Ten artykuł przedstawia manipulację w leczeniu przewlekłego ucisku zwoju korzenia grzbietowego u szczurów za pomocą terapii Tuina, wraz z metodą oceny jej skuteczności na podstawie zachowania bólu i wyników histopatologicznych.
Artykuł metodologiczny
* These authors contributed equally
Ten artykuł przedstawia manipulację w leczeniu przewlekłego ucisku zwoju korzenia grzbietowego u szczurów za pomocą terapii Tuina, wraz z metodą oceny jej skuteczności na podstawie zachowania bólu i wyników histopatologicznych.
Ból neuropatyczny jest powszechnym stanem, który dotyka 6,9%-10% populacji i wynika z uszkodzenia nerwów z powodu różnych etiologii, takich jak przepuklina dysku lędźwiowego, zwężenie kanału kręgowego i zwężenie otworu międzykręgowego. Chociaż Tuina, tradycyjna chińska terapia manualna, wykazała działanie przeciwbólowe w praktyce klinicznej w leczeniu bólu neuropatycznego, leżące u jej podstaw mechanizmy neurobiologiczne pozostają niejasne. Modele zwierzęce są niezbędne do wyjaśnienia podstawowych zasad Tuina. W tym badaniu proponujemy ustandaryzowany protokół Tuina dla szczurów z uciskiem zwoju korzenia grzbietowego (DRG), który polega na wywołaniu kompresji DRG poprzez włożenie pręta ze stali nierdzewnej do otworu międzykręgowego, wykonanie manipulacji Tuina z określonymi parametrami lokalizacji, intensywności i częstotliwości w kontrolowanym środowisku oraz ocena behawioralnych i histopatologicznych wyników leczenia Tuina. W artykule omówiono również potencjalne implikacje kliniczne i ograniczenia badania oraz zasugerowano kierunki przyszłych badań nad Tuiną.
W warunkach klinicznych, często obserwuje się neurologiczny patologiczny ból spowodowany uciskiem korzenia nerwowego z różnych powodów. Najbardziej typową postacią tego bólu neuropatycznego jest przepuklina dysku lędźwiowego (LDH), która często jest uporczywa, nawracająca i trudna do wyleczenia. Około 9% światowej populacji jest dotkniętych LDH, co prowadzi do znacznych obciążeń społecznych i ekonomicznych1. Częstość występowania tego typu bólu neuropatycznego wzrasta z roku na rok, z tendencją do młodszych pacjentów, ze względu na zmiany w produkcji i stylu życia ludzi2. Pomimo stosowania niesteroidowych leków przeciwbólowych nie można całkowicie złagodzić objawów u pacjentów. W rezultacie coraz większe zainteresowanie cieszą się alternatywnymi terapiami, takimi jak Tuina, w leczeniu bólu spowodowanego przez LDH.
Terapia Tuina, forma leczenia zachowawczego LDH, jest szeroko zalecana w różnych wytycznych praktyki klinicznej na całym świecie w celu zapobiegania i leczenia bólu dolnej części pleców3,4. Badania wykazały, że Tuina może znacznie obniżyć poziom czynników zapalnych, takich jak IL-6 w surowicy i czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF-α) u pacjentów z LDH, jednocześnie poprawiając ból pacjentów i upośledzenie funkcji odcinka lędźwiowego5. Jednak konkretny mechanizm stojący za działaniem przeciwbólowym terapii Tuina pozostaje niejasny
.Modele zwierzęce są cennym narzędziem do badania bólu neuropatycznego spowodowanego przez LDH6. Pozwalają one na pomiary behawioralne w celu oceny skuteczności terapii Tuina i dostarczają próbek patologicznej fizjologii LDH. Na przykład próbki ze zwojów korzenia grzbietowego w udzie można pobrać w celu zweryfikowania zmian w komórkach zwoju korzenia grzbietowego. Przewlekła kompresja modelu zwoju korzenia grzbietowego (CCD) jest powszechnie stosowana do oceny patologicznej fizjologii LDH, ponieważ powoduje uszkodzenie morfologii komórek zwoju korzenia grzbietowego, które są zgodne ze zmianami patologicznymi obserwowanymi w klinicznych przypadkach ucisku nerwów spowodowanego przepukliną dysku7.
Wielu uczonych przeprowadziło kilka eksperymentów na zwierzętach dotyczących analgezji akupresury8,9,10. Jednak wykonując operacje akupresury na modelach zwierzęcych, często naśladują one ludzką akupresurę. Na efekt terapeutyczny akupresury mają wpływ takie czynniki, jak wielkość, częstotliwość i kierunek przyłożonej siły11,12,13. Jeśli w eksperymencie brakuje ujednoliconego standardu akupresury, takiego jak siła, częstotliwość i czas trwania operacji, może to spowodować pewne odchylenia w wynikach eksperymentu. W artykule przedstawiono zestaw planów leczenia akupresury opartych na charakterystyce szczurów z CCD i promuje rozwój standaryzowanych operacji akupresury w modelach zwierzęcych.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Ta praca została przeprowadzona w Laboratorium Bólu Instytutu Neurobiologii na Uniwersytecie Fudan. Eksperymenty zostały zatwierdzone i ściśle przestrzegały wytycznych dotyczących ochrony zwierząt laboratoryjnych ustanowionych przez Międzynarodowe Stowarzyszenie Badań nad Bólem (LASP) dla wszystkich zabiegów chirurgicznych i obchodzenia się ze zwierzętami. Do niniejszego badania wykorzystano szczury Sprague-Dawley (SD) klasy czystej, składające się z 32 samców w wieku od 40 do 50 dni, o średniej wadze 220 ± 1,38 g. Szczury te zostały pozyskane z Centrum Zwierząt Doświadczalnych Akademii Nauk Przyrodniczych w Szanghaju, Chińskiej Akademii Nauk. Zwierzęta były pod odpowiednią opieką i trzymane w dedykowanym pomieszczeniu z niezależną wentylacją, regulowaną temperaturą (22 ± 1 °C) i wilgotnością (40%-50%). Szczury miały dostęp do odpowiedniej ilości pożywienia i wody w swoich klatkach. W pomieszczeniu dla zwierząt laboratoryjnych obowiązywał 12-godzinny cykl światła i ciemności, aby utrzymać regularność rytmu dobowego szczurów, a wyznaczony personel regularnie wymieniał wyściółkę. Zdjęcie rentgenowskie wykonano na Wydziale Radiologii Szpitala Zintegrowanej Tradycyjnej Medycyny Chińskiej i Zachodniej Yueyang, afiliowanego przy Uniwersytecie Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Szanghaju.
1. Uczestnicy badania i grupowanie
2. Ustanawianie modelu zwierzęcego
3. Terapia Tuina
4. Testy behawioralne na ból
UWAGA: Testy behawioralne zostały przeprowadzone przed modelowaniem, po modelowaniu, w dniu interwencji 1, w dniu interwencji 3, w dniu interwencji 7, w dniu interwencji 14, w dniu interwencji w 17 i w dniu interwencji w 21. dniu.
5. Perfuzja
6. Kolekcja ganglionu korzenia grzbietowego
UWAGA: Po perfuzji szybko odetnij odcinek lędźwiowy kręgosłupa szczura. Zlokalizuj otwór międzykręgowy L5 i L4, łącząc najwyższe punkty grzebienia biodrowego po obu stronach z wyrostkiem kolczystym lędźwiowym L5 za pomocą tej metody pozycjonowania i usuń ganglion korzenia grzbietowego z otworu międzykręgowego. Konkretna metoda zbierania jest następująca:
7. Kriosekcja
8. Barwienie hematoksyliną i eozyną
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Terapia Tuina może pomóc obniżyć progi stymulacji mechanicznej i termicznej u szczurów spowodowane modelowaniem CCD
Po 17 dniach terapii Tuina zaobserwowano istotną różnicę w progach PWT między szczurami z CCD otrzymującymi terapię Tuina a grupą nieleczoną CCD (P = 0,021, <0,05) (Rycina 6 i Tabela 1).
Szczury w grupie CCD otrzymującej terapię Tuina wykazały poprawę progu bólu od początku leczenia, a znacząca różnica ...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Nasza grupa badawcza przeprowadziła odpowiednie badania nad parametrami manipulacji Tuina we wczesnym stadium. Po pierwsze, ważne jest, aby ustawić intensywność siły do manipulacji Tuina. W klinicznej Tuinie praktycy dostosowują intensywność siły zgodnie ze swoim doświadczeniem i subiektywnymi odczuciami pacjentów, osiągając najlepszy efekt Tuiny poprzez komunikację. Nie jest to jednak możliwe w eksperymentach na zwierzętach. W eksperymentach na zwierzętach "próg odpowiedzi" jest używany do określenia intensywności manip...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Ta praca była wspierana przez ShanghaiCritical Clinical Specialties ConstructionProject(Numer grantu: Shslczdzk04001); program żeglarski Szanghajskiej Komisji Nauki i Technologii (numer grantu:22YF1444300); Projekty w ramach budżetu Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Szanghaju (numer grantu: 2021LK091).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Pręt ze stali nierdzewnej "L" (4 mm długości i 0,4 mm średnicy) | ręcznie robiony | / | Do modeli CCD |
| Aparatura pomiarowa ALMEMO | ahlborn | 2450-1 | Test mechanicznego progu wycofania |
| Krajalnica o stałej temperaturze CM-1900 | Leica | 1491950C1US | Do produkcji próbek |
| Środek dezynfekujący (jod) 100 ml / butelka | LIRCON/Shandong Lilkang | / | Do dezynfekcji |
| Jednorazowa sterylna strzykawka 5 ml | Shanghai Misha Wa Medical Industry | / | Do wstrzykiwań |
| Mikroskop elektronowy CX-31 | Olympus, Japonia | BJ002318 | Do obserwacji próbki |
| Zapisy nacisku na palec | Suzhou Changxian Technologia optoelektroniczna | CX1003w | Do manipulacji Tuina |
| Płyta piankowa (35 cm x 20 cm) | ręcznie robione | / | Jest to nasz domowy aparat do mocowania szczurów |
| MERSILK W2512 | Johnson & Johnson | / | Do szwu tkankowego |
| Neutralny balsam | Sinopharm Odczynnik chemiczny | 10004160 | Do produkcji próbek |
| paraformaldehyd | Chiński narodowy odczynnik chemiczny | Do produkcji próbek | |
| Pentobarbital sodu | Sigma-Aldrich | P3761 | Do znieczulenia szczurów |
| Aparatura do badania podeszwowego (metoda Hargreavesa) dla myszy i szczurów | IITC Life Nauka | / | Opóźnienie wycofania łapy |
| Precyzyjna waga elektroniczna do eksperymentu JY3002 | Shanghai Precision Scientific Instrument | / | Ważenie szczura |
| Maszynka do strzyżenia włosów szczura | Philips | HP6341/00 | Golenie futra szczura |
| Ogranicznik dla szczurów | Uniwersytet Tongji (wykonany samodzielnie) | / | Jest to domowy aparat wyprodukowany przez Uniwersytet Tongji, który może skutecznie unieruchomić szczury i całkowicie odsłonić ich tylne kończyny. |
| Tissue-Tek O.C.T. Compound | SAKURA | 4583 | Do produkcji próbek |
| Uratan | China National Chemical Reodczynnik | Do znieczulenia | |
| detektora rentgenowskiego szczura XR-600 | Dongguan Kaso Electronic Technology | / | Badanie modeli CCD |
| ksylen | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | Do produkcji próbek |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie