Stworzenie modelu mysiego z nadwrażliwością na kaszel poprzez wdychanie kwasu cytrynowego

Mingtong Lin; Chen Zhan; Tingting Xu; Jinlan Gu; Chuqin Huang

doi:10.3791/67462

Artykuł metodologiczny

Stworzenie modelu mysiego z nadwrażliwością na kaszel poprzez wdychanie kwasu cytrynowego

DOI:

10.3791/67462

⸱

10 stycznia 2025

Mingtong Lin¹ , Chen Zhan¹ , Tingting Xu¹ , Jinlan Gu¹ , Chuqin Huang¹

¹State Key Laboratory of Respiratory Disease, The First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou Medical University

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół opisuje rozwój modelu myszy z nadwrażliwością na kaszel, który może służyć jako idealny model do badania mechanizmów przewlekłego kaszlu.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaszel jest jednym z najczęstszych objawów wielu chorób układu oddechowego. Przewlekły kaszel znacząco wpływa na jakość życia i stanowi znaczne obciążenie ekonomiczne. Zwiększona wrażliwość na kaszel jest patofizjologiczną cechą charakterystyczną przewlekłego kaszlu. Zaobserwowano, że nadwrażliwość na kaszel jest związana z zapaleniem dróg oddechowych, przebudową nerwów czuciowych dróg oddechowych i zmianami w ośrodkowym układzie nerwowym. Jednak dokładne mechanizmy molekularne pozostają niejasne i wymagają dalszych wyjaśnień przy użyciu odpowiednich modeli zwierzęcych. Poprzednie badania wykorzystywały świnki morskie jako modele do badania kaszlu, ale modele te mają kilka ograniczeń eksperymentalnych, w tym wysokie koszty, brak narzędzi transgenicznych i niedobór komercyjnych odczynników. Ponadto świnki morskie zazwyczaj wykazują słabą tolerancję środowiskową i wysoką śmiertelność pod wpływem bodźców. W przeciwieństwie do tego, myszy są mniejsze, łatwiejsze w utrzymaniu, bardziej opłacalne i podatne na manipulacje genetyczne, co czyni je bardziej odpowiednimi do badań mechanistycznych. W tym badaniu ustaliliśmy model myszy z nadwrażliwością na kaszel via ciągłym wdychaniu kwasu cytrynowego (CA). Model ten jest prosty w obsłudze i daje powtarzalne wyniki, co czyni go cennym narzędziem do dalszych badań nad mechanizmami i potencjalnymi nowymi metodami leczenia przewlekłego kaszlu.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaszel jest kluczowym odruchem obronnym, który pomaga usunąć wydzieliny z dróg oddechowych lub ciała obce z dróg oddechowych. Jest to jednak również jeden z najczęstszych objawów wielu chorób układu oddechowego, często skłaniający pacjentów do szukania pomocy medycznej¹. Przewlekły kaszel, definiowany jako uporczywy kaszel trwający dłużej niż 8 tygodni u dorosłych, znacząco wpływa na jakość życia, powodując problemy, takie jak nietrzymanie moczu, bezsenność, refluks i inne nieprzyjemne doświadczenia, a także znaczne obciążenie ekonomiczne²^,³^,⁴. Powszec....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury eksperymentalne na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Zwierząt Laboratoryjnych Pierwszego Szpitala Stowarzyszonego Uniwersytetu Medycznego w Kantonie (20230656). W badaniu wykorzystano dorosłe samce myszy C57BL/6 wolne od specyficznych patogenów w wieku 8-10 tygodni i o wadze 20-25 g. Szczegółowe informacje na temat stosowanych odczynników i sprzętu są wymienione w Tabeli Materiałów.

1. Przygotowanie odczynnika chemicznego

Przygotowanie roztworu kwasu cytrynowego (CA)
1. W celu oceny kaszlu należy przygotować 0,4 M roztwór, rozpuszczając 3,84 g kwas....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Jak pokazano w Rysunek 4A, wrażliwość na kaszel w grupie modelowej (grupa CA) znacznie wzrosła po 1 tygodniu ekspozycji w porównaniu z grupą kontrolną (grupa NS), a ta podwyższona wrażliwość utrzymywała się przez cały okres ekspozycji. Ani grupa kontrolna, ani grupa modelowa myszy nie doświadczyły śmiertelności podczas procesu modelowania (Rysunek 4B). Rysunek 4C i rysunek 4D pokazują, że liczba spontanicznych epizodów kaszlu znacznie wzr.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W tym badaniu udało się ustalić model mysi z nadwrażliwością na kaszel poprzez ciągłe wdychanie kwasu cytrynowego (CA). Model ten wykazał wiarygodny wzrost wrażliwości na kaszel zarówno w przypadku kaszlu spontanicznego, jak i odruchowego wywołanego przez kwas cytrynowy i kapsaicynę. Kwas cytrynowy i kapsaicyna są szeroko stosowane do oceny wrażliwości odruchu kaszlowego¹⁶.

Kilka krytycznych kroków w tym .......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

To badanie było wspierane przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (NSFC 82100034), Guangzhou Science and Technology Planning Project (202102010168).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
Nazwa	Firma	Numer katalogowy
0,9% sól fizjologiczna	Biosharp	BL158A
Kapsaicyna	Kajman chemiczna	92350
Kwas cytrynowy	Sigma-Aldrich	C2404
Etanol	Fabryka odczynników chemicznych w Kantonie	GSHB15-AR-0,5L
Zestaw do syntezy pierwszej nici cDNA	TransGen Biotech	AT341
Metacholina	Sigma-Aldrich	A2251
Nieinwazyjny system pletyzmografii całego ciała (WBP)	DSI	601-1400-001
Pentobarbital sodowy	Merk	P3761
PerfectStart Green qPCR SuperMix	TransGen Biotech	AQ601
Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS)	Meilunbio	MA0015
W czasie rzeczywistym ilościowe PCR Wykrywanie system	Bio-rad	Sterownik CFX Connect
TRIzol odczynnik	Invitrogen	15596026CN
Tween-80	Solarbio	T8360-100
Nebulizator ultradźwiękowy	Yuwell	402AI

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Morice, A. H. Epidemiology of cough. Pulm Pharmacol Ther. 15 (3), 253-259 (2002).
Lai, K., Long, L. Current status and future directions of chronic cough in China. Lung. 198 (1), 23-29 (2020).
Zeiger, R. S., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Inhalacja kwasu cytrynowego przewlek y kaszel stan zapalny dr g oddechowych sensoryczne nerwy dr g oddechowych pletyzmografia ca ego cia a p ukanie wewn trzbronchialne nadreaktywno dr g oddechowych pr ba z metacholim

Stworzenie modelu mysiego z nadwrażliwością na kaszel poprzez wdychanie kwasu cytrynowego

W tym artykule

Podsumowanie

Streszczenie

Wprowadzenie

Protokół

Wyniki

Dyskusja

Oświadczenia

Podziękowania

Materiały

Bibliografia

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Powiązane artykuły