Artykuł metodologiczny

Indukowanie wnikania w trzecim stadium dyspersyjnych młodych osobników Bursaphelenchus xylophilus do kryptobiozy poprzez regulację osmotyczną

883 wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/67350

⸱

27 grudnia 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
11State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding, Institute of Ecological Conservation and Restoration, Chinese Academy of Forestry, 2Comprehensive Experimental Center in Yellow River Delta of Chinese Academy of Forestry, 3Tianjin Institute of Forestry Science, Chinese Academy of Forestry, 4Ningbo Yongsen Biotechnology Co. Ltd, 5Xiangshan Natural Resources and Planning Bureau of Zhejiang

W tym artykule

Podsumowanie

Niniejszy protokół opisuje metodę indukowania dyspersji młodocianych osobników trzeciego stadium (młodocianych osobników sprzed dauer, JIII.) Bursaphelenchus xylophilus do kryptobiozy poprzez osmotyczną regulację jonów chlorku potasu (KCl). Metoda ta może stanowić wsparcie techniczne dla badań nad mechanizmami odporności B . xylophilus na stres.

Streszczenie

Kryptobioza to stan, w którym organizmy tracą niemal całą wodę wewnętrzną i przechodzą w anhydrobiozę pod wpływem ekstremalnego stresu środowiskowego. Rozprzestrzeniające się młodociane stadium trzecie (młodociane pre-dauer, Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne.) Bursaphelenchus xylophilus mogą wejść w stan kryptobiozy poprzez odwodnienie i odżywić się po rehydratacji, gdy warunki środowiskowe ulegną poprawie. Regulacja osmotyczna ma kluczowe znaczenie dla ich przetrwania w tym procesie. W niniejszej studyjnej analizie okazy Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus zostały pobrane z martwych drzew Pinus massoniana dotkniętych chorobą więdnięcia sosny w Ningbo, prowincja Zhejiang, Chiny. Po zanurzeniu w 8% roztworze chlorku potasu (KCl), Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus weszły w stan kryptobiozy w wyniku stopniowego odwodnienia spowodowanego zwiększonym zewnętrznym ciśnieniem osmotycznym w wyniku naturalnego parowania wody. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus potrafi przetrwać stres niskotemperaturowy w -20 °C. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus mogą odżyć po rehydratacji, przy stopniu przeżywalności wynoszącym 92,1%. Proces ten może regulować przejście Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus w stan kryptobiozy, umożliwiając im odporność na ekstremalne warunki środowiskowe. Opisana w naszej pracy metoda jest prosta i niezawodna, stanowiąc wsparcie techniczne dla badań nad mechanizmami odporności na stres B. xylophilus.

Wprowadzenie

Choroba więdnięcia sosen jest jedną z najpoważniejszych chorób lasów w Chinach1. Nematod sosnowy Bursaphelenchus xylophilus (B. xylophilus) stanowi istotne zagrożenie dla gatunków sosen, takich jak Pinus massoniana (P. massoniana), ponieważ rozmnaża się wewnątrz gospodarza, co prowadzi do szybkiego więdnięcia i obumarcia drzewa. W niekorzystnych warunkach środowiskowych po śmierci gospodarza, młodzieńce reprodukcyjne B. xylophilus mogą przejść w stadium młodzieńczych form pre-dauer (Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne.). Młodzieńce te poszukują owadów-wektorów, aby kontynuować migrację i rozprzestrzenianie się, co powoduje rozległe zamieranie lasów sosnowych2.

Kryptobioza to stan, w którym organizmy tracą niemal całą wodę wewnętrzną i wchodzą w stan anhydrobiozy pod wpływem ekstremalnego stresu środowiskowego3. W tym procesie organizmy stopniowo ulegają odwodnieniu, co skutkuje zatrzymaniem ruchu, ograniczeniem metabolizmu i zawieszeniem cyklu życiowego4. W odpowiednich warunkach mogą one odzyskać sprawność po rehydratacji. Kryptobioza pozwala organizmom przetrwać w ekstremalnych środowiskach, takich jak niskie temperatury, i wydłużyć ich czas życia5. W antarktycznej zmarzlinie znaleziono nicienie, które przetrwały w stanie kryptobiozy przez 30 000 lat6.

Poprzednie badania wykazały, że nicienie mogą adaptować się do różnych stresorów abiotycznych – takich jak niska temperatura, susza i wysokie ciśnienie osmotyczne – podczas dehydratacji poprzez regulację przepuszczalności swojej powierzchni7. Ponadto nicienie potrafią zwijać ciało, aby zmniejszyć powierzchnię i zminimalizować tempo utraty wody. Na przykład Caenorhabditis elegans reguluje równowagę osmotyczną, pozwalając jonom i małym cząsteczkom na swobodny transport przez kutykulę, podczas gdy większe cząsteczki nie mogą przenikać8. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus również wykazuje zdolność do kryptobiozy. Podczas etapów dehydratacji i rehydratacji w kryptobiozie regulacja osmotyczna jest niezbędna do kontrolowania wymiany substancji przez kutykulę, co czyni ją kluczową dla wejścia w stan kryptobiozy lub wybudzenia się z niego9.

Niniejsza praca przedstawia metodę indukowania kryptobiozy u Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus poprzez regulację osmotyczną. Metoda ta jest prosta, wydajna i wysoce niezawodna, zapewniając wsparcie techniczne dla badań nad mechanizmami odporności na stres u Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus.

Protokół

1. Pobieranie JIII B. xylophilus

  1. Pozyskiwanie zainfekowanych krążków P. massoniana
    UWAGA: Wszystkie procedury były zgodne z Administracyjnymi Środkami dla Obszarów Epidemii Choroby Więdnięcia Sosny i Zainfekowanego Drewna oraz innymi obowiązującymi przepisami. Jako miejsce poboru próbek wybrano las P. massoniana zainfekowany B. xylophilus w powiecie Xiangshan, mieście Ningbo, prowincji Zhejiang. Drzewa P. massoniana, które obumarły z powodu choroby więdnięcia sosny, zostały ścięte w obrębie miejsca poboru próbek.
    1. Pobierz okrągłe kłody (grubości 5 cm) z górnej, środkowej i dolnej sekcji głównego pnia ściętych drzew.
    2. Pokrój zebrane okrągłe kłody P. massoniana na plastry o grubości 0,5-1 cm, a następnie przytnij je do małych pasków o długości 2-3 cm.
    3. Umieść małe paski drewna w szczelnych woreczkach i przechowuj je w laboratorium do dalszego wykorzystania.
  2. Ekstrakcja Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus
    1. Przymocuj gumową rurkę do wąskiego końca szklanego lejka z długą szyjką o przybliżonej średnicy 15 cm. Zabezpiecz gumową rurkę zaciskiem. Umieść zmontowany lejek na statywie do lejków.
    2. Zawiń małe paski drewna całkowicie w pojedynczą warstwę papieru chłonnego, a następnie umieść je w lejku. Dolewaj do lejka wodę destylowaną, aż wszystkie paski drewna zostaną zanurzone.
      ​UWAGA: Po pozostawieniu na 12-24 h nicienie wywędrowały z pasków drewna i osiadły na dnie lejka10. Papier chłonny zapobiegał osadzaniu się resztek drewna, umożliwiając jednocześnie przejście nicieni.
    3. Powoli zwolnij zacisk na dnie lejka i pozwól, aby 2000-5000 µL mieszaniny wypłynąć do szalki Petriego (średnica 5 cm) w celu badania mikroskopowego i identyfikacji morfologicznej.
    4. Zidentyfikuj Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, obserwując takie cechy jak stylesy, środkowe bulwy przełyku, kropelki lipidowe oraz „palczaste” kształty ogona11.
    5. Pod mikroskopem przenieś pojedyncze osobniki Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus na szkiełko, odsysając za każdym razem 10 µL cieczy wraz z jednym nicieniem za pomocą pipety o pojemności 10 µL. Powtórz ten proces 30 razy, aby zebrać około 300 µL mieszaniny zawierającej nicienie.
    6. Po ekstrakcji Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, wysterylizuj pozostałe paski drewna i zainfekowane materiały drzewne, aby zapobiec dalszemu zanieczyszczeniu.

2. Kontrola procesu regulacji osmotycznej

  1. Przygotowanie mieszaniny do regulacji osmotycznej
    1. Przygotować 8% roztwór wodny KCl.
    2. Za pomocą pipety dodać 10 µL 8% roztworu wodnego KCl na szkiełko zawierające mieszaninę Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, otrzymując około 310 µL mieszaniny nematod i roztworu KCl.
  2. Regulacja zwiększonego ciśnienia osmotycznego i dehydratacja Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus​
    1. Umieścić szkiełko na stole mikroskopu, pozwalając na naturalne odparowanie wody. Doprowadzi to do stopniowego zwiększenia ciśnienia osmotycznego środowiska zewnętrznego, powodując dehydratację nematod w czasie około 30-60 min.
      UWAGA: Operator musi jedynie czekać na naturalne odparowanie wody aż do wytrącenia kryształów KCl i obserwować stan nematod pod mikroskopem. Naturalne odparowanie 310 µL mieszaniny do momentu wytrącenia kryształów KCl trwa około 30-60 min.
    2. Obserwować pod mikroskopem proces dehydratacji (np. zwijanie się ciała, agregację itp.) Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Gdy woda całkowicie odparuje, a kryształy KCl się wytrącą, Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus przestaje się poruszać i wchodzi w stan kryptobiozy.
  3. Opracowanie stresu niskotemperaturowego kryptobiotycznych Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus
    1. Umieścić kryptobiotyczne Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus w środowisku o stałej temperaturze -20 °C przez 24 h.
  4. Regulacja zmniejszonego ciśnienia osmotycznego i rehydratacja Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus
    1. Za pomocą pipety dodać około 300 µL wody destylowanej wokół osobników młodzieżnych, które zostały poddane działaniu niskiej temperatury. Proces rehydratacji, trwający około 30-60 min, stopniowo obniża ciśnienie osmotyczne ich środowiska zewnętrznego.
    2. Obserwować pod mikroskopem proces rehydratacji Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus (np. prostowanie ciała, powrót do ruchu itp.). Obliczyć przeżywalność po 24 h.

Wyniki

W 8% roztworze KCl, w miarę odparowywania wody, Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus początkowo wykazywał wyraźne „zwijanie się”, pozostając jednocześnie ruchliwym (Rysunek 1A). Po całkowitym odparowaniu wody nematody przestały się poruszać i zwinięły się, wykazując zapadnięte powierzchnie oraz nagromadzone krople lipidów (Rysunek 1B), co wskazywało na wejście w stan kryptobiozy. Po dodaniu wody destylowanej do otoczenia, nematody nawodniły się i ożyły (Rysunek 1C). Po odparowaniu wody pojawią się kryształy KCl (Rysunek 1D). Rysunek 1E przedstawia cechy morfologiczne Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus.

Eksperyment z odwodnienia wykazał, że w początkowym 8% roztworze KCl parowanie wody spowodowało utratę wody przez Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Po odwodnieniu Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus poddano stresowi niskiej temperatury w -20 °C przez 24 h; średni wskaźnik przeżywalności wyniósł 92,1%11. W porównaniu ze wskaźnikiem przeżywalności wynoszącym 0% w grupie kontrolnej, która nie weszła w stan kryptobiozy, powyższe dane sugerują, że odwodnienie może znacząco zwiększyć przeżywalność Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus w warunkach niskiej temperatury.

Podczas fazy rehydratacji po kryptobiozie Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus zaobserwowano, że 100% nicieni wykazywało obecność „pęcherzyków” in vivo podczas przenoszenia z 40% roztworu KCl do wody destylowanej (Rycina 2).

Obraz mikroskopowy formacji kryształów; rysunki A-E pokazują różne struktury w różnych skalach.
Rysunek 1: Proces odwodnienia-kryptobiozy-rehydratacji Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Obraz ten ilustruje proces kryptobiozy u Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, w tym (A) etap odwodnienia, (B) etap kryptobiozy, (C) etap rehydratacji, (D) etap krystalizacji KCL oraz (E) Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Obraz mikroskopowy nitki spirogiry, podkreślający układ chloroplastów w strukturze komórkowej.
Rycina 2: Akumulacja granulek tłuszczu w niepobudzonych Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Obraz przedstawia stan Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus po rehydratacji, charakteryzujący się obecnością bąbelkowych granulek tłuszczu in vivo. Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.

Dyskusja

W niniejszym badaniu Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus pobrano z martwych okazów P. massoniana w Ningbo, w prowincji Zhejiang. Należy zaznaczyć, że Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus wyselekcjonowano z populacji mieszanej o różnych stadiach rozwojowych. W szczególności wybrano okrągłe kłody o wysokiej gęstości występowania B. xylophilus, a następnie przeprowadzono przesiew Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. Zimą, gdy dobowa temperatura minimalna w prowincji Liaoning wynosi około -20 °C, z martwych okazów Pinus tabuliformis można pozyskać dużą liczbę osobników Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus o jednolitym stadium rozwojowym, co uprościło proces selekcji w niniejszym eksperymencie12.

Podczas procesu kryptobiozy powolne tempo odwodnienia nicieni sprzyja ich przeżyciu i zapobiega uszkodzeniom strukturalnym ich białek13. Czas odwodnienia ma krytyczne znaczenie dla określenia przeżywalności Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus. W niniejszym badaniu zastosowano roztwór KCl o początkowym stężeniu 8%, którego stężenie zwiększano stopniowo poprzez naturalne odparowywanie wody, co pozwoliło Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus na powolne odwodnienie i wejście w stan kryptobiozy. Jeśli woda odparowuje zbyt szybko lub jeśli nicienie zostaną umieszczone bezpośrednio w roztworze KCl o wysokim stężeniu, ich przeżywalność znacząco spada.

Metoda opisana w niniejszym badaniu wykazuje szereg zalet. Materiały eksperymentalne są łatwo dostępne, ponieważ do regulacji odwodnienia i rehydratacji Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus wymagany jest jedynie roztwór KCl i woda destylowana. Procedury są proste: odwodnienie zachodziło poprzez naturalne odparowanie, a rehydratację osiągnięto poprzez dodanie wody destylowanej. Cały proces może zostać zakończony w ciągu 2 h. Metoda ta charakteryzuje się wysokim wskaźnikiem sukcesu i przeżywalnością, przy czym większość osobników Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus wchodzi w kryptobiozę po odwodnieniu, a większość z nich ożywa po rehydratacji11.

Proponowana metoda jest możliwa do zastosowania w celu regulacji stanu kryptobiozy zarówno w przypadku Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, jak i w przypadku młodzieży rozproszonej w czwartym stadium (równowaga statyczna, ΣFx=0, schemat, wektory sił równoważących, fizyka edukacyjna, analiza sił)14. Może ona jednak nie być skuteczna w odniesieniu do propagatywnych form B. xylophilus.

W ostatnich latach choroba więdnięcia sosny wywoływana przez B. xylophilus rozprzestrzeniła się z południowych Chin na obszary północne. Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, który zasiedla sosny w tych chłodniejszych regionach północnych, wykazuje tendencję do większej mrozoodporności15. Proponowana metoda pozwala na indukcję kryptobiozy u Równowaga statyczna, ΣFx=0, ΣFy=0, MA=0, schemat analizy strukturalnej, siły mechaniczne. B. xylophilus, zwiększając ich odporność na zimno i suszę. Wspólnie metoda ta może zapewnić wsparcie techniczne w badaniu mechanizmów odporności na stres B. xylophilus oraz mechanizmu transmisji choroby więdnięcia sosny.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Badania te zostały sfinansowane przez Centralną Instytucję Naukową Pożytku Publicznego Basal Research Fund of State Key Laboratory of Tree Genetics and Breeding (numer grantu CAFYBB2020ZY001-2), projekty badawcze przedsiębiorstw (202404016-4320) oraz Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (NSFC 32271896).

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Zjeżdżalnia szklanaTereny biologiczneGS7101-752575 mm i razy; 25 mm i razy; 1 mm
Szklany lejek z długą szyjkąEksperymentalna technologia Nanjing KangluodaN/A150 mm
MikroskopPhenixXSP-35-1600XPH100-2B41L-IPL
szalka PetriegoEksperymentalna technologia Nanjing Kangluoda  TB-62493579274550 mm i razy; 50 mm
Szczypta KurkaEksperymentalna technologia Nanjing Kangluoda  TB-62497331174336 mm i razy; 11 mm  &czasy; 55 mm
PipetaEppendorf powiedział:312300001210– 100 &mikro; L
Chlorek potasu (KCL)Solarbio Nauki przyrodniczeZobacz materiał P9921500 gramów
Gumowa rurkaEksperymentalna technologia Nanjing KangluodaTB-6249234570947 mm i czasy; 5 mm
SterylizatorBinJiang https://detail.1688.com/offer/644766597053.html?_t=1730892390541&spm=
a2615.7691456.co_0_0_wangpu
_score_0_0_0_0_1_0_0000_0.0		75L
Bibuła Nadruk od serca do sercaKlasa M322,5 cm i razy; 21,5 cm

Bibliografia

  1. Li, Y., Zhang, X. Analysis on the trend of invasion and expansion of Bursaphelenchus xylophilus. Forest Pest and Disease. 37 (5), 1-4 (2018).
  2. Futai, K. Pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Annu Rev Phytopathol. 51 (51), ?61(2013).
  3. Crowe, J. H., Cooper, A. F. Cryptobiosis. Sci Am. 225, 30-36 (1971).
  4. Wharton, D. A. Anhydrobiosis. Curr Biol. 25, 1107-1125 (2015).
  5. Browne, J., Tunnacliffe, A., Burnell, A. Anhydrobiosis: plant desiccation gene found in a nematode. Nature. 416 (6876), 38(2002).
  6. Shatilovich, A. V., et al. Viable nematodes from late Pleistocene permafrost of the Kolyma river lowland. Dokl Biol Sci. 480 (1), 100-102 (2018).
  7. Schottenfeld-Roames, J., Ghabrial, A. S. Osmotic regulation of seamless tube growth. Nat Cell Biol. 15 (2), 137-139 (2013).
  8. Erkut, C., et al. Trehalose renders the dauer larva of Caenorhabditis elegans resistant to extreme desiccation. Curr Biol. 21 (1), 1331-1336 (2012).
  9. Pan, L., et al. Third-stage dispersal juveniles of Bursaphelenchus xylophilus can resist low-temperature stress by entering cryptobiosis. Biology. 10 (8), 785(2021).
  10. Mao, X. F., Li, H. X., Chen, X. Y., Hu, F. Extraction efficiency of soil nematodes by different methods. Chinese J Ecol. 23 (3), 149-151 (2004).
  11. Pan, L., et al. Isolation and identification of pine wood nematode in Pinus koraiensis in Fengcheng, Liaoning province. Forest Pest and Disease. 38 (1), 4(2019).
  12. Pan, L., Cui, R., Li, Y., Feng, Y., Zhang, X. Investigation of pinewood nematodes in Pinus tabuliformis Carr. under low-temperature conditions in Fushun, China. Forests. 11 (9), 993(2020).
  13. Madin, K. A. C., Crowe, J. H. Anhydrobiosis in nematodes: Carbohydrate and lipid metabolism during dehydration. J Exp Zool. 3, 193(2010).
  14. Wharton, D. A. Anhydrobiosis: The model worm as a model. Curr Biol. 21 (15), 578-579 (2011).
  15. Li, Y., Zhang, X. High risk of invasion and expansion of pine wood nematode in the middle temperate zone of China. J Temperate Res. 1 (1), 4(2018).

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Indukcja kryptobiozynicień sosnymłodociane trzeciego stadiumanhydrobiozaprotokół odwodnieniastres niskotemperaturowyroztwór chlorku potasuprzeżywalność po rehydratacji
Indukowanie wnikania w trzecim stadium dyspersyjnych młodych osobników Bursaphelenchus xylophilus do kryptobiozy poprzez regulację osmotyczną
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.