Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Indukowanie wnikania w trzecim stadium dyspersyjnych młodych osobników Bursaphelenchus xylophilus do kryptobiozy poprzez regulację osmotyczną

899 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/67350

⸱

27 grudnia 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Niniejszy protokół opisuje metodę indukowania dyspersji młodocianych osobników trzeciego stadium (młodocianych osobników sprzed dauer, JIII.) Bursaphelenchus xylophilus do kryptobiozy poprzez osmotyczną regulację jonów chlorku potasu (KCl). Metoda ta może stanowić wsparcie techniczne dla badań nad mechanizmami odporności B . xylophilus na stres.

Streszczenie

Kryptobioza to stan, w którym organizmy tracą niemal całą wodę wewnętrzną i przechodzą w anhydrobiozę pod wpływem ekstremalnego stresu środowiskowego. Rozprzestrzeniające się młodociane stadium trzecie (młodociane pre-dauer, Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne.) Bursaphelenchus xylophilus mogą wejść w stan kryptobiozy poprzez odwodnienie i odżywić się po rehydratacji, gdy warunki środowiskowe ulegną poprawie. Regulacja osmotyczna ma kluczowe znaczenie dla ich przetrwania w tym procesie. W niniejszej studyjnej analizie okazy Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus zostały pobrane z martwych drzew Pinus massoniana dotkniętych chorobą więdnięcia sosny w Ningbo, prowincja Zhejiang, Chiny. Po zanurzeniu w 8% roztworze chlorku potasu (KCl), Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus weszły w stan kryptobiozy w wyniku stopniowego odwodnienia spowodowanego zwiększonym zewnętrznym ciśnieniem osmotycznym w wyniku naturalnego parowania wody. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus potrafi przetrwać stres niskotemperaturowy w -20 °C. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus mogą odżyć po rehydratacji, przy stopniu przeżywalności wynoszącym 92,1%. Proces ten może regulować przejście Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus w stan kryptobiozy, umożliwiając im odporność na ekstremalne warunki środowiskowe. Opisana w naszej pracy metoda jest prosta i niezawodna, stanowiąc wsparcie techniczne dla badań nad mechanizmami odporności na stres B. xylophilus.

Wprowadzenie

Choroba więdnięcia sosen jest jedną z najpoważniejszych chorób lasów w Chinach1. Nematod sosnowy Bursaphelenchus xylophilus (B. xylophilus) stanowi istotne zagrożenie dla gatunków sosen, takich jak Pinus massoniana (P. massoniana), ponieważ rozmnaża się wewnątrz gospodarza, co prowadzi do szybkiego więdnięcia i obumarcia drzewa. W niekorzystnych warunkach środowiskowych po śmierci gospodarza, młodzieńce reprodukcyjne B. xylophilus mogą przejść w stadium młodzieńczych form pre-dauer (

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

1. Pobieranie JIII B. xylophilus

  1. Pozyskiwanie zainfekowanych krążków P. massoniana
    UWAGA: Wszystkie procedury były zgodne z Administracyjnymi Środkami dla Obszarów Epidemii Choroby Więdnięcia Sosny i Zainfekowanego Drewna oraz innymi obowiązującymi przepisami. Jako miejsce poboru próbek wybrano las P. massoniana zainfekowany B. xylophilus w powiecie Xiangshan, mieście Ningbo, prowincji Zhejiang. Drzewa P. massoniana, które obumarły z powodu choroby więdnięcia sosny, zostały ścięte w obrębie miejsca poboru próbek.
    1. Pobierz okrągłe kłody (grubości 5 cm) ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W 8% roztworze KCl, w miarę odparowywania wody, Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus początkowo wykazywał wyraźne „zwijanie się”, pozostając jednocześnie ruchliwym (Rysunek 1A). Po całkowitym odparowaniu wody nematody przestały się poruszać i zwinięły się, wykazując zapadnięte powier.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

W niniejszym badaniu Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus pobrano z martwych okazów P. massoniana w Ningbo, w prowincji Zhejiang. Należy zaznaczyć, że

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Badania te zostały sfinansowane przez Centralną Instytucję Naukową Pożytku Publicznego Basal Research Fund of State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding (numer grantu CAFYBB2020ZY001-2), projekty badawcze przedsiębiorstw (202404016-4320) oraz Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (NSFC 32271896).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Zjeżdżalnia szklanaTereny biologiczneGS7101-752575 mm i razy; 25 mm i razy; 1 mm
Szklany lejek z długą szyjkąEksperymentalna technologia Nanjing KangluodaN/A150 mm
MikroskopPhenixXSP-35-1600XPH100-2B41L-IPL
szalka PetriegoEksperymentalna technologia Nanjing Kangluoda  TB-62493579274550 mm i razy; 50 mm
Szczypta KurkaEksperymentalna technologia Nanjing Kangluoda  TB-62497331174336 mm i razy; 11 mm  &czasy; 55 mm
PipetaEppendorf powiedział:312300001210– 100 &mikro; L
Chlorek potasu (KCL)Solarbio Nauki przyrodniczeZobacz materiał P9921500 gramów
Gumowa rurkaEksperymentalna technologia Nanjing KangluodaTB-6249234570947 mm i czasy; 5 mm
SterylizatorBinJiang https://detail.1688.com/offer/644766597053.html?_t=1730892390541&spm=
a2615.7691456.co_0_0_wangpu
_score_0_0_0_0_1_0_0000_0.0
75L
Bibuła Nadruk od serca do sercaKlasa M322,5 cm i razy; 21,5 cm

Bibliografia

  1. Li, Y., Zhang, X. Analysis on the trend of invasion and expansion of Bursaphelenchus xylophilus. Forest Pest and Disease. 37 (5), 1-4 (2018).
  2. Futai, K. Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Annu Rev Phytopathol. 51 (51), ?61(2013).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Indukcja kryptobiozynicień sosnymłodociane trzeciego stadiumanhydrobiozaprotokół odwodnieniastres niskotemperaturowyroztwór chlorku potasuprzeżywalność po rehydratacji