Sekcja całego ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego myszy

Krystina Rhéaume; Zhiguo Chen; Yong Wang; Camille Plante; Dhanushka Hewa Bostanthirige; Maude Lévesque; Sameh Geha; Lu Q. Le; Jean-Philippe Brosseau

doi:10.3791/64974

Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Sekcja całego ośrodkowego i obwodowego układu nerwowego myszy

10.8K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/64974

⸱

24 lutego 2023

Krystina Rhéaume^*¹ , Zhiguo Chen^*² , Yong Wang^*² , Camille Plante¹ , Dhanushka Hewa Bostanthirige¹ , Maude Lévesque¹ , Sameh Geha³^,⁴ , Lu Q. Le²^,⁵^,⁶^,⁷ , Jean-Philippe Brosseau¹^,⁴

¹Department of Biochemistry and Functional Genomics, Université de Sherbrooke, ²Department of Dermatology, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ³Department of Pathology, Université de Sherbrooke, ⁴Centre de Recherche du Centre Hospitalier de Universitaire de Sherbrooke, Université de Sherbrooke, ⁵Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁶UTSW Comprehensive Neurofibromatosis Clinic, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁷Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas

^* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj prezentujemy protokół do zakończenia sekcji centralnego i obwodowego układu nerwowego myszy. Wypreparowane tkanki są dalej analizowane w dalszych zastosowaniach, takich jak robienie zdjęć ogólnych lub histologia.

Streszczenie

Modele zwierzęce reprezentują konia pociągowego w dziedzinie neuronauki. Mimo to nadal nie ma protokołu krok po kroku, który pozwoliłby przeanalizować cały układ nerwowy gryzoni, ani nie ma kompletnego schematu przedstawiającego go, który byłby swobodnie dostępny. Dostępne są tylko metody pobierania mózgu, rdzenia kręgowego, określonego zwoju korzenia grzbietowego i nerwu kulszowego (osobno). Tutaj przedstawiamy szczegółowe zdjęcia i schemat ośrodkowego i obwodowego mysiego układu nerwowego. Co ważniejsze, przedstawiamy solidną procedurę przeprowadzania jego sekcji. 30-minutowy etap presekcji pozwala na odizolowanie nienaruszonego układu nerwowego w obrębie kręgu z mięśniami wolnymi od wnętrzności i skóry. Po 2-4 godzinnej sekcji pod mikroskopem mikropreparacyjnym odsłania się rdzeń kręgowy i nerwy piersiowe, a na koniec odkleja się cały ośrodkowy i obwodowy układ nerwowy od tuszy. Protokół ten stanowi znaczący krok naprzód w badaniu anatomii i patofizjologii układu nerwowego na całym świecie. Na przykład wypreparowane gangliony korzenia grzbietowego z modelu myszy z nerwiakowłókniakowatością typu I mogą być dalej przetwarzane do badań histologicznych w celu wyjaśnienia zmian w progresji guza.

Wprowadzenie

Ogólnym celem tej metody jest odizolowanie centralnego i obwodowego układu nerwowego myszy w jednym kawałku. Obecnie nie ma protokołu pozwalającego na przeanalizowanie całego układu nerwowego gryzonia w celu zbadania go na poziomie globalnym. Neurobiolodzy zazwyczaj używają nerwu kulszowego jako substytutu dla dowolnego nerwu obwodowego¹, a ganglionów od L3 do L5² jako substytutu dla dowolnych ganglionów. Korzystając z tych metod, nie można stwierdzić, czy wyniki są specyficzne dla konkretnego nerwu/zwoju. Ponieważ wiadomo, że przynajmniej niektóre patologie nerwowe nie wpływają jednakowo na wszystkie nerwy i zwoje