Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zmodyfikowany model bólu zapalnego do badania działania przeciwbólowego u myszy

3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/66701

⸱

15 listopada 2024

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj prezentujemy zmodyfikowany model bólu zapalnego z wstrzyknięciem karagenu zarówno tylnej łapy, jak i w celu oceny efektu przeciwbólowego.

Streszczenie

Test gorącej płyty jest powszechnie stosowany do oceny wpływu przeciwbólowego na ból zapalny u myszy. Powszechnie stosowany model bólu zapalnego był wywoływany przez doplantacyjne wstrzyknięcie karagenu w jedną tylną łapę. Jednak wyniki naszego laboratorium wykazały, że myszy, którym wstrzyknięto karagen w jedną tylną łapę, podniosły łapy, aby uniknąć nocycepcji termicznej podczas testu gorącej płyty. Ze względu na tę reakcję, poprzednia metoda iniekcji nie może dokładnie odzwierciedlić progu bólu termicznego. Dlatego zbadaliśmy nową metodę, aby uniknąć tego problemu. W niniejszym badaniu zmodyfikowaliśmy poprzednią metodę, wstrzykując karagen w obie tylne łapy, aby ustalić model bólu zapalnego. Wyniki wykazały, że wstrzyknięcie karagenu w obie tylną łapę było wrażliwe i stanowiło lepszą metodę wywoływania bólu zapalnego podczas korzystania z testu gorącej płyty niż wstrzyknięcie pojedynczej tylnej łapy. Na podstawie tych ustaleń zaprojektowaliśmy dalsze eksperymenty, w których myszy z wstrzyknięciem karagenu zarówno do tylnej łapy, jak i do pojedynczej tylnej łapy były leczone dożołądkowo celekoksybem (30 mg / kg). Wyniki testu z gorącą płytą wykazały, że celekoksyb zwiększał próg bólu termicznego u myszy po wstrzyknięciu karagenu do obu tylnych łap, ale nie u myszy z wstrzyknięciem karagenu do pojedynczej tylnej łapy. Podsumowując, opracowaliśmy lepszą metodę indukowania modelu bólu zapalnego w celu oceny działania przeciwbólowego.

Wprowadzenie

Ból jest problemem zdrowia publicznego na całym świecie. Jest wywoływany przez szkodliwą stymulację termiczną, mechaniczną lub chemiczną. Trudno jest przeprowadzić badania bólu u ludzi ze względów etycznych. Dlatego wykorzystanie modeli bólu zwierzęcego jest kluczowym podejściem do zrozumienia mechanizmów bólu i badań nad terapiami1. Test gorącej płyty jest szeroko stosowany do oceny nocycepcji termicznej i hiperalgezji2. Obecnie model bólu zapalnego stosowany w teście gorącej płyty jest indukowany za pomocą doplantacyjnego wstrzyknięcia karagenu w jedną tylną łapę. Na przykład, aby zbadać antynocyceptywne działanie mikr....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Protokół eksperymentalny został zatwierdzony przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt na Uniwersytecie Yantai (No. YTDX20220425). Procedury były zgodne z wytycznymi National Institutes of Health dotyczącymi wykorzystywania zwierząt laboratoryjnych.

1. Zwierzęta

  1. Do eksperymentów użyj samic myszy ICR o wadze 20-25 g.
  2. Pozwól zwierzętom zaaklimatyzować się w środowisku pomieszczenia doświadczalnego przez 3 dni przed rozpoczęciem doświadczeń.
  3. Utrzymuj pomieszczenie eksperymentalne z 12-godzinnym cyklem światła i ciemności i zapewnij myszom swobodny dostęp do wody i karmy.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Próg bólu w modelach bólu zapalnego
Próg bólu w modelu bólu zapalnego po jednorazowym wstrzyknięciu karageniny do jednej tylnej łapy wyniósł 32,23 ± 11,11 s, podczas gdy próg bólu w grupie kontrolnej wyniósł 27,73 ± 7,08 s. W porównaniu z grupą kontrolną, próg bólu w modelu z wstrzyknięciem do jednej tylnej łapy nie wykazał istotnego obniżenia (p > 0,05, Rycina 1A). Próg bólu w modelu bólu zapalnego po wstrzyknięciu karageniny do obu tylnych łap wyniósł 21,84 ± 5,63 s.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Ból jest reakcją ochronną wywołaną uszkodzeniem lub urazem tkanki. Ma to jednak również negatywny wpływ na jakość życia10. W związku z tym opracowywanie skutecznych leków przeciwbólowych i badanie mechanizmów bólu pozostają aktywnymi obszarami badań. Metody oceny bólu odgrywają kluczową rolę w opracowywaniu leków przeciwbólowych. Wstrzyknięcie karagenu do pojedynczej tylnej łapy jest klasyczną metodą testu na gorącej płycie. Prezentowany tutaj zmodyfikowany model indukowany przez wstrzyknięcie kar.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych potencjalnie sprzecznych interesów.

Podziękowania

Dziękujemy dr Lesley McCollum z Liwen Bianji (Edanz) (www.liwenbianji.cn), za zredagowanie angielskiego tekstu szkicu tego rękopisu.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Waga elektroniczna AL204Yuheng Battery Co., Ltd YH-400A
KarboksymetylocelulozaTianjin Chemical Co., Ltd 
CarrageenanSigma, MO, Stany Zjednoczone29H0715
CelecoxibPfizer Inc.
Płyta grzewcza UGO Ltd. Co., WłochyPB-200 
ICR samice myszyJinan Pengyue  Co., Ltd.
Sól fizjologiczna KelunPharmaceutical Co., Ltd 
202103268142838SCXK20220007H51021157

Bibliografia

  1. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).
  2. Menéndez, L., Lastra, A., Hidalgo, A., Baamonde, A. Unilateral hot plate test: a simple and sensitive method ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Test gorącej płytywstrzyknięcie karagenanupróg bólu termicznegowstrzyknięcie do obu tylnych łapwstrzyknięcie do pojedynczej tylnej łapyleczenie celekoksybempomiar progu bólumyszy ICR