" interplay between enveloped virus epidemics, mutated genes of enzymes synthesizing carbohydrate antigens, and natural anti-carbohydrate antibodies. American Journal of Physical Anthropology. 168 (2), 352-363 (2019).
  14. Hilger, C., Fischer, J., Wölbing, F., Biedermann, T. Role and mechanism of galactose-alpha-1,3-galactose in the elicitation of delayed anaphylactic reactions to red meat. Current Allergy and Asthma Reports. 19 (1), 3(2019).
  15. Cabezas-Cruz, A., Valdés, J., de la Fuente, J. Cancer research meets tick vectors for infectious diseases. The Lancet. Infectious Diseases. 14 (10), 916-917 (2014).
  16. Yilmaz, B., et al. Gut microbiota elicits a protective immune response against malaria transmission. Cell. 159 (6), 1277-1289 (2014).
  17. Cabezas-Cruz, A., et al. Regulation of the immune response to α-Gal and vector-borne diseases. Trends in Parasitology. 31 (10), 470-476 (2015).
  18. Weins, A. B., Eberlein, B., Biedermann, T. Diagnostics of alpha-gal syndrome: Current standards, pitfalls and perspectives. Der Hautarzt; Zeitschrift Fur Dermatologie, Venerologie, Und Verwandte Gebiete. 70 (1), 36-43 (2019).
  19. Commins, S. P., et al. The relevance of tick bites to the production of IgE antibodies to the mammalian oligosaccharide galactose-α-1,3-galactose. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 127 (5), 1286-1293 (2011).
  20. Fischer, J., Yazdi, A. S., Biedermann, T. Clinical spectrum of α-Gal syndrome: from immediate-type to delayed immediate-type reactions to mammalian innards and meat. Allergo Journal International. 25 (2), 55-62 (2016).
  21. Hodžić, A., et al. Infection with Toxocara canis inhibits the production of IgE antibodies to α-Gal in humans: towards a conceptual framework of the hygiene hypothesis. Vaccines. 8 (2), 167(2020).
  22. Kiewiet, M. B. G., et al. Clinical and serological characterization of the α-Gal syndrome-importance of atopy for symptom severity in a European cohort. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. In Practice. 8 (6), 2027-2034 (2020).
  23. Steinke, J. W., Platts-Mills, T. A. E., Commins, S. P. The alpha-gal story: lessons learned from connecting the dots. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 135 (3), 589-596 (2015).
  24. Hashizume, H., et al. Repeated Amblyomma testudinarium tick bites are associated with increased galactose-α-1,3-galactose carbohydrate IgE antibody levels: A retrospective cohort study in a single institution. Journal of the American Academy of Dermatology. 78 (6), 1135-1141 (2018).
  25. Chandrasekhar, J. L., et al. Cutaneous exposure to clinically relevant lone star ticks promotes IgE production and hypersensitivity through CD4+ T cell- and MyD88-dependent pathways in mice. Journal of Immunology. 203 (4), 813-824 (2019).
  26. Araujo, R. N., et al. Amblyomma sculptum tick saliva: α-Gal identification, antibody response and possible association with red meat allergy in Brazil. International Journal for Parasitology. 46 (3), 213-220 (2016).
  27. Contreras, M., et al. Allergic reactions and immunity in response to tick salivary biogenic substances and red meat consumption in the zebrafish model. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 10, 78(2020).
  28. Poole, N. M., Mamidanna, G., Smith, R. A., Coons, L. B., Cole, J. A. Prostaglandin E(2) in tick saliva regulates macrophage cell migration and cytokine profile. Parasites & Vectors. 6 (2), 261(2013).
  29. Seibel, H., Baßmann, B., Rebl, A. Blood will tell: what hematological analyses can reveal about fish welfare. Frontiers in Veterinary Science. 8, 616955(2021).
  30. Pacheco, I., et al. Vaccination with alpha-gal protects against mycobacterial infection in the zebrafish model of tuberculosis. Vaccines. 8 (2), 195(2020).
  31. Gupta, T., Mullins, M. C. Dissection of organs from the adult zebrafish. Journal of Visualized Experiments. (37), e1717(2010).
  32. Lu, M. -W., et al. The interferon response is involved in nervous necrosis virus acute and persistent infection in zebrafish infection model. Molecular Immunology. 45 (4), 1146-1152 (2008).
  33. Saralahti, A., et al. Adult zebrafish model for pneumococcal pathogenesis. Developmental and Comparative Immunology. 42 (2), 345-353 (2014).
  34. Gore, A. V., Pillay, L. M., Venero Galanternik, M., Weinstein, B. M. The zebrafish: A fintastic model for hematopoietic development and disease. Wiley Interdisciplinary Reviews. Developmental Biology. 7 (3), 312(2018).
  35. Katoch, S., Patial, V. Zebrafish: An emerging model system to study liver diseases and related drug discovery. Journal of Applied Toxicology. 41 (1), 33-51 (2021).
  36. Kalueff, A. V., et al. Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond. Zebrafish. 10 (1), 70-86 (2013).
  37. Xin, N., Jiang, Y., Liu, S., Zhou, Y., Cheng, Y. Effects of prednisolone on behavior and hypothalamic-pituitary-interrenal axis activity in zebrafish. Environmental Toxicology and Pharmacology. 75, 103325(2020).
  38. Aleström, P., et al. Zebrafish: Housing and husbandry recommendations. Laboratory Animals. 54 (3), 213-224 (2020).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Zesp alfa Galalergia na mi so ssak wodpowied immunologicznainiekcja wewn trzsk rnaanaliza RT qPCRwykrywanie przeciwcia IgMtechnologie omiczne
Model zwierzęcy danio pręgowanego do badania reakcji alergicznych w odpowiedzi na biomolekuły śliny kleszczy
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki Korzystania

Zasady

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.