Ten nowatorski protokół pociąga za sobą ilościowe określanie progresji zwapnienia układu sercowo-naczyniowego na podstawie obrazów seryjnej mikropozytonowej tomografii emisyjnej (PET)/mikrotomografii komputerowej (CT) u małych zwierząt badawczych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Ten nowatorski protokół pociąga za sobą ilościowe określanie progresji zwapnienia układu sercowo-naczyniowego na podstawie obrazów seryjnej mikropozytonowej tomografii emisyjnej (PET)/mikrotomografii komputerowej (CT) u małych zwierząt badawczych.
Obrazowanie mikropozytonowej tomografii emisyjnej (PET) i mikrotomografii komputerowej (CT) są potężnymi, idealnymi narzędziami badawczymi do śledzenia postępu zwapnienia układu sercowo-naczyniowego. Ze względu na ich nieinwazyjny charakter, małe zwierzęta badawcze mogą być obrazowane w wielu punktach czasowych. Wyzwanie polega na dokładnym określeniu ilościowym zwapnienia układu sercowo-naczyniowego. W tym miejscu przedstawiamy protokół, wykorzystujący obrazy z późniejszych etapów choroby jako szablon, aby dokładnie określić ilościowo postęp zwapnienia układu sercowo-naczyniowego w badaniach podłużnych. Protokół obejmuje 1) wyrównanie obszaru klatki piersiowej na wielu obrazach pochodzących od tego samego zwierzęcia podczas badania podłużnego jako pierwszy krok, 2) zdefiniowanie obszaru zainteresowania (ROI) znajdującego się w sercu i aorcie w miejscu większych złogów wapnia, które stają się widoczne na późniejszych obrazach, oraz 3) jednoczesną segmentację i kwantyfikację złogów wapnia na wszystkich obrazach uzyskanych podczas badania podłużnego. Ta uproszczona metoda zwiększa dokładność analizy obrazu w śledzeniu postępu zwapnienia układu sercowo-naczyniowego, poprawiając precyzję definiowania ROI i zmniejszając zmienność związaną z wcześniejszymi technikami, które analizują poszczególne skany niezależnie.
Choroby układu sercowo-naczyniowego są główną globalną przyczyną zachorowalności i śmiertelności, co wymaga rygorystycznych badań w celu odkrycia ich mechanizmów oraz opracowania skutecznych strategii zapobiegawczych i terapeutycznych. Zwapnienia tętnic wieńcowych (CAC) są powszechnie uznawane przez ekspertów w tej dziedzinie za czynnik prognostyczny chorób układu sercowo-naczyniowego, znacznie zwiększający ryzyko zgonu z przyczyn sercowo-naczyniowych1,2,3,4,5. Mikrowapnienia są uważane za najwcześniejsze s....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Reprezentatywne obrazy przedstawiają samicę myszy z niedoborem apolipoproteiny E (Apoe-/-). Protokoły doświadczalne zostały sprawdzone i zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet Opieki i Wykorzystania Zwierząt Uniwersytetu Kalifornijskiego w Los Angeles.
1. Skanowanie zwierząt
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Metody analizy
W tej sekcji zilustrowano skuteczne zastosowanie metody poprzez przedstawienie reprezentatywnych wyników. Zaprezentowano tutaj połączony obraz microPET/microCT pojedynczej myszy skanowanej w 15. i 18. miesiącu życia, po poddaniu jej diecie zachodniej (21% tłuszczu, 0,2% cholesterolu) od 12. do 14. miesiąca życia. Zgodnie z sekcjami 2-8 protokołu dotyczącymi ilościowego oznaczania zwapnień, czterej niezależni badacze oddzielnie zmierzyli objętościową zawartość wapnia oraz aktywność
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Ten nowatorski protokół jest ulepszonym podejściem do ilościowego oznaczania zwapnień sercowo-naczyniowych. Ze względu na nieinwazyjny charakter obrazowania, podłużne obrazy mikrotomografii komputerowej mogą być uzyskiwane w celu śledzenia postępu zwapnienia układu sercowo-naczyniowego u małych zwierząt. Chociaż same obrazy mikrotomografii komputerowej mogą pokazać postęp zawartości wapnia, obrazy microPET, jeśli są dostępne, mogą dostarczyć dodatkowych poziomów informacji, zwłaszcza ulepszonego wykrywania małych osadów .......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.
Dziękujemy wszystkim członkom UCLA Crump Preclinical Imaging Technology Center za pomoc w pozyskiwaniu i przetwarzaniu danych, a także za utrzymanie sprzętu i infrastruktury. Dziękujemy Jeffreyowi Collinsowi za pomoc w operacji cyklotronu i syntezie 18F-NaF. Dziękujemy UCLA Statistical Consulting Group za pomoc w analizie statystycznej. Praca ta jest wspierana przez NIH Cancer Center Support Grant (2 P30 CA016042-44 do MT) oraz National Institutes of Health, Heart, Lung, and Blood Institute (HL137647 i HL151391 do YT i LLD). Skaner GNEXT PET/CT został sfinansowany przez NIH S10 Shared Instrumentation for Animal Research Grant (1S10OD026917-01A1 dla Ariona C....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,5 cc Sterylne strzykawki insulinowe | Exel International | #26028 | Używany do wstrzykiwań dożylnych 18F-NaF PET Tracer |
| 18F-NaF PET Tracer | CNSI Cyclotron | ||
| Biorender | Biorender | Używany do rysunku 1 | |
| Samica myszy Apoe-/- | Jackson Laboratories | #002052 | B6.129P2-Apoe tm1Unc/J |
| GNEXT PET/CT | Sofie Biosciences, Dulles, Virginia | ||
| Isoflurane | Piramal Critical Care | Stosowany jako znieczulenie do obrazowania myszy | |
| ORS Dragonfly | Comet Technologies Canada Inc. | ||
| SPSS Statistics | IBM | ||
| Western dieta dla myszy | Envigo | #TD88139 | 21% tłuszczu, 0,2% cholesterolu |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.