Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Naśladowanie metody Dinga na uszkodzeniu mięśni wywołanym nutoksyną u szczurów

1.9K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/65820

⸱

25 sierpnia 2023

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół opisuje proste urządzenie, które naśladuje metodę rolki Dinga, ustanawia szczurzy model uszkodzenia mięśni szkieletowych i wykorzystuje barwienie hematoksyliną-eozyną do obserwacji patologii uszkodzonej tkanki oraz test immunoenzymatyczny do wykrywania zmian w markerach uszkodzenia surowicy.

Streszczenie

Metoda rolki Dinga jest jedną z najczęściej stosowanych manipulacji w tradycyjnych chińskich klinikach masażu (Tuina) i jedną z najbardziej wpływowych współczesnych manipulacji Tuina w Chinach. Opiera się na tradycyjnej metodzie toczenia powszechnie stosowanej w gatunku Zen jednym palcem i nazwanej metodą rolki Dinga. Ze względu na swoje działanie przeciwzapalne i wspomagające krążenie krwi, metoda rolowania Dinga ma solidne działanie terapeutyczne na miopatię. Ze względu na duży obszar siły przyłożony do ludzkiej skóry, metoda rolki Dinga jest trudna do wykonania na zwierzętach doświadczalnych z małymi obszarami skóry, takich jak szczury i króliki. Dodatkowo siła Tuiny zastosowana na organizm ludzki różni się od tej zastosowanej do zwierząt doświadczalnych, więc może się zdarzyć, że siła jest zbyt wysoka lub zbyt niska, aby osiągnąć efekt terapeutyczny Tuiny podczas eksperymentu. Ten eksperyment ma na celu stworzenie prostego masażera odpowiedniego dla szczurów w oparciu o parametry manipulacji toczeniem Dinga (siła, częstotliwość, czas trwania Tuina). Urządzenie może ustandaryzować manipulację w eksperymentach na zwierzętach i zmniejszyć zmienność siły Tuina stosowanej do różnych zwierząt z powodu czynników subiektywnych. Stworzono szczurzy model uszkodzenia mięśni szkieletowych wywołanego przez noteksynę, a markery uszkodzenia osocza, kinazę kreatynową (CK) i białko wiążące kwasy tłuszczowe 3 (FABP3), wykorzystano do oceny terapeutycznego wpływu Tuiny na uszkodzenie mięśni szkieletowych. Wyniki wykazały, że ten masażer Tuina może obniżyć poziom ekspresji CK i FABP3 oraz spowolnić stopień uszkodzenia mięśni szkieletowych. Dlatego opisywany tutaj masażer Tuina, naśladujący metodę rolki Dinga, przyczynia się do standaryzacji manipulacji Tuiną w badaniach eksperymentalnych i jest bardzo pomocny w późniejszych badaniach nad molekularnym mechanizmem Tuiny dla miopatii.

Wprowadzenie

Urazy mięśniowe są częstymi urazami w życiu klinicznym i codziennym, spowodowanymi zewnętrznymi uderzeniami (stłuczeniami) lub przewlekłym przeciążeniem włókien mięśniowych (nadwyrężeniami), itp., powodując dysfunkcję mięśni i ból, nawet poważnie wpływając na jakość życia pacjenta1. Rozpoczęcie rehabilitacji tak wcześnie, jak to możliwe po kontuzji spowodowanej ostrym przeciążeniem, jest kluczem do skrócenia czasu powrotu do sportu2 oraz do zmniejszenia bólu3,4. We współczesnej medycynie zachodniej pierwsza pomoc kliniczna w przypadku urazów mięśni jest zgodna z ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Procedury z udziałem zwierząt zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt w Hunan University of Chinese Medicine.

1. Montaż masażera rolkowego

  1. Wybierz masażer składający się z gumowego rolki, uchwytu w kształcie widelca, sprężyny, ogranicznika, szyny regulacyjnej, śruby oraz akrylowego uchwytu (Rysunek 1). Upewnij się, że gumowa rolka ma długość 3 cm i średnicę 1,6 cm, sprężyna ma długość 3 cm i średnicę 0,9 cm, ogranicznik ma długość 3 cm i szerokość 2 cm, a uchwyt ma długość 12 cm i średnicę 0,9 cm.
  2. Kontrola siły: Zgodnie z wyni....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W celu zaobserwowania właściwości morfologicznych szkieletowych mięśni szczura po urazie, mięsień brzuchaty łydki barwiono hematoksyliną i eozyną, a przetworzone obrazy analizowano za pomocą oprogramowania analitycznego zgodnie z protokołem dla 8 szczurów w grupie. U szczurów z urazem mięśnia brzuchatego łydki wywołanym przez noteksynę (grupa NTX) wiele komórek mięśniowych było rozerwanych, zanikowych, martwiczych i rozmieszczonych nieregularnie. W obszarze objętym zmianami stwierdzono również wysoką infiltrację neutrofi.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Tutaj opisaliśmy protokół leczenia Tuina uszkodzeń mięśni szkieletowych u szczurów, a następnie przeanalizowaliśmy stopień uszkodzenia mięśni szkieletowych po leczeniu, aby zweryfikować skuteczność metody. Warto zauważyć, że modele uszkodzeń mięśni szkieletowych szczurów, w tym między innymi indukcja leków (noteksyna, bupiwakaina)16, stłuczenie26, zgniatanie27 i niedokrwienie-reperfuzja28, mogą być interweniowane za pomocą Tui.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

To badanie było wspierane przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (Grant Nr.82174521), Projekt Innowacyjny dla Absolwentów Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Hunan (2022CX109)

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Strzykawka 1 mlJIANGXI FENGLIN20220521
1,5 mikroprobówki ServicebioEP-150X-J
15 ml probówka wirówkowaServicebioEP-1501-J
30G igłaCONPUVON220318
5 ml probówka do pobierania krwiServicebioQX0023
Uchwyt akrylowyGuangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd65643645
Szyna regulacyjnaCREROMEM
Wacik bawełnianyINOHV22080215
Instrument znakowany enzymemRaytoRT-6100 
EtanolINOHV211106
Uchwyt widelcaYongkang Kangzhe Health Technology Co., LtdJL001
Krem do depilacjiVeet, FrancjaLOTC190922002
Zestaw roztworów do barwienia hematoksylinyWuhan Google BiotechG1005
System obrazowania Nikon, JaponiaNikon DS-U3
IODOPHOR rozwiązanie dysfekcyjneHale& Obfitymikroskop 20221205
LightNikon, JaponiaNikon Eclipse E100
Przegroda granicznaCREROMEM20220724
NotexinLatoxan S.A.S.L8104-100UG
Pentobarbital sodowyMerck KGaAP3761
Zestaw ELISA kinazy kreatynowej szczura (CK)LunChangShuoBiotechYD-35237
Białko wiążące kwasy tłuszczowe szczura 3 (FABP3) Zestaw ELISALunChangShuoBiotechYD-35730
Wałek gumowyHebei Mgkui Chemical Technology Co., Ltd202207
ŚrubaWeiyan HardwareB05Z122
Sprague Dawley szczuryHunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.SYXK2019-0009
SprężynaBingzhang HardwareTH001
Ostrze chirurgiczneCovetrus#23
Kontroler wagiIyoysHY-XSQ
20220729

Bibliografia

  1. Lempainen, L., et al. Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide. BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41(2022).
  2. Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. Trea....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Uszkodzenie mięśni wywołane noteksynąmanipulacja Tuinauszkodzenie mięśni szkieletowychszczurzy model uszkodzenia mięśnimasażer rolkowymarkery uszkodzenia mięśnikinaza kreatynowabiałko wiążące kwasy tłuszczowebarwienie hematoksyliną i eozyną