Artykuł metodologiczny

Zwiększenie wiarygodności biobankowania guzów gruczołu krokowego dzięki ulepszonej technice pobierania próbek i charakterystyce histologicznej

DOI:

10.3791/65635

⸱

17 listopada 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pathology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 2Department of Urology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 3Biobanco La Fe, Instituto de Investigación Sanitaria La Fe, 4Department of Medicine, Jaume I University of Castellon, 5Department of Surgery, University of Valencia, 6Department of Pathology, University of Valencia

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół opisuje metodę ułatwiającą pobieranie próbek z próbek po radykalnej prostatektomii. Celem jest zmapowanie, scharakteryzowanie i mikro-makro wypreparowanie próbek tkanek z próbek w oparciu o kryteria anatomopatologiczne przed przechowywaniem ich w biobanku.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pozyskiwanie świeżych i dobrze scharakteryzowanych próbek tkanek nowotworowych jest kluczowe dla prowadzenia wysokiej jakości badań "omicznych". Jednak może to być szczególnie trudne w kontekście raka prostaty (PC) ze względu na unikalny charakter tego narządu i wysoką heterogeniczność związaną z tym nowotworem. Z drugiej strony, histopatologiczne scharakteryzowanie próbek przed ich przechowywaniem bez powodowania znaczących zmian w tkankach jest również intrygującym wyzwaniem. W tym kontekście przedstawiamy nową metodę pozyskiwania, mapowania, charakteryzowania i mikropreparowania wyciętej tkanki gruczołu krokowego w oparciu o kryteria anatomomologiczne.

W przeciwieństwie do wcześniej opublikowanych protokołów, ta metoda skraca czas potrzebny na analizę histopatologiczną próbki prostaty bez naruszania jej struktury, co jest kluczowe dla oceny marginesów chirurgicznych. Ponadto umożliwia nakreślenie i mikro-makro preparację świeżych próbek tkanki gruczołu krokowego, ze szczególnym uwzględnieniem histologicznych obszarów guza zdefiniowanych przez kryteria patologiczne, takie jak skala Gleasona, zmiany prekursorowe (śródnabłonkowa neoplazja gruczołu krokowego o wysokim stopniu złośliwości - PIN) oraz zmiany zapalne (zapalenie gruczołu krokowego). Próbki te są następnie przechowywane w biobanku w celu przeprowadzenia dalszych analiz badawczych.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rak prostaty (PC) jest drugą najczęstszą przyczyną zgonów u mężczyzn ipiątą najczęstszą przyczyną zgonów na świecie1. Leczenie pacjenta i rokowanie zależą od stopnia zaawansowania i oceny (skala Gleasona) guza, o czym świadczą wyższe 5-letnie wskaźniki przeżycia guzów zlokalizowanych i o niskim stopniu złośliwości (stopień Gleasona 6) (99%) w porównaniu z wysokimi stopniami Gleasona i guzami przerzutowymi (31%)2.

Miejscowy nawrót choroby PC i niepowodzenie leczenia zostały powiązane z charakterystyczną wysoką niejednorodnością genetyczną tego typu nowotworu3. Ponadto PC jest uważana za chorobę wieloogniskową z kilkoma ogniskami nowotworowymi wykazującymi różne cechy morfologiczne, histologiczne i molekularne4, które mogą powstawać niezależnie lub wywodzić się od wspólnego przodka komórek nowotworowych5. Wcześniejsze badania wykazały, że ewolucja guza różni się u pacjentów w oparciu o określone czynniki genetyczne, które mogą sprzyjać przerzutom lub ograniczać linię komórkową do prostaty5. Dlatego charakterystyka molekularna różnych ognisk nowotworowych ma kluczowe znaczenie nie tylko dla zapewnienia dokładniejszej diagnozy i rokowania, ale także dla dostosowania skutecznego i spersonalizowanego leczenia dla pacjenta.

W tym kontekście, badania biomedyczne i integracyjne podejścia multiomiczne oferują bezprecedensowe możliwości klasyfikowania nowotworów do różnych podtypów, identyfikacji biomarkerów diagnostycznych i prognostycznych oraz odkrywania markerów związanych z odpowiedzią na leczenie. Co więcej, podejścia te przyczyniają się do lepszego zrozumienia biologii tej choroby6,7. Próbki biologiczne, zarówno tkanki, jak i płyny biologiczne, mogą być analizowane przy użyciu różnych platform multiomicznych (genomika, transkryptomika, proteomika, metabolomika itp.) w celu odkrycia cech biologicznych leżących u podstaw patofizjologii raka, rozwiązując w ten sposób obecne ograniczenia związane z heterogenicznością genetyczną i fenotypową6. Jednak ważne jest, aby wziąć pod uwagę, że jakość danych pochodzących z badań omicznych zależy od jakości próbek pobranych z nowotworów, ich dokładnej charakterystyki oraz późniejszego przetwarzania i przechowywania8.

W tym kontekście, pozyskanie świeżej tkanki PC do badań stanowi wyzwanie metodologiczne ze względu na trudności w pomyślnym pobraniu próbek guza9. Poprzednie metody polegały na losowym pobieraniu próbek po radykalnej prostatektomii, co dawało słabe wyniki10. Jednak nowsze podejścia obejmują ukierunkowane protokoły oparte zarówno na obrazowaniu rezonansu magnetycznego (MRI), jak i danych z biopsji, co skutkuje lepszą skutecznością w pobieraniu próbek guza11.

Z drugiej strony, charakterystyka histopatologiczna próbek przed ich przechowywaniem bez znaczących zmian w tkance również stanowi interesujące wyzwanie. W związku z tym w wielu przypadkach oznaczenie histopatologiczne próbek przeprowadza się po ich analizie (np. analiza metabolomiczna HR 1H NMR)12. Praktyka ta wiąże się ze zbędnymi wydatkami, czasochłonnością i utratą znacznej liczby próbek, które ostatecznie są wyłączane z analizy (na przykład próbek, które po analizie histopatologicznej okazują się nie być próbkami nowotworowymi). W innych przypadkach charakterystykę histopatologiczną próbek przeprowadza się przed ich analizą. W rzeczywistości niektóre wcześniejsze badania próbowały ustandaryzować metody dostarczania reprezentatywnych próbek badawczych wysokiej jakości z próbek radykalnej prostatektomii dla genomiki i metabolomiki13,14. Niemniej jednak skuteczność pobierania próbek jest znacznie wyższa, gdy jest wykonywana z już histologicznie potwierdzonych odcinków (88%), które niszczą tkankę, w porównaniu z próbkami niepotwierdzonymi (45%)1.

Tutaj prezentowana jest nowa metodologia pozwalająca przezwyciężyć te ograniczenia, mająca na celu uzyskanie świeżych i dobrze scharakteryzowanych próbek PC przed przechowywaniem w Biobanku. Metoda ta została opracowana dzięki współpracy różnych służb klinicznych (urologia, patologia i biobank szpitala La Fe). Należy podkreślić, że biobanki odgrywają istotną rolę w gromadzeniu, przetwarzaniu, zabezpieczaniu i przechowywaniu próbek biologicznych, zapewniając jednocześnie wysoką jakość próbek i danych, a także zgodność z wymogami etycznymi i prawnymi8,15,16.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta metoda została opracowana dzięki wspólnym wysiłkom różnych służb klinicznych (urologia, patologia i biobank szpitala La Fe). Badanie zostało przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrostanu człowieka i uzyskało zgodę Komitetu Etyki ds. Badań Biomedycznych przy Instituto de Investigación Sanitaria Hospital Universitario y Politécnico La Fe (Walencja, Hiszpania). Wszystkie próbki przechowywano w Biobanku Szpitala La Fe (PT13/0010/0026). Cała procedura jest szczegółowo opisana w Rysunek 1.

figure-protocol-1
Rysunek 1: Ogólny schemat procedury. Schematyczne przedstawienie procedury krokowej opisanej w rozdziale poświęconym protokołowi. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

1. Celowanie w guz

  1. Przed zabiegiem należy zastosować wieloparametryczne lub dwuparametryczne obrazowanie metodą rezonansu magnetycznego (mpMRI lub bpMRI)17,18, aby zlokalizować guz i odwzorować jego położenie w gruczole krokowym. Połącz informacje uzyskane z MRI z wynikami ultrasonografii przezodbytniczej lub badania doodbytniczego, jeśli to ostatnie daje rozbieżne wyniki.
  2. Aby zwiększyć lokalizację guza, zapoznaj się z wynikami przedoperacyjnej biopsji prostaty odbytniczej pod kontrolą USG i MRI.
    UWAGA: W procedurze diagnostycznej raka gruczołu krokowego biopsje są pobierane bezpośrednio z prostaty przez dostęp przezodbytniczy. Biopsje te obejmują systematyczne pobieranie próbek z prostaty (w tym cylindrów rozmieszczonych po całym gruczole) oraz cylindrów bezpośrednio ukierunkowanych na podejrzane wyniki w MRI. Aby ukierunkować na pobranie tych próbek, stosuje się ultrasonografię przezodbytniczą, która jest łączona z wynikami MRI w sposób poznawczy ("fuzja poznawcza") lub z "prawdziwym oprogramowaniem do fuzji MRI-ultrasonografia", jeśli jest dostępne.

2. Radykalna prostatektomia i pobranie prostaty

  1. Wykonaj standaryzowaną radykalną prostatektomię wspomaganą robotem z dostępu przezotrzewnowego, postępując zgodnie z krokami opisanymi przez Huynh et al.19.
    1. Zacznij od dostępu brzusznego, wdmuchiwania i umieszczenia portu kamery (patrz tabela materiałów). Umieść pozostałe pięć portów w zasięgu wzroku. Ustaw odmę otrzewnową na 12 mm.
    2. Uwolnij pęcherz, nacinając otrzewną i rozpreparuj przestrzeń okołoodbytniczą.
    3. Otwórz rozcięgno miednicy z każdej strony.
    4. Wykonaj pełną sekcję przedniej i bocznej strony prostaty i pęcherza moczowego.
    5. Wykonaj otwarcie szyi pęcherza, zidentyfikuj i przekrój bliższą cewkę moczową, aby uzyskać dostęp do tylnych aspektów prostaty i pęcherza
      6. moczowego.
    6. Rozkrój pęcherzyki nasienne i przestrzeń odbytnicy19.
    7. Przeanalizuj boczne aspekty prostaty, oszczędzając wiązki nerwowo-naczyniowe.
    8. Zapewnić hemostazę naczyń w przestrzeni załonowej .
    9. Wypreparuj wierzchołek i przekrój dystalną cewkę moczową.
    10. Uzupełnij zespolenie pęcherzowo-cewkowe.
    11. Usuń prostatę i wykonaj zamknięcie nacięcia19.
  2. Zbierz świeżą prostatę do suchego pojemnika. Bardzo ważne jest, aby nie utrwalać ani nie zatapiać próbki w parafinie.
  3. Świeżą próbkę chirurgiczną, która obejmuje całą prostatę, należy przetransportować do biobanku w celu przetworzenia próbki.

3. Przetwarzanie prostaty i pobieranie próbek

  1. Wybierz docelowe strefy prostaty do pobrania próbek na podstawie informacji o lokalizacji guza uzyskanych z przedoperacyjnego mpMRI, wyników biopsji przedoperacyjnej i bezpośredniego badania palpacyjnego próbki prostatektomii. Zapisz te informacje w formularzu, który zawiera dane identyfikacyjne pacjenta, obszary prostaty, z których ostatecznie pobrano próbki, oraz liczbę pobranych próbek.
    UWAGA: Gdy wyniki MRI, wyniki biopsji przedoperacyjnej i bezpośrednie badanie palpacyjne próbki prostatektomii są zgodne, skieruj wszystkie próbki do tego lub tych miejsc (od 4 do 6 cylindrów). Jeśli występuje jakakolwiek niezgodność, zwiększ liczbę cylindrów i oddzielnie celuj we wszystkie strefy, co do których istnieje podejrzenie, że są dotknięte którąkolwiek z tych metod.
  2. Użyj jednorazowej automatycznej igły (chirurga), aby pobrać cylindryczne próbki z wybranych obszarów (krok 1.1). Następnie zidentyfikuj (patologa) zewnętrzną strefę cylindra, zaciśnij cylinder kleszczami do tkanek, umieść go na szkiełku i zaznacz zewnętrzną strefę tuszem tkankowym. Powtórz ten proces z zajętymi wszystkimi cylindrami.
  3. Umieścić zebrane cylindry poziomo na dysku uchwytu próbki (patrz Tabela materiałów) wypełnionym pożywką do zatapiania kriostatu i przenieść je do płyty chłodzącej mikrotomu w celu cięcia.
  4. Po umieszczeniu na płycie przymocuj dysk uchwytu próbki do uchwytu na próbkę i przetnij go, ostrożnie przesuwając koło, wykonując następujące czynności:
    1. Użyj związku o optymalnej temperaturze skrawania (związek OCT, patrz tabela materiałów), aby zatopić próbkę tkanki przed zamrożeniem na kriostacie mikrotomowym.
    2. Następnie przeciąć próbkę za pomocą mikrotomu kriostatu w temperaturze -25 °C. Pobrać cienkie odcinki tkanki w kształcie cylindra (10 μm) na szkiełka mikroskopowe poddane działaniu środka. Upewnij się, że zebrałeś tylko kilka mikronów tkanki, aby zapewnić odpowiednią ilość nienaruszonej tkanki nowotworowej do przechowywania w Biobanku.
    3. Zbierz dwie lub trzy cienkie sekcje na szkiełko i ręcznie je zabarw, aby kontrolować ostateczne zabarwienie. Oko technika zapewnia optymalne barwienie i można wykonać wszelkie niezbędne ponowne barwienie. Wykonaj następujące kroki
      1. Utrwal szkiełka w 96% etanolu, uwodnij w wodzie destylowanej i zabarwij hematoksyliną Harrisa (patrz Tabela materiałów) przez 1 minutę, aby zabarwić jądra. Usunąć nadmiar hematoksyliny, spłukując szkiełka wodą destylowaną.
      2. Potraktuj szkiełka 30% wodorotlenkiem amonu, aby zmienić kolor hematoksyliny na niebieski. Usuń nadmiar roztworu, spłukując wodą destylowaną.
      3. Szkiełka barwiące z eozyną (patrz tabela materiałów) przez 30 s.
      4. Następnie odwodnić szkiełka za pomocą zwiększającego się miareczkowania alkoholu, oczyścić ksylenem (100%) i zamontować je za pomocą DPX (mieszanina distyrenu, plastyfikatora i ksylenu, stosowana jako podłoże do mocowania żywicy syntetycznej, która zastępuje ksylen-balsam, patrz Tabela materiałów). Podczas tych czynności zanurz szkiełka w roztworze Coplin i wyjmij je ze słoika z roztworem Coplin.
      5. Na koniec umieść szkiełko nakrywkowe na wierzchu zabarwionej tkanki i użyj podłoża o odpowiednim współczynniku załamania światła (patrz Tabela materiałów) do oglądania pod mikroskopem.

4. Charakterystyka próbki

  1. Przeanalizuj próbkę pod mikroskopem świetlnym (patolog), rozróżniając obszary raka i określając wynik Gleasona guza. Udokumentuj wszystkie te dane i zaznacz dokładne strefy guza na szkiełkach.
  2. Na tym etapie oznacz slajd dokładną lokalizacją guza i odpowiadającym mu wynikiem Gleasona Score20. Zaznacz również lokalizację PIN (nowotwór śródnabłonkowy gruczołu krokowego) na podstawie identyfikacji morfologicznej.

5. Mikro-makro-analiza i przechowywanie próbki

  1. Wyraźnie oznacz różne składniki histologiczne wyraźnymi markerami na szkiełku (patolog) i bezpośrednio skoreluj je z zamrożoną tkanką na dysku.
  2. Następnie, za pomocą ostrza chirurgicznego, makro-mikro wypreparuj obszary próbki zaznaczone na szkiełku w krążku OCT, dzieląc je na tkankę nowotworową, okołonowotworową, PIN i normalną tkankę gruczołu krokowego.
  3. Gdy podłoże do zatapiania zacznie się rozmrażać, obejmij się chusteczką za pomocą kleszczy i umieść ją w prawidłowo oznakowanych krioprobówkach.
    UWAGA: Ostrożnie przechowuj każdy wypreparowany fragment w odpowiedniej probówce, zgodnie z diagnozą histologiczną krioplastów.
  4. Oznakowane krioprobówki z w pełni scharakteryzowanymi próbkami histologicznymi należy przechowywać w Biobanku w temperaturze -80 °C do późniejszego wykorzystania w badaniach naukowych.
    UWAGA: Czynności opisane w tej sekcji mogą być wykonywane przez przeszkolonego technika pod nadzorem patologa. Próbka chirurgiczna powinna zostać jak najszybciej przetransportowana do Biobanku, aby zapobiec degradacji tkanek i kwasów nukleinowych. Zgodnie z przewodnikami referencyjnymi należy dołożyć starań, aby uniknąć przedłużającego się czasu niedokrwienia (>30 min)21. Próbki mogą być przechowywane w Biobanku przez czas nieokreślony, o ile zachowane są zasady jakości próbek.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wyniki pokazują, że ta technika umożliwiła uzyskanie materiału nowotworowego w 61% badanych przypadków (25 z 41 przypadków) (Tabela 1).

Tabela 1: Dane histopatologiczne badanych próbek. Podsumowanie danych histopatologicznych dla próbek wykorzystanych w badaniu. Cylinder diagnostyczny odnosi się do próbki biopsji gruczołu krokowego pobranej w celach diagnostycznych, podczas gdy przetworzony cylinder odpowiada cylindrowi uzyskanemu z próbki po prostatektomii do...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W każdym badaniu naukowym uzyskanie próbek wysokiej jakości jest podstawowym wymogiem w celu zmniejszenia systematycznych błędów systematycznych i uzyskania wiarygodnych wyników22. W związku z tym kontrola zmiennych przedanalitycznych, takich jak temperatura, w której próbki są przetwarzane i przechowywane, czas, jaki upłynął od pobrania próbki do przechowywania, użycie materiałów sterylizowanych lub wpływ, jaki dodanie konserwantów lub innych dodatków może mieć na próbki, musi być uwzględniona w ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

A.L. potwierdza zawarcie umowy o doktorat "Margarita Salas" (numer 21-076), a MAM-T umowę badawczą "Maria Zambrano" (numer MAZ/2021/03 UP2021-021). Oba kontrakty zostały sfinansowane przez Unię Europejską – Next Generation EU.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Kleszczyki CadiereIntuicyjnePN1052082-US 10/2021Numer katalogowy: 471049 18 zastosowań.
Prowadnice konwencjonalneKnittel Glass2021Szlifowany/ Matowy koniec
Mikrotom CryostatThermo Fisher Scientific---Criostato CryoStar NX50 Cryotubes
Greiner Bio-One GmbHNr ref.: 122280.CRYO S. PP, z nakrętką, sterylne. 
System chirurgiczny Da VinciIntuicyjnymodel PN1052082-US 10/2021XI
Narzędzia preparacyjneBayer---Dwie pęsety i ostrze chirurgiczne 
DPX Eukitt Medizin- und Labortechnik GmbH6.00.01.0001.06.01.01
EosinAgilent157252
FenestratedIntuicyjnyPN1052082-US 10/2021Kod produktu: 471205. 14 żyć.
Force bipolarIntuitivePN1052082-US 10/2021Numer katalogowy: 471405. 12 zastosowań.
ZamrażarkiThermo ScientificMODEL 907. -80 º C
HematoxylinAgilent157251
Preparaty inmunohistochemiczneAgilent-DakoK802021-2
Duży sterownik igłowyIntuicyjnyPN1052082-US 10/2021Numer katalogowy: 471006. 15 zastosowań.
Kleszcze bipolarne MarylandIntuicyjnePN1052082-US 10/2021Numer katalogowy: 471172 14 zastosowań.
MikroskopOlympus---Olympus cx40
Ostrza mikrotomuPFM Medicala35
Monopolarne zakrzywione nożyczkiIntuicyjnyPN1052082-US 10/2021Numer części: 470179. 10 zastosowań.
OCT compoundNEG-50LOT.117340
PlusSpeed S Jednorazowe urządzenie do biopsji ze ściętą końcówkąPeter Pflugbeil GmbH PSS-1825-S
Kleszczyki ProGaspIntuicyjnyPN1052082-US 10/2021Numer katalogowy: 471093. 18 użyć.
Uchwyt na próbkę DiscDavidson Cryo Chuck. BradleyProdukty30 mm 
Tusz do bibułyPelikan2021Tusz 4001 brylantowy (301168)
KsylolQuimipurRef. 169
Kleszczyki bipolarne

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rawla, P. Epidemiology of prostate cancer. World Journal of Oncology. 10 (2), 63-89 (2019).
  2. Epstein, J. I. The 2019 Genitourinary Pathology Society (GUPS) white paper on contemporary grading of prostate cancer. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 145 (4), 461-493 (2021).
  3. Zhang, W. Intratumor heterogeneity and clonal evolution revealed in castration-resistant prostate cancer by longitudinal genomic analysis. Translational Oncology. 16, 101311(2022).
  4. Haffner, M. C., et al. Genomic and phenotypic heterogeneity in prostate cancer. Nature Reviews Urology. 18 (2), 79-92 (2021).
  5. Woodcock, D. J. Prostate cancer evolution from multilineage primary to single lineage metastases with implications for liquid biopsy. Nature Communications. 11 (1), 5070(2020).
  6. Heo, Y. J., Hwa, C., Lee, G. H., Park, J. M., An, J. Y. Integrative multi-omics approaches in cancer research: from biological networks to clinical subtypes. Molecules and Cells. 44 (7), 433-443 (2021).
  7. Menyhárt, O., Győrffy, B. Multi-omics approaches in cancer research with applications in tumor subtyping, prognosis, and diagnosis. Computational and Structural Biotechnology Journal. 19, 949-960 (2021).
  8. Annaratone, L. Basic principles of biobanking: from biological samples to precision medicine for patients. Virchows Archiv. 479 (2), 233-246 (2021).
  9. King, C. R., Long, J. P. Prostate biopsy grading errors: A sampling problem. International Journal of Cancer. 90 (6), 326-330 (2000).
  10. Jayadevan, R., Zhou, S., Priester, A. M., Delfin, M., Marks, L. S. Use of MRI-ultrasound fusion to achieve targeted prostate biopsy. Journal of Visualized Experiments. 146, e59231(2019).
  11. Heavey, S., et al. Use of magnetic resonance imaging and biopsy data to guide sampling procedures for prostate cancer biobanking. Journal of Visualized Experiments. 152, 60216(2019).
  12. Panach Navarrete, J. Estudio metabolómico en tejido prostático y orina para el diagnóstico y pronóstico del cáncer de próstata. , https://roderic.uv.es/handle/10550/81853 (2022).
  13. Bertilsson, H., et al. A new method to provide a fresh frozen prostate slice suitable for gene expression study and MR spectroscopy. The Prostate. 71 (5), 461-469 (2011).
  14. Show SOP - Biospecimen Research Database. , https://brd.nci.nih.gov/brd/sop/show/522 (2022).
  15. Dagher, G. Quality matters: International standards for biobanking. Cell Proliferation. 55 (8), e13282(2022).
  16. Yüzbaşıoğlu, A., Özgüç, M. Biobanking: sample acquisition and quality assurance for "omics" research. New Biotechnology. 30 (3), 339-342 (2013).
  17. Carpagnano, F. A. Multiparametric MRI: local staging of prostate cancer. Current Radiology Reports. 8 (12), 27(2020).
  18. Christophe, C. Prostate cancer local staging using biparametric MRI: assessment and comparison with multiparametric MRI. European Journal of Radiology. 132, 109350(2020).
  19. Huynh, L. M., Ahlering, T. E. Robot-assisted radical prostatectomy: a step-by-step guide. Journal of Endourology. 32 (S1), S28-S32 (2018).
  20. van Leenders, G. J. L. H., et al. The 2019 International Society of Urological Pathology (ISUP) consensus conference on grading of prostatic carcinoma. The American Journal of Surgical Pathology. 44 (8), e87-e99 (2020).
  21. Liu, A., Collins, C. C., Diemer, S. M. Biobanking metastases and biopsy specimens for personalized medicine. Journal of Biorepository Science for Applied Medicine. 3, 57-67 (2015).
  22. Ellervik, C., Vaught, J. Preanalytical variables affecting the integrity of human biospecimens in biobanking. Clinical Chemistry. 61 (7), 914-934 (2015).
  23. Arellano, H. L., Castillo, C. O., Metrebián, B. E. Diagnostic agreement of the Gleason score in needle biopsy and radical prostatectomy and its clinical consequences. Rev Méd Chile. 132 (8), 971-978 (2004).
  24. Torres Caparó, D. A. Concordancia en los valores de gleason en biopsia prostática transrectal y en prostatectomia radical en pacientes con cáncer de próstata del Hospital Cirujano Mayor Santiago Távara entre enero 2010 - junio del 2018. , Universidad Ricardo Palma. https://repositorio.urp.edu.pe/handle/20.500.14138/1886 (2019).
  25. Chavolla-Canal, A. J., et al. Concordancia del puntaje de Gleason en biopsia transrectal de próstata vs prostatectomía radical. Revista Mexicana de Urología. 81 (2), 1-10 (2021).
  26. Fan, X. J., et al. Impact of cold ischemic time and freeze-thaw cycles on RNA, DNA and protein quality in colorectal cancer tissues biobanking. Journal of Cancer. 10 (20), 4978-4988 (2019).
  27. Vaswani, A., et al. Comparative liquid chromatography/tandem mass spectrometry lipidomics analysis of macaque heart tissue flash-frozen or embedded in optimal cutting temperature polymer (OCT): Practical considerations. Rapid communications in Mass Spectrometry: RCM. 35 (18), e9155(2021).
  28. Zhang, W., Sakashita, S., Taylor, P., Tsao, M. S., Moran, M. F. Comprehensive proteome analysis of fresh frozen and optimal cutting temperature (OCT) embedded primary non-small cell lung carcinoma by LC-MS/MS. Methods (San Diego, Calif). 81, 50-55 (2015).
  29. Boyd, A. E., Allegood, J., Lima, S. Preparation of human tissues embedded in optimal cutting temperature compound for mass spectrometry analysis. Journal of Visualized Experiments. 170, e62552(2021).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Tkanka raka prostatypobieranie pr bek guzacharakterystyka molekularnaprzechowywanie w biobankuskala Gleasonaheterogenno wewn trznowotworowatechnika mikrosekcjimedycyna spersonalizowana

Powiązane artykuły