Artykuł metodologiczny

Aktualne metody w przedklinicznych modelach tętniaków

255 wyświetleń

8 września 2023

W tym artykule

Artykuł redakcyjny

Rosnąca wiedza na temat patofizjologii tętniaków śródczaszkowych u ludzi doprowadziła do głębszego zrozumienia procesów wzrostu i pękania IA. W minionych dziesięcioleciach badania i strategie terapeutyczne koncentrowały się głównie na koncepcjach mechanicznych zorientowanych na światło, aby zapobiec lub zablokować przepływ krwi do tętniaka. Jednak dalsze badania w ostatnich latach ujawniły fundamentalną rolę cech biologicznych związanych z chorą ścianą naczynia, takich jak zwyrodnienie ściany tętniaka, przebudowa skrzepliny, zdolność do wzrostu i potencjalne pęknięcie IA 1,2.

Przedkliniczne eksperymenty na zwierzętach w znacznym stopniu przyczyniły się do zrozumienia patofizjologii IA. W związku z tym opracowanie i wykorzystanie odpowiedniego modelu zwierzęcego ma ogromne znaczenie w celu zbadania tego stanu klinicznego w warunkach przedklinicznych3. W modelach przedklinicznych niewielka modyfikacja parametrów eksperymentalnych lub technik pomiaru wyników może mieć duży wpływ na wyniki4. W wyniku zwiększonej świadomości powszechnego błędu metodologicznego i oczywistych przeszkód translacyjnych, ustanowienie ustandaryzowanych protokołów dla wszystkich etapów eksperymentów na zwierzętach, w tym planowania, projektowania, realizacji i raportowania, ma kluczowe znaczenie dla osiągnięcia odtwarzalności wyników i ostatecznie zapewnienia tłumaczenia klinicznego5.

Niniejszy zbiór ma na celu przedstawienie obecnie stosowanych metodologii przedklinicznych i technik pomiaru wyników do badania patofizjologii ludzkich IAs w modelach przedklinicznych.

Wśród licznych przedklinicznych modeli tętniaków jednym z najpopularniejszych jest wewnątrznaczyniowy model perforacji krwotoku podpajęczynówkowego (SAH) u myszy. Jednak wiele badań z wykorzystaniem tego modelu nie informuje o parametrach eksperymentalnych, a dobór parametrów (takich jak rozmiar filamentu czy zastosowane środki znieczulające) jest ogromny. W związku z tym literatura wykorzystująca ten model charakteryzuje się znaczną niejednorodnością w raportowanej śmiertelności zwierząt i mierzonych wynikach. Liu i wsp. przedstawiają szczegóły techniczne i proponują dobór parametrów, aby wyznaczyć standard dla modelu perforacji wewnątrznaczyniowej6. Ponadto udoskonalają model, wykonując standardowe obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego (MRI) w ciągu 24 godzin od indukcji SAH w celu weryfikacji krwawienia i wykluczenia innych patologii wewnątrzczaszkowych.

Praca Wanderera i wsp. opisuje nowy model tętniaka u królika7. Badania histopatologiczne u ludzi wykazały, że IAs podatne na wzrost i pękanie charakteryzują się utratą komórkowości w ścianach tętniaka. Biorąc pod uwagę ten fakt, modyfikacja eksperymentalnej ściany tętniaka - w szczególności w celu decelularyzacji ściany tętniaka - została po raz pierwszy opisana w helsińskim modelu tętniaka ściany bocznej szczura8. Przesuwając się w górę drabiny translacyjnej, prezentowany model królika uwzględnia również sytuację hemodynamiczną, tworząc autologiczne tętniaki worka tętniczego w prawdziwej konstelacji bifurkacji, aby naśladować różne warunki ściany. Tętniaki pozbawione komórek w tym modelu wykazują utrzymującą się długoterminową drożność i wzorce wzrostu w czasie.

Biorąc za punkt wyjścia wyżej wspomniany model bifurkacji królika i ściśle stosując zasady 3R (reduce, replace, refine), Boillat i wsp. prezentują udoskonalenie modelu tętniaka królika9. Ich niewielka modyfikacja kroków chirurgicznych umożliwia stworzenie kikuta i prawdziwego tętniaka bifurkacji podczas jednej operacji. Pozwala to na testowanie nowatorskich urządzeń wewnątrznaczyniowych w tętniakach o różnej angioarchitekturze i warunkach hemodynamicznych w obrębie jednego zwierzęcia, a także pozwala na różne warunki ścian.

Artykuł Popadic i wsp. poświęcony jest powstawaniu gigantycznych tętniaków u królików10. Autologiczny worek żylny wywodzący się z żyły szyjnej zewnętrznej jest zszywany w sztucznie powstałym rozwidleniu między tętnicami szyjnymi wspólnymi. Pooperacyjne podawanie kwasu acetylosalicylowego i długotrwałe podawanie niskocząsteczkowej heparyny są kluczowymi punktami tego protokołu. Jeśli etapy eksperymentalne zostaną starannie wykonane, model ten ma wyjątkowo niską zachorowalność i wysoki wskaźnik drożności tętniaka, a zatem jest idealny do testowania nowych urządzeń wewnątrznaczyniowych.

Stały pomiar ciśnienia śródczaszkowego (ICP) jest podstawowym działaniem podejmowanym w klinicznym leczeniu SAH. Grupa Petersona i wsp. przedstawia technikę bezpiecznego umieszczania światłowodowego czujnika ciśnienia w miąższu mózgu szczurów11. Pozwala to na precyzyjne monitorowanie ICP z jednoczesnym pomiarem średniego ciśnienia tętniczego (MAP) w celu obliczenia ciśnienia perfuzji mózgowej. Chociaż szczegółowo opisana dla krwotoku śródczaszkowego u szczurów, ta sama technika może być stosowana w przypadku różnych patologii charakteryzujących się zmienionym ciśnieniem śródczaszkowym, a także u innych gryzoni.

Artykuł na temat śledzenia komórek autorstwa Wanderera i wsp. obejmuje bardziej podstawowe zagadnienia związane z badaniaminaukowymi 12. W pracy autorzy badają pochodzenie komórek, które pośredniczą w gojeniu tętniaka po leczeniu wewnątrznaczyniowym. W pracochłonnym otoczeniu chirurgicznie tworzonych tętniaków ściany bocznej u genetycznie zmodyfikowanych szczurów, lokalnie wstrzykują lipofilowy znacznik komórkowy (barwnik CM-Dil) w celu śledzenia komórek śródbłonka i ich pochodnych pochodzących z tętnicy macierzystej poniżej tętniaka.

Podsumowując, wszystkie przedstawione badania mają na celu większą standaryzację przedklinicznych modeli tętniaków. Wybór najbardziej adekwatnego modelu jest w dużym stopniu uzależniony od intencji badania. Na przykład przedstawione powyżej trzy różne modele królików mają inny cel (tj. stan ściany tętniaka, hemodynamikę lub rozmiar tętniaka). Ustalenie większej spójności parametrów eksperymentalnych i uświadomienie sobie ograniczeń wybranego modelu zwierzęcego nie tylko zwiększy odtwarzalność eksperymentów, ale może ostatecznie odblokować drogę translacyjną od stanowiska laboratoryjnego do łóżka pacjenta.

Oświadczenia

Autor nie ma nic do zdradzienia.

Podziękowania

Autor nie ma żadnych podziękowań.

Bibliografia

  1. Gruter, B. E., von Faber-Castell, F., Marbacher, S. Lumen-oriented versus wall-oriented treatment strategies for intracranial aneurysms - A systematic review of suggested therapeutic concepts. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 42 (9), 1568-1578 (2022).
  2. Marbacher, S., Niemelä, M., Hernesniemi, J., Frösén, J. Recurrence of endovascularly and microsurgically treated intracranial aneurysms-Review of the putative role of aneurysm wall biology. Neurosurgical Review. 42 (1), 49-58 (2019).
  3. Marbacher, S. Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: Species, standard parameters, and outcomes. Translational Stroke Research. 10, 250-258 (2018).
  4. Dirnagl, U. Bench to bedside: The quest for quality in experimental stroke research. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 26 (12), 1465-1478 (2006).
  5. Gruter, B. E. Systematic review and meta-analysis of methodological quality in in vivo animal studies of subarachnoid hemorrhage. Translational Stroke Research. 11 (6), 1175-1184 (2020).
  6. Liu, S., et al. Endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (MRI). Journal of Visualized Experiments. (178), e63150(2021).
  7. Wanderer, S., et al. Arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit. Journal of Visualized Experiments. (159), e61157(2020).
  8. Marbacher, S. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).
  9. Boillat, G., et al. Creation of two saccular elastase-digested aneurysms with different hemodynamics in one rabbit. Journal of Visualized Experiments. (170), e62518(2021).
  10. Popadic, B., Scheichel, F., Plasenzotti, R., Sherif, C. Microsurgical creation of giant bifurcation aneurysms in rabbits for the evaluation of endovascular devices. Journal of Visualized Experiments. , (2022).
  11. Peterson, C., Hawk, C., Puglisi, C. H., Waldau, B. Intrranial pressure monitoring in non traumatic intraventricular hemorrhage rodent model. Journal of Visualized Experiments. (180), e63309(2022).
  12. Wanderer, S., et al. Using a cell-tracer injection to investigate the origin of neointima-forming cells in a rat saccular side wall model. Journal of Visualized Experiments. (181), e63580(2022).

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Aneurysm ResearchModeling TechniquesExperimental ApproachesVascular DiseaseAneurysm AssessmentAnimal ModelsTreatment Evaluation

Powiązane artykuły