Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Ocena mechanizmu działania tradycyjnego syropu ziołowego w leczeniu niedokrwistości przy użyciu metabolomiki wątroby

667 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/67225

⸱

30 sierpnia 2024

 ,  ,  , 
1School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Chinese Medicine, 2School of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, 3Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.

W tym artykule

Podsumowanie

To badanie przede wszystkim wprowadza zastosowanie metabolomiki wątroby w badaniu skuteczności syropu Shi-Liu-Bu-Xue w leczeniu anemii.

Streszczenie

Jako dobrze znany lek ujgurski, syrop Shi-Liu-Bu-Xue (SLBXS) jest powszechnie stosowany w leczeniu anemii w Chinach od ponad 20 lat. Jednak mechanizmy leżące u podstaw jego skuteczności w leczeniu niedokrwistości pozostają niejasne. W tym badaniu metabolomika wątroby została wykorzystana przede wszystkim do określenia potencjalnych mechanizmów regulacyjnych SLBXS w leczeniu niedokrwistości. Profilowanie metabolomiczne wątroby przeprowadzono w celu scharakteryzowania mechanizmu działania SLBXS w mysim modelu niedokrwistości wywołanym acetylofenylohydrazyną. Wykazano, że SLBXS zmniejsza indeks wątroby, liczbę białych krwinek i liczbę płytek krwi, jednocześnie zwiększając liczbę czerwonych krwinek, hemoglobinę i poziom hematokrytu. Główne cele zostały wybrane do weryfikacji za pomocą Western blot. SLBXS wykazał znaczący wpływ terapeutyczny na niedokrwistość przede wszystkim poprzez regulację metabolizmu galaktozy i szlaku sygnałowego HIF-1, na co wskazuje regulacja w dół białek HIF-1α, NOS3, VEGFA i GLA w tkankach wątroby myszy z niedokrwistością. Badanie to wyjaśnia potencjalne mechanizmy regulacyjne metabolizmu wątrobowego przez podawanie SLBXS w leczeniu niedokrwistości.

Wprowadzenie

Niedokrwistość jest palącym i powszechnym globalnym problemem zdrowotnym, dotykającym 25% światowej populacji i ludzi w każdym wieku, szczególnie nastolatków i kobiet w ciąży1,2,3. Wiąże się to ze zwiększonym ryzykiem przedwczesnego porodu i śmiertelności matek oraz może prowadzić do zaburzeń rozwoju fizycznego i upośledzenia wydolności sercowo-naczyniowej4. Ten stan może również negatywnie wpływać na stan zdrowia nastolatków, powodując infekcje i niewydolność serca5. Obecne metody leczenia obejmują przede wszystkim transfuzję krwi, suplementację żelaza i terapię erytropoetyną. Jednak te zabiegi mają wady i niekorzystne skutki uboczne, takie jak anafilaksja, zaburzenia żołądkowo-jelitowe, przeciążenie żelazem i pokrzywka1. Dlatego kluczowe znaczenie ma identyfikacja skutecznych leków o mniejszej liczbie skutków ubocznych w leczeniu niedokrwistości.

Tradycyjna medycyna chińska, w tym medycyna ujgurska, oferuje kilka zalet, takich jak preparaty wieloskładnikowe, efekty wielokierunkowe, interakcje wielolinkowe i mniej skutków ubocznych w zapobieganiu i leczeniu chorób wieloczynnikowych. Syrop Shi-Liu-Bu-Xue (SLBXS) jest godnym uwagi tradycyjnym środkiem w medycynie ujgurskiej, stosowanym do toników krwi i produkcji krwi. Jest uznawany za lek regulujący krew, który może zmniejszać ciepło wątroby i został uwzględniony w wytycznych dotyczących klinicznego stosowania leków mniejszościowych w leczeniu niedokrwistości. Jest również licencjonowany przez Chińską Państwową Agencję ds. Żywności i Leków (Z20026094)6,7,8. W ciągu ostatnich dwóch dekad SLBXS był szeroko stosowany w Chinach w leczeniu schorzeń związanych z niedokrwistością. Jednak jego potencjalne mechanizmy leczenia niedokrwistości pozostają nieznane i wymagają dalszych badań. Metabolomika, która bada dynamiczne reakcje metaboliczne systemów biologicznych na choroby, interwencje lekowe lub warunki środowiskowe9, jest coraz częściej wykorzystywana do wyjaśniania mechanizmów działania tradycyjnej medycyny chińskiej poprzez ocenę zmian w biomarkerach metabolicznych w próbkach biologicznych pod wpływem bodźców zewnętrznych9,10.

W związku z tym, w tym badaniu przyjęto podejście metabolomiczne wątroby w celu określenia podstawowych mechanizmów terapeutycznych SLBXS w leczeniu niedokrwistości. Po pierwsze, ustalono mysi model niedokrwistości wywołany acetylofenylohydrazyną (APH). Następnie zbadano szlaki metaboliczne metabolitów endogennych za pomocą metabolomiki wątroby z chromatografią gazową ze spektrometrią mas (GC-MS) oraz metod danych wieloczynnikowych po podaniu SLBXS. Na koniec kluczowe cele przeanalizowano eksperymentalnie, aby wyjaśnić działanie przeciwanemiczne i mechanizmy molekularne SLBXS.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Hubei (HBUCMS201912015). Samce myszy C57BL/6 (waga 20-22 g) trzymano w specjalnym pomieszczeniu wolnym od patogenów o wilgotności względnej 50%-60% i temperaturze 22%C± 2°C, poddano 12-godzinnemu cyklowi światła/12-godzinnemu cyklowi ciemnemu i zapewniono im swobodny dostęp do pożywienia i wody. Przed rozpoczęciem eksperymentu wszystkie myszy miały tydzień na aklimatyzację w środowisku. Myszy zostały losowo przydzielone do jednej z następujących czterech grup (n = 12): kontrolny, modelowy, syrop Fu-Fang-E-Jiao (FFEJS, lek dodatni, podawany dożołądkowo w dawce 7,8 ml / kg) i SLBXS (podawany dożołądkowo w ilości 11,7 ml / kg). Myszy w grupie kontrolnej i modelowej otrzymywały równe objętości soli fizjologicznej. Myszom we wszystkich grupach podawano dożołądkowo odpowiednie leki raz dziennie przez 2 tygodnie. Szczegółowe informacje na temat leków, odczynników i sprzętu użytego w tym badaniu znajdują się w Tabeli Materiałów.

1. Opracowanie modelu niedokrwistości u myszy

  1. Odważyć 2 g acetylofenylohydrazyny (APH) za pomocą wagi elektronicznej i przenieść do zlewki o pojemności 150 ml. Dodaj 100 ml soli fizjologicznej i mieszaj szklaną pałeczką, aż APH całkowicie się rozpuści.
    2. Ustal mysi model niedokrwistości, wstrzykując podskórnie 2% APH, jak przygotowano w kroku 1.1, 1, 4 i 7 dnia w dawkach odpowiednio 200 mg/kg, 100 mg/kg i 100 mg/kg11.
  2. UWAGA: Począwszy od pierwszego dnia, myszom z grup FFEJS (7,8 ml / kg) i SLBXS (11,7 ml / kg) podawano dożołądkowo raz dziennie przez 2 tygodnie. Myszy w grupie kontrolnej i modelowej otrzymywały równe objętości soli fizjologicznej raz dziennie przez 2 tygodnie.

2. Określanie wskaźnika wątrobowego

  1. Pod koniec eksperymentu zważ każdą mysz za pomocą wagi elektronicznej.
  2. Znieczulić myszy, wdychając 2% izofluranu. Ściśnij gałkę oczną myszy, aby była przekrwiona i wystająca. Szybko usuń gałkę oczną za pomocą kleszczy i zbierz krew do heparynizowanych probówek z próbkami.
  3. Zabezpiecz znieczulone myszy od kroku 2.2 do chirurgicznej płytki manipulacyjnej.
  4. Wykonaj pełne nacięcie wzdłuż linii środkowej brzucha za pomocą skalpela. Ostrożnie wypreparuj i wyizoluj nienaruszoną tkankę wątroby12, a następnie zmierz jej wagę za pomocą wagi elektronicznej.
    UWAGA: Indeks wątrobowy każdej myszy oblicza się przy użyciu następującego wzoru: Indeks wątrobowy = masa wątroby/masa ciała.

3. Analiza hematologiczna

  1. Delikatnie potrząsnąć probówką zawierającą heparynizowaną próbkę krwi z kroku 2.2, aby zapobiec krzepnięciu krwi.
  2. Umieścić próbkę krwi poniżej igły do wstrzykiwań, aby upewnić się, że jest całkowicie zanurzona w igle.
  3. Kliknij przycisk Automatyczne wykrywanie, aby zmierzyć liczbę czerwonych krwinek (RBC), hematokryt (HCT), liczbę białych krwinek (WBC), poziom hemoglobiny (HGB) i liczbę płytek krwi (PLT) za pomocą w pełni automatycznego analizatora hemocytów.

4. Badanie metabolomiki wątroby

  1. Przygotowanie próbki wątroby
    1. Homogenizować próbki tkanek wątroby (50 mg) z kroku 2.4 z 1 ml wstępnie schłodzonego metanolu. Wirować przy 18,759 x g przez 10 minut w temperaturze 4 °C w celu usunięcia osadu.
    2. Przenieść 200 μl supernatantu do fiolki z próbką za pomocą pipety i suszyć próżniowo w liofilizatorze w temperaturze 35 °C przez 2 godziny.
    3. Wysuszone próbki należy reagować z 40 μl roztworu chlorowodorku metoksyaminy o stężeniu 40 mg/ml w pirydynie przez 90 minut w temperaturze 30 °C. Następnie dodać 80 μl N-metylo-N-(trimetylosililo)trifluoroacetamidu (MSTFA) z 1% trimetylochlorosilanem (TMCS) i inkubować przez 60 minut w temperaturze 37 °C.
    4. Dodać 10 μl n-heksanu do fiolki, aby zakończyć reakcję derywatyzacji.
  2. Analiza metaboliczna wątroby
    1. Analizować derywatyzowane próbki (1 μl) za pomocą systemu GC-MS. Oddzielić pochodne za pomocą kolumny kapilarnej DB-5MS (30 m × 0,25 mm × 0,25 μm).
      UWAGA: Warunki programu temperatury piekarnika zostały ustawione w następujący sposób: 60 °C przez 1 min; zwiększyć do 325 °C z szybkością 10 °C/min i utrzymać przez 10 minut. Temperatury wtryskiwacza, źródła jonów i MS ustawiono odpowiednio na 250 °C, 230 °C i 150 °C. Jako gaz nośny użyto helu (99,999%) o natężeniu przepływu 1,1 ml/min, a stosunek podziału ustalono na 10:1. Wykorzystano energię wiązki elektronów wynoszącą 70 eV i czas opóźnienia rozpuszczalnika wynoszący 5,9 min.
  3. Przetwarzanie i analiza danych
    1. Pobieraj i konwertuj surowe dane GC-MS za pomocą kompatybilnego oprogramowania MassHunter.
    2. Przeprowadź analizę spektralną za pomocą narzędzia AMDIS (Automated Mass Spectral Deconvolution and Identification System)12.
    3. Zidentyfikuj wszystkie metabolity, korzystając z baz danych NIST i HMDB (patrz tabela materiałów).
    4. Zaimportuj dane do narzędzia MetaboAnalyst w celu częściowej analizy dyskryminacyjnej metodą najmniejszych kwadratów (PLS-DA), testów t, analizy ścieżek i analizy sieci12.

5. Analiza Western blot

  1. Ekstrakcja całkowitych białek z tkanki wątroby myszy
    1. Dodać 50 mg tkanki wątroby z kroku 2.4 i 250 μl lizatu komórkowego do szklanego homogenizatora o pojemności 1 ml i mielić na lodzie przez 5 minut.
    2. Przenieść homogenat tkanki wątroby z etapu 5.1.1 do probówki mikrowirówkowej o pojemności 1,5 ml za pomocą pipetora i odwirować przy 18,759 x g przez 10 minut w temperaturze 4 °C. Następnie przenieść supernatant do nowej probówki o pojemności 1,5 ml za pomocą pipetora.
  2. Oznaczanie stężeń białek i wstępne przetwarzanie próbek białek
    1. Dodać 2 μl supernatantu z kroku 5.1.2, 18 μl PBS i 180 μl roztworu roboczego BCA do 96-dołkowej płytki do mikromiareczkowania8.
    2. Oscylować płytką na oscylatorze przez 30 s, pozostawić ją na 30 minut w temperaturze 37 °C i określić absorbancję przy 562 nm za pomocą czytnika mikropłytek.
  3. Oddziel całkowitą ilość białek za pomocą SDS-PAGE, przenieś do błon z polifluorku winylidenu i zablokuj 5% beztłuszczowym mlekiem8.
  4. Inkubować błony z kroku 5.3 z pierwszorzędowymi przeciwciałami przeciwko HIF-1α (1:1000), VEGFA (1:1000), GLA (1:1000), NOS3 (1:1000) i β-aktynie (1:5000) przez noc w temperaturze 4 °C.
  5. Umieścić membrany z kroku 5.4 w pudełku do inkubacji przeciwciał, dodać 10 ml TBST i wytrząsać poziomo w temperaturze 111 x g w temperaturze pokojowej, aby zmyć niezwiązane przeciwciała pierwszorzędowe trzy razy przez 5 minut każda.
  6. Dodać 200 μl koziej anty-króliczej IgG (H + L)-HRP (1:1000) do każdej błony z kroku 5.5 i inkubować przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Następnie powtórz krok 5.5, aby zmyć niezwiązane przeciwciało drugorzędowe (kozie przeciwciało anty-królicze IgG (H + L)-HRP).
  7. Dodać 200 μl ultraczułego roztworu chemiluminescencyjnego ECL na powierzchnię każdej membrany z kroku 5.6 i natychmiast uwidocznić prążki białkowe za pomocą automatycznego systemu analizy obrazowania chemiluminescencyjnego.

6. Analiza statystyczna

  1. Analizuj dane za pomocą oprogramowania statystycznego i graficznego z jednokierunkową ANOVA, a następnie testem Tukeya.
  2. Przedstaw wyniki jako średnią ± odchylenie standardowe (SD) i przyjmij wartość P < 0,05 jako statystycznie istotną.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Aby potwierdzić pomyślne stworzenie mysiego modelu niedokrwistości i przeanalizować wpływ SLBXS na niedokrwistość, najpierw zbadano indeks wątrobowy i parametry hematologiczne. Rysunek 1 ilustruje, że grupa modelowa wykazała znaczny spadek (P < 0,01) liczby czerwonych krwinek (RBC), hemoglobiny (HGB) i hematokrytu (HCT) w porównaniu z grupą kontrolną. I odwrotnie, wskaźnik wątroby, liczba białych krwinek (WBC) i liczba płytek krwi (PLT) w grupie modelowej były znacznie wyższe (P < 0...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Niedokrwistość jest powszechnym schorzeniem dotykającym wielu ludzi na całym świecie, szczególnie w krajach rozwijających się1. W Chinach pacjenci często stosują tradycyjną medycynę chińską, w tym medycynę ujgurską, w celu złagodzenia oznak i objawów niedokrwistości. SLBXS jest lekiem ujgurskim, który jest stosowany w praktyce klinicznej od wielu lat; Jednak jego dokładny mechanizm działania przeciwko niedokrwistości pozostaje słabo poznany13. W tym badaniu ustalono mysi mo...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez Specjalny Plan Szkoleniowy dla Mniejszościowych Talentów Naukowych i Technologicznych, Fundację Nauk Przyrodniczych Regionu Autonomicznego Sinciang-Ujgur (2020D03021), Fundusze na Kluczowy Program Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Hubei (2022ZZXZ004) oraz Program Zespołu Innowacji Tianshan (2020D14030).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
AcetylofenylohydrazynaShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Automatyczny system analizy obrazowania chemiluminescencyjnegoShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
Zestaw do oznaczania kwasu bicunchoninowegoThermoFisher ScientificQPBCA-1KT
Kolumna kapilarnaAgilent J& W Naukowy, Agilent Technologies, Inc.DB-5MS
Bufor do lizy komórek dla Western i IPBeyotime BiotechnologyP0013
ChlorotrimetylosilanShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Waga elektronicznaMettler-Toledo International Inc.ME203E
Waga elektronicznaMettler-Toledo International Inc.LE104E
Fu-Fang-E-Jiao SyropDong E E Jiao Co., Ltd.
W pełni automatyczny analizator hemocytówShenzhen Mindray Animal Care Technology Co., Ltd.IDEXX ProCyte Dx
GC-MSfirmy Agilent Technologies, Inc.7890B-5977B 
Przeciwciało pierwotne GLABioworld TechnologyBS77041
Homogenizator szklanyShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
Pręt szklany Szanghaj Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-003904
Oprogramowanie GraphPad Prism  GraphPad, La JollaWersja 9.0
Heparynizowane probówki na próbkiChangde BKMAM Biotechnology Co., Ltd.B-ACT1P5
HIF-1α przeciwciało pierwszorzędoweBioworld TechnologyBS3514
HMDB baza danychhttp://www.hmdb.ca/—
IsofluraneHebei Jindafu Pharmaceutical Co., Ltd.
Samiec myszy C57BL / 6Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd.Nie. SCXK [Liao] 2015-0001
MassHunterAgilent Technologies, Inc.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
Chlorowodorek metoksyaminyShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
n-heksanShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Baza danych NISThttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
Przeciwciało pierwotne NOS3Bioworld TechnologyBS3625
PirydynaShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Sól fizjologicznaBIOSHARP LIFE SCIENCES
Syrop Shi-Liu-Bu-XueXinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.
Chirurgiczna płytka manipulacyjnaDIXSGZK-JPB-A
VEGFA przeciwciało pierwotneBioworld TechnologyAP0742
β-aktynaABclonal (Shanghai) Trading Co., Ltd.Zobacz materiał AC026
C13979660C104814214020031System 20231202E1818113C14878803C13026996 2308262009 211277

Bibliografia

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Shi-Liu-Bu-Xuesygnalizacja HIF-1metabolizm galaktozyWestern blotmodel mysimetabolizm wątrobowyobniżenie poziomu białek

Ten artykuł został opublikowany

Film wkrótce dostępny

Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.