$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Trypanosomatoza jest poważnym wyzwaniem dla globalnych problemów zdrowotnych ze względu na różnorodność gatunków odzwierzęcych powodujących choroby u ludzi o szerokim zasięgu geograficznym poza kontynentami afrykańskimi i amerykańskimi, takimi jak Azja Południowa i Południowo-Wschodnia1,2,3. Ludzka trypanosomatoza afrykańska (HAT) lub śpiączka jest wywoływana przez Trypanosoma brucei gambiense i T. b. rhodesiense, które wytwarzają odpowiednio formy przewlekłe i ostre, reprezentujące główne rozprzestrzenianie się w Afryce. Pasożyt sprawczy należy do grupy Salivaria ze względu na przenoszenie przez zakażoną ślinę much Tse-tse4. dobrze znana trypanosomatoza amerykańska (choroba Chagasa) wywoływana przez T. cruzi stanowi zagrożenie dla zdrowia publicznego w krajach nieendemicznych; w tym Kanada, USA, Europa, Australia i Japonia, ze względu na częstą migrację osobników z obszarów endemicznych5. Zakażenie trypanosomem należy do grupy Stercoraria, ponieważ jest przenoszone przez zakażony kał robaków reduviiid. Trypanosomatozy i trypanosomozy (choroba Surra) wywołane zakażeniem T. evansi są endemiczne w Afryce, Ameryce Południowej, Azji Zachodniej i Wschodniej oraz krajach Azji Południowej i Południowo-Wschodniej3,6. Chociaż zgłoszono ludzką trypanosomatozę wywołaną przez trypanosom3,4,7,8,9,10,11,12, Droga przenoszenia infekcji pasożytem jest dyskutowana: albo mechaniczna, albo zakażona krew przez owady hematofagiczne, takie jak muchy tse-tse i tabanidy lub muchy końskie6,7,8,9,10,12,13,14. W Tajlandii nie znaleziono żadnego opisu przypadku, jednak opublikowano wysoką częstość występowania infekcji T. evansi u psów15, koni wyścigowych i bawołów wodnych w regionie wschodnim16, co sugeruje, że mogło dojść do nabytej transmisji między zwierzętami domowymi. Zgłoszono kilka nietypowych zakażeń u ludzi wywołanych przez trypanosomy zwierzęce (T. vivax, T. b. brucei, T. congolense, T. lewisi i T. evansi), które nie są klasycznymi formami ludzkich trypanosomów17. Świadomość na temat nietypowych zakażeń u ludzi może być niedoszacowana, co podkreśla potrzebę ulepszonych testów diagnostycznych i badań terenowych w celu wykrywania i potwierdzania tych nietypowych przypadków oraz umożliwienia właściwej kontroli i leczenia chorób chorobotwórczych zwierząt, które mają wpływ na globalny inwentarz żywy, bezpieczeństwo żywnościowe18 i opiekę zdrowotną dla ludzi. Doprowadziło to do opracowania potencjalnej strategii zintegrowanej z istniejącą powszechnie stosowaną metodą (badanie mikroskopowe) w celu szybkiego badania przesiewowego próbek krwi w odległych obszarach podczas aktywnego nadzoru, umożliwiając identyfikację stref krytycznych w celu ograniczenia i kontroli choroby.
Sporadyczne występowanie choroby Surra u wielu zwierząt domowych, takich jak dromadery, bydło, konie i psy, które wywołują euryxeniczne T. evansi, może być odzwierzęce dla ludzi1,4,13,14. Zakażenie człowieka wydaje się niemożliwe, ponieważ czynnik trypanolityczny w ludzkiej surowicy, wyrażany przez gen podobny do , jest w stanie zapobiegać ludzkim T. brucei i T. congolense12,19. Ponadto, jak pokazuje pierwszy opis przypadku z Indii, choroba nie ma związku z pacjentami z HIV z obniżoną odpornością4. Jak opisano powyżej, możliwe zakażenie u ludzi może być związane z niedoborem lipoprotein o dużej gęstości z nieprawidłową funkcją czynnika litycznego trypanosomu, który jest rzadką autosomalną recesywną chorobą genetyczną, a mianowicie chorobą Tangeru4. W 2016 roku u pacjenta z Wietnamu odkryto dwa allele APOL1 typu dzikiego i stężenie APOL1 w surowicy w normalnym zakresie. Jednak teoria niedoboru APOL-1 nie jest już uważana za ważną12. Dlatego jednym z możliwych mechanizmów zakażenia trypanosomem jest bezpośredni kontakt rany z zakażoną krwią zwierzęcą podczas pracy w hodowli zwierząt4,12. Badania mikroskopowe ujawniają, że morfologia T. evansi jest monomorficzną formą trypomastigoty, w tym dominującym długim, smukłym, wiciowym i dzielącym się trypanosomem, który jest podobny do ich krewnego gatunku T. brucei1,12,13. Jądro znajduje się w pozycji centralnej z widocznym małym kinetoplastem w pozycji tylnej. Poprzednie badanie wykazało, że pasożyt może występować w dwóch porównywalnych formach, znanych jako forma klasyczna i skrócona. Konieczne jest jednak potwierdzenie ich patogennego wpływu na gospodarzy20. Przebieg objawów jest różny, począwszy od okresowej gorączki związanej z dreszczami i poceniem się. Suramin, na szczęście, jest skuteczną terapią pierwszego rzutu we wczesnym stadium ludzkiej trypanosomatozy afrykańskiej bez inwazji ośrodkowego układu nerwowego (OUN), lecząc pacjentów w Indiach i Wietnamie4,12,21.
Z wyjątkiem badania objawów klinicznych, istnieje kilka metod diagnostycznych dla pasożytów T. evansi, w tym parazytologiczna obserwacja mikroskopowa4,9,12, serological4,8,9,10,12, oraz molekularne testy biologiczne4,12. Cienkie warstwy krwi barwione preparatem Giemsa są często używane do wizualizacji pasożyta obecnego pod mikroskopem, co jest rutynowo i powszechnie stosowane22. Procedura wydaje się jednak wykonalna; Niemniej jednak jest to czasochłonne i pracochłonne, ma zmienność oceny między oceniającymi, jest wrażliwe tylko na ostrą fazę i wymaga osobistego stażysty23. Zarówno biologia molekularna, jak i badania serologiczne wymagały również wysoko wykwalifikowanego personelu do wykonywania wielu procesów przygotowania próbek, w tym ekstrakcji i oczyszczania próbek przed testowaniem ich za pomocą drogiej aparatury, która jest trudna do standaryzacji, ryzyka zanieczyszczenia materiałami pozapasożytniczymi i rozbieżności w wynikach24. W oparciu o przesłanki opisane powyżej, potrzebna jest technologia szybkich i wczesnych badań przesiewowych, aby wesprzeć badanie nadzoru terenowego i zapewnić, że wyniki ankiety zostaną przedstawione w odpowiednim czasie w celu zidentyfikowania strefy hotspotu do dalszej kontroli transmisji choroby1,8. Urządzenia komputerowe (CAD) zostały zaproponowane jako innowacyjna technologia dla dziedzin medycznych, w tym zadań histopatologicznych i cytopatologicznych25. Wspomniany powyżej CAD został wykonany z dużą prędkością i obliczony przy użyciu rozpoznawania wzorców, a mianowicie sztucznej inteligencji (AI). Metoda sztucznej inteligencji jest realizowana przy użyciu algorytmów konwolucyjnych sieci neuronowych, które można wykorzystać do radzenia sobie z dużą liczbą próbek zestawów danych, w szczególności podejścia opartego na uczeniu nadzorowanym, które trenuje dobrze wyszkolony model po zużyciu danych.
Ogólnie rzecz biorąc, sztuczna inteligencja to zdolność komputerów do rozwiązywania zadań wymagających specjalistycznej inteligencji, takich jak etykietowanie danych. Uczenie maszynowe (ML), poddziedzina sztucznej inteligencji, jest reprezentowane jako system komputerowy z dwoma różnymi procesami składającymi się z ekstrakcji cech i rozpoznawania wzorców. Głębokie uczenie (DL), czyli zaawansowane algorytmy uczenia maszynowego, odnosi się do rozwoju skomputeryzowanych programów i urządzeń porównujących wydajność podobną do ludzkiej z poziomami dokładności większymi i równymi tym, które osiągają profesjonaliści26. Obecnie rola DL w medycynie i weterynarii obiecująco rozszerza się i rewolucjonizuje profilaktykę chorób zakaźnych w celu niedawnej profilaktyki i kierowania jej do indywidualnego personelu medycznego22,27. Potencjalna aplikacja DL jest nieograniczona dzięki etykietom jakości i dużej liczbie rozszerzonych zbiorów danych, co uwalnia specjalistów do zarządzania zadaniem projektowym. W szczególności postęp w obrazie cyfrowym wraz z analizą wspomaganą komputerowo poprawił automatyczną diagnostykę i badania przesiewowe w pięciu kategoriach zgłaszanych patologii; w tym metody statyczne, dynamiczne, zrobotyzowane, obrazowania całych slajdów i metody hybrydowe28. Należy wziąć pod uwagę, że integracja podejść opartych na algorytmach DL i cyfrowych danych obrazowych może zachęcić lokalny personel do korzystania z tej technologii w codziennych praktykach.
Poprzednio udowodniono wzrost dokładności przewidywania wynikający z zastosowania modelu hybrydowego27. Aby zidentyfikować pasożyta trypanosomu na obrazach mikroskopowych, w badaniu przedstawiono dwa modele hybrydowe, wykorzystujące algorytmy YOLOv4-tiny (wykrywanie obiektów) i Densenet201 (klasyfikacja obiektów). Spośród kilku modeli detekcji, YOLOv4-tiny ze szkieletem CSPDarknet53 wykazał się wysoką wydajnością jako wynik predykcji pod względem lokalizacji i klasyfikacji29. Ponieważ detektor w czasie rzeczywistym zmodyfikował optymalną równowagę między rozdzielczością sieci wejściowej, ilością warstwy konwolucyjnej, całkowitym parametrem i liczbą wyjść warstwy, poprawił priorytetyzację dużych prędkości operacyjnych i optymalizację pod kątem obliczeń równoległych w porównaniu z poprzednimi wersjami. Gęsta sieć konwolucyjna (DenseNet) to kolejny popularny model, który osiąga najnowocześniejsze wyniki w konkurencyjnych zestawach danych. DenseNet201 przyniósł podobny błąd walidacji porównywalny do tego z ResNet101; jednak DenseNet201 ma mniej niż 20 milionów parametrów, czyli mniej niż ponad 40 milionów parametrów ResNet10130. W związku z tym model DenseNet może poprawić dokładność przewidywania przy rosnącej liczbie parametrów bez oznak nadmiernego dopasowania. W tym przypadku program sztucznej inteligencji (AI) wykorzystuje hybrydowy algorytm głębokiego uczenia z głębokim wykrywaniem i klasyfikacją sieci neuronowych na wewnętrznej platformie CiRA CORE. Opracowany program może zidentyfikować i sklasyfikować gatunki trypanosomów pierwotniaków, a mianowicie Trypanosoma cruzi, T. brucei i T. evansi, na podstawie obrazów mikroskopowych zanurzonych w oleju. Technologia ta może zrewolucjonizować nadzór i kontrolę chorób, zapewniając szybką, zautomatyzowaną i dokładną metodę badań przesiewowych. Może to pomóc lokalnemu personelowi w podejmowaniu bardziej świadomych decyzji dotyczących strategii blokowania transmisji w przypadku pasożytniczej choroby pierwotniaków.