Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Przewlekły nieprzewidywalny łagodny stres u szczurów na podstawie medycyny mongolskiej

2.6K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/65889

⸱

27 października 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Humanities Education, Inner Mongolia Medical University, 2Faculty of Mongolian Medicine, Inner Mongolia Medical University, 3Faculty of Basic Medical, Inner Mongolia Medical University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół przedstawia model chronicznego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) dla depresji oparty na mongolskiej teorii medycznej, wraz z metodami walidacji testów behawioralnych.

Streszczenie

Depresja jest powszechnym zaburzeniem afektywnym i stanowi główną przyczynę globalnej niepełnosprawności. Ograniczenia obecnych interwencji farmakologicznych przyczyniają się do znacznego obciążenia zdrowotnego przypisywanego temu schorzeniu. Istnieje pilna potrzeba głębszego zrozumienia mechanizmów leżących u podstaw depresji, co sprawi, że modele przedkliniczne o potencjale translacyjnym będą bardzo cenne. Medycyna mongolska, podzbiór medycyny tradycyjnej, zakłada, że występowanie choroby jest ściśle związane z równowagą wiatru, żółci i flegmy. W tym badaniu przedstawiamy protokół metody przewlekłego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS) u szczurów. W tym kontekście szczury są poddawane serii zmiennych, łagodnych stresorów w celu wywołania fenotypu podobnego do depresji, naśladując patogenezę ludzkiej depresji. Testy behawioralne stosowane w tym protokole obejmują test preferencji sacharozy (SPT), wskazujący na anhedonię - podstawowy objaw depresji; test otwartego pola (OFT), który mierzy poziom lęku; oraz test labiryntu wodnego Morrisa (MWM), który ocenia pamięć przestrzenną i zdolności uczenia się. Metoda CUMS wykazuje zdolność do wywoływania anhedonii i powodowania długotrwałych deficytów behawioralnych. Co więcej, protokół ten jest bardziej zgodny z mongolską teorią medyczną niż inne modele zwierzęce zaprojektowane do wywoływania zachowań podobnych do depresji. Opracowanie tego modelu zwierzęcego i późniejsze badania stanowią solidną podstawę dla przyszłych innowacyjnych badań w dziedzinie medycyny mongolskiej.

Wprowadzenie

Duże zaburzenie depresyjne (MDD) jest powszechną chorobą psychiczną, plasującą się jako trzecia najczęstsza przyczyna niepełnosprawności na świecie i dotykającą ponad 300 milionów ludzi1,2,3. Warto zauważyć, że szacuje się, że co najmniej połowa osób dotkniętych chorobą nie otrzymuje odpowiedniego leczenia4. Biorąc pod uwagę tę lukę, modele zwierzęce służą jako kluczowe narzędzie do badania etiologii depresji. Do tej pory istnieje ponad 20 różnych zwierzęcych modeli depresji5. Wśród nich, model przewlekłego nieprzewidywalnego łagodnego stresu (CUMS), udoskonalony przez Paula Winera w 1987 roku, jest najczęściej używany6. Model CUMS opiera się na założeniu, że narażenie gryzoni na różnorodny zakres stresorów społeczno-środowiskowych prowadzi do objawów podobnych do lęku, napięcia i depresji. Metodologia polega na wystawianiu zwierząt na różne łagodne czynniki stresogenne przez kilka tygodni, których kulminacją jest szereg zmian behawioralnych, w tym anhedonia i zachowania podobne do depresji7,8. Zmianom tym towarzyszą zmiany w profilach endokrynologicznych i neuroprzekaźników, takie jak zmniejszenie 5-HT9,10. Wyniki te ściśle odzwierciedlają wyniki obserwowane u ludzi, u których zdiagnozowano MDD, potwierdzając w ten sposób użyteczność modelu. Model CUMS jest szczególnie ceniony ze względu na swoją skuteczność w ocenie leków przeciwdepresyjnych, wykazując wysoki poziom trafności powierzchniowej, strukturalnej i predykcyjnej11,12. W przeciwieństwie do innych modeli, CUMS jest wrażliwy na skutki przewlekłego podawania monoaminergicznych leków przeciwdepresyjnych. Na przykład wykazano, że selektywne inhibitory wychwytu zwrotnego serotoniny (SSRI), takie jak citalopram, paroksetyna i fluoksetyna, zapobiegają i odwracają anhedonię w warunkach przewlekłego stresu12,13. Ponadto nowe szybko działające leki przeciwdepresyjne, takie jak ketamina, również wykazały skuteczność w tym modelu14,15. W przeciwieństwie do tego, inne testy, takie jak test wymuszonego pływania (FST) i test zawieszenia ogona (TST), są mniej wiarygodne w modelowaniu długoterminowych zmian w zachowaniu, często odzwierciedlając adaptacje do ostrego stresu, a nie trwałe objawy depresji16. Cechy te podkreślają solidną trafność modelu CUMS w badaniach nad depresją. Jedną z najbardziej istotnych cech modelu CUMS, uznaną za wysoce wiarygodną w badaniach klasycznych, jest anhedonia - niezdolność do odczuwania przyjemności lub zainteresowania codziennymi czynnościami17,18. Zjawisko to jest powszechnie oceniane za pomocą testów preferencji sacharozy i wykazano, że wiele leków przeciwdepresyjnych odwraca zmniejszone spożycie sacharozy. Kilka innych wskaźników jest również powszechnie stosowanych w literaturze CUMS, w tym test otwartego pola (OFT), który ocenia dobrowolne zachowania motoryczne, tendencje eksploracyjne i napięcie, mierząc w ten sposób nasilenie depresji19. Inne testy, takie jak elevated plus maze (EPM) oceniają zachowania podobne do lęku, test labiryntu wodnego Morrisa (MWM) bada funkcjonowanie poznawcze 20, a FST ocenia podatność na negatywne emocje i rozpacz behawioralną20. Co więcej, większość stresorów, które wpływają na ludzi, ma charakter społeczny. Osoby z nieoptymalnymi relacjami społecznymi, charakteryzującymi się ograniczoną aktywnością społeczną, sieciami i wsparciem, są narażone na zwiększone ryzyko różnych chorób21,22. Ma to również znaczenie w przypadku gryzoni, które są zwierzętami społecznymi żyjącymi w grupach. Na przykład szczury trzymane w izolacji wykazują cechy tak zwanego syndromu izolacji, który wywołuje stres społeczny i przyspiesza wystąpienie depresji23.

Medycyna mongolska, znacząca gałąź medycyny chińskiej, zakłada, że początek choroby to złożona interakcja między czynnikami wewnętrznymi i zewnętrznymi. Te czynniki zewnętrzne, określane jako cztery warunki pomocnicze, obejmują zmiany klimatu, dietę, styl życia i nagłe zdarzenia, takie jak infekcje, zaskakujące incydenty i zaburzenia psychiczne. Proces chorobowy jest konceptualizowany jako ciągła interakcja między trzema elementami - określanymi jako trzy typy homorów - a Siedmioma Składnikami Ciała w połączeniu z czterema warunkami pomocniczymi24. Medycyna mongolska utrzymuje, że ciało ludzkie funkcjonuje jako zintegrowana jednostka, utrzymywana przez względną równowagę między trzema homorami. Zaburzenie tej równowagi jest uważane za prekursor choroby24. Biorąc pod uwagę kluczową rolę eksperymentów na zwierzętach w łączeniu medycyny tradycyjnej i nowoczesnej, kluczowe znaczenie ma opracowanie modeli zwierzęcych, które są istotne dla badań w dziedzinie medycyny mongolskiej. W związku z tym zastosowaliśmy metodologię 28-dniowej izolacji w połączeniu z CUMS, aby symulować te fizjologiczne i psychologiczne czynniki stresogenne. Wybraliśmy dziewięć konkretnych nieprzewidywalnych stresorów i staraliśmy się oprzeć tę metodę modelowania na podstawie teorii trzech homorów medycyny mongolskiej. Stworzenie solidnego modelu zwierzęcego ma zasadnicze znaczenie dla postępu w badaniach podstawowych w medycynie mongolskiej i znacząco przyczyni się do ich podstawowego rozwoju.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Protokoły eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komisję ds. Etyki Opieki nad Zwierzętami w Eksperymentach Uniwersytetu Medycznego w Mongolii Wewnętrznej (YKD202301172) i były zgodne z wytycznymi National Institutes of Health dotyczącymi opieki i etyki w badaniach na zwierzętach. Numer licencji naszego ośrodka dla zwierząt to NO.110324230102364187. Pozyskano dwudziestu czterech samców szczurów Sprague-Dawley (SD) w wieku 8 tygodni (200 g ± 20 g), które utrzymywano w kontrolowanym środowisku o temperaturze 22°C ± 2°C i wilgotności 55% ± 15%. Szczury karmiono standardową karmą utrzymującą dla gryzoni, zapewniając dostęp do czystej wody oraz ściółki z kolb kukurydzy. Przed rozpoczęciem eksperymentów szczury przez 1 tydzień poddawano 12-godzinnemu cyklowi światła i ciemności (12 h/12 h).

1. Ustanowienie szczurzego modelu CUMS

  1. Grupowanie
    1. Podziel 24 szczury losowo na 2 grupy: grupę kontrolną (CON), która nie będzie poddana izolacji ani stresowi, oraz grupę modelową (MOD). Każda grupa składa się z 12 szczurów.
    2. Umieść szczury w standardowych klatkach o wymiarach 55 cm x 40 cm x 20 cm, po 6 szczurów na klatkę. Zachowaj ten przydział do klatek przez cały okres aklimatyzacji, chyba że wskazano inaczej.
    3. Wypełnij każdą klatkę hodowlaną świeżą ściółką i wymieniaj ją dwa razy w tygodniu.
    4. Przeprowadź 1-tygodniowy okres aklimatyzacji. Zapewnij szczurom nieograniczony dostęp do pożywienia i wody, z wyjątkiem czasu stosowania stresorów CUMS. Utrzymuj stałe warunki środowiskowe z temperaturą 22°C ± 2°C, wilgotnością 55% ± 15% oraz 12-godzinnym cyklem światła i ciemności (12 h/12 h) od 08:00 do 20:00, chyba że zaznaczono inaczej.
    5. Przed rozpoczęciem eksperymentu codziennie manipuluj szczurami, aby przyzwyczaić je do badacza i zminimalizować dodatkowy stres w fazie eksperymentalnej.
  2. Izolacja z przewlekłym nieprzewidywalnym łagodnym stresem
    1. Umieść jednocześnie grupy MOD i CON w oddzielnych pomieszczeniach. Szczury z grupy MOD trzymaj indywidualnie, natomiast szczury z grupy CON razem. Wszystkie pozostałe warunki utrzymuj na stałym poziomie.
    2. Wdróż 28-dniowy schemat stresorów25. Aby zapobiec habituacji i zapewnić nieprzewidywalność stresorów, stosuj jeden losowy stresor dziennie, unikając użycia tego samego stresora w kolejne dni.
    3. W różne dni stosuj losowo jeden z dziewięciu następujących stresorów26,27: 24-godzinną deprywację wody, 24-godzinną deprywację pokarmu, mokrą ściółkę, nachylenie klatki, odwrócenie cyklu światło/ciemność, ekspozycję na zimno w 4 °C, ekspozycję na ciepło w 45 °C, 1-minutowe zaciskanie ogona lub 15-minutowe wstrząsanie przy 160 rpm. Szczegółowy plan przedstawiono w Tabeli 1.
    4. Podczas stosowania stresora ogranicz dostęp do pożywienia i wody dla grupy MOD do momentu ustąpienia stresu, z wyjątkiem odwrócenia cyklu światło/ciemność. W przypadku grupy CON nie było wymagane ograniczanie wody i diety.
  3. Metody stresowe
    1. Rozpocznij eksperyment od zastosowania bodźców depresyjnych w połączeniu z 28-dniową izolacją u wszystkich szczurów, z wyłączeniem grupy kontrolnej. Umieść te szczury w indywidualnych klatkach. Warunki dotyczące bodźców depresyjnych znajdują się w Tabeli 2.
    2. Aby przeprowadzić metodę zaciskania ogona, unieruchom ogon szczura z grupy MOD, zaciskając go standardowym spinaczem biurowym w odległości 1-2 cm od nasady ogona. Mierz czas zaciskania przez okres 1 min (n = 12).
    3. W metodzie deprywacji wody odizoluj szczura z grupy MOD od wody poprzez usunięcie butelki z wodą i rejestruj przez 24 h.
      UWAGA: Odnotowano czas rozpoczęcia deprywacji wody, aby można było dokładnie obliczyć czas jej zakończenia; obserwowano zachowanie szczurów w tym okresie, w tym aktywność, apetyt i stan psychiczny.
    4. W metodzie deprywacji pokarmu odizoluj szczura z grupy MOD od pożywienia i rejestruj przez 24 h.
      UWAGA: Zapisz czas rozpoczęcia deprywacji pokarmu, aby można było dokładnie obliczyć czas jej zakończenia; upewnij się, że szczury są odpowiednio nawodnione w tym okresie; obserwuj zachowanie szczurów w tym czasie, w tym aktywność, stan psychiczny itd.
    5. W przypadku stymulacji zimnem w 4 °C umieść szczura z grupy MOD w wiadrze z zimną wodą i rejestruj przez 5 min. Upewnij się, że temperatura wody pozostaje stała przez cały czas trwania testu. Po zakończeniu eksperymentu osusz szczura suszarką i zwróć go do oryginalnej klatki.
      UWAGA: Utrzymuj temperaturę zimnej wody na poziomie 4 °C za pomocą termometru i kostek lodu w celu regulacji temperatury wody w przypadku jej wzrostu. Wodę należy zmieniać regularnie, aby zapewnić jej czystość i stałą temperaturę. Podczas pływania wszystkie kończyny i tułów szczurów powinny być zanurzone w zimnej wodzie, z wyjątkiem głowy. Głębokość wody musi być większa niż długość ciała szczura, aby zapobiec wyskakiwaniu szczura z wody w wyniku kontaktu z dnem wiadra.
    6. Aby zastosować stres cieplny w 45 °C, umieść szczura z grupy MOD w inkubatorze i rejestruj przez 5 min, upewniając się, że temperatura pozostaje stabilna przez cały test.
    7. W przypadku odwrócenia cyklu światło-ciemność okryj klatkę czarnym materiałem na 1 h, aby zasymulować dzienną ciemność. Następnie oświetl klatkę przez 12 h w nocy, aby naśladować światło dzienne. Rejestruj zachowanie szczura, spożycie pokarmu i wody oraz wzorce snu przez 24 h.
    8. W eksperymencie z mokrą ściółką wlej 200 mL wody do klatki zawierającej 100 g ściółki. Umieść szczura z grupy MOD w mokrej klatce i rejestruj zachowanie szczurów pod wpływem stresu wywołanego mokrą ściółką, w tym aktywność, apetyt, spożycie wody itd. Obserwuj, czy występują jakiekolwiek nieprawidłowe zachowania lub reakcje dyskomfortu, takie jak stan skóry i sierści szczurów, które mogą być spowodowane mokrą ściółką, i rejestruj je na bieżąco do późniejszej analizy przez 24 h. Po teście osusz szczura suszarką i zwróć go do klatki ze świeżymi wiórami drewnianymi.
    9. W metodzie nachylenia klatki umieść szczura z grupy MOD w klatce nachylonej pod kątem 45° względem ściany i rejestruj przez 24 h. Użyj konstrukcji ramy klatki, aby dostosować kąt i unieruchomić klatkę.
      UWAGA: Oblicz czas od początku do końca i obserwuj zachowanie szczurów w okresie nachylenia klatki, w tym aktywność, apetyt i stan psychiczny; upewnij się, że kąt nachylenia klatki jest ustawiony prawidłowo i pozostaje stabilny, aby zapewnić dokładność i powtarzalność eksperymentu.
    10. W przypadku szybkiego wstrząsania umieść szczura z grupy MOD w mechanicznym wstrząsaczu ustawionym na 160 rpm i rejestruj przez 15 min. Następnie stosuje się metody testów behawioralnych w celu oceny prawidłowego ustanowienia modelu.
    11. Po zastosowaniu stresorów przenieś klatki grupy MOD z pomieszczenia CUMS z powrotem do pomieszczenia hodowlanego. Podczas 4-tygodniowego okresu ekspozycji na stres utrzymuj grupę CON w ich domowych klatkach znajdujących się w pomieszczeniu hodowlanym.
  4. Środki ostrożności podczas eksperymentów
    1. Przenieś klatki grupy MOD z powrotem do ogólnego pomieszczenia hodowlanego po zastosowaniu stresora w pomieszczeniu CUMS.
    2. Monitorowanie zwierząt podczas modelowania CUMS
      1. Podczas zaciskania ogona zwierzę może szamotać się z powodu wywołanej stymulacji. Przez cały ten czas stale monitoruj zacisk. Jeśli się ześlizgnie, zatrzymaj stoper, ponownie nałóż zacisk, a następnie wznowij odliczanie do 1 min.
      2. Nie stosuj jednocześnie deprywacji wody i stresora w postaci mokrej ściółki.
        UWAGA: Unikanie jednoczesnego stosowania mokrej ściółki i deprywacji wody pomaga zachować integralność eksperymentu, redukuje zmienne zakłócające i sprzyja dobrostanowi zwierząt.
      3. Temperatura ciała zwierzęcia i temperatura otoczenia mogą podnieść temperaturę wody podczas pływania w zimnej wodzie. Dlatego należy korygować ją poprzez dodawanie lodowatej wody lub kostek lodu, aby utrzymać stałą temperaturę wody.
      4. Obserwuj szczury w odstępach 30-minutowych podczas stosowania stresorów, z wyjątkiem odwrócenia cyklu dobowego. Zwróć szczególną uwagę na oznaki niezwykłego stresu, takie jak drżenie, letarg lub brak ruchu. Jeśli zaobserwowane zostaną takie objawy – w szczególności potencjalna hipotermia podczas pływania w zimnej wodzie (4 °C) i przy mokrej ściółce – natychmiast usuń szczura ze stresora.
        UWAGA: Usuń zwierzęta eksperymentalne z badania, gdy wystąpią u nich problemy zdrowotne, takie jak infekcja, ciężki uraz, zachowania agresywne, nieprawidłowa ruchliwość itd. Warunki usuwania zwierząt z badania opierają się zazwyczaj na ochronie ich zdrowia i bezpieczeństwa przy jednoczesnym zapewnieniu integralności wyników eksperymentalnych.
      5. Przeprowadzaj codzienne inspekcje w poszukiwaniu ran lub innych nieprawidłowości fizycznych bądź behawioralnych u każdego szczura. W przypadku zaobserwowania jakichkolwiek nieprawidłowości skonsultuj się z weterynarzem laboratoryjnym, aby ustalić, czy szczur powinien zostać wykluczony z eksperymentu.
      6. Waż każdego szczura co 3 dni. Jeśli zwierzę straci więcej niż 20% swojej podstawowej masy ciała sprzed karmienia, musi zostać wykluczone z eksperymentu.

2. Testy behawioralne

  1. W pierwszej kolejności wszystkim szczurom, z wyjątkiem grupy kontrolnej, należy poddać działaniu bodźców depresyjnych w połączeniu z izolacją przez 28 dni. Szczury należy umieścić w indywidualnych klatkach. Szczegółowe warunki stosowania bodźców depresyjnych przedstawiono w Tabeli 2.
  2. Do testu otwartego pola należy wykorzystać czarną skrzynkę podzieloną na 25 kwadratowych sekcji o równej powierzchni. W skrzynce należy zainstalować system wideotrakingu do analizy ruchu. Szczura należy umieścić w centralnym kwadracie i monitorować jego aktywność horyzontalną oraz wertykalną przez 5 min.
    UWAGA: Wymiary skrzynki wynoszą 500 mm x 500 mm x 300 mm. Dane dotyczące aktywności zostaną zebrane za pomocą systemu wideotrakingu w celu oceny zachowań lękowych u gryzoni po wystawieniu ich na nowe środowisko.
  3. Następnie należy zliczyć liczbę kwadratów pokonanych przez szczura (licząc wszystkie łapy), aby określić poziom aktywności horyzontalnej. Liczbę przypadków stania na tylnych łapach oraz pielęgnacji (grooming) należy przyjąć jako wskaźniki aktywności wertykalnej. Po każdym teście skrzynkę należy zdezynfekować 75% alkoholem, aby usunąć zapachy pozostałe po poprzednim zwierzęciu przed kolejnymi testami.
  4. Kolejno, anhedonię ocenia się za pomocą testu preferencji sakarozy. Na pokrywie klatki należy umieścić dwie butelki: butelkę A zawierającą czystą wodę oraz butelkę B zawierającą 1% roztwór sakarozy. Szczurowi należy zapewnić dostęp ad libitum do obu roztworów. Butelki należy zważyć przed i po spożyciu, aby obliczyć wskaźnik preferencji sakarozy w czasie 60 min w dniach 0, 7, 14, 21 i 28. Wzór jest następujący:
    Spożycie sakarozy = Równanie pokazujące stosunek spożycia wody z sakarozą; spożycie sakarozy B:A w stosunku do całkowitego spożycia; schemat wzoru. × 100%
  5. W celu pomiaru pamięci przestrzennej i zdolności uczenia się należy zastosować test wodnego labiryntu Morrisa. Basen należy podzielić na cztery kwadranty, numerując je od jeden do cztery. W trzecim kwadrancie należy umieścić zatopioną platformę spoczynkową 1 cm poniżej powierzchni wody.
  6. Do basenu należy dodać mleko w celu zwiększenia mętności wody, a temperaturę wody należy utrzymywać na poziomie około 23 °C przez cały czas trwania procedury eksperymentalnej.
  7. Każdego szczura należy umieszczać w różnych kwadrantach labiryntu, dając im 120 s na zlokalizowanie ukrytej platformy. Szczury muszą polegać na pamięci przestrzennej i zdolnościach uczenia się, aby zapamiętać lokalizację platformy. Po nauczeniu się położenia platformy będą mogły dopłynąć do niej bezpośrednio. Czas latencji należy zarejestrować za pomocą systemu wideotrakingu labiryntu wodnego Morrisa.
  8. Szczura należy ustawić w stałym punkcie basenu. Jeśli badane zwierzę nie zlokalizuje ukrytej platformy w ciągu 120 s, czas latencji zapisuje się jako 120 s.
  9. Na koniec należy usunąć ukrytą platformę, ponownie umieścić szczura w wodzie i zarejestrować liczbę przekroczeń strefy w okresie 120 s.

3. Analiza statystyczna

  1. W celu oceny istotnych różnic w parametrach biochemicznych należy zastosować jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA), a następnie test post hoc Duncana. Dane należy przedstawić jako średnią ± błąd standardowy (SE), przyjmując, że wartość p mniejsza niż 0,05 jest statystycznie istotna.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Wyniki testów behawioralnych w modelu depresji szczurów indukowanej przez CUMS
Aby potwierdzić skuteczność procedury CUMS w indukowaniu zachowań depresyjnych, przeprowadzono kontrolę manipulacyjną. Samce szczurów Sprague-Dawley (SD) zostały losowo przydzielone do grupy MOD lub CON na okres 4 tygodni, zgodnie z opisem w kroku 1.2.3. Następnie szczury uśmiercono, a ich hipokampy całkowicie wypreparowano w celu oceny poziomu 5-HT, neuroprzekaźnika silnie powiązanego z patofizjologią depresji

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Depresja to zaburzenie psychiczne charakteryzujące się objawami takimi jak obniżony nastrój, brak przyjemności i zmniejszona energia30. W dziedzinie badań nad depresją stworzenie wiarygodnego modelu zwierzęcego ma kluczowe znaczenie dla postępu w interwencjach terapeutycznych. Wśród różnych modeli zwierzęcych model CUMS jest szczególnie godny uwagi ze względu na jego wysoką wiarygodność, trafność i zgodność z charakterystyką ludzkiej depresji31. Doskonale nadaje się do naśl...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Podziękowania

Jesteśmy wdzięczni za dostarczone oprzyrządowanie i laboratorium, aby wyrazić naszą wdzięczność mongolskiemu wydziałowi medycznemu Uniwersytetu Medycznego Mongolii Wewnętrznej w Chinach.To badanie było wspierane przez dostarczenie niezbędnego oprzyrządowania i zaplecza laboratoryjnego. Badanie to otrzymało wsparcie finansowe od Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (grant nr 81760762) oraz projektu Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Mongolii Wewnętrznej (grant nr 1). YKD2022MS074) oraz Projekt Naukowo-Badawczy Szkolnictwa Wyższego w Mongolii Wewnętrznej w Chinach (grant nr NJZY22661) oraz projekt Funduszu Otwartego Kluczowego Laboratorium Medycyny Chińskiej i Mongolskiej w Regionie Autonomicznym Mongolii Wewnętrznej w Chinach (grant nr 1). MYX2023-K07).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
1,5 ml probówka wirówkowaserwis Biotechnology Co., LtdEP-150-M
1000 µ L Serwis pipetBiotechnology Co., LtdIC021198160223
10 & mikro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdIC012395160823
10 & mikro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-10
1250 µ L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-1250
2 mL serwis probówek wirówkowychBiotechnology Co., LtdEP-200-M
200 µ L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdTP-200
200 & micro; L serwis końcówek do pipetBiotechnology Co., LtdIC021029160323
300 & mikro; L Wielokanałowa usługa pipetBiotechnology Co., LtdIC091006161022
50 & mikro; L Serwis pipetBiotechnology Co., LtdDS35110
Automatyczna myjka do płytrayto Life Sciences Co., LtdRT-3100
Stołowa wirówka do zamrażania o dużej prędkościdalong construction Co., LtdD3024R
Mettler Toledo International Trade (Shanghai) Co., LtdME203E/02
Elektrotermiczne suszenie strumieniowo-ścierne piekarnikLabotery Experimental Instrument Equipment Co., LtdGEL-70
Detektor etykiet enzymówBioTeK Co., LtdEpoch
High Speed Tissue Grinderservice Biotechnology Co., LtdKZ-figure-materials-1-F
Zamrażarka poziomaMellow Group Co., LtdBCD-318AT
Laboratoryjna maszyna do wody ultraczystejJinan Aiken Environmental Protection Technology Co., Ltd   AK-RO-C2
System analizy szlaków wideo labiryntu wodnego Morris Tai Meng Tech Co., LtdWMT-200
Szczur 5-HT ELISA KitLian Ke bio Co., Ltd, Chiny96T / 48T
SPF klasa Sprague Dawley (SD) szczurySPF (Pekin) Biotechnologia Co SCXK(JING)2019-0010
Szczury Sprague DawleyBeijing Biotechnology Co., Ltd, Chiny  SCXK (JING) 2019-0010
Pionowa witryna chłodniczaXingx Group Co., LtdLSC-316C
Tai Meng Tech Co., LtdZH-ZFT
Servicebio technology Co., LtdMV-100
Waga elektroniczna System śledzenia wideo Mieszalnik wirowy

Bibliografia

  1. Alqurashi, G. K., et al. The impact of chronic unpredictable mild stress-induced depression on spatial, recognition and reference memory tasks in mice: Behavioral and histological study. Behav Sci. 12 (6), 166(2022).
  2. Yu, S., Wang, L., Jing, X., Wang, Y., An, C. Features of gut microbiota and short-chain fatty acids in patients with first-episode depression and their relationship with the clinical symptoms. Front Psychol. 14, 1088268(2023).
  3. Duda, P., Hajka, D., Wójcicka, O., Rakus, D., Gizak, A. Gsk3β: A master player in depressive disorder pathogenesis and treatment responsiveness. Cells. 9 (3), 727(2020).
  4. Correia, A. S., Vale, N. Tryptophan metabolism in depression: A narrative review with a focus on serotonin and kynurenine pathways. Int J Mol Sci. 23 (15), 8493(2022).
  5. Hao, Y., Ge, H., Sun, M., Gao, Y. Selecting an appropriate animal model of depression. Int J Mol Sci. 20 (19), 4827(2019).
  6. Willner, P., Towell, A., Sampson, D., Sophokleous, S., Muscat, R. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress, and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology (Berl). 93 (3), 358-364 (1987).
  7. Nakase, S., Kitayama, I., Soya, H., Hamanaka, K., Nomura, J. Increased expression of magnocellular arginine vasopressin mrna in paraventricular nucleus of stress-induced depression-model rats. Life Sci. 63 (1), 23-31 (1998).
  8. Wu, X., et al. Involvement of kynurenine pathway between inflammation and glutamate in the underlying etiopathology of cums-induced depression mouse model. BMC Neurosci. 23 (1), 62(2022).
  9. Zhang, C., et al. Minocycline ameliorates depressive behaviors and neuro-immune dysfunction induced by chronic unpredictable mild stress in the rat. Behav Brain Res. 356, 348-357 (2019).
  10. Ma, J., Wang, R., Chen, Y., Wang, Z., Dong, Y. 5-HT attenuates chronic stress-induced cognitive impairment in mice through intestinal flora disruption. J Neuroinflammation. 20 (1), 23(2023).
  11. Nollet, M. Models of depression: Unpredictable chronic mild stress in mice. Curr Protoc. 1 (8), e208(2021).
  12. Becker, M., Pinhasov, A., Ornoy, A. Animal models of depression: What can they teach us about the human disease. Diagnostics (Basel). 11 (1), 123(2021).
  13. Petkovic, A., Chaudhury, D. Encore: Behavioural animal models of stress, depression and mood disorders. Front Behav Neurosci. 16, 931964(2022).
  14. Okine, T., Shepard, R., Lemanski, E., Coutellier, L. Sex differences in the sustained effects of ketamine on resilience to chronic stress. Front Behav Neurosci. 14, 581360(2020).
  15. Fitzgerald, P. J., et al. Sex- and stress-dependent effects of a single injection of ketamine on open field and forced swim behavior. Stress. 24 (6), 857-865 (2021).
  16. Doron, R., Burstein, O. The unpredictable chronic mild stress protocol for inducing anhedonia in mice. J Vis Exp. (140), e58184(2018).
  17. De Vry, J., Schreiber, R. The chronic mild stress depression model: Future developments from a drug discovery perspective. Psychopharmacology (Berl). 134 (4), discussion 371-347 349-350 (1997).
  18. Tong, J., et al. Antidepressant effect of helicid in chronic unpredictable mild stress model in rats. Int Immunopharmacol. 67, 13-21 (2019).
  19. Liu, H., et al. Tnf signaling pathway-mediated microglial activation in the pfc underlies acute paradoxical sleep deprivation-induced anxiety-like behaviors in mice. Brain Behav Immun. 100, 254-266 (2022).
  20. He, L. W., et al. Optimization of food deprivation and sucrose preference test in sd rat model undergoing chronic unpredictable mild stress. Animal Model Exp Med. 3 (1), 69-78 (2020).
  21. Ma, W., Wu, B., Gao, X., Zhong, R. Association between frailty and cognitive function in older chinese people: A moderated mediation of social relationships and depressive symptoms. J Affect Disord. 316, 223-232 (2022).
  22. Geng, C., et al. Systematic impacts of chronic unpredictable mild stress on metabolomics in rats. Sci Rep. 10 (1), 700(2020).
  23. Holmes, T. H., Rahe, R. H. The social readjustment rating scale. J Psychosom Res. 11 (2), 213-218 (1967).
  24. Zhang, M., et al. Shuxie-1 decoction alleviated cums -induced liver injury via il-6/jak2/stat3 signaling. Front Pharmacol. 13, 848355(2022).
  25. Antoniuk, S., Bijata, M., Ponimaskin, E., Wlodarczyk, J. Chronic unpredictable mild stress for modeling depression in rodents: Meta-analysis of model reliability. Neurosci Biobehav Rev. 99, 101-116 (2019).
  26. Hu, C., et al. Re-evaluation of the interrelationships among the behavioral tests in rats exposed to chronic unpredictable mild stress. PLoS One. 12 (9), e0185129(2017).
  27. Li, Y., et al. Increased hippocampal fissure width is a sensitive indicator of rat hippocampal atrophy. Brain Res Bull. 137, 91-97 (2018).
  28. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of the Mongolian medicine Zadi-5 on monoamine neurotransmitters in the brain of rats with chronic stress depression model. Info Traditional Chinese Med. 34 (06), 5-8 (2017).
  29. Zhou, Y., Cong, Y., Liu, H. Folic acid ameliorates depression-like behaviour in a rat model of chronic unpredictable mild stress. BMC Neurosci. 21 (1), 1(2020).
  30. Zhuang, Y., Zeng, R., Liu, X., Yang, L., Chan, Z. Neoagaro-oligosaccharides ameliorate chronic restraint stress-induced depression by increasing 5-ht and bdnf in the brain and remodeling the gut microbiota of mice. Mar Drugs. 20 (11), 725(2022).
  31. Socała, K., et al. The role of microbiota-gut-brain axis in neuropsychiatric and neurological disorders. Pharmacol Res. 172, 105840(2021).
  32. Song, J., Kim, Y. K. Animal models for the study of depressive disorder. CNS Neurosci Ther. 27 (6), 633-642 (2021).
  33. Abelaira, H. M., Réus, G. Z., Quevedo, J. Animal models as tools to study the pathophysiology of depression. Braz J Psychiatry. 35 Suppl 2, S112-S120 (2013).
  34. Strekalova, T., et al. Chronic mild stress paradigm as a rat model of depression: Facts, artifacts, and future perspectives. Psychopharmacology (Berl). 239 (3), 663-693 (2022).
  35. Markov, D. D. Sucrose preference test as a measure of anhedonic behavior in a chronic unpredictable mild stress model of depression: Outstanding issues. Brain Sci. 12 (10), 1287(2022).
  36. Czéh, B., Fuchs, E., Wiborg, O., Simon, M. Animal models of major depression and their clinical implications. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 64, 293-310 (2016).
  37. Gururajan, A., Reif, A., Cryan, J. F., Slattery, D. A. The future of rodent models in depression research. Nat Rev Neurosci. 20 (11), 686-701 (2019).
  38. Markov, D. D., Novosadova, E. V. Chronic unpredictable mild stress model of depression: Possible sources of poor reproducibility and latent variables. Biology (Basel). 11 (11), 1621(2022).
  39. Willner, P. The chronic mild stress (cms) model of depression: History, evaluation and usage. Neurobiol Stress. 6, 78-93 (2017).
  40. Lages, Y. V. M., Rossi, A. D., Krahe, T. E., Landeira-Fernandez, J. Effect of chronic unpredictable mild stress on the expression profile of serotonin receptors in rats and mice: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 124, 78-88 (2021).
  41. Willner, P., et al. Validation of chronic mild stress in the wistar-kyoto rat as an animal model of treatment-resistant depression. Behavioural Pharmacology. 30 (2 and 3), 239-250 (2019).
  42. Slattery, D. A., Cryan, J. F. Modelling depression in animals: At the interface of reward and stress pathways. Psychopharmacology (Berl). 234 (9-10), 1451-1465 (2017).
  43. Sterley, T. L., et al. Social transmission and buffering of synaptic changes after stress. Nat Neurosci. 21 (3), 393-403 (2018).
  44. Brechbühl, J., et al. Mouse alarm pheromone shares structural similarity with predator scents. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (12), 4762-4767 (2013).
  45. Beck, R. C., Self, J. L., Carter, D. J. Sucrose preference thresholds for satiated and water-deprived rats. Psychol Rep. 16, 901-905 (1965).
  46. Hawkins, P., Golledge, H. D. R. The 9 to 5 rodent - time for change? Scientific and animal welfare implications of circadian and light effects on laboratory mice and rats. J Neurosci Methods. 300, 20-25 (2018).
  47. Daut, R. A., Ravenel, J. R., Watkins, L. R., Maier, S. F., Fonken, L. K. The behavioral and neurochemical effects of an inescapable stressor are time of day dependent. Stress. 23 (4), 405-416 (2020).
  48. Hu, R. L. B. G., et al. Experimental research on nutmeg wuwei pills against of depression model rats behavior and hippocampus monoamine neurotransmitters. Chinese J Exp Traditional Medical Formulae. 21 (11), 146-149 (2015).
  49. Hu, R. L. B. G., et al. Effects of Rou kou Wuwei Pill on the learning and memory abilities and the expression of BDNF and TrkB in hippocampus of depression rats. Chinese J Traditional Chines Med Pro. 32 (8), 3797-3800 (2017).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Model depresjitesty behawioralne u szczur wtest preferencji do sacharozytest otwartego polalabirynt wodny Morrisaindukcja anhedoniibadania nad medycyn tradycyjnzwierz cy model depresji
Przewlekły nieprzewidywalny łagodny stres u szczurów na podstawie medycyny mongolskiej
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.