$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury eksperymentalne zostały sprawdzone i zatwierdzone przez Institutional Review Board of Seoul National University Bundang Hospital. Do eksperymentów w tym badaniu zrekrutowano 34 uczestników z udarem. Od wszystkich uczestników uzyskano podpisaną świadomą zgodę. Podpisaną świadomą zgodę uzyskiwano od przedstawiciela prawnego, jeśli uczestnik spełniał kryteria, ale nie mógł podpisać formularza zgody z powodu niepełnosprawności.
1. Konfiguracja eksperymentalna
- Rekrutacja pacjentów
- Przeprowadź proces selekcji, stosując następujące kryteria włączenia:
Wiek od 18 do 85 lat z upośledzonymi funkcjami kończyn górnych;
Pierwszy w historii udar niedokrwienny lub krwotoczny potwierdzony za pomocą tomografii komputerowej mózgu lub rezonansu magnetycznego;
Zdolność uczestnika do przestrzegania instrukcji oceny klinicznej i badania EEG;
Brak historii jakichkolwiek innych chorób psychicznych lub neurologicznych z wyjątkiem udaru.
- Wyklucz pacjentów na podstawie następujących kryteriów:
Przebyta choroba obejmująca ośrodkowy układ nerwowy (np. urazowe uszkodzenie mózgu, guz mózgu, choroba Parkinsona);
Niemożność noszenia czepka EEG; oraz
Niemożność zastosowania się do instrukcji oceny klinicznej i badania EEG.
UWAGA: Kryteria włączenia i wykluczenia zostały dobrane w celu wybrania uczestników zdolnych do udziału w eksperymencie oraz uregulowania czynników demograficznych, które mogą mieć wpływ na wyniki.
- Przekaż wszystkim zrekrutowanym uczestnikom informacje o szczegółach procedury eksperymentalnej.
- System eksperymentalny: EEG
- Do rejestracji danych należy używać systemu EEG składającego się z 32 elektrod do skóry głowy Ag/AgCl, tekstylnego czepka EEG i oprogramowania do rejestracji EEG.
- Użyj komputera osobistego (PC) z zainstalowanym oprogramowaniem do rejestracji EEG i podłącz komputer do urządzenia EEG przez Bluetooth.
- Użyj innego komputera z aplikacją do analizy numerycznej i programowania dla inżynierii (patrz tabela materiałów).
- W celu prezentacji bodźców podłącz komputer do dedykowanej skrzynki spustowej (Rysunek 1).
UWAGA: Szczegółowe specyfikacje obu komputerów znajdują się w tabeli materiałów.
- Paradygmat eksperymentalny oparty na oprogramowaniu do programowania
UWAGA: Uczestnicy wykonywali zadanie wyprostu ręki przy użyciu rąk dotkniętych chorobą i zdrowych, podczas którego mierzono dane EEG. Rysunek 2 pokazuje eksperymentalny paradygmat tego badania.
- Prezentuj dwa bodźce wzrokowe, CLOSE i OPEN, przez 30 s każdy, na środku monitora, aby zmierzyć podstawowe dane EEG w stanie spoczynku, podczas których uczestnik zamyka i otwiera oczy.
UWAGA: Ponieważ dane EEG w stanie spoczynku są stosunkowo mniej zanieczyszczone niepożądanymi artefaktami fizjologicznymi, są one przydatne do weryfikacji jakości danych EEG i identyfikacji indywidualnych cech EEG w odniesieniu do stanu spoczynku.
- Prezentuj obraz ruchu ręki przez 3 sekundy, aby poinstruować uczestnika, aby wykonał ruch wyprostu ręki, a następnie znak fiksacji na 5 s w celu odpoczynku.
UWAGA: Ta procedura została potraktowana jako próba i została powtórzona 10 razy podczas jednej sesji. Każdy uczestnik przeszedł 4 sesje dla każdej ręki. Uczestnik miał przerwę, kiedy tylko chciał po wykonaniu każdej sesji, aby zapobiec nadmiernemu zmęczeniu.

Rysunek 1: Schemat konfiguracji sprzętu. Komputer (PC1) prezentujący bodźce eksperymentalne był podłączony do skrzynki spustowej, a drugi komputer (PC2) był podłączony do wzmacniacza EEG. Zdarzenia stymulacyjne generowane w PC1 były dostarczane do wzmacniacza EEG za pośrednictwem skrzynki wyzwalającej podłączonej do PC1. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rysunek 2: Paradygmat eksperymentalny użyty w tym badaniu. Pojedyncza próba składała się z ruchu wyprostu ręki trwającego 3 s, po którym następowało rozluźnienie trwające 5 sekund. Ten schemat powtórzono 10 razy w ciągu jednej sesji. Łącznie wykonano osiem sesji; Cztery sesje obejmowały dotknięty ruch ręki, podczas gdy pozostałe cztery obejmowały niezakłócony ruch ręki. Ten rysunek został zaadaptowany z Shim et al.17 za zgodą Mary Ann Liebert, Inc. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
2. Rejestrowanie danych EEG związanych z ruchem
- Konfiguracja EEG
- Posadź uczestnika w wygodnym fotelu przed monitorem.
UWAGA: Odległość między uczestnikiem a monitorem powinna wynosić co najmniej 60 cm, aby zapobiec zmęczeniu oczu. Należy jednak unikać nadmiernego dystansu (np. >150 cm), ponieważ mógłby on rozpraszać koncentrację uczestnika.
- Aby dokładnie założyć czepek do pomiaru EEG, należy określić położenie Cz w oparciu o międzynarodowy układ 10-20, wykorzystując przecięcie linii podłużnej łączącej nasiono i inion oraz linii poprzecznej łączącej górną część obu małżowin usznych.
UWAGA: Czepek EEG może nie być wymagany w zależności od sprzętu do pomiaru EEG. W takim przypadku elektrody EEG są bezpośrednio mocowane do skóry głowy zgodnie z międzynarodowym systemem 10-2015.
- Aby uzyskać dokładny pomiar EEG, użyj czepka EEG o odpowiednim rozmiarze zgodnie z rozmiarem głowy uczestnika i umieść go tak, aby pozycja elektrody Cz była umieszczona w indywidualnym miejscu Cz.
- Zamocuj pasek podbródkowy z odpowiednią mocą, dzięki czemu uczestnik nie będzie czuł się niekomfortowo podczas połykania i mrugania w eksperymencie. Następnie upewnij się, że pozycje elektrod T9 i T10 czepka EEG znajdują się w okolicy skroniowej nad obiema małżowinami usznymi, a pozycja elektrody Fpz czepka EEG znajduje się na środku czoła.
UWAGA: Jeśli te elektrody znajdują się poza wyznaczonym miejscem, rozważ wymianę nasadki. W naszym badaniu zastosowano trzy rozmiary czepków EEG (54 cm: mały, 56 cm: średni, 58 cm: duży).
- Po prawidłowym umieszczeniu czepka EEG przymocuj 32 elektrody do skóry głowy Ag/AgCl zgodnie z rozszerzonym międzynarodowym systemem 10-10, z elektrodami uziemiającymi i referencyjnymi odpowiednio na Fpz i FCz16.
UWAGA: Na położenie elektrody referencyjnej (FCz) stosunkowo mniejszy wpływ mają różne artefakty fizjologiczne, takie jak te z elektrookulografii, elektromiografii i elektrokardiografii, ponieważ znajduje się ona wokół centralnej części (Cz) skóry głowy.
- Dostosuj poziom impedancji między elektrodami EEG a skórą głowy za pomocą żelu przewodzącego i przymocuj włosy żelem, aby zapobiec niedrożności między elektrodami EEG a skórą głowy.
UWAGA: Ważne jest, aby potwierdzić, czy z powodu wycieku żelu powstaje mostek między sąsiednimi elektrodami EEG.
- Skorzystaj z oprogramowania do rejestracji EEG.
- Włącz system EEG i wykonaj konfigurację > wybierz wzmacniacz. Wybierz Liveamp > > amplifier > się podłączyć. Wyszukaj funkcję Liveamp dla połączenia bezprzewodowego (Rysunek 3).
- Wykonaj funkcję sprawdzania impedancji, aby monitorować poziom impedancji dla każdej elektrody.
UWAGA: Zaleca się przeprowadzenie eksperymentu z poziomem impedancji <20 KΩ (Rysunek 4).
- Wykonaj funkcję monitorowania, aby potwierdzić, czy EEG wszystkich elektrod ma podobne poziomy amplitudy poprzez monitorowanie sygnału EEG w czasie rzeczywistym (Rysunek 5).
UWAGA: Amplituda sygnału EEG wynosi na ogół od 10 μV do 100 μV, a moc alfa (8-12 Hz) wzrasta w okolicy potylicznej, gdy oczy są zamknięte. Dlatego jakość danych EEG można jakościowo potwierdzić, monitorując poziom amplitudy i oscylacje alfa na kanałach wokół okolicy potylicznej, gdy oczy są zamknięte.
- Konfiguracja paradygmatu
- Do stabilnego pozyskiwania danych EEG użyj dwóch oddzielnych komputerów do prezentacji bodźców zewnętrznych i rejestrowania danych EEG (patrz Rysunek 1).
- Aby zaprezentować uczestnikom bodźce eksperymentalne, stwórz program stymulacji oparty na paradygmacie eksperymentalnym za pomocą oprogramowania do programowania (przedstawionego w kroku 1.3).
UWAGA: W tym badaniu stworzono program stymulacji oparty na oprogramowaniu, ale inne oprogramowanie może być używane w zależności od ich kompatybilności ze sprzętem EEG użytym w eksperymencie, a także wygody użytkownika. Skrypt stymulacyjny oparty na oprogramowaniu programistycznym znajduje się w pliku uzupełniającym 1 (Experimental_stimulus.m). Informacje o zdarzeniu, wskazujące punkt początkowy bodźców, są generowane przez wewnętrzne oprogramowanie programistyczne, przesyłane do wzmacniacza EEG za pośrednictwem skrzynki wyzwalającej, a ostatecznie do oprogramowania rejestrującego EEG (Rysunek 1).
- Wykonać program prezentujący bodźce eksperymentalne w trybie monitorowania (patrz krok podrzędny 2.1.10). Następnie upewnij się, że informacje o zdarzeniu są prawidłowo oznaczone w odpowiednim czasie na dole oprogramowania do rejestracji EEG za każdym razem, gdy prezentowany jest bodziec, jak pokazano na Rysunek 6.
UWAGA: Informacje o punkcie czasowym są rejestrowane za każdym razem, gdy prezentowany jest nowy bodziec, a następnie są wykorzystywane do segmentacji danych. Dlatego ważne jest, aby uzyskać dokładne punkty czasowe zdarzeń eksperymentalnych w jak największym stopniu, aby zapobiec niedokładnej segmentacji danych, która doprowadziłaby do niewiarygodnych wyników analizy.
- Uruchom oprogramowanie do rejestracji EEG, a następnie samodzielnie uruchom program prezentacji bodźca opracowany w oparciu o paradygmat eksperymentalny za pomocą oprogramowania do programowania, aby zapobiec pominięciu danych.
UWAGA: Dla wygody analizy danych zaleca się tworzenie nazw plików ze spójną regułą przechowywania danych (np. Sub1_Session1).
- Zapis EEG
- Pomiar EEG z częstotliwością próbkowania 1,000 Hz zgodnie z paradygmatem eksperymentalnym przedstawionym w kroku 1.3.
UWAGA: Częstotliwość próbkowania można zmieniać w zależności od zakresu częstotliwości EEG, który badacz chce zbadać. Ogólnie zaleca się stosowanie częstotliwości próbkowania >200 Hz, gdzie informacje EEG mogą być badane przy ≤100 Hz w oparciu o twierdzenie Nyquista. Dzieje się tak, ponieważ większość informacji EEG występuje poniżej 100 Hz.
- Utrzymuj te same środowiska eksperymentalne (np. miejsce eksperymentu, sprzęt, temperatura pokojowa itp.) w jak największym stopniu między uczestnikami i poinstruuj ich, aby zminimalizowali niepotrzebne ruchy podczas pomiaru EEG.

Rysunek 3: Procedura bezprzewodowego połączenia między wzmacniaczem EEG a komputerem za pomocą oprogramowania do rejestracji EEG. Postępuj zgodnie z instrukcjami w kolejności: (A) wybierz amplifier, (B) podłącz amplifier, (C) wyszukaj podłączony amplifier do połączenia bezprzewodowego, (D) połączenie zakończone. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rysunek 4: Procedura sprawdzania impedancji dla każdego kanału. Wszystkie kanały powinny być ustawione na kolor zielony, aby zapewnić stabilny pomiar EEG. Zaleca się przeprowadzenie eksperymentu z impedancją mniejszą niż 20 KΩ. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rysunek 5: Procedura monitorowania danych w czasie rzeczywistym dla każdego kanału. Sygnały ze wszystkich mierzonych kanałów mogą być monitorowane w czasie rzeczywistym i mogą być powiększane/pomniejszane za pomocą opcji (czerwone pole) na górnym pasku. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rysunek 6: Zrzut ekranu do monitorowania informacji o zdarzeniu. Czerwone słupki wskazują kreatory zdarzeń, które są prezentowane za każdym razem, gdy bodziec jest dostarczany przez PC1. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
3. Analiza danych EEG
UWAGA: To badanie dostarcza precyzyjnych wytycznych do powielania koncepcji badawczej. W związku z tym przedstawiono w nim krótki zarys procesu analizy i reprezentatywne wyniki. Szczegółowe procesy i związane z nimi wyniki można znaleźć w poprzednim badaniu17. Wskazuje to, że Mary Ann Liebert, Inc. udzieliła pozwolenia na wykorzystanie materiałów chronionych prawem autorskim.
- Wstępnego przetwarzania
- Usuń artefakty związane z oczami z surowych danych EEG za pomocą procedur matematycznych opartych na analizie głównych składowych zaimplementowanych w oprogramowaniu do wstępnego przetwarzania danych EEG18,19 (patrz Tabela materiałów).
UWAGA: Jeśli któraś z epok wykazywała wyraźne artefakty (± 100 μV), nawet po wstępnym przetworzeniu w którejkolwiek z elektrod, była ona wyłączana z dalszej analizy. Średnia liczba odrzuconych epok, w tym ich odchylenie standardowe, wynosiła 3,69 ± 7,15 dla zadania dotyczącego ruchu ręki i 1,62 ± 3,95 dla zadania bez wpływu ruchu ręki.
- Zastosuj filtr pasmowoprzepustowy w zakresie od 0,1 Hz do 55 Hz. Podziel wstępnie przetworzone dane EEG od -1 s do 3,5 s dla każdej próby w oparciu o początek zadania, aby uwzględnić okres bazowy stosowany do perturbacji widmowych związanych ze zdarzeniami (ERSP) i funkcjonalnych analiz sieciowych.
- Analiza ERSP
UWAGA: Zmierzone dane EEG zostały zweryfikowane za pomocą analizy ERSP dla pasma częstotliwości o niskiej częstotliwości beta (12-20 Hz) związanego z ruchami dobrowolnymi.
- Przeprowadź krótkotrwałą transformację Fouriera dla każdej próby, aby obliczyć moc spektralną EEG, do której użyto funkcji newtimef zestawu narzędzi EEGLAB w oprogramowaniu do programowania20 (nienakładające się okno Hanninga, rozmiar okna 250 ms).
- Znormalizuj spektrum mocy każdej próby, odejmując średnią moc w okresie podstawowym (od -1 do 0 s), aby zbadać zmiany mocy widmowych między zadaniem ruchu ręki a okresem wyjściowym.
- Oszacuj znormalizowane bazowo mapy ERSP dla każdego pacjenta, uśredniając znormalizowane widma mocy w różnych badaniach.
- Funkcjonalna analiza sieci
UWAGA: Przeprowadzono analizę sieci funkcjonalnej w celu zbadania zmian EEG z perspektywy sieci mózgowej. Aby obliczyć ważone wskaźniki sieci całego mózgu w oparciu o teorię grafów, najpierw obliczono łączność mózgu między różnymi regionami przy użyciu wartości blokowania fazy (PLV). Następnie obliczono funkcjonalną macierz łączności przy użyciu wyników analizy połączeń opartej na PLV, która została następnie wykorzystana do obliczenia wskaźników sieci całego mózgu17. Wszystkie funkcjonalne analizy sieci zostały wykonane za pomocą oprogramowania do programowania.
- Oblicz wartość blokowania fazy (PLV) opartą na transformacji Hilberta dla pasma częstotliwości o niskiej beta (12-20 Hz) za pomocą wewnętrznej funkcji21,22. Wewnętrzna funkcja obliczania PLV opartej na transformacji Hilberta jest dostępna w pliku uzupełniającym 2 (myPLV.m).
- Oceń PLV między wszystkimi możliwymi parami 32 elektrod EEG w każdym punkcie czasowym w okresach zadania (0-3,5 s) i utwórz symetryczną macierz sąsiedztwa (32 x 32, liczba elektrod = 32), uśredniając PLV w okresie zadania. Użyj macierzy PLV jako danych wejściowych do analizy sieci17,23.
- Oceń cztery ważone indeksy sieci na poziomie globalnym w oparciu o teorię grafów za pomocą zestawu narzędzi Brain Connectivity Toolbox (https://sites.google.com/site/bctnet): (1) siła, (2) współczynnik grupowania, (3) długość ścieżki i (4) małoświatowość17,24,25.