Platforma eksperymentalna moksowania może unieruchamiać szczury bez ograniczeń, a szczury mogą być poddawane wielopunktowej moksterapii w stanie czuwania, zapewniając dobrostan szczurów, chroniąc bezpieczeństwo operatorów, zapewniając skuteczność terapeutyczną i poprawiając efektywność eksperymentu.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Stosowanie moksyterapii oddzielonej ciastkami ziołowymi w leczeniu szczurów z przewlekłą niewydolnością nerek
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
W procesie moksowania w praktyce klinicznej, badani muszą być w stabilnym nastroju i wygodnej pozycji, aby uniknąć problemów, takich jak opadanie popiołu z moksy, poparzenie skóry i słaby efekt leczniczy. Takie problemy występują również w eksperymencie z moksobinacją na szczurach. Aby symulować praktykę kliniczną, konieczne jest wprowadzenie instrumentu eksperymentalnego w eksperymentach na zwierzętach, to znaczy urządzenia do moksybusji ze stałymi szczurami i synchronizacją leczenia moksybusją, które może sprawić, że szczury doświadczalne otrzymają leczenie moksybusją cicho i wygodnie bez znieczulenia.
Nasza grupa badawcza zaprojektowała eksperymentalną platformę do moksowania szczurów. Urządzenie zostało obramowane drewnianą deską z nośną płytą podstawy, wieloma stałymi elementami i elementami podzielonymi na części. Urządzenie może osiągnąć tryb działania moksoterapii u szczurów bez wiązania, unikając znieczulenia i oparzeń oraz jednocześnie odsłaniając wiele punktów akupunkturowych na plecach. Operacja ta pozwala uniknąć fizycznych i psychicznych obrażeń szczurów i operatorów, co poprawia efektywność badań i dodatkowo promuje rozwój i badania eksperymentów na zwierzętach moksowych.
Urządzenie ma prostą budowę, jest łatwe w obsłudze i popularyzacji, jest kompleksowo i innowacyjnie zaprojektowane, wielokrotnego użytku i nadaje się do eksperymentów na szczurach głównie opartych na moksowaniu. W artykule przedstawiono głównie strukturę eksperymentalnego urządzenia platformowego do moksowania szczurów, podstawową procedurę moksybusji oddzielonej ciastkiem ziołowym u szczurów doświadczalnych przy użyciu tego urządzenia oraz opisano ustalenie szczurzego modelu przewlekłej niewydolności nerek (CRF) i reprezentatywne wyniki eksperymentalne.
Wprowadzenie
Moxibustion pojawił się wraz z zastosowaniem ognia. Starożytni lekarze przypadkowo odkryli, że niektóre części palącego się ogniem ciała mogą złagodzić objawy dyskomfortu. Po długotrwałej praktyce "Artemisiae Argyi Folium" był stopniowo wybierany jako główny materiał do moksybusji1. Moksowanie jest jednym z ważnych składników tradycyjnej medycyny chińskiej, a w zestawieniu z wywarem z tradycyjnej medycyny chińskiej i akupunkturą akupunkturową, te trzy główne terapie tradycyjnej medycyny chińskiej są szeroko stosowane w wielu chorobach.
Chińscy lekarze często stosowali moksowanie do leczenia chorób już w okresie Huangdi Neijing (Wewnętrzny Klasyk Żółtego Cesarza). Artemisiae Argyi Folium to rodzaj chińskiego ziołolecznictwa z funkcją rozgrzewania meridianów w celu zatrzymania krwawienia, rozproszenia przeziębienia i łagodzenia bólu. Jest powszechnie stosowany w zewnętrznym leczeniu tradycyjnej medycyny chińskiej i może być również stosowany w leczeniu wywaru z tradycyjnej medycyny chińskiej. Moxibustion to rodzaj terapii zewnętrznej2, w której moksa lub inne leki są umieszczane na punktach akupunkturowych na powierzchni ciała, aby spalić i wykorzystać łagodne ciepło ognia moksowania i działanie leków do leczenia chorób3.
Jako jedna z powszechnych metod leczenia, moksowanie jest szeroko stosowane w praktyce klinicznej. Wraz z ciągłym rozwojem terapii moksowania, coraz więcej badań bada mechanizm moksowania i przeprowadza wiele eksperymentów na zwierzętach4,5.
Metodę moksowania można sklasyfikować jako bezpośrednią moksowanie i pośrednią moksowanie. Metoda nakładania moksy na skórę ciała nazywana jest moksacją bezpośrednią. Moksowanie pośrednie oddziela powierzchnię stożka moksy od akupunktów za pomocą leków lub innych materiałów. Moxibustion może leczyć różne choroby, takie jak zespół jelita drażliwego6, zespół chronicznego zmęczenia7 i choroba zwyrodnieniowa stawu kolanowego8.
Ten artykuł głównie omawia mechanizm moksybustion-oddzielonego ciastkiem ziołowym. Moxibustion z oddzielenia ciastem ziołowym należy do metody moksowania pośredniego, w której stożek moksy umieszcza się na ciastku leczniczym w celu zastosowania moksybusji. Obecne badania wykazały, że efekty podczerwone i ocieplające wytwarzane przez spalanie stożków moksy, skład chemiczny smoły z liści moksy i stymulacja akupunkturów mogą zapewnić zapobieganie chorobom i ich leczenie9 poprzez zwiększenie przenikania leków do punktów akupunkturowych. W związku z tym, moxibustion oddzielony ciastem ziołowym daje głównie "wszechstronny efekt" poprzez moksowanie, leki i akupunkty10.
Poprzednie badania pokazują, że moksowanie jest skuteczną metodą leczenia CRF11,12,13,14,15, ale podstawowy mechanizm jest nadal niezdefiniowany. Pracowaliśmy nad badaniami klinicznymi i badaniami na zwierzętach nad CRF. Obecnie prowadzimy eksperymentalne badanie moksoterapii na szczurach CRF w oparciu o szlak sygnałowy kinazy retikulum endoplazmatycznego (PERK) kinazy białkowej RNA-podobnej do monakotki ziołowej kinazy retikulum endoplazmatycznego. Poprzez ten eksperyment na zwierzętach staramy się wstępnie wyjaśnić potencjalny mechanizm moksyterapii w leczeniu przewlekłej choroby nerek. W tym eksperymencie kluczową operacją jest leczenie moksybuzy oddzielonej od ciastka ziołowego u szczurów.
W poprzednim eksperymencie16, pokrywa klatki hodowlanej była używana do wiązania i mocowania szczurów. Aby chronić operatora, szczury muszą zostać znieczulone przed związaniem. Jednak szczury Sprague-Dawley (SD) są łatwe do przestraszenia i przestraszenia. Operacja wiązania może łatwo wywołać niepokój u szczurów. Często występowały problemy, takie jak słaba fiksacja postawy szczurów, odchylenie pozycji punktu akupunkturowego, wydłużony czas eksperymentu i obrażenia operatora.
Ponadto, jeśli wiązanie jest zbyt ciasne, może łatwo spowodować trudności w oddychaniu u szczurów, co nie sprzyja dobrostanowi zwierząt. Jeśli wiązanie jest zbyt luźne, szczury mają skłonność do szarpania się i poruszania ciałem, powodując opadanie stożków moksybacji i poparzenie skóry, co wpływa na wyniki eksperymentów. Z literatury wynika, że eksperymenty na zwierzętach nadal wiążą się z bindingiem16,17,18, a większość eksperymentalnych urządzeń można tylko naprawić, co utrudnia implementację innych technik, takich jak moxibustion19. W związku z tym osiągnięcie integracji fiksacji i moksyterapii w wyrobie doświadczalnym przy jednoczesnym zapewnieniu dobrostanu zwierząt oraz specyfikacji i wydajności doświadczalnej stało się jednym z obszarów zainteresowania badaczy.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Plan jest zgodny z Wytycznymi Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Yunnan i został zatwierdzony przez Komitet Etyki Zwierząt Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Yunnan. Numer przeglądu w zakresie dobrostanu zwierząt doświadczalnych i etyki to R-062021G098.
1. Eksperymentalne urządzenie platformy Moxibustion (Rysunek 1)
UWAGA: Zaprojektowaliśmy i zbudowaliśmy eksperymentalną platformę do moksowania szczurów w oparciu o odległość między tylnymi i przednimi kończynami szczurów oraz ich cechy behawioralne i fizjologiczne.
- Rozmiar urządzenia do moksowania
- Wykonaj urządzenie przy użyciu płyty odpornej na bicie i drewnianej deski; całkowity rozmiar to 52 cm dł. x 23,5 cm szer. x 64 cm wys., a dolna część urządzenia to 1222 cm2.
UWAGA: Operacja moksyterapii odbywa się na platformie na tej wysokości, a szczury można zachować spokój.
- Wykonaj urządzenie przy użyciu płyty odpornej na bicie i drewnianej deski; całkowity rozmiar to 52 cm dł. x 23,5 cm szer. x 64 cm wys., a dolna część urządzenia to 1222 cm2.
- Rama główna urządzenia do moksyterapii
- Wykonaj podstawę całego urządzenia z płyty odpornej na bicie: Płyta podstawy ma wymiary 52 cm dł. x 23,5 cm szer. z białą powierzchnią. Upewnij się, że spód stanowi dużą część masy urządzenia, aby ustabilizować całe urządzenie.
- Wykonaj podwyższoną platformę urządzenia z litego drewna o wysokości 60 cm.
UWAGA: Jest to główna rama całego instrumentu, która stabilizuje całe urządzenie i wspomaga ułożenie szczurów w pozycji stojącej. - Umieść pięć miejsc do umieszczania nad podwyższoną platformą, o wymiarach 10 cm dł. x 6 cm szer. x 10 cm wys. Użyj tablic interwałowych (10 cm dł. x 1.3 cm szer. x 10 cm wys.), aby oddzielić szczeliny do umieszczania, odpowiadając odległości między przednimi i tylnymi kończynami szczura w pozycji stojącej.
- Elementy urządzenia do moksyterapii
- Zamocuj dwa paski ze stali nierdzewnej na górze otworów umieszczających. Każdy stały pasek to stalowy pręt o równych krawędziach pod kątem prostym 40 cm dł. x 1,4 cm szer. (obie strony mają tę samą szerokość), z 15 otworami. Trzy otwory na listwie stałej odpowiadają każdej szczelinie, służącej do zamocowania uchwytu śliwkowego i ruchomego węża. Odległość między sąsiednimi otworami wynosi 7 cm.
- Umieść regulowaną uchwytu w kształcie kwiatu śliwki na obu końcach siatki izolacji cieplnej wykonanej ze stali nierdzewnej 304 i podłącz do stałej sieci izolacji cieplnej i listwy stałej.
- Połącz górny koniec każdej szczeliny umieszczającej z podnoszoną siecią izolacji cieplnej otoczoną ramą z ocynkowanej płyty. Podłącz tę ramkę do uchwytu kwiatu śliwy na obu końcach. Umieść okrągłą siatkę ze stali nierdzewnej 304 pośrodku sieci izolacji cieplnej, aby zapobiec opadaniu popiołu i poparzeniom szczurów oraz utrwalić szczury, aby ułatwić moksację.
- Dolny koniec ruchomego węża ze stali nierdzewnej (o długości 34 cm) przymocować listwą stałą ze stali nierdzewnej, a górny koniec za pomocą rury clamp płyta przyłączeniowa.
UWAGA: Ruchomy wąż jest wygodny do regulacji położenia sztyftu do moksy podczas operacji moksy zawieszenia. - Użyj rurki clamp wykonany ze stopu aluminium, aby połączyć ruchomy wąż ze stali nierdzewnej i klips do moksy.
- Podłącz klips do moksy ze stali nierdzewnej do rury clamp płyta łącząca i zamocuj jednocześnie 8-10 pasków moksy w celu moxibustion.
UWAGA: Ruchomy wąż, rurka clamp płyta łącząca i klips do moksy mogą być używane do operacji moksyterapii zawiesiny u szczurów.
2. Ustal szczurzy model przewlekłej niewydolności nerek
- Zaaklimatyzować 24 wolne od specyficznych patogenów (SPF) samce SD szczurów (w wieku 3-4 tygodni, o wadze 180-200 g) przez 1 tydzień. Utrzymuj temperaturę karmienia na poziomie 18-24 °C; wilgotność względna na poziomie 40-70%; oraz 12-godzinny cykl światła i 12-godzinny cykl ciemności. Umieść sześć zwierząt w każdej klatce i zapewnij swobodny dostęp do wody i wspólnej paszy.
- Ustal szczurzy model CRF. Zgodnie z tabelą liczb losowych i zgodnie z tym protokołem wybierz sześć szczurów jako grupę kontrolną, a pozostałe 18 jako grupę modelową. Grupę kontrolną (n = 6) należy traktować wodą destylowaną (10 ml∙kg-1∙dzień-1) i normalną paszą, a grupę modelową (n = 18) zawiesiną adeniny (150 mg kg-1∙dzień-1) i paszą wysokobiałkową przez 21 dni.
- Codziennie obserwuj i zapisuj masę ciała, stan psychiczny i dietę. Po upływie 21 dni należy upewnić się, że wszystkie zwierzęta są na czczo przez 12 godzin przed pobraniem krwi w orlocie.
- Zbierz próbki krwi z orbity.
- Znieczulić szczury na krótko izofluranem. Chwyć grzbiet szczura ręką niedominującą, przytrzymaj głowę i twarz szczura symetrycznie między kciukiem a palcem wskazującym, całkowicie odsłoń jedną stronę kantu szczura i utrzymaj tę pozycję.
- Ręką dominującą przytrzymaj naczynie włosowate o temperaturze topnienia o długości 3 cm między kciukiem a palcem wskazującym i powoli przekręć kapila, wchodząc do wewnętrznego splotu żylnego kant szczura pod kątem 45°, aż krew powoli wypłynie z probówki.
- Zbierz 150-200 μl próbek krwi w probówkach antyzakrzepowych o pojemności 0,5 ml, delikatnie wyciągnij naczynia włosowate i dociśnij orbitę bawełną.
- Szybko i dokładnie wstrząsnąć probówką antykoagulantu. Zmierz stężenie kreatyniny w surowicy osocza (Scr) i azotu mocznikowego (BUN) we krwi za pomocą automatycznego analizatora biochemicznego.
UWAGA: Wzrost Scr i BUN wskazuje na pomyślne ustanowienie modelu CRF. - Podziel szczury na cztery grupy: A: sześć szczurów kontrolnych, bez leczenia; 18 szczurów modelowych podzielonych na grupy B: (grupa modelowa: bez leków lub moksybustion), C: (grupa z losartanem potasu: podawana 2,33 mg∙kg-1∙dzień-1 za pomocą igły do głębnika 12 G) i D: (grupa moksowania oddzielona ciastem ziołowym: moksa oddzielona ciastem ziołowym stosowana do obustronnego Shenshu [B23] i obustronnego Pishu [B20]).
3. Faza leczenia
UWAGA: Grupy A i B nie są leczone, podczas gdy grupy C i D będą leczone raz dziennie przez 24 dni, z dwoma dniami przerwy po 12 dniach leczenia.
- Przygotowania przed zabiegiem
- Przygotuj 300 g suszonego Radix astragali, 300 g suszonego Radix Codonopsis, 200 g suszonego Radix Rehmanniae Praeparata, 100 g prażonego ziela Epimedium krótkorogiego i 100 g Cornus officinalis. Wymieszaj te proszki.
- Umieść 500 g Artemisiae Argyi Folium w kruszarce tradycyjnej medycyny chińskiej (prędkość 34 000 obrotów/min) na 5 minut, przenieś zmielony proszek na talerz, a następnie przesiaj sitkiem o oczkach 600. Po dwóch rundach przesiewania wyeliminuj gruboziarnistą moksy i przenieś drobną moksy do torby w celu użycia (Rysunek 2).
- Przygotuj stożek moksy, wypełniając drobną moksy do formy, aby uzyskać mały stożek moksy o średnicy 0,5 cm i wysokości 0,5 cm. Alternatywnie, malaksuj moksy między kciukami i palcami wskazującymi obu rąk, aby utworzyć stożki moksy (Rysunek 3A).
- Przygotuj formę do ciasta ziołowego, przecinając strzykawkę o pojemności 5 ml na cztery okrągłe plastikowe pierścienie o grubości 0,5 cm i przyklejając cztery pierścienie w tej samej płaszczyźnie poziomej (na rogach kwadratowej płaszczyzny o długości boku 26 mm, Rysunek 3D).
- Zrób ciastka lecznicze, mieszając proszek i wodę w stosunku 1:1 i wlewając mieszaninę do formy do ciasta ziołowego (Rysunek 3E). Ciasto lekarskie zostaw w foremce i przechowuj w suchym miejscu.
- Oznaczanie punktów akupunkturowych
- Zlokalizuj punkty akupunkturowe w następujący sposób: Shenshu (B23), obie strony drugiego kręgu lędźwiowego, po jednym punkcie akupunkturowym z każdej strony; Pishu (B20), międzyżebro 11. kręgu piersiowego po obu stronach, po jednym akupunku z każdej strony (Ryc. 4).
UWAGA: Aby uzyskać informacje na temat lokalizacji punktów akupunkturowych, zapoznaj się z Podręcznikiem Akupunktury dla Zwierząt Doświadczalnych20. - Załóż grubą gumową rękawicę na rękę niedominującą, aby delikatnie zakryć głowę szczura, zlokalizuj punkty akupunkturowe na grzbiecie szczura ręką dominującą, a następnie zaznacz punkty akupunkturowe kolorowym markerem.
- Zlokalizuj punkty akupunkturowe w następujący sposób: Shenshu (B23), obie strony drugiego kręgu lędźwiowego, po jednym punkcie akupunkturowym z każdej strony; Pishu (B20), międzyżebro 11. kręgu piersiowego po obu stronach, po jednym akupunku z każdej strony (Ryc. 4).
- Umieszczanie szczurów
- Noś grube gumowe rękawice. Użyj kciuka i pozostałych czterech palców dominującej ręki, aby lekko uszczypnąć skórę na grzbiecie i szyi szczura. Użyj kciuka i palca wskazującego ręki niedominującej, aby delikatnie uszczypnąć ogon szczura.
- Podnieś szczura, dopasuj głowę szczura do szczeliny umieszczania specjalnej platformy do moksyterapii i powoli przesuwaj szczura do przodu. Upewnij się, że przednia łapa szczura znajduje się blisko krawędzi szczeliny umieszczania i że szczur wspina się do szczeliny.
UWAGA: Przed rozpoczęciem zdezynfekuj całą platformę moxibustion. Zanim złapiesz szczura, delikatnie dotknij grzbietu szczura lub porozmawiaj z nim, aby go uspokoić. Dostosuj wysokość sieci izolacyjnej od niskiej pozycji (gdy nie jest używana) do najwyższej, co jest wygodne dla szczurów.
- Fiksacja szczura
- Umieść kciuk i palec wskazujący obu rąk na z kwiatem śliwki na obu końcach sieci izolacji cieplnej. Odkręć kwiatu śliwy, aby opuścić siatkę izolacyjną do odpowiedniej pozycji, blisko grzbietu szczura, ale nie powodując ściskania, a następnie dokręć.
- Umieszczenie stożka moksy i ciasta leczniczego.
- Umieść przygotowaną formę zawierającą ciastko medyczne na siatce izolacyjnej odpowiadającej punktom akupunkturowym zarówno Pishu (B20), jak i Shenshu (B23) zgodnie ze znakami punktów akupunkturowych na szczurach. Istnieją cztery punkty akupunkturowe, z których każdy odpowiada ciastu lekarskiemu.
- Umieść rożek moksy na cieście leczniczym płynnie i równomiernie.
- Moxibustion (Woskowanie)
- Zapal stożek moksy zapalniczką i rozpocznij moksyterapię, aż stożek moksy wypali się, a ciepło resztkowe naturalnie się rozproszy (mokre ciastko lecznicze wyschnie).
- Zastąp wypalony stożek moksy nowym stożkiem moksy i ciastkiem leczniczym na tym samym akupunkcie i kontynuuj moksyterapię, aż stożek moksy wypali się, a ciasto z lekiem wyschnie. Powtórz to w sumie 5 razy na każdym punkcie akupunkturowym.
UWAGA: Wyczyść i zdezynfekuj podnoszoną siatkę izolacji cieplnej przed wymianą jej na nowy stożek moksowy i ciasto lecznicze. - Zgaś stożki moksy i ciastka lecznicze w zbiorniku na ścieki zawierające wodę po spaleniu pięciu stożków moksy w każdym punkcie akupunktu.
UWAGA: Każdy punkt akupunkturowy otrzymuje pięć stożków moksystymulacji; Każdy stożek moksy można wymienić po wypaleniu.
- Powrót szczura do klatki
- Umieść pustą klatkę hodowlaną przed szczurem, blisko dolnego końca szczeliny umieszczającej platformę do moksyterapii i nie ruszaj się. Delikatnie poklep pośladek szczura, aby szczur mógł przejść z miejsca do karmienia. Po wejściu szczura odłóż klatkę. Użyj dominującej ręki, aby chwycić futro na grzbiecie szczura, mocno przytrzymaj szczura i połóż go na ziemi w celu dalszej obserwacji.
- Obserwuj, czy szczury mają duszności, czy nastrój jest stabilny i czy powierzchnia skóry jest oparzona. Jeśli nie ma żadnych nieprawidłowości, włóż go z powrotem do klatki. W przypadku oparzenia natychmiast nałóż maść na oparzenia na powierzchnię skóry i umieść ją w jednej klatce.
4. Faza pobierania próbek
- Po 24 dniach leczenia należy przygotować szczury na 12 godzin postu przed pobraniem próbki.
- Wlej izofluran do aparatu do znieczulenia gazowego i znieczul szczury 2-3% izofluranem. Po 2-3 minutach upewnij się, że odruchy są nieobecne (uszczypnij ogon pęsetą chirurgiczną, aby sprawdzić, czy nie mają żadnego odruchu) i nadal utrzymuje się bicie serca i przejdź do znieczulenia podtrzymującego z 1-1,5% izofluranem.
- Zbierz 5 ml krwi z aorty brzusznej, wprowadzając igłę do aorty quasi-brzusznej. Pozostawić krew na 2 godziny, odwirować w temperaturze 2490 × g przez 10 minut w temperaturze 4 °C i przenieść supernatant surowicy do probówki mikrowirówkowej o pojemności 1,5 ml w celu dalszej analizy.
- Głęboko znieczulaj szczury przez długi czas i pobieraj krew z aorty brzusznej w znieczuleniu podtrzymującym. Ponadto poddaj szczury eutanazji przez zwichnięcie szyjki macicy.
- Zbierz tkanki z obu nerek, usuwając obustronną powięź nerkową i tłuszcz nożyczkami chirurgicznymi i pęsetą, a następnie spłukując 0,9% solą fizjologiczną. Zważ lewą i prawą nerkę i zapisz wagę i morfologię.
- Zachowaj tkankę nerkową, przecinając lewą nerkę na sześć części i umieszczając je w probówce wirówkowej o pojemności 50 ml zawierającej 4% paraformaldehydu w celu namoczenia, utrwalenia i konserwacji. Pokrój prawą nerkę na sześć części za pomocą noża w kierunku wzdłużnym i dwóch noży w kierunku poprzecznym. Umieść te kawałki w sześciu krioprobówkach o pojemności 2 ml i natychmiast umieść je w ciekłym azocie; przenieść je do zamrażarki w temperaturze -80 °C w celu przechowywania.
5. Faza wykrywania
- Użyj odpowiedniej tkanki nerkowej o odpowiedniej wielkości do ekstrakcji białka, elektroforezy żelowej, transferu błony, blokowania, inkubacji przeciwciał pierwotnych, przeciwciał wtórnych, chemiluminescencji, rozwoju, utrwalania i skanowania filmu.
- Użyj systemu analizy danych obrazu żelu (np. Image-Pro Plus 6.0), aby przeanalizować wartość szarości prążka i obliczyć zawartość każdego białka.
- Poddaj tkanki lewej nerki odwodnieniu, oczyszczeniu, zatopieniu w parafinie, przecięciu (grubość 4 μm), barwieniu hematoksyliną-eozyną i barwieniem trichromowym Massona i obserwuj zmiany patologiczne21 w tkance nerkowej pod mikroskopem świetlnym przy 200-krotnym powiększeniu.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Morfologia nerek
Jak widać na Rysunku 5, w porównaniu z pozostałymi grupami, wielkość, kolor i tekstura nerek w grupie D (grupa z moksą z dodatkiem ciastka ziołowego) były bardziej zbliżone do tych z grupy kontrolnej. Morfologia nerek w grupie modelowej oraz grupie z losartanem potasowym wykazała różny stopień białego włóknienia.
Masa nerek
Rysunek 6 pokazuje, że masa lewej ne...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Klinicznie leczenie akupunkturą i moksą wymaga od pacjentów spokoju i odprężenia, unikania nadmiernego gniewu i głodu oraz podkreślania "spokoju". Jednak obecna praktyka eksperymentów z akupunkturą i moksą nadal opiera się na założeniu wiązania zwierząt, co jest nie tylko sprzeczne z pierwotnym zamiarem eksperymentu, ale także nie jest zgodne z praktyką kliniczną. Wiązanie zwierząt, wywoływanie u nich strachu i złości, gwałtownie zwiększy poziom adrenaliny i innych hormonów u zwierząt doświadczalnych, wpływając na wyniki...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy oświadczają, że nie występują konflikty interesów. Numer patentu eksperymentalnej platformy do moksowania szczurów to ZL202320880924.X.
Podziękowania
Dziękujemy Profesor Huang i Pani Cui za ich ścisłe wskazówki i wsparcie dla tego artykułu. Badanie było wspierane przez: 1. Chińską Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych (NSFC), 82160938, "Eksploracja badań nad mechanizmem zwłóknienia śródmiąższowego nerek z moksybusją oddzieloną placekiem od interaktywnego efektu szlaków sygnałowych ERK i Smad za pośrednictwem TGF-β1"; 2. Komisja Zdrowia Prowincji Yunnan Projekt inkubacyjny "2020 High-level TCM Reserve Talents" (Yunwei TCM Development [2021] nr 1); 3. Departament Nauki i Technologii Prowincji Yunnan - Wspólne Specjalne Fundusze Medycyny Chińskiej Stosowane Badania Podstawowe (nr 2019FF002-022, nr 202101AZ70001-286, nr 202301AZ070001-030); 4. Zespół ds. innowacji prowincji Yunnan Zapobieganie i leczenie cerebropatii za pomocą akupunktury i Tuiny (2023).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,5 ml biochemicznej rurki litowo-heparynowej | Shijiazhuang Kangweishi Medical Equipment Co., LTD | 220518 | Pobieranie krwi |
| 0,9% soli fizjologicznej Kunming | Nanjiang Pharmaceutical Co., LTD | / | Płukanie |
| 1,5 ml probówki Eppendorf | Pekin Lanjieke Biotechnology Co., LTD | 12100024 | Podpakiet |
| 2 ml probówka do kriokonserwacji | Baroque Biotechnology Co., LTD | 88-0151 | Nerka w opakowaniu |
| 4 & stopnie; C lodówka | Haier Group Co. LTD | BCD-236WDGL | Sklep |
| Strzykawka 5 ml | Sichuan New century Medical polymer products Co., LTD | 20211115 | Gavage |
| Probówka wirówkowa 50 ml | Beijing Langeke Biotechnology Co., LTD | CT-002-50A | Pakowana nerka |
| Igła do zgłębnika 12 G | Beijing Zhongke Hengtian Technology Co., Ltd. | 12#55mm | Zgłębnik |
| Płytki 96-dołkowe | Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD | 11510 | Oznaczanie stężenia białka |
| -80 ° C zamrażarka | Thermo Fisher Scientific | 991 | Sklep |
| Adenina | Pekin Boaotuo Technology Co., LTD | A0607 | Twórca leku do formowania |
| BCA | Biyuntian Biological Engineering Co., LTD | P0010 | Oznaczanie stężenia białka |
| Odczynnik przeciwciała białkowego BCL-2 | Abcam Shanghai Trading Co., LTD | ab196495 | Białko |
| kaspazy-3 Western Blot odczynnik przeciwciał | Abcam Shanghai Trading Co., LTD | ab184787 | |
| System obrazowania chemiluminescencyjnego | Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., LTD | 100240073 | Obrazowanie pasm białkowych |
| Proszek medycyny chińskiej | Drugi stowarzyszony szpital Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Yunnan/ | Leczenie | |
| Marker barwiony | kolorem z bezpośrednim obciążeniemBeijing Kangrunchengye Biotechnology Co., LTD (GenStar) | M221 | Western Blot |
| Jednorazowa igła do pobierania krwi | Liuyang Sanli Rozwój nauk medycznych i technologii Co., LTD | YZB / Kraj 0411-2010 | Pobieranie próbek krwi |
| Jednorazowy pojemnik do pobierania próbek ludzkiej krwi żylnej | Liuyang Sanli Rozwój nauk medycznych i technologii Co., LTD | 20210901 | Pobieranie |
| próbek krwiDK-30 Automatyczna kostkarka do lodu śnieżnego | Henan Brothers Sprzęt instrumentalny Co., LTD | SHDX0023 | |
| Zestaw podłoża luminescencyjnego ECL | Pekin Lanjieke Biotechnology Co., LTD | BL520B | Konwertuj utajone obrazy w naświetlonej kliszy na obrazy widzialne |
| elektroniczne | Shanghai Ran Hao Electronics Co., LTD | JCS-31002C | Zmierzono |
| masę ciała i masę nerek szczurówMikrotom do zamrażania | Thermo Fisher Scientific | HM525 NX | Microtome |
| Tianjin Micro nano core Technology Co., LTD | PV2112001Z02410305 | Test czynności nerek | |
| System znieczulenia gazowego | Zhongshi Technology Co., Ltd | ZS-MV-1 | Znieczulenie |
| Glicyna | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | Cat#G8200 | Działający bufor, zachodni bufor transferowy |
| Odczynnik do barwienia HE | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | G1120 | Barwienia |
| Pasza wysokobiałkowa | Jiangsu Synergetics Biological Engineering Co., LTD | XT19008 | Karmienie |
| Inteligentna laboratoryjna maszyna do ultraczystej wody | Chongqing huachuag water treatment engineering co., LTD | 15L | Filtracja |
| Odniesienie wewnętrzne β-aktyna | Jiangsu Qinke Biological Research Co., LTD | AF7018 | Western Blot |
| Isofluran | Jiangsu Zhongmu Beikang Pharmaceutical Co., Ltd | 20220701 | Anestezjologiczne |
| ciekły azot | Kunming Botai sprzedaż suchego lodu Co., LTD | / | Zamrażanie tkanki nerkowej |
| Losartan potasu tabletki | Merck Sharp & Dohme (Chiny) Investment Co., LTD | J20180054 | Cure |
| Niskotemperaturowa wysokoobrotowa szlifierka do tkanek | Wuhan Servicebio technology CO., LTD | SKZ3F20200191 | Zestaw |
| do barwienia tkanek Maason | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | G1340 | Barwienie |
| metanolu | Guangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd | 20220519 | Zachodni bufor transferowy |
| Mini-PROTEAN Tetra | Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd | 552BR 233193 | Elektroforeza |
| Moxa | Drugi szpital stowarzyszony Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Yunnan/ | Cure | |
| Spektrofotometr mikropłytkowy Multiskan Spectrum | TECAN | Spark | Wykryto absorbancję i stężenie białka tkankowego |
| nożyczki operacyjne | Zhangjiagang miasto Jinfeng fabryka cięcia noży jeleni | 201118 | Przeciąć skórę |
| Paraformaldehyd | Pekin Lanjieke Biotechnology Co., LTD | BL539A | Stały |
| tkankowy odczynnik przeciwciał białkowych PERK | Shanghai Pumai Biotechnology Co., LTD (CST China Agent) | 3192 | Western Blot (Zachodnia plama) |
| Mikroskop fluorescencyjny | dodatni Carl Zeiss Suzhou Co., Ltd. | 5446000456 | Zrób zdjęcie |
| Prefabrykowany klej | Derun Cheng (Pekin) Biological Co., LTD (agent ACE China) | B230418 | Western Blot |
| ProteinFind Goat Anti-Rabbit LgG (H+L), koniugat HRP | Shanghai Dinran electronic Technology Co., LTD (TRAN) | HS101 | |
| Rozdrabniacz | Hefei Rongzhida małe AGD Co., LTD | RS-FS1401 | Kruszony chiński medycyna |
| membrana PVDF | MerckMillipore Corporation | IPVH00010 | Western Blot (Zachodnia plama) |
| Wirówka z chłodzeniem | Hettich Precision Technology (Zhuhai) Co., LTD | MIKRO 220R | Wirówka |
| RIPA lizatu | Beijing Solaibao Technology Co., LTD (Solarbio) | R0010 | próbek tkanek litycznych |
| Jiangsu Kangjianhua Medical Supplies Co., LTD | 20160157 | Krew z wewnętrznego kantu | |
| Maść na oparzenia (maść Zilian) | Szpital Prowincjonalny Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Yunnan/ | Stosowany do leczenia oparzeń spowodowanych moksowanią | |
| Odtłuszczone mleko w proszku | Guangzhou Saiguo Biotechnology Co., LTD (BIOFROXX) | 1172GR500 | Zachodnie ostrze chirurgiczne z buforem blokującym |
| Shanghai Medical Equipment Co., LTD | JOBO10 | Nacięcie | |
| noża chirurgicznego | Shanghai Medical Equipment Co., LTD | J11010 | Ostrze montażowe |
| TS-200 Wytrząsarka orbitalna | Haimen Qilin Bell Manufacturing Co., Ltd. | TS-8S | Utrwalanie żelu |
| Tween 80 | MedChemExpress | HY-Y1819 | TBST |
| pęseta | Shanghai Medical Equipment Co., LTD | JD1050 | Podnieś moksy |
| Leki weterynaryjne*Dysk z mikrordzeniowym testem czynności nerek | Tianjin Micro nano core Technology Co., LTD | 47031-35.5-0145-0227-62-220750 | Test czynności nerek |
Bibliografia
- Run-Ming, Y. The origin and development of Chinese acupuncture and moxibustion. Ancient Science of Life. 4 (4), 224-228 (1985).
- Zhang, Q. W. Moxibustion Theories of Different Schools. , China Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2016).
- Ren, H. W., Cai, D. J. Brief discuss on treating febrile diseases with moxibustion. China's Naturopathy. 29 (02), 1-2 (2021).
- Ouyang, X. L., et al. Moxibustion may delay the aging process of Wistar rats by regulating intestinal microbiota. Biomedicine & Pharmacotherapy = Biomedecine & Pharmacotherapie. 146, 112147(2022).
- Qi, Q., et al. Gut microbiome alterations in colitis rats after moxibustion at bilateral Tianshu acupoints. BMC Gastroenterology. 22 (1), 62(2022).
- Wang, G. Y., Meng, Z., Xu, Q. Y., Dou, L., Cui, X. F. Scar moxibustion Zusanli treatment of diarrhea-predominant irritable bowel syndrome 20 cases. Modern Chinese Medicine. 33 (03), 79-80 (2013).
- Xue, K. Y., Fu, J., Lan, L., Tang, J. X., Cui, J. Meta-analysis of the efficacy and safety of barrier moxibustion in the treatment of chronic fatigue syndrome. Journal of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine. 44 (03), 53-59 (2022).
- Liu, J. W., Tian, Y., Peng, Y. Y., Ye, Y. Y. Observation on moxibustion sensitivity and curative effect of thermal sensitive moxibustion and knee osteoarthritis. Chinese Acupuncture & Moxibustion. 41 (10), 1063-1068 (2021).
- Liu, W. A., Chang, X. R., Liu, M., Zhang, G. S. Effects of herbal-cake-separated-moxibustion sized cones at different dosages on blood fat and hemorheology in patients with hyperlipemia. Liaoning Journal of Traditional Chinese Medicine. 40 (9), 1787-1790 (2013).
- Zuo, Z., Chen, X. M., Jiang, Y. W., Yang, Y. M., Wang, B. Y. Effect of medicinal cake partition moxibustion on serum TGF-β1 and renal function in chronic renal failure rabbits. Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 38 (04), 82-84 (2017).
- Huang, P. D., et al. Effect of herbal cake-partitioned moxibustion on renal function and expression of renal connective tissue growth factor, integrin-linked kinase and bone morphogenetic protein-7 in chronic renal failure rabbits. Zhen Ci Yan Jiu = Acupuncture Research. 44 (8), 577-582 (2019).
- Li, L. R., Huang, X. X., Wei, T. T., Zhang, P. Research progress of TCM external treatment for chronic renal failure. Journal of Guangxi University of Chinese Medicine. 23 (04), 51-54 (2020).
- Zuo, Z., Jiang, Y. W., Guan, Z. X., Chen, X. M. Observations on the therapeutic effect of herbal cake moxibustion on chronic renal failure. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 34 (03), 218-220 (2015).
- Wang, H., Zhang, H. M., Xu, J. M., Fan, R. Y., Lu, J. Effect of moxibustion on renal hemodynamics in patients with chronic kidney disease. Zhen Ci Yan Jiu = Acupuncture Research. 43 (11), 722-724 (2018).
- Zhang, X. Q., Zhang, X. Y. External treatment of chronic kidney failure. Clinical Journal of Chinese Medicine. 9 (26), 141-143 (2017).
- He, C., Zhang, C. X., Zhou, S. Q., Fan, Y. S. Using old meshy cage cover to make a rat fixating device for acupuncture study. Zhen Ci Yan Jiu = Acupuncture Research. 46 (4), 348-350 (2021).
- Zhang, H. X., et al. Introduction of a new type of mouse forelimb fixator and two types of batch mice moxibustion device. Zhen Ci Yan Jiu = Acupuncture Research. 46 (7), 616-619 (2021).
- Chen, W., et al. A batch moxibustion device in the mouse abdominal waist. Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. 45 (04), 110-112 (2022).
- Gao, S. Y., Wu, R. N., Wang, M. M., Zhang, S. J. A device for animal experiment. Clinical Journal of Chinese Medicine. 10 (23), 139-140 (2018).
- Hu, Y. L. Manual of acupuncture for experimental animals (second edition). , China Agriculture Press. Beijing. (2014).
- Liang, Y. L., et al. Reflections on animal experiments with moxibustion. China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy. 31 (11), 4379-4381 (2016).
- Madalina, V. N., Jinyang, Z. -B., Malgorzata, W., Liliana, S. Targeting renal fibrosis: Mechanisms and drug delivery systems. Advanced Drug Delivery Reviews. 129, 295-307 (2018).
- Wu, R. N., et al. Design of convenient animal experimental moxibustion therapy device. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 38 (02), 243-244 (2019).
- Yan, L. G., Zhou, T., Jia, Z. K., Li, J., Wang, C. X. Influence of Panax pseudo-ginseng-partition moxibustion on cartilage damage in rats with traumatic osteoarthritis by regulating AMPK/SIRT1/NF-?B signaling pathway. Hebei Medical Journal. 45 (10), 1450-1454 (2019).
- Xu, Q., et al. Effect of mild moxibustion of 45 °C at "Zusanli" (ST36) of different durations on the inflammatory factors in the abdominal aorta of hyperlipidemia rats. Zhen Ci Yan Jiu = Acupuncture Research. 48 (9), 923-932 (2023).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
