Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zastosowanie akupotomii w modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego u królika

2.3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/65584

⸱

20 października 2023

W tym artykule

Podsumowanie

W tym protokole, model choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego został przygotowany przy użyciu zmodyfikowanej metody Videmana, a procedury operacyjne i środki ostrożności związane z akupotomią są szczegółowo opisane. Skuteczność akukotomii wykazano poprzez badanie właściwości mechanicznych mięśnia czworogłowego uda i ścięgna oraz właściwości mechanicznych i morfologicznych chrząstki.

Streszczenie

Choroba zwyrodnieniowa stawu kolanowego (KOA) jest jedną z najczęściej spotykanych chorób na oddziale ortopedycznym, co poważnie obniża jakość życia osób z KOA. Wśród kilku czynników chorobotwórczych, jedną z głównych przyczyn KOA jest brak równowagi biomechanicznej stawu kolanowego. Akupotomologia uważa, że przywrócenie równowagi mechanicznej stawu kolanowego jest kluczem do leczenia KOA. Badania kliniczne wykazały, że akupotomia może skutecznie zmniejszyć ból i poprawić ruchomość kolana poprzez zmniejszenie adhezji, przykurczu tkanek miękkich i punktów koncentracji stresu w mięśniach i ścięgnach wokół stawu kolanowego.

W tym protokole użyliśmy zmodyfikowanej metody Videmana do stworzenia modelu KOA poprzez unieruchomienie lewej tylnej kończyny w pozycji prostej. Szczegółowo przedstawiliśmy metodę działania i środki ostrożności związane z akupotomią oraz oceniliśmy skuteczność akupotomii w połączeniu z teorią "Modulacji mięśni i ścięgien w leczeniu zaburzeń kości" poprzez wykrywanie właściwości mechanicznych mięśnia czworogłowego uda i ścięgna, a także mechaniki i morfologii chrząstki. Wyniki pokazują, że akupotomia działa ochronnie na chrząstkę poprzez dostosowanie właściwości mechanicznych tkanek miękkich wokół stawu kolanowego, poprawę środowiska stresu chrzęstnego i opóźnienie degeneracji chrząstki.

Wprowadzenie

Choroba zwyrodnieniowa stawu kolanowego (KOA) jest najczęstszą formą choroby zwyrodnieniowej stawów, często rozpoznawaną jako choroba całego stawu charakteryzująca się zwyrodnieniem chrząstki stawowej, które objawia się klinicznie bólem, obrzękiem i ograniczoną ruchomością dotkniętych stawów1. Według najnowszych statystyk epidemiologicznych, do 2020 r. KOA dotknęła 654,1 miliona osób na całym świecie, które ukończyły 40 lat. Częstość występowania i częstość występowania KOA wzrasta wraz z wiekiem, jest najwyższa u osób w średnim i starszym wieku i dotyka więcej kobiet niż mężczyzn2. Częstość występowania KOA prawdopodobnie wzrośnie ze względu na starzenie się populacji i epidemię otyłości na całym świecie, stanowiąc rosnące zagrożenie dla globalnego zdrowia publicznego. Wiek, płeć, otyłość, uraz i inne skomplikowane czynniki ryzyka związane z KOA mają bezpośredni wpływ na niestabilność kolana, co sprawia, że nierównowaga biomechaniczna w stawach kolanowych jest jedną z głównych przyczyn KOA3.

W normalnych warunkach fizjologicznych, staw kolanowy jest w stanie równowagi mechanicznej, co zapewnia równomierne rozłożenie obciążeń mechanicznych w stawie na chrząstce. Każda nierównowaga mechaniczna w stawie kolanowym może prowadzić do nieprawidłowego naprężenia w chrząstce, co skutkuje zwyrodnieniem chrząstki i wystąpieniem KOA4. Układ mięśniowo-ścięgnisty jest głównym układem dynamicznym, który utrzymuje równowagę mechaniczną stawu kolanowego. Skoordynowany ruch układu mięśniowo-ścięgnistego prostownika i zginacza może równomiernie rozłożyć obciążenie generowane przez ruch na powierzchni chrząstki, unikając nierównowagi metabolicznej lokalnych naprężeń chrząstki poza jej obciążeniem fizjologicznym, co powoduje utratę chrząstki5. Zmniejszona siła mięśni jest główną przyczyną zaburzeń ruchu śródmięśniowego i uszkodzeń chrząstek, które mogą wystąpić przed objawowym KOA.

KOA może również indukować artrogenne hamowanie mięśni (AMI), objawiające się osłabieniem mięśni i zmniejszoną siłą mięśni wokół kolana6. Wśród tych mięśni grupa mięśnia czworogłowego uda pełni funkcję jedynego prostownika kolana, ważnej struktury w utrzymaniu stabilności stawu kolanowego. Badania wykazały, że zmniejszenie pola przekroju mięśnia czworogłowego uda i siły mięśni jest istotnie i dodatnio skorelowane z progresją KOA7. Spadek siły mięśnia czworogłowego uda wpływa na wzorzec chodu, stabilność kolana, wzorce ruchowe i wiele innych funkcji. Co więcej, spadek siły mięśni upośledza funkcję ścięgien, objawiając się zmniejszeniem sztywności ścięgien, modułu sprężystości i innych właściwości biomechanicznych8. W długotrwałej naprawie przeciążenia mogą wystąpić zmiany takie jak zrost i przykurcz w mięśniach i ścięgnach stawu kolanowego, uszkadzając ich właściwości mechaniczne, powodując niestabilność stawu i ostatecznie tworząc błędne koło patologicznych zmian KOA. W leczeniu KOA kluczowa jest zatem poprawa właściwości mechanicznych układu mięśniowo-ścięgnistego i przywrócenie równowagi mechanicznej stawu.

Wśród przyczyn KOA, głównym czynnikiem wywołującym ból kolana, dysfunkcję, zmiany zapalne i >. Dlatego kluczem do leczenia KOA jest przywrócenie równowagi biomechanicznej stawu kolanowego. Akupotomologia uważa, że etiologia i patogeneza KOA to "nierównowaga mechaniczna". Kiedy charakterystyka mechaniczna tkanek miękkich wokół kolana zmienia się nieprawidłowo, staw kolanowy traci równowagę mechaniczną, a nieprawidłowe środowisko naprężeń mechanicznych stawu przyspiesza zwyrodnienie, powodując stymulację zapalną w celu dalszego pogorszenia zrostów tkanek miękkich, przykurczów i dalszego spadku stabilności stawu. To błędne koło w końcu przeradza się w KOA. Rozluźniając zrosty i przykurcze tkanek miękkich, a także zmniejszając koncentrację stresu w mięśniach i ścięgnach, akupotomia w połączeniu z teorią "Modulacji mięśni i ścięgien w leczeniu zaburzeń kości" poprawia mechanikę tkanek miękkich i "moduluje mięśnie i ścięgna", co równoważy mechaniczne obciążenie stawu, skutecznie łagodząc zwyrodnienie chrząstki i "lecząc zaburzenia kości"10. W zakresie doboru modelu zwierzęcego, w oparciu o cel niniejszego badania, opracowaliśmy model KOA zmodyfikowaną metodą Videmana polegającą na unieruchomieniu lewej kończyny tylnej.

Ten artykuł szczegółowo opisuje tworzenie modelu KOA przy użyciu zmodyfikowanej metody Videmana unieruchamiania lewej kończyny tylnej oraz metody działania i środków ostrożności akupotomii. Skuteczność akupotomii wykazujemy poprzez badanie właściwości mechanicznych mięśnia czworogłowego uda i ścięgna oraz wykrywanie zmian w naprężeniu i morfologii chrząstki stawowej.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały przeanalizowane i zatwierdzone przez Komisję Etyki ds. Zwierząt Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Pekinie (nr BUCM-4-2022010101-1097). W niniejszym protokole 24 6-tygodniowe samce królików nowozelandzkich utrzymywano w określonych warunkach: w temperaturze 20-25 °C, przy wilgotności 50-60% i 12-godzinnym cyklu dobowym światła/ciemności, z wolnym dostępem do standardowej karmy. Króliki znieczulono i uśmiercono poprzez połączenie głębokiej anestezji i embolizacji powietrznej. Ból jest jedną z typowych cech patologicznych KOA i stanowi również jeden z kluczowych wskaźników służących do oceny modeli zwierzęcych KOA oraz metod interwencyjnych, dlatego podczas przygotowywania modelu nie stosowano leków przeciwbólowych.

1. Model królika w OA

  1. Zanurz króliki w narkozie, podając dożylnie w okolicach brzegu ucha 3% roztwór pentobarbitalu sodowego (30 mg/kg). Aby potwierdzić odpowiedni poziom znieczulenia, należy sprawdzić, czy odruch rogówkowy jest znacznie osłabiony lub zniesiony, a także czy brak jest reakcji bólowej podczas zaciskania skóry kleszczykami hemostatycznymi. W trakcie znieczulenia co 15 min należy zakraplać do oczu królików 2-3 krople środka nawilżającego, aby zapobiec ich wysychaniu.
  2. Po znieczuleniu unieruchom każdego królika w pozycji na plecach, wyciągając lewą kończynę tylną do pełnego wyprostu.
  3. Unieruchom lewą kończynę tylną każdego królika w pozycji wyprostowanej.
    1. W pierwszej warstwie użyj taśmy medycznej, aby zakryć skórę królika od pachwiny do stawu skokowego.
    2. W drugiej warstwie owiń taśmę medyczną dwustronną taśmą piankową o szerokości 36 mm, a następnie owiń bandażem polimerowym od pachwiny do stawu skokowego. Upewnij się, że staw kolanowy jest wyprostowany pod kątem 180°, a staw skokowy znajduje się w zgięciu grzbietowym o 60°.
    3. W trzeciej warstwie unieruchom stawy za pomocą małych szyn z przodu i z tyłu stawów kolanowych oraz skokowych, a następnie owiń naj zewnętrzną warstwę siatką stalową, aby chronić ją przed przegryzieniem. Pozostaw palce u stóp odkryte, aby móc obserwować, czy krążenie krwi jest prawidłowe.
  4. Unieruchom zwierzęta na 6 tygodni w celu stworzenia modelu KOA (Rysunek 1).
    UWAGA: 1) Podczas przygotowania modelu sprawdzaj unieruchomienia co drugi dzień. Jeśli jakiekolwiek elementy są luźne lub odklejone, znieczul króliki i ponownie unieruchom lewe kończyny tylne w pozycji wyprostowanej. 2) Na dnie klatek ułóż maty ochronne, aby zapobiec blokowaniu się kończyn królików i uniknąć obrażeń.

2. Interwencja akupotomią

UWAGA: Przed rozpoczęciem zabiegu akupotomii należy znieczulić króliki, podając 3% pentobarbital sodu (30 mg/kg) poprzez wstrzyknięcie dożylne w obrębie brzegu małżowiny usznej.

  1. Wyznaczenie punktów zabiegowych.
    1. Wygolić futro w okolicy stawu kolanowego lewej kończyny tylnej królika.
    2. Zbadać palpacyjnie przyczepy ścięgien przyśrodkowego mięśnia udowego, ścięgna mięśnia prostego uda, ścięgna mięśnia dwugłowego uda oraz kaletkę gęsią. Patologiczne zgrubienia miejscowych mięśni zaznaczyć sterylnym markerem do skóry. Zdezynfekować staw kolanowy trzykrotnie, stosując naprzemiennie jodofor medyczny i 75% alkohol medyczny.
  2. Przeprowadzenie akupotomii
    1. Utrzymywać ostrze do akupotomii równolegle do kierunku prowadzenia, ścięgna oraz osi podłużnej kończyny.
    2. Kciukiem lewej ręki docisnąć skórę w miejscu punktu zaznaczonego markerem i przesunąć go bocznie, tak aby naczynia krwionośne i nerwy znalazły się po brzusznej stronie kciuka.
    3. Trzymając uchwyt do akupotomii w prawej ręce, szybko i z niewielką siłą docisnąć go tak, aby ostrze do akupotomii błyskawicznie przebiło skórę. Powoli wprowadzić ostrze do akupotomii w stronę miejscowych zgrubień mięśniowych, wykonując nacięcia podłużne i ruchy wahadłowe w kierunku bocznym.
    4. Po zakończeniu zabiegu akupotomii ponownie zdezynfekować staw kolanowy i założyć plaster.
  3. Zabieg ten powtarzać raz w tygodniu przez 4 tygodnie (Rycina 2).
    UWAGA: 1) W przypadku braku wyczuwalnych zgrubień lub tkanek strunowatych w przyczepach ścięgien mięśnia obszernego przyśrodkowego, mięśnia obszernego bocznego, mięśnia prostego uda, mięśnia dwugłowego uda lub w kaletce gęsiej, igłę do akupotomii należy wykorzystać do bezpośredniego uwolnienia ich przyczepów ścięgnistych. 2) Podczas interwencji akupotomijnej nie unieruchamiać lewych kończyn tylnych królików w grupie akupotomii oraz w grupie modelowej w pozycji wyprostu.

3. Moduł sprężystości mięśnia czworogłowego uda

UWAGA: 1) W tym eksperymencie wykorzystano urządzenie diagnostyczne do ultrasonografii z funkcją elastografii fali poprzecznej (SWE) w czasie rzeczywistym w celu pomiaru modułu sprężystości mięśnia czworogłowego uda in vivo w każdej grupie królików. 2) Osoba wykonująca pomiary powinna być doświadczonym sonografem w zakresie diagnostyki ultrasonograficznej. Podczas pomiaru głowicę ultrasonograficzną należy delikatnie przyłożyć do powierzchni skóry mięśnia czworogłowego, aby uniknąć miejscowego napięcia mięśniowego. Pomiary należy przeprowadzać, gdy zwierzę znajduje się w stanie spoczynku, bez walki czy aktywności. Jeśli zwierzę jest aktywne, należy odczekać do czasu jego uspokojenia przed przeprowadzeniem badania.

  1. Wygolić sierść, aby odsłonić skórę w obrębie mięśnia czworogłowego uda lewej tylnej kończyny.
  2. Użyć konwencjonalnego ultradźwiękowego obrazowania dwuwymiarowego, aby zlokalizować brzusiec mięśnia czworogłowego i wyznaczyć obszar zainteresowania (ROI), ustawiając głębokość na 1-2 cm.
  3. Uruchomić tryb SWE w celu przeprowadzenia inspekcji.
    1. Ustawić obszar zainteresowania jednolicie jako obszar kołowy o średnicy 2 mm, z głębokością ~0,5-1 cm od powierzchni skóry.
    2. Użyć aparatu do diagnostyki ultradźwiękowej w celu wygenerowania impulsu siły promieniowania akustycznego, aby stymulować tkankę mięśniową i uzyskać elastografię tkanki.
    3. Odczekać 2-3 s do ustabilizowania się obrazu, a następnie go zamrozić. Aktywować funkcję Q-BOX urządzenia, aby zmierzyć moduł Younga mięśnia czworogłowego.
    4. Odczekać, aż system automatycznie obliczy wartości maksymalną, minimalną i średnią (jednostka: KPa) modułu Younga dla ROI. Wybrać trzy obszary ROI na tej samej głębokości w celu wykonania trzech pomiarów i przyjąć wartość średnią do analizy statystycznej.
      UWAGA: Operator powinien być doświadczonym sonografem w zakresie badań ultradźwiękowych. Podczas pomiaru głowicę ultradźwiękową należy delikatnie przyłożyć do powierzchni skóry mięśnia czworogłowego, aby uniknąć lokalnego napięcia mięśniowego. Pomiary należy wykonywać, gdy zwierzę znajduje się w stanie spoczynku, bez walki lub aktywności. Jeśli zwierzę jest aktywne, należy odczekać, aż się uspokoi przed przeprowadzeniem badania.

4. Pomiar siły skurczu mięśnia czworogłowego uda

UWAGA: Po pomiarze siły skurczu mięśnia czworogłowego uda króliki zostały poddane eutanazji poprzez zator powietrzny w znieczuleniu.

  1. Zanurzyć króliki w narkozie, podając dożylnie w okolicach brzegu małżowiny usznej 3% roztwór pentobarbitalu sodowego (30 mg/kg). Aby potwierdzić osiągnięcie odpowiedniego poziomu znieczulenia, należy sprawdzić, czy odruch rogówkowy jest znacznie osłabiony lub zniesiony oraz czy brak jest reakcji bólowej podczas zaciskania skóry kleszczykami hemostatycznymi. W trakcie anestezji co 15 min należy dodawać do oczu królików 2–3 krople środka nawilżającego, aby zapobiec ich wysychaniu.
  2. Odsłoń mięśnie czworogłowe i przymocuj przetwornik napięcia.
    1. Naciąć skórę poniżej rzepki, wzdłuż osi podłużnej kończyny w kierunku podstawy uda, a następnie kontynuować nacięcie skóry ku górze o 3-4 cm. Ostrożnie odwarstwić skórę i powięź, aby odsłonić mięsień. Przeciąć więzadło rzepki i ostrożnie oddzielić mięsień czworogłowy od złącza miednicznego, pozostawiając mięsień czworogłowy w połączeniu z kością biodrową.
    2. Podwiąż szwy chirurgiczne w miejscu połączenia ścięgna między rzepką a mięśniem czworogłowym. Rozciągnij mięsień do jego pełnej długości w stanie naturalnym, a następnie przymocuj go do przetwornika naprężenia. Utrzymaj linię podwiązania na mięśniu w jednej linii z linią podwiązania na przetworniku siły.
    3. Przymocuj przetwornik naprężenia do uchwytu. Podłącz linię akwizycji sygnału z przetwornika naprężenia do procesora systemu akwizycji biosygnałów.
  3. Zmierz wydajność skurczową mięśnia czworogłowego uda.
    1. Wprowadź elektrody równolegle do brzucha mięśnia czworogłowego, unikając kontaktu między elektrodami.
    2. Naciśnij przycisk oscyloskopu. Dostosuj położenie przetwornika siły na uchwycie, aby utrzymać poziom bazowy na poziomie zero. Wybrać parametry stymulacji stymulatora za pomocą szerokość fali z 5 ms oraz a opóźnienie z 10 ms.
    3. Najpierw zastosuj pojedynczy bodziec, stopniowo zwiększając jego intensywność od zera w przyrostach 0,1 V. Obserwuj zmiany w krzywej skurczu mięśnia oraz amplitudę skurczu, aż do momentu wyznaczenia maksymalnej amplitudy pojedynczego skurczu (Pt) mięśnia czworogłowego. Zapisz tę wartość do późniejszych analiz statystycznych.
    4. Zastosuj stymulację wiązkową, przyjmując amplitudę bodźca wywołującą maksymalną amplitudę pojedynczego skurczu jako wartość bazową, a następnie stymuluj mięsień w sposób ciągły, stopniowo zwiększając częstotliwość bodźców. Obserwuj zmiany w krzywej skurczu mięśnia aż do momentu określenia maksymalnej amplitudy skurczu (Pt) mięśnia czworogłowego. Zapisz tę wartość do późniejszych analiz statystycznych.
      UWAGA: 1) Po każdym skurczu mięśnia należy pozostawić go na 30 s w celu rozluźnienia, stale zakraplając na niego roztwór buforu mięśniowego. 2) W trakcie zabiegu należy oceniać stopień znieczulenia, monitorując odruch powiekowy, rytm oddechowy, rozluźnienie mięśni oraz reakcję na uszczypnięcie skóry królików.

5. Właściwości mechaniczne ścięgna mięśnia czworogłowego

  1. Przygotowanie wstępne: W dniu badania zmierzyć długość, szerokość i grubość ścięgna mięśnia czworogłowego za pomocą suwmiarki, a następnie zainstalować specjalny zacisk antypoślizgowy w maszynie do badań zmęczeniowych. W celu przygotowania wstępnego powtórzyć cykl obciążania i odciążania 15 razy.
  2. Test relaksacji naprężeń: należy użyć czujnika w zakresie od 0 N do 100 N, rozciągnij go w prędkość z 5 mm/min do momentu osiągnięcia wymaganej długości, a następnie rozpocznij zbieranie danych. Ustaw dane komputerowe czas akwizycji z t (0), zbierając dane co 0,1 strwający 1 800 sPo upływie wyznaczonego czasu należy zarejestrować dane i krzywe.
  3. Próba rozciągania: należy użyć czujnika w zakresie od 0 N do 100 N i rozciągnąć go przy prędkość z 5 mm/min do maksymalnego obciążenia, aż do rozerwania próbki. Po zakończeniu badania obliczyć maksymalne przemieszczenie, obciążenie krytyczne oraz sztywność próbki.

6. Nacisk powierzchni styku stawu i ciśnienie jednostkowe chrząstki

  1. Ustabilizuj preparaty kości udowej i piszczelowej po obu stronach w pozycji wyprostowanej na uchwycie i przeprowadź test wstępnego obciążenia. Zmierz przybliżony zakres ruchu stawu kolanowego, wytnij papier wrażliwy na nacisk w tym samym kształcie i zabezpiecz go folią spożywczą.
  2. Umieść zamknięty papier wrażliwy na nacisk pomiędzy stawami kości piszczelowej i udowej, a następnie przeprowadź test nacisku w stawie kolanowym za pomocą ciśnienie z 5 mm/min oraz a maksimum ciśnienie 50 NUtrzymać ciśnienie przez 2 min aż do osiągnięcia 50 N po utrwaleniu się zabarwienia papieru czułego na nacisk.
  3. Po 2 minutach należy zdjąć papier czuły na nacisk, przymocować jego zabarwioną powierzchnię do arkusza papieru w formacie A4 i wykonać zdjęcia, umieszczając obok skalę.
  4. Prześlij obraz do komputera. Użyj wskazanego oprogramowania do pomiaru powierzchni oraz wielosegmentowego pomiaru figur nieregularnych. Zmierz ciśnienie wewnątrz i na zewnątrz stawów kości udowej oraz piszczelowej, a następnie zapisz wyniki.

7. Barwienie chrząstki stawu kolanowego safraniną O i Fast Green

  1. Po zakończeniu interwencji w postaci akupotomii, pobrać kompleks tkanki chrząstki i kości podchrzęstnej, a następnie zablokować go w parafinie. Pokroić przygotowane bloki woskowe i sporządzić preparaty na szkiełkach. Odparafinizować przygotowane skrawki tkankowe, stosując środowiskowy roztwór do odparafinizowania (I) oraz środowiskowy roztwór do odparafinizowania (II) przez 15 min każdy; następnie zanurzać je kolejno w ksylenie i bezwodnym etanolu (1:1), bezwodnym etanolu (I), etanolu 95%, etanolu 85% i etanolu 75%, przez 2-5 min na każdym etapie; na koniec namoczyć w wodzie destylowanej przez 15 min.
  2. Przeprowadzić barwienie.
    1. Barwić preparaty roztworem Fast Green przez 1 min. W trakcie tego procesu wyjmować szkiełka z roztworu i obserwować pod mikroskopem, aż tkanka nabierze ciemnozielonego koloru.
    2. Rozdzielenie barw: Spłukać nadmiar roztworu Fast Green wodą ultrapure. Szybko zanurzyć szkiełka w 1% roztworze kwasu octowego na 5-10 sekund. Ponownie opłukać szkiełko wodą ultrapure.
    3. Barwić preparaty w roztworze safraniny O przez 10-15 min, aż chrząstka zabarwi się na czerwono.
  3. Odwodnić i przejaśnić tkankę, zamontować preparaty na szkiełkach i obserwować pod mikroskopem.
    1. Zanurzać szkiełka kolejno w etanolu 75%, etanolu 85%, etanolu 95% i etanolu 100% przez 3-5 sekund.
    2. Zanurzyć szkiełka kolejno w środowiskowym roztworze do odparafinizowania (I) oraz środowiskowym roztworze do odparafinizowania (II) przez 10 min. Wyjąć szkiełka i nanieść neutralne medium żywiczne na przednią część szkiełka, omijając tkankę. Przyłożyć krawędź szkiełka nakrywkowe do szkiełka, a następnie powoli je opuścić, aby pokryło balsam neutralny. Usunąć powietrze i zapobiec powstawaniu pęcherzyków powietrza. Wyetrzeć nadmiar ksylenu i balsamu neutralnego, a następnie pozostawić na noc w temperaturze pokojowej.
    3. Obserwować preparaty pod mikroskopem i wykonać zdjęcia. Dla każdej grupy wybrać sześć próbek chrząstki kolanowej królika i dla każdej próbki losowo wybrać cztery różne pola widzenia do oceny. Ocenić histologię chrząstki dla każdej grupy zgodnie z metodą Mankina (Tabela 1).

8. Analiza statystyczna

  1. Dane przedstawiono jako średnią ± odchylenie standardowe (Statyczna równowaga, diagram ΣFx=0; przedstawia siły w równowadze, edukacyjny koncept fizyczny. ± s).
  2. Przeprowadzono jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA) oraz test LSD w celu określenia istotności statystycznej porównań wielu grup.
  3. Różnice uznano za istotne statystycznie, gdy P < 0,05.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Wyniki eksperymentalne właściwości mechanicznych mięśnia czworogłowego uda i ścięgna
Aby ocenić wpływ akupotomologii na właściwości mechaniczne mięśnia czworogłowego uda u królików z KOA, zastosowano odpowiednio ultrasionografię elastograficzną z wykorzystaniem fal ścinających w czasie rzeczywistym oraz przetwornik napięcia mięśniowego. W porównaniu z grupą kontrolną moduł Younga mięśnia czworogłowego uda w grupie KOA uległ zmniejszeniu (P < 0,05). W porównaniu z grupą KOA moduł Younga w ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Odpowiedni model zwierzęcy jest jednym z kluczowych czynników pozwalających osiągnąć cele eksperymentalne i wyjaśnić konkretne zagadnienie naukowe. Badanie to opierało się na teoriach "Zongjin kontrolujących kości i smarowanie stawów" oraz "nierównowagi mechanicznej" w akupotomologii, mających na celu wyjaśnienie naukowych konotacji leczenia KOA poprzez "modulowanie mięśni i ścięgien w leczeniu zaburzeń kości" w terapii akupotomii. Innymi słowy, akupotomia poprawia nieprawidłowe środowisko mechaniczne chrząstki poprzez r...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (No.82074523,82104996).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
AkupotomiaPekin Zhuoyue Huayou Medical Devices Co., Ltd.0,4 x 40 mm
Connect Cast Ortopedyczna taśma odlewniczaSuzhou Connect Medical Technology Co., Ltd.KCP0615,0 cm x 360 cm
Dwustronna taśma piankowa DeliGroup Co., Ltd.NO.3041636 mm x 5 jardów x 2,5 mm
Środowiskowe rozwiązanie do odparafinowaniaWuhan Servicebio Technology Co., Ltd.G1128
Absolutny etanolBeijing Hengkangda Medicine Co., Ltd.
Szybkie zielone rozwiązanieWuhan Servicebio Technology Co., Ltd.G1031
Fast grenn FCFSigma, Ameryka2353-45-9
Maszyna do badania zmęczeniaBOSE, AmerykaBose Electro Force 3300
Czterokanałowy rejestrator fizjologicznyChengdu Instrumeny FrctoryRM-6420
FPD-305EFuji, Japonia
FPD-306EFuji, Japonia
Roztwór hematoksylinyWuhan Servicebio Technology Co., Ltd.G1005
Medyczny środek dezynfekujący jodoforowyShan Dong Lircon Medical Technology Co., Ltd.
Taśma medycznaShandong Rongjian Sanitary Products Co., Ltd.2004021,5 x 500 cm
Przetwornik napięcia mięśniowego Chengdu Instrumeny FrctoryJH-2204005, 50 g
PrescaleFuji, Japonia
Ultradźwiękowy instrument diagnostyczny SWE w czasie rzeczywistymSuperSonic Imagine SA, FrancjaSuperSonic Imagine AixPlorer
Rhamsan gumWuhan Servicebio Technology Co., Ltd.
Safranine OSigma, Ameryka477-73-6
Roztwór Safraniny OWuhan Servicebio Technology Co., Ltd.G1015
Pakiet statystyczny dla nauk społecznych (SPSS)IBM, Ameryka
WG10004160

Bibliografia

  1. Roseti, L., Desando, G., Cavallo, C., Petretta, M., Grigolo, B. Articular cartilage regeneration in osteoarthritis. Cells. 8 (11), 1305(2019).
  2. Cui, A. Y., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29-30, 100587(2020).
  3. Miyauchi, A., et al. Alleviation of murine osteoarthritis by deletion of the focal adhesion mechanosensitive adapter, Hic-5. Sci Rep. 9 (1), 15770(2019).
  4. Wright, T. Biomechanical factors in osteoarthritis: the effects of joint instability. HSS J. 8 (1), 15-17 (2012).
  5. Patsika, G., Kellis, E., Kofotolis, N., Salonikidis, K., Amiridis, I. G. Synergetic and antagonist muscle strength and activity in women with knee osteoarthritis. J Geriatr Phys Ther. 37 (1), 17-23 (2014).
  6. Blalock, D., Miller, A., Tilley, M., Wang, J. X. Joint instability and osteoarthritis. Clin Med Insights. Arthritis and Musculoskelet Disord. 8, 15-23 (2015).
  7. Henriksen, M., Christensen, R., Danneskiold-Samsøe, B., Bliddal, H. Changes in lower extremity muscle mass and muscle strength after weight loss in obese patients with knee osteoarthritis: a prospective cohort study. Arthritis Rheum. 64 (2), 438-442 (2012).
  8. Schwartz, A. G., Lipner, J. H., Pasteris, J. D., Genin, G. M., Thomopoulos, S. Muscle loading is necessary for the formation of a functional tendon enthesis. Bone. 55 (1), 44-51 (2013).
  9. Felson, D. T. Osteoarthritis as a disease of mechanics. Osteoarthr Cartil. 21 (1), 10-15 (2013).
  10. Ma, S. N., et al. Effect of acupotomy on FAK-PI3K signaling pathways in KOA rabbit articular cartilages. Evid Based Complement Alternat Med. 2017, 4535326(2017).
  11. Yu, P., et al. Research progress of experimental animal models of knee osteoarthritis. China Medical Herald. 16 (27), 41-44 (2019).
  12. Li, L. H., et al. Research progress of rabbit knee osteoarthritis model. Journal of Jiangxi University of Chinese Medicine. 31 (4), 108-113 (2019).
  13. Zhang, W., Gao, Y., Guo, C. Q., Khattab, I. Z. A., Mokhtari, F. Effect of acupotomy versus electroacupuncture on ethology and morphology in a rabbit model of knee osteoarthritis. J Tradit Chin Med. 39 (2), 229-236 (2019).
  14. An, X. Y., et al. Chondroprotective effects of combination therapy of acupotomy and human adipose mesenchymal stem cells in knee osteoarthritis rabbits via the GSK3 beta-cyclin D1-CDK4/CDK6 signaling pathway. Aging Dis. 11 (5), 1116-1132 (2020).
  15. Guo, C. Q., Liu, N. G. Analysis on the distribution features of Ashi points in Jingjin disorders. Journal of Basic Chinese Medicine. 17 (8), 899-900 (2011).
  16. Guo, C. Q., et al. Effects of acupotomy therapy on tenderness point around knee joint in patients with knee osteoarthritis: a randomized controlled clinical trial. Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. 33 (3), 3-5 (2010).
  17. Zhao, Y., Dong, F. H., Zhang, K. Analysis of soft tissues mechanical changes and treatment of meridian tendon pain. Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. (9), 705-707 (2008).
  18. Zhang, L. P., Cheng, F., Liu, D. Y., Zhu, L. G. Application progress of biomechanics in knee osteoarthritis. Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 34 (7), 1644-1647 (2016).
  19. Thomas, A. C., Sowers, M., Karvonen-Gutierrez, C., Palmieri-Smith, R. M. Lack of quadriceps dysfunction in women with early knee osteoarthritis. J Orthop Res. 28 (5), 595-599 (2010).
  20. Li, L., et al. Effects of unloaded muscle atrophy on contractile characteristics of hind-limb skeletal muscles in mice. Space Med Med Eng. 25 (5), 322-325 (2012).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Zabieg akupotomiikróliczy model KOAwłaściwości biomechaniczneochrona chrząstkimięsień czworogłowy udamechanika ścięgienhistologia chrząstkiskurcz mięśniabarwienie tkanek