Ten protokół przedstawia metodę oceny powstawania i naprawy pęknięć dwuniciowych DNA poprzez jednoczesne wykrywanie ognisk γH2AX i 53BP1 w jądrach interfazowych ludzkich limfocytów obwodowych traktowanych bleomycyną.
Artykuł metodologiczny
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| AlexaFluor 568 kozia anty-mysia IgG (γ 1) | Invitrogen | A21124 | 53BP1 |
| Bleoprim | Sanofi | Siarczan bleomycyny (mutagen) | |
| Roztwór penicyliny i streptomycyny 100X | Euroclone | ECB3001D | antybiotyki do pożywki |
| hodowlanej PBS 10X | Termofisher | 14200075 | Sól fizjologiczna buforowana fosforanami |
| FBS Euroclone | EC20180L | Płodowa surowica bydlęca do immunofluorescencji | |
| Kozia anty-królicza IgG (H+L) DyLight 488 Coniugated | Termofisher | #35552 | γ Przeciwciało drugorzędowe H2AX |
| Mysie przeciwciało monoklonalne anty-53BP1 | Merck | MAB 3802 | 53BP1 przeciwciało pierwszorzędowe |
| Labophot 2 | fluorescencyjny | Nikon | |
| Histon H2AX (Ser139) przeciwciało królika | Sygnalizacja komórkowa | # 2577 | i gamma; Przeciwciało pierwszorzędowe H2AX |
| Fitohemoaglutynina | Termofisher | R30852801 | składnik pożywki |
| hodowlanej Przedłuż złoty odczynnik zapobiegający blaknięciu z DAPI | Cell Signaling | #8961 | Roztwór zapobiegający blaknięciu z DAPI do barwienia przeciwdziałającego |
| barwieniu RPMI 1640 | Euroclone | ECB9006L | Pożywka |
| hodowlana Triton-X100 | Sigma | T9284 | Niejonowy detergent do przepuszczalność |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie