Artykuł metodologiczny

Przewlekły nieprzewidywalny łagodny stres u szczurów na podstawie medycyny mongolskiej

DOI:

10.3791/65889

⸱

27 października 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Humanities Education, Inner Mongolia Medical University, 2Faculty of Mongolian Medicine, Inner Mongolia Medical University, 3Faculty of Basic Medical, Inner Mongolia Medical University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół przedstawia model chronicznego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) dla depresji oparty na mongolskiej teorii medycznej, wraz z metodami walidacji testów behawioralnych.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Depresja jest powszechnym zaburzeniem afektywnym i stanowi główną przyczynę globalnej niepełnosprawności. Ograniczenia obecnych interwencji farmakologicznych przyczyniają się do znacznego obciążenia zdrowotnego przypisywanego temu schorzeniu. Istnieje pilna potrzeba głębszego zrozumienia mechanizmów leżących u podstaw depresji, co sprawi, że modele przedkliniczne o potencjale translacyjnym będą bardzo cenne. Medycyna mongolska, podzbiór medycyny tradycyjnej, zakłada, że występowanie choroby jest ściśle związane z równowagą wiatru, żółci i flegmy. W tym badaniu przedstawiamy protokół metody przewlekłego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) u szczurów. W tym kontekście szczury są poddawane serii zmiennych, łagodnych stresorów w celu wywołania fenotypu podobnego do depresji, naśladując patogenezę ludzkiej depresji. Testy behawioralne stosowane w tym protokole obejmują test preferencji sacharozy (SPT), wskazujący na anhedonię - podstawowy objaw depresji; test otwartego pola (OFT), który mierzy poziom lęku; oraz test labiryntu wodnego Morrisa (MWM), który ocenia pamięć przestrzenną i zdolności uczenia się. Metoda CUMS wykazuje zdolność do wywoływania anhedonii i powodowania długotrwałych deficytów behawioralnych. Co więcej, protokół ten jest bardziej zgodny z mongolską teorią medyczną niż inne modele zwierzęce zaprojektowane do wywoływania zachowań podobnych do depresji. Opracowanie tego modelu zwierzęcego i późniejsze badania stanowią solidną podstawę dla przyszłych innowacyjnych badań w dziedzinie medycyny mongolskiej.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Duże zaburzenie depresyjne (MDD) jest powszechną chorobą psychiczną, plasującą się jako trzecia najczęstsza przyczyna niepełnosprawności na świecie i dotykającą ponad 300 milionów ludzi1,2,3. Warto zauważyć, że szacuje się, że co najmniej połowa osób dotkniętych chorobą nie otrzymuje odpowiedniego leczenia4. Biorąc pod uwagę tę lukę, modele zwierzęce służą jako kluczowe narzędzie do badania etiologii depresji. Do tej pory istnieje ponad 20 różnych zwierzęcych modeli depresji5. Wśród nich, model przewlekłego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS), udoskonalony przez Paula Winera w 1987 roku, jest najczęściej używany6. Model CUMS opiera się na założeniu, że narażenie gryzoni na różnorodny zakres stresorów społeczno-środowiskowych prowadzi do objawów podobnych do lęku, napięcia i depresji. Metodologia polega na wystawianiu zwierząt na różne łagodne czynniki stresogenne przez kilka tygodni, których kulminacją jest szereg zmian behawioralnych, w tym anhedonia i zachowania podobne do depresji7,8. Zmianom tym towarzyszą zmiany w profilach endokrynologicznych i neuroprzekaźników, takie jak zmniejszenie 5-HT9,10. Wyniki te ściśle odzwierciedlają wyniki obserwowane u ludzi, u których zdiagnozowano MDD, potwierdzając w ten sposób użyteczność modelu. Model CUMS jest szczególnie ceniony ze względu na swoją skuteczność w ocenie leków przeciwdepresyjnych, wykazując wysoki poziom trafności powierzchniowej, strukturalnej i predykcyjnej11,12. W przeciwieństwie do innych modeli, CUMS jest wrażliwy na skutki przewlekłego podawania monoaminergicznych leków przeciwdepresyjnych. Na przykład wykazano, że selektywne inhibitory wychwytu zwrotnego serotoniny (SSRI), takie jak citalopram, paroksetyna i fluoksetyna, zapobiegają i odwracają anhedonię w warunkach przewlekłego stresu12,13. Ponadto nowe szybko działające leki przeciwdepresyjne, takie jak ketamina, również wykazały skuteczność w tym modelu14,15. W przeciwieństwie do tego, inne testy, takie jak test wymuszonego pływania (FST) i test zawieszenia ogona (TST), są mniej wiarygodne w modelowaniu długoterminowych zmian w zachowaniu, często odzwierciedlając adaptacje do ostrego stresu, a nie trwałe objawy depresji16. Cechy te podkreślają solidną trafność modelu CUMS w badaniach nad depresją. Jedną z najbardziej istotnych cech modelu CUMS, uznaną za wysoce wiarygodną w badaniach klasycznych, jest anhedonia - niezdolność do odczuwania przyjemności lub zainteresowania codziennymi czynnościami17,18. Zjawisko to jest powszechnie oceniane za pomocą testów preferencji sacharozy i wykazano, że wiele leków przeciwdepresyjnych odwraca zmniejszone spożycie sacharozy. Kilka innych wskaźników jest również powszechnie stosowanych w literaturze CUMS, w tym test otwartego pola (OFT), który ocenia dobrowolne zachowania motoryczne, tendencje eksploracyjne i napięcie, mierząc w ten sposób nasilenie depresji19. Inne testy, takie jak elevated plus maze (EPM) oceniają zachowania podobne do lęku, test labiryntu wodnego Morrisa (MWM) bada funkcjonowanie poznawcze 20, a FST ocenia podatność na negatywne emocje i rozpacz behawioralną20. Co więcej, większość stresorów, które wpływają na ludzi, ma charakter społeczny. Osoby z nieoptymalnymi relacjami społecznymi, charakteryzującymi się ograniczoną aktywnością społeczną, sieciami i wsparciem, są narażone na zwiększone ryzyko różnych chorób21,22. Ma to również znaczenie w przypadku gryzoni, które są zwierzętami społecznymi żyjącymi w grupach. Na przykład szczury trzymane w izolacji wykazują cechy tak zwanego syndromu izolacji, który wywołuje stres społeczny i przyspiesza wystąpienie depresji23.

Medycyna mongolska, znacząca gałąź medycyny chińskiej, zakłada, że początek choroby to złożona interakcja między czynnikami wewnętrznymi i zewnętrznymi. Te czynniki zewnętrzne, określane jako cztery warunki pomocnicze, obejmują zmiany klimatu, dietę, styl życia i nagłe zdarzenia, takie jak infekcje, zaskakujące incydenty i zaburzenia psychiczne. Proces chorobowy jest konceptualizowany jako ciągła interakcja między trzema elementami - określanymi jako trzy typy homorów - a Siedmioma Składnikami Ciała w połączeniu z czterema warunkami pomocniczymi24. Medycyna mongolska utrzymuje, że ciało ludzkie funkcjonuje jako zintegrowana jednostka, utrzymywana przez względną równowagę między trzema homorami. Zaburzenie tej równowagi jest uważane za prekursor choroby24. Biorąc pod uwagę kluczową rolę eksperymentów na zwierzętach w łączeniu medycyny tradycyjnej i nowoczesnej, kluczowe znaczenie ma opracowanie modeli zwierzęcych, które są istotne dla badań w dziedzinie medycyny mongolskiej. W związku z tym zastosowaliśmy metodologię 28-dniowej izolacji w połączeniu z CUMS, aby symulować te fizjologiczne i psychologiczne czynniki stresogenne. Wybraliśmy dziewięć konkretnych nieprzewidywalnych stresorów i staraliśmy się oprzeć tę metodę modelowania na podstawie teorii trzech homorów medycyny mongolskiej. Stworzenie solidnego modelu zwierzęcego ma zasadnicze znaczenie dla postępu w badaniach podstawowych w medycynie mongolskiej i znacząco przyczyni się do ich podstawowego rozwoju.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokoły eksperymentalne otrzymały zgodę Komitetu ds. Etyki Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Medycznego Mongolii Wewnętrznej (YKD202301172) i przestrzegały wytycznych Narodowych Instytutów Zdrowia dotyczących opieki nad zwierzętami i etyki. Numer licencji naszego centrum dla zwierząt to NO.110324230102364187. Dwadzieścia cztery samce szczurów Sprague-Dawley (SD), każdy w wieku 8 tygodni (200 g ± 20 g), zostały pozyskane i trzymane w kontrolowanym środowisku o temperaturze 22°C ± 2°C i wilgotności 55% ± 15%. Karm szczury dietą pielęgnacyjną dla gryzoni i czystą wodą z kolbami kukurydzy na ściółkę. Szczury poddano cyklowi 12 godzin/12 godzin światła/ciemności przez 1 tydzień przed eksperymentami.

1. Ustanowienie modelu szczura CUMS

  1. grupowanie
    1. Podziel losowo 24 szczury na 2 grupy: grupę kontrolną (CON), która nie będzie narażona na izolację lub stres, oraz grupę modelową (MOD). Każda grupa składa się z 12 szczurów.
    2. Trzymaj szczury w standardowych klatkach o wymiarach 55 cm x 40 cm x 20 cm, po 6 szczurów w klatce. Przydział klatki należy zachować przez cały okres aklimatyzacji, chyba że wskazano inaczej.
    3. Napełnij każdą klatkę hodowlaną świeżą ściółką i wymieniaj ją dwa razy w tygodniu.
    4. Przeprowadź 1-tygodniowy okres aklimatyzacji. Pozwól szczurom na nieograniczony dostęp do pożywienia i wody, z wyjątkiem stosowania stresora CUMS. Utrzymuj stałe środowisko o temperaturze 22°C ± 2°C, wilgotności 55% ± 15% i 12 godzinnym cyklu światło/ciemność 12 godzin/12 godzin od 08:00 do 20:00, chyba że zaznaczono inaczej.
    5. Przed rozpoczęciem eksperymentu należy codziennie obchodzić się ze szczurami, aby przyzwyczaić je do badacza i zminimalizować dodatkowy stres podczas fazy eksperymentalnej.
  2. Izolacja z przewlekłym, nieprzewidywalnym, łagodnym stresem
    1. Równolegle umieść grupy MOD i CON w oddzielnych pokojach. Trzymaj szczury z grupy MOD pojedynczo, jednocześnie trzymając szczury grupy CON razem. Utrzymuj wszystkie inne warunki na stałym poziomie.
    2. Zaimplementuj 28-dniowy schemat stresujący25. Aby zapobiec przyzwyczajeniu i zapewnić nieprzewidywalność stresora, podawaj jeden losowy stresor dziennie, unikając stosowania tego samego stresora w kolejnych dniach.
    3. Losowo zastosuj jeden z następujących dziewięciu stresorów26,27 w różne dni: 24-godzinny brak wody, 24-godzinny brak jedzenia, mokra wyściółka, nachylenie klatki, odwrócenie cyklu światła/ciemności, ekspozycja na zimno w 4 °C, ekspozycja na ciepło w 45 °C, 1 minuta zaciskania ogona lub 15 minut wstrząsania przy 160 obr./min. Konkretny projekt przedstawiono w tabeli 1.
    4. Podczas stosowania stresora ogranicz dostęp do jedzenia i wody do grupy MOD do czasu zakończenia stresu, z wyjątkiem odwrócenia cyklu światło/ciemność. Grupa CON nie była zobowiązana do ograniczania wody i diety.
  3. Metody naprężeń
    1. Rozpocznij eksperyment od zastosowania bodźców depresyjnych w połączeniu z 28-dniową izolacją u wszystkich szczurów, z wyłączeniem grupy kontrolnej. Trzymaj te szczury w indywidualnych klatkach. Patrz Tabela 2, aby zapoznać się ze stanami związanymi z bodźcami depresyjnymi.
    2. Aby wykonać metodę zacisku ogonowego, zabezpiecz ogon szczura z grupy MOD, zaciskając ogon standardowym spinaczem do papieru w odległości 1-2 cm od nasady ogona szczura. Mierzyć czas zaciskania przez 1 minutę (n = 12).
    3. W metodzie pozbawiania wody wstrzymaj wodę szczurowi z grupy MOD, wyjmując jego butelkę z wodą i zapisuj przez 24 godziny
      UWAGA: Czas rozpoczęcia deprywacji wody został zarejestrowany, aby można było dokładnie obliczyć czas zakończenia; Zaobserwowano zachowanie szczurów w tym okresie, w tym aktywność, apetyt i stan psychiczny.
    4. W metodzie deprywacji żywnościowej należy wstrzymać jedzenie od szczura z grupy MOD i zapisać przez 24 godziny
      UWAGA: Zapisz czas, w którym zaczyna się deprywacja żywności, aby można było dokładnie obliczyć czas zakończenia; zapewnić, że szczury są odpowiednio nawodnione w tym okresie; i obserwuj zachowanie szczurów w tym okresie, w tym aktywność i stan psychiczny itp.
    5. W celu stymulacji zimnem w temperaturze 4 °C umieść szczura z grupy MOD w wiadrze z zimną wodą i nagrywaj przez 5 minut. Upewnij się, że temperatura wody pozostaje stała przez cały czas trwania testu. Po zakończeniu eksperymentu osusz szczura dmuchawą i włóż go z powrotem do pierwotnej klatki.
      UWAGA: Utrzymuj temperaturę zimnej wody na poziomie 4 °C za pomocą termometru i kostek lodu, aby regulować temperaturę wody, gdy rośnie. Woda powinna być regularnie wymieniana, aby zapewnić czystość wody i stałą temperaturę. Podczas pływania wszystkie kończyny i tułowia szczurów powinny być zanurzone w zimnej wodzie z wyjątkiem głowy. Głębokość wody musi być większa niż długość ciała szczura, aby zapobiec wyskakiwaniu szczura z wody w wyniku kontaktu z dnem wiadra.
    6. Aby zastosować stres cieplny w temperaturze 45 °C, należy umieścić szczura z grupy MOD w inkubatorze i nagrywać przez 5 minut, upewniając się, że temperatura pozostaje stabilna przez cały czas trwania testu.
    7. W odwróceniu cyklu światło-ciemność owiń klatkę czarną szmatką na 1 godzinę, aby symulować ciemność w ciągu dnia. Następnie oświetl klatkę przez 12 godzin w nocy, aby naśladować światło dzienne. Rejestruj zachowanie szczura, spożycie pokarmu i wody oraz wzorce snu przez 24 godziny.
    8. W eksperymencie z mokrą wyściółką wprowadź 200 ml wody do klatki zawierającej 100 g wyściółki. Trzymaj szczura z grupy MOD w mokrej klatce i rejestruj zachowanie szczurów pod wpływem stresu związanego z mokrą ściółką, w tym aktywność, apetyt, spożycie wody itp. Obserwuj, czy nie ma żadnych nieprawidłowych zachowań lub nieprzyjemnych reakcji, takich jak stan skóry i włosów szczurów, które mogą być spowodowane mokrą wyściółką, i rejestruj je na czas do późniejszej analizy przez 24 godziny. Po teście osusz szczura dmuchawą i umieść go z powrotem w klatce ze świeżymi wiórami drzewnymi.
    9. W metodzie nachylenia klatki umieść szczura z grupy MOD w klatce nachylonej pod kątem 45° do ściany i nagrywaj przez 24 godziny. Użyj konstrukcji ramy klatki, aby wyregulować kąt i zabezpieczyć klatkę na miejscu.
      UWAGA: Oblicz czas od początku do końca i obserwuj zachowanie szczurów w okresie przechylania klatki, w tym aktywność, apetyt i stan psychiczny, a także upewnij się, że kąt przechylonej klatki jest ustawiony prawidłowo i pozostaje stabilny, aby zapewnić dokładność i powtarzalność eksperymentu.
    10. W przypadku wytrząsania z dużą prędkością umieść szczura z grupy MOD w wytrząsarce mechanicznej ustawionej na 160 obr./min i nagrywaj szczura przez 15 minut. Metody testowania behawioralnego są następnie wykorzystywane do oceny pomyślnego ustanowienia modelu.
    11. Po zastosowaniu stresorów przenieś klatki grupy MOD z pomieszczenia CUMS z powrotem do pomieszczenia mieszkalnego. Podczas 4-tygodniowego okresu ekspozycji na stres utrzymuj grupę CON w klatkach domowych znajdujących się w pomieszczeniu mieszkalnym.
  4. Środki ostrożności podczas eksperymentów
    1. Przenieś klatki z grupy MOD z powrotem do ogólnego pomieszczenia mieszkalnego po zastosowaniu stresora w pomieszczeniu CUMS.
    2. Monitorowanie zwierząt podczas modelowania CUMS
      1. Podczas zaciskania ogona zwierzę prawdopodobnie będzie miało problemy z powodu indukowanej stymulacji. Przez cały ten okres należy stale monitorować zacisk. Jeśli zostanie przemieszczony, zatrzymaj timer, ponownie załóż clamp, a następnie wznów timer na 1 minutę.
      2. Nie nakładaj jednocześnie niedoboru wody i stresorów związanych z mokrą ściółką.
        UWAGA: Unikanie jednoczesnego nakładania mokrej wyściółki i deprywacji wody pomaga utrzymać integralność eksperymentu, zmniejsza zmienne zakłócające i sprzyja dobrostanowi zwierząt.
      3. Temperatura ciała zwierzęcia i temperatura otoczenia w pomieszczeniu mogą podnieść temperaturę wody podczas pływania w zimnej wodzie. Dlatego dostosuj, dodając lodowatą wodę lub kostki lodu, aby utrzymać stałą temperaturę wody.
      4. Obserwuj szczury w odstępach 30-minutowych podczas stosowania stresorów, z wyjątkiem odwrócenia dobowego. Zwróć szczególną uwagę na oznaki nietypowego niepokoju, takie jak dreszcze, letarg lub brak ruchu. W przypadku zaobserwowania takich objawów - szczególnie potencjalnej hipotermii podczas pływania w zimnej wodzie o temperaturze 4 °C i mokrej ściółki - natychmiast usuń szczura ze stresora.
        UWAGA: Należy usunąć zwierzęta doświadczalne z badania, gdy mają problemy zdrowotne, takie jak infekcja, ciężki uraz, agresywne zachowania, nienormalna mobilność itp., Warunki usunięcia zwierząt z badania zazwyczaj koncentrują się na ochronie ich zdrowia i bezpieczeństwa przy jednoczesnym zapewnieniu integralności wyników eksperymentalnych.
      5. Przeprowadzaj codzienne kontrole pod kątem ran lub innych nieprawidłowości fizycznych lub behawioralnych u każdego szczura. W przypadku zaobserwowania jakichkolwiek nieprawidłowości skonsultuj się z weterynarzem laboratoryjnym, aby ustalić, czy szczur powinien zostać wykluczony z eksperymentu.
      6. Waż każdego szczura co 3 dni. Jeżeli zwierzę traci więcej niż 20% swojej podstawowej masy ciała przed karmieniem, musi zostać wykluczone z doświadczenia.

2. Testy behawioralne

  1. Na początek podawaj bodźce depresyjne w połączeniu z izolacją przez 28 dni wszystkim szczurom, z wyjątkiem grupy kontrolnej. Trzymaj szczury w indywidualnych klatkach. Zapoznaj się z Tabelą 2, aby uzyskać szczegółowe informacje na temat stanów bodźców depresyjnych.
  2. W przypadku testu w otwartym polu podziel czarną skrzynkę na 25 kwadratowych odcinków o równej powierzchni. Zainstaluj system analizy śledzenia wideo w pudełku. Umieść szczura na centralnym kwadracie i monitoruj jego aktywność poziomą i pionową przez czas 5 min.
    UWAGA: Wymiary pudełka to 500 mm x 500 mm x 300 mm. Dane dotyczące aktywności będą gromadzone za pomocą systemu śledzenia wideo w celu oceny zachowań związanych z lękiem u gryzoni wystawionych na działanie nowego środowiska.
  3. Następnie policz liczbę kwadratów przebytych przez szczura, używając wszystkich łap, aby określić ilościowo aktywność poziomą. Policz przypadki stania i pielęgnacji jako wskaźniki aktywności pionowej. Po każdym teście zdezynfekuj pudełko za pomocą 75% alkoholu, aby wyeliminować wszelkie pozostałości zapachów szczurów do kolejnych testów.
  4. Następnie anhedonię ocenia się za pomocą testu preferencji sacharozy. Umieść dwie butelki na pokrywie koszyka: butelka A zawiera czystą wodę, a butelka B zawiera 1% roztwór sacharozy. Zezwól szczurowi na dostęp ad libitum do obu rozwiązań. Zważ butelki przed i po spożyciu, aby obliczyć 60-minutowe preferencje sacharozy w dniach 0, 7, 14, 21 i 28. Wzór jest następujący:
    Zużycie sacharozy = figure-protocol-1 × 100%
  5. Aby zmierzyć pamięć przestrzenną i zdolności uczenia się, zastosuj test labiryntu wodnego Morrisa. Podziel pulę na cztery ćwiartki, numerując je od jednego do czterech. Umieść zanurzoną platformę spoczynkową 1 cm poniżej powierzchni wody w trzeciej ćwiartce.
  6. Wprowadzić mleko do basenu, aby zwiększyć zmętnienie wody i utrzymać temperaturę wody na poziomie około 23 °C przez cały czas trwania procedury doświadczalnej.
  7. Umieść każdego szczura w różnych ćwiartkach labiryntu, dając mu 120 sekund na zlokalizowanie ukrytej platformy. Szczury muszą polegać na pamięci przestrzennej i umiejętnościach uczenia się, aby zapamiętać lokalizację platformy. Gdy poznają lokalizację platformy, mogą podpłynąć bezpośrednio do niej. Nagraj czas opóźnienia za pomocą systemu śledzenia wideo Morris water labiryt.
  8. Umieść szczura w ustalonym miejscu w basenie. Jeśli testerowi nie uda się zlokalizować ukrytej platformy w ciągu 120 sekund, zapisz opóźnienie jako 120 s.
  9. Na koniec usuń ukrytą platformę, umieść szczura z powrotem w wodzie i zapisz liczbę przekroczeń stref w okresie 120 sekund.

3. Analiza statystyczna

  1. Aby ocenić znaczące różnice w parametrach biochemicznych, należy zastosować jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA), a następnie test post hoc Duncana. Przedstaw dane jako średnią ± błędu standardowego (SE) i uznaj wartość p mniejszą niż 0,05 za statystycznie istotną.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wyniki testów behawioralnych w modelu depresji szczurów wywołanej przez CUMS
Aby potwierdzić skuteczność procedury CUMS w wywoływaniu zachowań podobnych do depresji, przeprowadzono kontrolę manipulacji. Samce szczurów Sprague-Dawley (SD) zostały losowo przydzielone do grupy MOD lub CON na okres 4 tygodni, jak opisano w kroku 1.2.3. Następnie szczury zostały uśmiercone, a ich hipokampy zostały całkowicie wypreparowane w celu oceny 5-HT, neuroprzekaźnika silnie związanego z patofizjologią depresji

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Depresja to zaburzenie psychiczne charakteryzujące się objawami takimi jak obniżony nastrój, brak przyjemności i zmniejszona energia30. W dziedzinie badań nad depresją stworzenie wiarygodnego modelu zwierzęcego ma kluczowe znaczenie dla postępu w interwencjach terapeutycznych. Wśród różnych modeli zwierzęcych model CUMS jest szczególnie godny uwagi ze względu na jego wysoką wiarygodność, trafność i zgodność z charakterystyką ludzkiej depresji31. Doskonale nadaje się do naśl...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Jesteśmy wdzięczni za dostarczone oprzyrządowanie i laboratorium, aby wyrazić naszą wdzięczność mongolskiemu wydziałowi medycznemu Uniwersytetu Medycznego Mongolii Wewnętrznej w Chinach.To badanie było wspierane przez dostarczenie niezbędnego oprzyrządowania i zaplecza laboratoryjnego. Badanie to otrzymało wsparcie finansowe od Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (grant nr 81760762) oraz projektu Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Mongolii Wewnętrznej (grant nr 1). YKD2022MS074) oraz Projekt Naukowo-Badawczy Szkolnictwa Wyższego w Mongolii Wewnętrznej w Chinach (grant nr NJZY22661) oraz projekt Funduszu Otwartego Kluczowego Laboratorium Medycyny Chińskiej i Mongolskiej w Regionie Autonomicznym Mongolii Wewnętrznej w Chinach (grant nr 1). MYX2023-K07).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
1,5 ml probówka wirówkowaserwis Biotechnology Co., LtdEP-150-M
1000 µ L Serwis pipetBiotechnology Co., LtdIC021198160223
10 & mikro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdIC012395160823
10 & mikro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-10
1250 µ L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-1250
2 mL serwis probówek wirówkowychBiotechnology Co., LtdEP-200-M
200 µ L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-200
200 & micro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdIC021029160323
300 & mikro; L Wielokanałowa usługa pipetBiotechnology Co., LtdIC091006161022
50 & mikro; L Serwis pipetBiotechnology Co., LtdDS35110
Automatyczna myjka do płytrayto Life Sciences Co., LtdRT-3100
Stołowa wirówka do zamrażania o dużej prędkościdalong construction Co., LtdD3024R
Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., LtdME203E/02
Elektrotermiczne suszenie strumieniowo-ścierne piekarnikLabotery Experimental Instrument Equipment Co., LtdGEL-70
Detektor etykiet enzymówBioTeK Co., LtdEpoch
High Speed Tissue Grinderservice Biotechnology Co., LtdKZ-figure-materials-1-F
Zamrażarka poziomaMellow Group Co., LtdBCD-318AT
Laboratoryjna maszyna do wody ultraczystejJinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd   AK-RO-C2
System analizy szlaków wideo labiryntu wodnego Morris Tai Meng Tech Co., LtdWMT-200
Szczur 5-HT ELISA KitLian Ke bio Co., Ltd, Chiny96T / 48T
SPF klasa Sprague Dawley (SD) szczurySPF (Pekin) Biotechnologia Co SCXK(JING)2019-0010
Szczury Sprague DawleyBeijing Biotechnology Co., Ltd, Chiny  SCXK (JING) 2019-0010
Pionowa witryna chłodniczaXingx Group Co., LtdLSC-316C
Tai Meng Tech Co., LtdZH-ZFT
Servicebio technology Co., LtdMV-100
Waga elektroniczna System śledzenia wideo Mieszalnik wirowy

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Alqurashi, G. K., et al. The impact of chronic unpredictable mild stress-induced depression on spatial, recognition and reference memory tasks in mice: Behavioral and histological study. Behav Sci. 12 (6), 166(2022).
  2. Yu, S., Wang, L., Jing, X., Wang, Y., An, C. Features of gut microbiota and short-chain fatty acids in patients with first-episode depression and their relationship with the clinical symptoms. Front Psychol. 14, 1088268(2023).
  3. Duda, P., Hajka, D., Wójcicka, O., Rakus, D., Gizak, A. Gsk3β: A master player in depressive disorder pathogenesis and treatment responsiveness. Cells. 9 (3), 727(2020).
  4. Correia, A. S., Vale, N. Tryptophan metabolism in depression: A narrative review with a focus on serotonin and kynurenine pathways. Int J Mol Sci. 23 (15), 8493(2022).
  5. Hao, Y., Ge, H., Sun, M., Gao, Y. Selecting an appropriate animal model of depression. Int J Mol Sci. 20 (19), 4827(2019).
  6. Willner, P., Towell, A., Sampson, D., Sophokleous, S., Muscat, R. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology (Berl). 93 (3), 358-364 (1987).
  7. Nakase, S., Kitayama, I., Soya, H., Hamanaka, K., Nomura, J. Increased expression of magnocellular arginine vasopressin mrna in paraventricular nucleus of stress-induced depression-model rats. Life Sci. 63 (1), 23-31 (1998).
  8. Wu, X., et al. Involvement of kynurenine pathway between inflammation and glutamate in the underlying etiopathology of cums-induced depression mouse model. BMC Neurosci. 23 (1), 62(2022).
  9. Zhang, C., et al. Minocycline ameliorates depressive behaviors and neuro-immune dysfunction induced by chronic unpredictable mild stress in the rat. Behav Brain Res. 356, 348-357 (2019).
  10. Ma, J., Wang, R., Chen, Y., Wang, Z., Dong, Y. 5-HT attenuates chronic stress-induced cognitive impairment in mice through intestinal flora disruption. J Neuroinflammation. 20 (1), 23(2023).
  11. Nollet, M. Models of depression: Unpredictable chronic mild stress in mice. Curr Protoc. 1 (8), e208(2021).
  12. Becker, M., Pinhasov, A., Ornoy, A. Animal models of depression: What can they teach us about the human disease. Diagnostics (Basel). 11 (1), 123(2021).
  13. Petkovic, A., Chaudhury, D. Encore: Behavioural animal models of stress, depression and mood disorders. Front Behav Neurosci. 16, 931964(2022).
  14. Okine, T., Shepard, R., Lemanski, E., Coutellier, L. Sex differences in the sustained effects of ketamine on resilience to chronic stress. Front Behav Neurosci. 14, 581360(2020).
  15. Fitzgerald, P. J., et al. Sex- and stress-dependent effects of a single injection of ketamine on open field and forced swim behavior. Stress. 24 (6), 857-865 (2021).
  16. Doron, R., Burstein, O. The unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice. J Vis Exp. (140), e58184(2018).
  17. De Vry, J., Schreiber, R. The chronic mild stress depression model: Future developments from a drug discovery perspective. Psychopharmacology (Berl). 134 (4), discussion 371-347 349-350 (1997).
  18. Tong, J., et al. Antidepressant effect of helicid in chronic unpredictable mild stress model in rats. Int Immunopharmacol. 67, 13-21 (2019).
  19. Liu, H., et al. Tnf signaling pathway-mediated microglial activation in the pfc underlies acute paradoxical sleep deprivation-induced anxiety-like behaviors in mice. Brain Behav Immun. 100, 254-266 (2022).
  20. He, L. W., et al. Optimization of food deprivation and sucrose preference test in sd rat model undergoing chronic unpredictable mild stress. Animal Model Exp Med. 3 (1), 69-78 (2020).
  21. Ma, W., Wu, B., Gao, X., Zhong, R. Association between frailty and cognitive function in older chinese people: A moderated mediation of social relationships and depressive symptoms. J Affect Disord. 316, 223-232 (2022).
  22. Geng, C., et al. Systematic impacts of chronic unpredictable mild stress on metabolomics in rats. Sci Rep. 10 (1), 700(2020).
  23. Holmes, T. H., Rahe, R. H. The social readjustment rating scale. J Psychosom Res. 11 (2), 213-218 (1967).
  24. Zhang, M., et al. Shuxie-1 decoction alleviated cums -induced liver injury via il-6/jak2/stat3 signaling. Front Pharmacol. 13, 848355(2022).
  25. Antoniuk, S., Bijata, M., Ponimaskin, E., Wlodarczyk, J. Chronic unpredictable mild stress for modeling depression in rodents: Meta-analysis of model reliability. Neurosci Biobehav Rev. 99, 101-116 (2019).
  26. Hu, C., et al. Re-evaluation of the interrelationships among the behavioral tests in rats exposed to chronic unpredictable mild stress. PLoS One. 12 (9), e0185129(2017).
  27. Li, Y., et al. Increased hippocampal fissure width is a sensitive indicator of rat hippocampal atrophy. Brain Res Bull. 137, 91-97 (2018).
  28. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of the Mongolian medicine Zadi-5 on monoamine neurotransmitters in the brain of rats with chronic stress depression model. Info Traditional Chinese Med. 34 (06), 5-8 (2017).
  29. Zhou, Y., Cong, Y., Liu, H. Folic acid ameliorates depression-like behaviour in a rat model of chronic unpredictable mild stress. BMC Neurosci. 21 (1), 1(2020).
  30. Zhuang, Y., Zeng, R., Liu, X., Yang, L., Chan, Z. Neoagaro-oligosaccharides ameliorate chronic restraint stress-induced depression by increasing 5-ht and bdnf in the brain and remodeling the gut microbiota of mice. Mar Drugs. 20 (11), 725(2022).
  31. Socała, K., et al. The role of microbiota-gut-brain axis in neuropsychiatric and neurological disorders. Pharmacol Res. 172, 105840(2021).
  32. Song, J., Kim, Y. K. Animal models for the study of depressive disorder. CNS Neurosci Ther. 27 (6), 633-642 (2021).
  33. Abelaira, H. M., Réus, G. Z., Quevedo, J. Animal models as tools to study the pathophysiology of depression. Braz J Psychiatry. 35 Suppl 2, S112-S120 (2013).
  34. Strekalova, T., et al. Chronic mild stress paradigm as a rat model of depression: Facts, artifacts, and future perspectives. Psychopharmacology (Berl). 239 (3), 663-693 (2022).
  35. Markov, D. D. Sucrose preference test as a measure of anhedonic behavior in a chronic unpredictable mild stress model of depression: Outstanding issues. Brain Sci. 12 (10), 1287(2022).
  36. Czéh, B., Fuchs, E., Wiborg, O., Simon, M. Animal models of major depression and their clinical implications. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 64, 293-310 (2016).
  37. Gururajan, A., Reif, A., Cryan, J. F., Slattery, D. A. The future of rodent models in depression research. Nat Rev Neurosci. 20 (11), 686-701 (2019).
  38. Markov, D. D., Novosadova, E. V. Chronic unpredictable mild stress model of depression: Possible sources of poor reproducibility and latent variables. Biology (Basel). 11 (11), 1621(2022).
  39. Willner, P. The chronic mild stress (cms) model of depression: History, evaluation and usage. Neurobiol Stress. 6, 78-93 (2017).
  40. Lages, Y. V. M., Rossi, A. D., Krahe, T. E., Landeira-Fernandez, J. Effect of chronic unpredictable mild stress on the expression profile of serotonin receptors in rats and mice: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 124, 78-88 (2021).
  41. Willner, P., et al. Validation of chronic mild stress in the wistar-kyoto rat as an animal model of treatment-resistant depression. Behavioural Pharmacology. 30 (2 and 3), 239-250 (2019).
  42. Slattery, D. A., Cryan, J. F. Modelling depression in animals: At the interface of reward and stress pathways. Psychopharmacology (Berl). 234 (9-10), 1451-1465 (2017).
  43. Sterley, T. L., et al. Social transmission and buffering of synaptic changes after stress. Nat Neurosci. 21 (3), 393-403 (2018).
  44. Brechbühl, J., et al. Mouse alarm pheromone shares structural similarity with predator scents. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (12), 4762-4767 (2013).
  45. Beck, R. C., Self, J. L., Carter, D. J. Sucrose preference thresholds for satiated and water-deprived rats. Psychol Rep. 16, 901-905 (1965).
  46. Hawkins, P., Golledge, H. D. R. The 9 to 5 rodent - time for change? Scientific and animal welfare implications of circadian and light effects on laboratory mice and rats. J Neurosci Methods. 300, 20-25 (2018).
  47. Daut, R. A., Ravenel, J. R., Watkins, L. R., Maier, S. F., Fonken, L. K. The behavioral and neurochemical effects of an inescapable stressor are time of day dependent. Stress. 23 (4), 405-416 (2020).
  48. Hu, R. L. B. G., et al. Experimental research on nutmeg wuwei pills against of depression model rats behavior and hippocampus monoamine neurotransmitters. Chinese J Exp Traditional Medical Formulae. 21 (11), 146-149 (2015).
  49. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of Rou kou Wuwei Pill on the learning and memory abilities and the expression of BDNF and TrkB in hippocampus of depression rats. Chinese J Traditional Chines Med Pro. 32 (8), 3797-3800 (2017).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Model depresjitesty behawioralne u szczur wtest preferencji do sacharozytest otwartego polalabirynt wodny Morrisaindukcja anhedoniibadania nad medycyn tradycyjnzwierz cy model depresji

Powiązane artykuły