Artykuł metodologiczny

Zadania behawioralne do badania rozpoznawania tożsamości u myszy

DOI:

10.3791/67547

⸱

7 lutego 2025

 ,  ,  , 
1Integrated Program in Neuroscience, McGill University, 2Neuroscience Division, Douglas Research Centre, 3Department of Psychiatry, McGill University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Poprzez parowanie negatywnie lub pozytywnie ocenianych doświadczeń z indywidualnymi celami społecznymi, opracowaliśmy zadania behawioralne do badania rozpoznawania tożsamości myszy C57BL/6. Zadania te pozwalają na badanie mechanizmów pamięci społecznej poszczególnych celów społecznych w zdrowych i związanych z chorobą modelach mysich z upośledzonym poznaniem społecznym.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zwierzęta społeczne, takie jak gryzonie, są w stanie rozpoznać i rozróżnić tożsamość znajomych osób. Rozpoznawanie tożsamości znajomych osób jest ważne dla rozwoju struktur społecznych, takich jak hierarchia, pokrewieństwo i rodzina. Mechanizmy leżące u podstaw uznawania tożsamości społecznej pozostają jednak niejasne. Większość badań nad uznaniem społecznym gryzoni opiera się na skłonności gryzoni do interakcji z nowym celem społecznym, zjawiskiem znanym jako nowość społeczna. Jednak zadania behawioralne mające na celu zbadanie nowości społecznej nie mogą ujawnić rozpoznania znajomych współplemieńców na podstawie ich tożsamości. Przedstawiono tutaj zadania behawioralne pozwalające na badanie rozpoznawania tożsamości u myszy C57BL/6 poprzez skojarzenie dwóch znajomych myszy z doświadczeniem wartościowym lub bez niego. Badani mieli interakcje z dwiema myszami, albo bez (neutralnego), albo z wartościowym doświadczeniem (negatywnym lub pozytywnym) i zapoznali się z tymi myszami. Mysz o ujemnej wartościowości była związana z szokami, podczas gdy mysz o dodatniej wartościacji była związana z nagrodą w postaci jedzenia. Po szkoleniu, rozpoznanie tożsamości tych znajomych myszy może zostać ujawnione w teście dyskryminacji społecznej, który jest reprezentowany jako preferencja dla myszy o pozytywnej wartości i unikanie myszy o ujemnej wartości w porównaniu z myszą neutralną. Zadania behawioralne związane z rozpoznawaniem tożsamości mogą być przydatne w badaniu mechanizmów pamięci społecznej i patofizjologii zaburzeń z upośledzonym poznaniem społecznym, takich jak zaburzenia ze spektrum autyzmu lub schizofrenia.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Rozpoznawanie tożsamości, czyli zdolność do identyfikowania znajomych osób na podstawie wcześniejszych doświadczeń, ma kluczowe znaczenie dla przetrwania zwierząt społecznych1. U gryzoni hierarchia społeczna, rozpoznawanie partnerów i potomstwa, obrona terytorialna oraz tworzenie i utrzymywanie grup są zachowaniami wymagającymi pomyślnego rozpoznania tożsamości2,3. Obecne rozumienie pamięci społecznej opiera się na badaniach na gryzoniach zakorzenionych w zdolności do identyfikacji nowych i znanych osobników tego samego gatunku. Zadania te okazały się przydatne do odkrywania regionów mózgu, które uważa się za pośredniczące w pamięci społecznej, takich jak hipokamp CA24 i brzuszne regiony CA15. Jednak takie badania nadal nie wyjaśniają mechanizmów leżących u podstaw rozpoznawania tożsamości, ponieważ ograniczają się do kategorycznego rozpoznania nowości społecznej.

Rozpoznawanie tożsamości zostało zademonstrowane niezależnie od nowości społecznej za pomocą paradygmatów uczenia się asocjacyjnego, gdzie wartościowe istotne doświadczenia są powiązane z jednym z dwóch (lub więcej) znanych celów społecznych. Zadania te opierają się na założeniu, że interakcje społeczne są często powiązane ze znaczeniem emocjonalnym, gdzie negatywne doświadczenia skutkują zachowaniami zapobiegającymi konfliktom, podczas gdy interakcje oparte na zabawie lub opiekuńczości są na ogół satysfakcjonujące. Afekt emocjonalny związany z interakcjami nazywa się wartościowością społeczną. Samce chomików złotych były w stanie rozróżnić dwa znajome cele tego samego gatunku, gdy jeden z nich wcześniej je zaatakował6. Pamięć rozpoznawcza poszczególnych samców szczurów rasy Wistar była również ważna dla ustalenia rangi społecznej7.

Ostatnio zbadano rozpoznawanie tożsamości u myszy C57BL/6, najczęściej używanego szczepu myszy w badaniach neurobiologicznych, poprzez kojarzenie poszczególnych myszy C57BL/6 z bodźcami pożądawczymi lub bez nich8. W tym podejściu wykorzystano myszy z głową do poddania się setkom prób treningowych, co ograniczyło jego zastosowanie do badania zachowań naturalistycznych u swobodnie poruszających się myszy. W innych badaniach rozpoznawanie tożsamości myszy C57BL/6 było wspierane przez preferencję współplemieńców podawanych etanolem9,10. Niemniej jednak podawanie substancji może powodować zakłócenia. Wreszcie, niewiele z tych badań wykorzystano do zbadania rozpoznawania tożsamości u gryzoni obu płci. Łatwa do przyjęcia metoda, która ma zastosowanie zarówno do samców, jak i samic myszy C57BL/6, jest narzędziem kluczowym dla dalszych badań nad rozpoznawaniem tożsamości.

Przedstawione tutaj są paradygmaty rozpoznawania tożsamości, które mogą być stosowane zarówno u samców, jak i samic myszy. Aby badać tożsamość niezależnie od skutków nowości, wykorzystuje się dwa znane cele społeczne, a jeden z tych celów jest związany z istotnym doświadczeniem emocjonalnym, które, jak się przypuszcza, wpływa na zachowanie interakcji. W przypadku związku z negatywną wartościowością społeczną zastosowano podejście podobne do warunkowania lęku społecznego, aby wywołać unikanie w stosunku do określonego celu społecznego11. Jeśli negatywna wartościowość społeczna, taka jak awersyjny wstrząs stopy, jest związana z jednostką, można się spodziewać zmniejszonej interakcji z celem społecznym. I odwrotnie, jeśli pozytywna wartość społeczna, taka jak nagroda apetytywna, jest związana z konkretnym osobnikiem, przewiduje się zwiększoną interakcję z tą myszą w kolejnych testach. Podsumowując, przedstawione zadania behawioralne można łatwo zastosować w większości laboratoriów do badania rozpoznawania tożsamości u myszy C57BL/6 i innych szczepów myszy.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dorosłe samce myszy C57BL/6 (8-10 tygodni; masa ciała: 18-25 g) zostały użyte w tym badaniu. Myszy wykorzystywane jako cele społeczne pozyskiwano z innego źródła (patrz tabela materiałów), aby upewnić się, że pochodzą z różnych miotów i wcześniej nie były znane badanym myszom. Wszystkie protokoły zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami w Centrum Badawczym Douglas i były zgodne z wytycznymi Kanadyjskiej Rady ds. Opieki nad Zwierzętami (nr protokołu: DOUG-5935).

1. Materiały (patrz Rysunek 1)

  1. Ustaw dużą przezroczystą klatkę (24 cm x 36 cm x 19,5 cm), która będzie neutralnym kontekstem w eksperymencie z negatywną wartościowością społeczną
  2. Użyj trójkątnego pudełka uderzeniowego o czarnych ściankach (długość każdego boku = 46 cm; wysokość = 29 cm) jako negatywnego kontekstu walencyjnego. Upewnij się, że podłoga skrzynki uderzeniowej składa się z metalowych siatek podłączonych do zaszyfrowanego generatora prądu sieciowego.
  3. Użyj dużej przezroczystej klatki (26 cm x 47 cm x 21 cm) jako kontekstu przyzwyczajenia do jedzenia w eksperymencie z pozytywną wartościowością społeczną.
  4. Użyj dużej klatki o czarnych ściankach (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) jako neutralnego kontekstu w eksperymencie z pozytywną wartościowością społeczną.
  5. Użyj dużej klatki o białych ściankach (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) z portem na żywność jako pozytywnego kontekstu walencji społecznej. Jako port na żywność użyj plastikowej rurki (o średnicy 0.5 cm), która przechodzi przez jedną stronę ściany i umieść białe plastikowe naczynie pod rurką.
  6. Wstępnie przycięte białe papiery sztalugowe do wykorzystania jako podłoga w kontekście neutralnym (neutralny trening zarówno w negatywnych, jak i pozytywnych eksperymentach z walencją społeczną) i pozytywnym kontekście walencji społecznej. Przytnij podkładkę nieco mniejszą niż dolna powierzchnia kontekstu, aby zapobiec zakopywaniu się myszy pod papierem. Wymień podkładki sztalugi między badanymi myszami.
  7. Użyj bezpyłowych, precyzyjnych granulek (20 mg, o smaku czekoladowym) jako wskazówki nagrody po interakcji z pozytywnie wartościowanym celem społecznym.
  8. Użyj wagi do codziennego ważenia badanych myszy przez cały czas trwania eksperymentów z pozytywną wartością społeczną.
  9. Do testów na dyskryminację społeczną należy użyć trzykomorowego pudełka (81 cm x 23 cm x 23 cm), z otworami w środkowej komorze, które łączą się z lewą i prawą komorą. Użyj zdejmowanych drzwiczek komory, aby utrzymać badaną mysz w środkowej komorze między sesjami, zapobiegając stresowi podczas obsługi.
  10. Użyj dwóch identycznych prostokątnych obudów z pleksi (10 cm x 5 cm x 30 cm) zarówno do treningu negatywnej, jak i pozytywnej walencji społecznej.
  11. Użyj czterech okrągłych drucianych kubków (8 cm x 8 cm x 10 cm) do testowania dyskryminacji społecznej. Trzymaj dwa druciane kubki puste podczas pierwszej sesji testu dyskryminacji społecznej. W sesji 2 umieść cele społeczne używane w treningu pozytywnej lub negatywnej walencji społecznej w pozostałych dwóch drucianych kubkach.
    UWAGA: Oznacz kubki druciane (np. za pomocą taśmy), aby odróżnić identyczne kubki druciane. W eksperymencie używaj drucianych kubków do tego samego celu przez cały czas trwania eksperymentu. Jeśli w drucianym kubku musi zostać umieszczony inny cel społeczny, dokładnie wyczyść drucianą kubek mydłem, wodą i szybko działającym środkiem dezynfekującym na bazie nadtlenku wodoru.
  12. Umieść dwie szklane butelki na przewróconych drucianych kubkach podczas testów dyskryminacji społecznej, aby zapobiec wspinaniu się badanych myszy na druciane kubki.
  13. Upewnij się, że pomieszczenia podczas treningu mają podłogi z materiału nieprzewodzącego do eksperymentów z negatywną wartościowością społeczną. Na przykład użyj plastiku lub tektury pokrytej taśmą izolacyjną, aby upewnić się, że negatywnie wartościowany cel społeczny nie zostanie potraktowany podczas treningu.
  14. Użyj cichego timera, aby uniknąć zewnętrznych sygnałów, które mogą zakłócać zachowanie zwierząt.
  15. Użyj kamery internetowej o wysokiej rozdzielczości (1,080 p/30 kl./s) podłączonej do laptopa, aby uchwycić zachowanie myszy podczas treningu i testu dyskryminacji społecznej.
  16. Użyj generatora białego szumu, który generuje statyczny biały szum o natężeniu 60 dB mierzonym w środku kontekstu.
    UWAGA: Wszystkie procedury behawioralne powinny być przeprowadzane ze statycznym białym szumem o natężeniu 60 dB mierzonym w środku kontekstu, aby zamaskować dźwięki otoczenia, które mogą wpływać na zachowanie zwierząt.
  17. Używaj lamp z czerwonym światłem do wszystkich procedur behawioralnych.
    UWAGA: Zapewnia to ciemne warunki środowiskowe, które zachęcają do eksploracji u myszy i pozwalają na wizualizację zachowania zwierząt w nagraniach wideo.
  18. Czyste pomieszczenia, zarówno puste, jak i zawierające zwierzęta, między badanymi myszami za pomocą 70% etanolu, który jest szybkoschnący. Oczyść konteksty treningowe i testowe między badanymi myszami za pomocą szybko działającego środka dezynfekującego na bazie nadtlenku wodoru, aby wyeliminować potencjalne wpływy na zachowanie, które wynikają z sygnałów węchowych od poprzednich badanych myszy.

2. Procedury behawioralne

  1. Negatywna walencja społeczna
    1. Przyzwyczajenie do kontekstu
      1. Wyposaż pomieszczenie eksperymentalne w biały szum i czerwone światło otoczenia na czas trwania eksperymentu.
      2. Przygotuj pudełko szokowe, umieszczając pustą obudowę z pleksi z nieprzewodzącą podłogą pośrodku.
      3. Umieść badaną mysz w rogu pola wstrząsu i pozwól myszy swobodnie eksplorować przez 5 minut.
      4. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
      5. Powtórz habituację pudełka szokowego z pozostałymi myszami.
      6. Co najmniej 1 godzinę później powtórz procedurę habituacji kontekstu (kroki 2.1.1.1-2.1.1.5) w neutralnym kontekście.
    2. Trening walencyjny negatywny
      1. Trening negatywnej walencji należy rozpocząć co najmniej 1 godzinę po przyzwyczajeniu się do obu kontekstów.
      2. Przygotuj skrzynkę udarową, ustawiając prąd na 0.3 mA.
        UWAGA: Zalecane bieżące ustawienie jest oparte na użytej przez nas skrzynce amortyzującej i naszym projekcie eksperymentalnym (3 dni treningowe). To ustawienie można zmodyfikować, aby pasowało do innych projektów eksperymentalnych (np. silniejszy prąd może być używany w projektach z mniejszą liczbą prób treningowych).
      3. Umieść ujemnie wartościowany cel społeczny w obudowie z pleksiglasu z nieprzewodzącym dnem pośrodku skrzynki uderzeniowej.
      4. Rozpocznij nagrywanie wideo i umieść mysz obiektu w rogu pola wstrząsu.
      5. Uruchom minutnik i pozwól badanej myszy swobodnie eksplorować.
      6. Po 4 i 4,5 minutach dostarcz wstrząs elektryczny o długości 1 s.
        UWAGA: Pozwala to na wystarczającą ilość czasu na interakcję między badaną myszą a celem społecznościowym, zanim doświadczy szoków awersyjnych.
      7. Usuń badaną mysz po 5 minutach i zatrzymaj nagrywanie oraz timer.
      8. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
      9. Zdezynfekuj pudełko szokowe i powtórz trening z ujemną wartościowością z pozostałymi badanymi myszami.
    3. Neutralny trening
      1. Rozpocznij neutralny trening co najmniej 2 godziny po treningu z ujemną walencją.
      2. Umieść neutralny cel społeczny w obudowie z nieprzewodzącym dnem w środku kontekstu.
        UWAGA: Nieprzewodzący dno służy do zapewnienia, że kontekst negatywny i neutralny mają identyczne wskazówki kontekstowe. W treningu neutralnym nie dochodzi do wstrząsu.
      3. Rozpocznij nagrywanie wideo i umieść poruszany obiekt myszy w rogu neutralnego kontekstu.
      4. Uruchom minutnik i pozwól badanej myszy swobodnie eksplorować.
      5. Usuń badaną mysz po 5 minutach i zatrzymaj nagrywanie oraz timer.
      6. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
    4. Kolejność szkolenia
      1. Dzień 1: Po przyzwyczajeniu się do obu kontekstów (krok 2.1.1), wykonaj trening neutralny (krok 2.1.3) 2 godziny po treningu walencyjnym negatywnym (krok 2.1.2).
      2. Dzień 2: Powtórz trening w dniu 2 z odwróconą kolejnością treningu (kroki 2.1.3, a następnie 2.1.2; tj. wykonaj trening neutralny, a następnie trening z ujemną wartościowością 2 godziny później).
      3. Dzień 3: Powtórz trening w dniu 3 z odwróconą kolejnością treningu (kroki 2.1.2, a następnie 2.1.3; tj. trening z ujemną walencją, a następnie trening neutralny 2 godziny później).
  2. Pozytywna walencja społeczna
    1. Deprywacja żywnościowa
      1. Waż każdą badaną mysz codziennie przez cały czas trwania eksperymentu.
        UWAGA: Jeśli w którymkolwiek momencie badana mysz straci więcej niż 15% swojej pierwotnej masy ciała, deprywacja żywności musi zostać powstrzymana, a mysz powinna zostać odrzucona z dalszych eksperymentów.
      2. Zapewnij 1 g zwykłego pokarmu dla myszy na badaną mysz w klatce domowej.
        UWAGA: Badane myszy są trzymane w grupach, w których na jedną mysz przypada 1 g pokarmu. Na przykład, jeśli cztery myszy są trzymane w grupie, 4 g jedzenia umieszcza się w klatce domowej.
      3. Powtarzaj deprywację pokarmową codziennie przez cały czas trwania eksperymentu z pozytywną wartościowością społeczną (tj. po każdym dniu przyzwyczajenia do granulek żywnościowych, przyzwyczajenia kontekstowego i treningu pozytywnej walencji).
    2. Przyzwyczajenie do granulek spożywczych sacharozy
      1. Habituację granulek pokarmowych należy rozpocząć po 12 godzinach od rozpoczęcia deprywacji pokarmowej.
      2. Wyposaż pomieszczenie eksperymentalne w biały szum i czerwone światło otoczenia na czas trwania eksperymentu.
      3. Umieść poruszany temat myszy w rogu kontekstu nawyku do jedzenia.
      4. Uruchom minutnik i podawaj 1 granulkę sacharozy / min w ciągu 10 minut.
      5. Usuń obiekt po 10 minutach i umieść mysz z powrotem w klatce głównej.
      6. Zapisz liczbę granulek sacharozy spożytych przez badaną mysz.
      7. Powtarzaj habituację granulek sacharozy przez łącznie 3 dni.
        UWAGA: Można dodać więcej dni przyzwyczajenia, jeśli myszy nie spożyją żadnych granulek sacharozy po 3 dniach.
      8. Należy usunąć z badania osoby, które nie spożywają żadnych granulek sacharozy podczas przyzwyczajania się do granulek spożywczych.
    3. Przyzwyczajenie do kontekstu
      1. Dzień po przyzwyczajeniu się do granulek sacharozy (dzień 4) przygotuj kontekst pozytywnej walencji, umieszczając pustą obudowę z pleksiglasu w rogu kontekstu.
      2. Umieść badaną mysz w rogu kontekstu pozytywnej walencji i pozwól myszy na swobodną eksplorację przez 10 minut.
      3. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
      4. Powtórz pozytywne przyzwyczajenie do kontekstu walencyjnego z pozostałymi myszami.
      5. Co najmniej 1 godzinę później powtórz procedurę przyzwyczajenia kontekstu w neutralnym kontekście.
    4. Trening pozytywnej walencji
      1. Rozpocznij pozytywny trening walencyjny co najmniej 1 godzinę po przyzwyczajeniu się do obu kontekstów.
      2. Umieść pozytywnie wartościowany cel społeczny w obudowie w centrum kontekstu pozytywnej walencji.
      3. Rozpocznij nagrywanie wideo i umieść badany kursor myszy w rogu pozytywnego kontekstu walencyjnego.
      4. Uruchom minutnik i pozwól badanej myszy swobodnie eksplorować przez 10 minut.
      5. Przy każdej interakcji z celem społecznym, który wynosi >2 s, dostarcz 1 granulkę sacharozy przez port pokarmowy. Interakcja jest definiowana jako okresy, w których nos badanej myszy znajduje się w odległości <2 cm od obrzeża obudowy z pleksiglasu. Kąt nachylenia głowy testera musi być skierowany w stronę obudowy.
        UWAGA: Może wystąpić szturchanie nosa i wąchanie, ale nie jest to konieczne do dostarczania granulek sacharozy.
      6. Usuń badaną mysz po 10 minutach i zatrzymaj nagrywanie oraz samowyzwalacz.
      7. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
      8. Zapisz liczbę granulek sacharozy dostarczonych przez port pokarmowy oraz liczbę granulek spożytych przez badaną mysz.
      9. Wymień podłogę podkładki sztalugowej, zdezynfekuj pozytywny kontekst i powtórz trening pozytywnej walencji z pozostałymi badanymi myszami.
    5. Neutralny trening
      1. Rozpocznij neutralny trening co najmniej 2 godziny po treningu walencyjnym.
      2. Umieść neutralny cel społeczny w ogrodzeniu w rogu neutralnego kontekstu.
      3. Rozpocznij nagrywanie wideo i umieść poruszany obiekt myszy w rogu neutralnego kontekstu.
      4. Uruchom minutnik i pozwól badanej myszy swobodnie eksplorować przez 10 minut.
      5. Usuń badaną mysz po 10 minutach i zatrzymaj nagrywanie oraz samowyzwalacz.
      6. Przywróć badaną mysz do jej klatki głównej.
      7. Wymień podłogę podkładki sztalugowej, zdezynfekuj sprzęt i powtórz neutralny trening z pozostałymi myszami.
    6. Kolejność szkolenia
      1. Dni 1-3: Wykonaj przyzwyczajenie do granulek pokarmowych (krok 2.2.2).
      2. Dzień 4: Po przyzwyczajeniu się do obu kontekstów (krok 2.2.3), najpierw wykonaj trening pozytywnej walencji (krok 2.2.4), a następnie trening neutralny (krok 2.2.5) 2 godziny później.
      3. Dzień 5: Powtórz trening w dniu 5 z odwróconą kolejnością treningu (kroki 2.2.5, a następnie 2.2.4; tj. trening neutralny, a następnie trening walencyjny pozytywnie 2 godziny później).
  3. Test na dyskryminację społeczną
    1. Wyposaż pomieszczenie eksperymentalne w biały szum i czerwone światło otoczenia.
    2. Przetransportuj badanych do pomieszczenia doświadczalnego i pozwól na niezakłócone przyzwyczajenie się do pomieszczenia przez co najmniej 1 godz.
      UWAGA: Upewnij się, że cele społeczne pozostają poza pomieszczeniem eksperymentalnym w okresie przyzwyczajenia.
    3. W sesji 1 umieść dwa puste druciane kubki w przeciwległych rogach lewej i prawej komory trzykomorowej skrzynki na dyskryminację społeczną.
      UWAGA: Identyczne duże ważone przedmioty (np. szklane butelki) umieszcza się na drucianych miseczkach, aby zapewnić, że badana mysz nie wspina się na drucianą miseczkę.
    4. Rozpocznij nagrywanie wideo, umieść badaną mysz na środku środkowej komory i uruchom stoper.
      UWAGA: Jeśli to możliwe, wyjdź z pokoju, aby zminimalizować ingerencję eksperymentatora w badane myszy.
    5. Po 8 minutach wróć do pokoju testowego i nie dotykając badanej myszy, użyj drzwi komory, aby zamknąć badanego w środkowej komorze.
    6. Zastąp puste druciane kubki identycznym, ale innym zestawem kubków zawierających cele społeczne.
      UWAGA: Cele społeczne to te używane w treningu negatywnej lub pozytywnej walencji społecznej.
    7. Zdejmij drzwi komory i uruchom stoper, gdy badana mysz eksploruje w sesji 2.
    8. Po 8 minutach zatrzymaj nagrywanie i przywróć badaną mysz i cele społecznościowe do odpowiednich klatek domowych.
    9. Wyczyść kubki 70% etanolem i wyczyść arenę środkiem dezynfekującym.
    10. Powtórz testy dyskryminacji społecznej (kroki 2.3.3-2.3.9) z pozostałymi badanymi myszami.
    11. Gdy połowa kohorty zakończy testy, zrównoważ lokalizację drucianego kubka.
      UWAGA: Cele społeczne powinny być przesuwane za pomocą odpowiednich drucianych miseczek, aby zapobiec sprzecznym sygnałom węchowym.
    12. Wyczyść wszystkie druciane kubki mydłem, wodą i środkiem dezynfekującym. Wyczyść trzykomorowy pojemnik na dyskryminację społeczną środkiem dezynfekującym.

3. Analiza behawioralna

  1. szkolenie
    1. Przeanalizuj czas interakcji z każdym celem społecznościowym i oceń liczbę napadów interakcji.
      UWAGA: Analiza może być oceniana ręcznie (głowa zwierzęcia w odległości <2 cm od obrzeża pomieszczenia i kąt głowy 180°) lub za pomocą automatycznego programu.
    2. Rejestruj liczbę granulek żywności spożywanych podczas pozytywnego treningu walencji społecznej, aby upewnić się, że zmiany w zachowaniach społecznych nie są spowodowane różnicami w motywacji do spożywania nagród w postaci jedzenia.
  2. Test na dyskryminację społeczną
    1. Zmierz czas, przez jaki badana mysz bada każdą filiżankę. 8-minutowy, nieprzerwany czas trwania testu rozpoczyna się, gdy eksperymentator opuści pomieszczenie.
      UWAGA: Analiza może być oceniana ręcznie (głowa zwierzęcia <2 cm od obwodu drucianego kubka i kąt główki 180°) lub za pomocą automatycznego programu.
    2. Obliczaj analizy parami, aby lepiej uchwycić poszczególne zmiany w sesjach testowych. Dodatkowo wykonuj dwukierunkowe powtarzane pomiary ANOVA (z czynnikami sesji i kubka), aby wykryć różnice między sesjami w eksploracji.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Użyliśmy zadań z pozytywną i negatywną wartościowością społeczną do oceny rozpoznawania tożsamości u myszy C57BL/6 (Rysunek 2). W porównaniu z pierwszym dniem przyzwyczajenia do sacharozy (H1, Rysunek 2B), większość myszy spożywała wszystkie podane granulki do ostatniego dnia przyzwyczajenia do jedzenia (H3). Podczas sesji treningowych (T1 i T2) badane myszy zapoznały się z dwiema myszami CD1: neutralną (Neu) i dodatnią wartościową (PV), wchodząc z nimi w interakcję oddzielnie w różnych kontekstach. Nagrody w postaci jedzenia podawano badanym myszom dopiero po interakcji z mysim PV. Podczas zadania dotyczącego dyskryminacji społecznej stwierdziliśmy, że wyszkolone myszy preferowały interakcję z myszą PV w porównaniu z myszą neutralną (* p < 0,05, sparowany test t-Studenta). Stosunek czasu interakcji w sesji 2 w porównaniu z interakcją w sesji 1 również ujawnił preferencję w stosunku do myszy PV (* p < 0,05, sparowany test t-Studenta).

Użyliśmy również zadania negatywnej wartości społecznej do zbadania rozpoznania tożsamości (Rysunek 2C). Badane myszy zapoznały się z dwiema myszami CD1: myszą Neu i myszą związaną z ujemną wartościowością (NV), wchodząc z nimi w interakcję oddzielnie w różnych kontekstach. Dwa wstrząsy elektryczne zostały poddane pod koniec sesji interakcji z myszą NV, podczas gdy po interakcji z myszą Neu nie podano żadnych wstrząsów. Nie znaleźliśmy różnic w czasie interakcji między badanymi myszami a myszami Neu lub NV w każdym dniu treningowym. Odkryliśmy jednak, że badane myszy skróciły czas interakcji z myszą NV podczas testu dyskryminacji społecznej (* p < 0,05, sparowany test t-Studenta). Stosunek czasu interakcji w sesji 2 w porównaniu z interakcją w sesji 1 również ujawnił preferencję w stosunku do myszy Neu (* p < 0,05, sparowany test t-Studenta).

figure-results-1
Rysunek 1: Aparatura do zadań związanych z rozpoznawaniem tożsamości. (A) Neutralny kontekst walencyjny dla negatywnych testów walencji społecznej. Na dole kontekstu umieszcza się biały papier tamponowy sztalugowy. (B) Pozytywny kontekst walencji społecznej. Zwróć uwagę na port żywności (strzałka) w środkowej dolnej części pudełka. (C) Neutralny kontekst walencyjny dla pozytywnych testów walencji społecznej. (D) Kontekst przyzwyczajenia do jedzenia. Port do dostarczania żywności jest zainstalowany po prawej stronie pudełka, jak pokazano na literach E (przerywane kółko) i F (powiększone). (G) Skrzynka amortyzacyjna. (H) Obudowa z pleksiglasu. (I) Kubek druciany. (J) Trzykomorowa skrzynka na dyskryminację społeczną do testu dyskryminacji społecznej. Zdejmowane drzwiczki komory do przechowywania badanej myszy w środkowej komorze są pokazane w K (groty strzałek). Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

figure-results-2
Rysunek 2: Projekt i oczekiwane wyniki zadań rozpoznawania tożsamości. (A) Schematy ideowe pozytywnych (na górze) i negatywnych wersji walencji społecznej zadań związanych z rozpoznawaniem tożsamości (na dole). Myszy C57BL/6 zostały przeszkolone do codziennej interakcji z neutralnymi (mysi Neu) i walencyjnymi celami społecznymi (mysz PV lub NV). Jednego dnia po treningu, badane myszy umieszczono w trzykomorowym aparacie w celu przeprowadzenia testu dyskryminacji społecznej. Spodziewamy się, że po pozytywnym i negatywnym treningu walencji społecznej, badane myszy będą wykazywać preferencje i unikanie odpowiednio myszy o dodatniej wartościacji (zielone, mysie PV) i ujemnie wartościowane (czerwone, mysie NV). (B) Reprezentatywne dane z eksperymentu z pozytywnym treningiem walencyjnym społecznym. Badane myszy zostały przeszkolone do interakcji z myszą o dodatniej wartościowości (mysz PV) i myszą neutralną (mysz Neu) codziennie przez 2 dni. Kolejność interakcji została odwrócona w dniu 2. Po lewej: Histogramy pokazują procent spożytych granulek sacharozy podczas habituacji (H1-3, które reprezentują dni habituacji 1-3) i treningu (T1-2, które reprezentują dni treningu 1-2) z PV myszy. Po prawej: Histogramy pokazują wydłużenie czasu interakcji społecznej z dodatnio wartościowanym PV myszy podczas testu dyskryminacji społecznej. Stosunek międzysesyjny (czas interakcji sesji 2 / czas interakcji sesji 1) ujawnił preferencję dla myszy o dodatnim wartościowaniu PV. * p < 0,05, sparowany test t-Studenta. (C) Reprezentatywne dane z eksperymentu z negatywnym treningiem walencyjnościowym. Badane myszy były szkolone do interakcji z myszą o ujemnej wartościowości (mysz NV) i neutralną myszą (mysz Neu) codziennie przez 3 dni. Kolejność interakcji była codziennie odwracana. Po lewej: Histogramy pokazują czas interakcji z myszą Neu i NV podczas różnych dni treningowych. Po prawej: Histogramy pokazują skrócenie czasu interakcji społecznej z myszą NV o ujemnej wartościowości podczas testu dyskryminacji społecznej. Współczynnik międzysesyjny ujawnił unikanie myszy o ujemnej wartościowości. * p < 0,05, sparowany test t-Studenta. Skróty: Neu = neutralny; PV = dodatnia wartościowość; NV = wartościowość ujemna; H = przyzwyczajenie; T = szkolenie. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Paradygmaty rozpoznawania tożsamości zostały zaprojektowane tak, aby można je było łatwo wdrożyć w laboratoriach przy minimalnym specjalistycznym sprzęcie i kilku sesjach szkoleniowych w ciągu tygodnia. Alternatywne doświadczenia walencyjne mogą być wykorzystywane w zależności od dostępnych zasobów i pożądanego pytania badawczego. Na przykład negatywnie wartościowane rozpoznawanie tożsamości po atakach ze strony agresywnego celu społecznego zostało po raz pierwszy opisane u chomików złotych i dostosowane do myszy w naszym modelu 6,12.

Walencyjne paradygmaty rozpoznawania tożsamości mogą mieć szersze zastosowanie w dziedzinie pamięci społecznej. Zadania te można nie tylko wykorzystać do dalszego badania pamięci społecznej lub mechanizmów walencji społecznej, ale mogą również pomóc w badaniu modeli chorób, o których wiadomo, że mają zaburzenia rozpoznawania społecznego. Upośledzenie rozpoznawania tożsamości leży u podstaw deficytów zachowań społecznych w zaburzeniach takich jak schizofrenia 13,14,15 i zaburzenia ze spektrum autyzmu 16,17,18, gdzie szacuje się, że jedna trzecia dorosłych z autyzmem ma trudności z rozpoznawaniem tożsamości indywidualnej19. Na przykład myszy z nokautem Shank3 i Df(16)A+/- są mysimi modelami zaburzeń ze spektrum autyzmu i schizofrenii, o których wiadomo, że wykazują upośledzone poznanie społeczne 20,21,22. Nasze nowe paradygmaty mogą podsumować deficyty pamięci społecznej i zostać przyjęte do charakterystyki modeli chorób i identyfikacji manipulacji lub metod leczenia, które poprawiają deficyty zachowań społecznych. Obiekty nieożywione mogą być również badane w zamian za cele społeczne, aby dokładniej przeanalizować mechanizmy wspierające obiekt, w porównaniu z rozpoznaniem społecznym12.

Cele społeczne użyte na rysunku 1 to myszy tej samej płci ze szczepem CD1, ale osiągnęliśmy porównywalne rozpoznawanie tożsamości przy użyciu celów C57BL / 6 tego samego szczepu. W ten sposób opracowaliśmy łatwą do zaadoptowania metodę, która może być wykorzystana do dalszych badań nad przetwarzaniem walencji społecznej, tożsamością społeczną i deficytami tych społecznych funkcji poznawczych w zwierzęcych modelach chorób mózgu.

Paradygmaty rozpoznawania tożsamości przyglądają się pamięci konkretnych osób. Projektując eksperymenty, należy zadbać o to, aby sesje treningowe i testowe były całkowicie różne, a jedyną stałą wskazówką była tożsamość celów społecznych. Na przykład pomieszczenia, w których przeprowadzane są szkolenia i testy, pomieszczenia, w których znajdują się cele społeczne, oraz wskazówki związane z kontekstem szkolenia i testowania muszą być różne.

Cztery druciane miseczki muszą być identyczne względem siebie, ale jak najbardziej różniące się od obudów z pleksi. Druciane kubki i obudowy muszą różnić się materiałem (np. pleksi kontra metal), kształtem (np. prostokątny vs. okrągły) i kolorem (np. przezroczysty vs. różowe złoto). Ma to na celu zapewnienie, że jedyną wskazówką informującą o zachowaniu eksploracyjnym podczas testowania jest tożsamość celów społecznościowych.

Habituacja kontekstu jest przeprowadzana w 1 dniu treningu. Ma to na celu zachęcenie do eksploracji celów społecznych podczas treningu, a nie kontekstu, który będzie już znany badanej myszy. Ponadto zalecany jest co najmniej 2-godzinny czas oczekiwania między sesjami treningowymi walencyjnymi i neutralnymi. Uważa się, że zapewnienie badanym myszom czasu między sesjami treningowymi zmniejsza uogólnienie, ponieważ doświadczenia przydzielone bliżej czasu są bardziej prawdopodobne, żebędą ze sobą powiązane. Z tego samego powodu trening jest powtarzany, ale równoważony w kolejności, w kolejnych dniach. Uważa się, że powtarzanie zachęca do dalszego kojarzenia doświadczenia z odpowiednim celem społecznym. Idealnie byłoby, gdyby więcej czasu między sesjami treningowymi pozwoliło badanym myszom nauczyć się kojarzyć cel społeczny z ich odpowiednim wartościowym doświadczeniem. Ze względów praktycznych zdecydowano się na okres oczekiwania wynoszący 2 godziny, ponieważ pozwalał on na odbycie zarówno neutralnych, jak i walencyjnych sesji treningowych w ciągu 1 dnia w kohorcie 8-12 myszy. Na przykład wytrenowanie 12 myszy może zająć około 2 godzin, w którym to momencie badana mysz, która została przeszkolona jako pierwsza, będzie gotowa do rozpoczęcia następnej sesji treningowej. Oczywiście, wydłużenie okresu oczekiwania może poprawić wydajność badanych myszy, ale będzie bardziej czasochłonne dla eksperymentatora.

Badane myszy i cele społeczne powinny przybyć do obiektu dla zwierząt co najmniej 7 dni przed rozpoczęciem treningu behawioralnego, aby zminimalizować wpływ stresu transportowego. Cele społeczne powinny być trzymane w jednym miejscu, ponieważ sygnały węchowe od współwięźniów mogą upośledzać rozpoznawanie tożsamości. Te same dwa cele społeczne można wykorzystać dla kohorty do 12 badanych myszy. Co ważne, cele społeczne muszą zostać zwrócone do ich klatki domowej podczas każdego okresu czyszczenia i konfiguracji między badanymi myszami. Ważne jest, aby zwrócić cele społeczne do ich klatek domowych, ponieważ długotrwałe przebywanie w pomieszczeniach może zmienić ich zachowanie, a co za tym idzie, wpłynąć na decyzję badanych myszy o interakcji.

Badane myszy i cele społeczne mogą być przedstawicielami tego samego lub różnych szczepów. Jeśli stosowane są cele społeczne tego samego szczepu, ważne jest, aby nie pochodziły one z tego samego miotu co badane myszy, a cele społeczne muszą być sobie nieznane. Można to zapewnić, zamawiając badane myszy i cele społeczne od różnych dostawców zwierząt lub zamawiając zwierzęta w nieco innym wieku (tj. 8-tygodniowe badane myszy i 7-tygodniowe cele społeczne). Jeśli wymagane są zabiegi kolczykowania uszu, należy je przeprowadzić co najmniej 24 godziny przed rozpoczęciem treningu behawioralnego. Ma to na celu zminimalizowanie wpływu zewnętrznych stresorów na zachowanie badanych myszy. W przypadku wszystkich treningów i testów behawioralnych zaleca się pracę z jedną myszą badaną na raz. Chociaż jednoczesne trenowanie i testowanie wielu badanych myszy może zaoszczędzić czas, zwiększa również sygnały węchowe w pomieszczeniu eksperymentalnym, które mogą wpływać na kodowanie lub przypominanie sobie rozpoznawania tożsamości. W związku z tym zalecamy kohorty 8-12 badanych myszy. W przypadku eksperymentów z pozytywną wartościowością społeczną zaleca się codzienne zajmowanie się zwierzętami przed treningiem, aby zminimalizować stres, który może zniechęcać do spożywania nowej żywności. Zaleca się również umieszczenie 2-3 granulek sacharozy na mysz w klatce domowej na 3 dni przed habituacją, aby ułatwić proces habituacji.

Chociaż prezentowane dane zostały ocenione ręcznie, istnieją przyjazne dla użytkownika i zautomatyzowane opcje analizy behawioralnej, które można zastosować do bardziej efektywnej oceny interakcji społecznych w filmach szkoleniowych i testowych. Na przykład DeepLabCut jest oprogramowaniem wykorzystującym sieci neuronowe wyszkolone przez użytkownika do bezznacznikowego opisywania pozycji zwierząt i może być zoptymalizowane pod kątem precyzyjnej identyfikacji ramek spełniających wymagania dotyczące zachowań śledczych24.

Dalsze eksperymenty kontrolne mogą być stosowane w celu sprawdzenia, czy pomyślnie osiągnięto protokoły rozpoznawania tożsamości12. Odwrócenie kolejności trenowania powinno nadal wywoływać rozpoznawanie tożsamości i potwierdzać, że wyniki nie wynikają z kolejności wartościowania i neutralnego szkolenia. Trening może być również prowadzony zgodnie z opisem, ale testowanie może odbywać się z neutralnym i nowym celem społecznym, gdzie zwiększona interakcja z nowym celem sugerowałaby, że badane myszy mają pamięć społeczną dla neutralnego celu i rozpoznały, że jest on znajomy. Podobnie, testy na dwóch nowych myszach można przeprowadzić, aby potwierdzić, że zachowania unikające lub zbliżające się są w rzeczywistości specyficzne odpowiednio dla negatywnie i pozytywnie ocenianych celów społecznych. Chociaż obecnie nie przetestowano, czy ta sama badana mysz może przejść zarówno negatywny, jak i pozytywny trening walencji społecznej, uważamy, że jest to możliwe, jeśli eksperymentatorzy mają dostęp do wielu docelowych szczepów społecznych lub kontekstów treningowych. Użycie tego samego szczepu celów społecznych do eksperymentów z dodatnią i ujemną wartościowością może skomplikować powiązanie szczepu z określoną wartościowością. Jeśli to możliwe, używanie różnych szczepów celów społecznych może zachęcać do eksploracji i unikać uogólnień między pozytywnymi i negatywnymi doświadczeniami. Podobnie, ponowne użycie tych samych kontekstów szkoleniowych zwiększyłoby uogólnienie między doświadczeniami o przeciwstawnych wartościach i zostałoby zminimalizowane przy użyciu odrębnych kontekstów do trenowania. Jeśli pozwala na to harmonogram eksperymentu, zaleca się również oddzielenie eksperymentów z dodatnią i negatywną wartościowością o kilka tygodni.

W przypadku trudności z ustanowieniem protokołów rozpoznawania tożsamości, proponujemy rozwiązania często spotykanych problemów, z którymi się spotkaliśmy. Trzymanie w grupie myszy badanych może funkcjonować jako trening wymierania, ponieważ wartościowość związana z celem społecznym wygasa po normalnej interakcji z klatką25, ale jest konieczna, ponieważ izolacja społeczna upośledza pamięć społeczną i zmienia zachowania społeczne26,27. W rzeczywistości odkryliśmy, że pojedyncze trzymanie nie wywołało rozpoznawania tożsamości u samców myszy. Jednak pojedyncze trzymanie może być wymagane, jeśli zwierzęta wracają do zdrowia po operacjach stereotaktycznych lub mają implanty wewnątrzczaszkowe, które mogą być wrażliwe na odwarstwienie. W takich przypadkach udało nam się połączyć myszy w pary w dużych klatkach, oddzielonych perforowaną przegrodą, i zreplikowaliśmy rozpoznawanie tożsamości w tym stanie12.

W przypadku zadania pozytywnej walencji społecznej myszy często wahają się przed spożyciem nowych granulek sacharozy. Aby rozwiązać ten problem, pomocne jest wydłużenie czasu pozbawienia pokarmu lub zapoznanie myszy z granulkami poprzez umieszczenie kilku granulek w ich domowej klatce na 2-3 dni przed sesją habituacyjną. W niektórych sytuacjach, gdy większość myszy nie spożywa żadnych granulek pokarmowych, pomocne może być również zwiększenie liczby sesji przyzwyczajenia. Chociaż zauważyliśmy, że samce myszy na ogół jadły mniej podczas przyzwyczajania się do granulek pokarmowych niż samice myszy, nie wpływa to na ich zdolność do rozpoznawania pozytywnie wartościowanego celu społecznego.

Na koniec parametry zadań rozpoznawania tożsamości można modyfikować w celu zmniejszenia lub zwiększenia trudności zadania. Na przykład, aby ujawnić subtelny wpływ czynników biologicznych na rozpoznawanie tożsamości, czas szkolenia i liczba sesji treningowych mogą zostać skrócone, aby zwiększyć trudność zadania.

Zadania behawioralne, które przedstawiliśmy w tym protokole, są proste, łatwe do skonfigurowania i można je dostosować do samców i samic myszy w celu badania rozpoznawania tożsamości. Elastyczne wykorzystanie bodźców apetytywnych lub awersyjnych w tych zadaniach pozwala również na zbadanie roli walencji społecznej w rozpoznawaniu tożsamości. Zadania te będą przydatne do badania biologicznych mechanizmów rozpoznawania tożsamości u zdrowych myszy lub deficytów tych mechanizmów w modelach mysich związanych z chorobami, które wykazują upośledzenie społeczne.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Chcielibyśmy podziękować Pani Alice Wong za udzielenie wsparcia technicznego oraz dr J. Quinn Lee za skonstruowanie aparatu wstrząsowego. Dziękujemy i doceniamy nasze źródła finansowania: Kanadyjską Radę ds. Badań Nauk Przyrodniczych i Inżynierii (RGPIN-2021-03739), Kanadyjskie Instytuty Badań nad Zdrowiem (PJ8 179866) oraz Fonds de recherche du Québec – Nature et technologies (326838).

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
70% etanol
Klatka o czarnych ściankach (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) neutralny kontekst, eksperyment z pozytywną wartościowością społeczną
Charles River, Jackson Laboratory Celespołeczne od Jackson Laboratory
Bezpyłowe granulki precyzyjneBioServF0530120 mg, smak czekoladowy
Taśma elektryczna 
Butelki szklane (2)
Środek
Plastik lub tektura Nieprzewodzący materiał na podłogę obudowy
Obudowy z pleksi prostokątnej (2, 10 cm x 5 cm x 30 cm) Identyczne
pudełko amortyzatora (trójkątne, długość z każdej strony = 46 cm; wysokość = 29 cm)
Cichy zegar 
Jednowyjściowy Scrambled Animal ShockerInstrument Lafayette HSCK100AP
trzykomorowe pudełko (81 cm x 23 cm x 23 cm), z otworami w środkowej komorze, które łączą się z lewą i prawą komorąTesty
Przezroczysta klatka (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) Negatywna walencja społeczna 
Przezroczysta klatka (26 cm x 47 cm x 21 cm) Przyzwyczajenie do jedzenia (pozytywna walencja społeczna)
Kamera internetowaLogitechC920x
Waga 
Bibuły bloczkowe sztalugowe białe Podłoga neutralnego kontekstu 
Generator białego szumu 60 dB
Białe, plastikowe naczynie
Klatka o białych ściankach (24 cm x 36 cm x 19,5 cm) z plastikową rurką o średnicy 1 cm jako portem na żywność pozytywny kontekst
Kubki druciane (okrągłe, cztery, 8 cm x 8 cm x 10 cm) 
myszy C57BL/6 dezynfekujący na bazie nadtlenku wodorudyskryminacji społecznejwalencji społecznej

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Van Der Kooij, M. A., Sandi, C. Social memories in rodents: Methods, mechanisms and modulation by stress. Neurosci Biobehav Rev. 36 (7), 1763-1772 (2012).
  2. Ferguson, J. N., Young, L. J., Insel, T. R. The neuroendocrine basis of social recognition. Front Neuroendocrinol. 23 (2), 200-224 (2002).
  3. Tibbetts, E. A., Dale, J. Individual recognition: It is good to be different. Trends Ecol Evol. 22 (10), 529-537 (2007).
  4. Hitti, F. L., Siegelbaum, S. A. The hippocampal ca2 region is essential for social memory. Nature. 508 (7494), 88-92 (2014).
  5. Okuyama, T., Kitamura, T., Roy, D. S., Itohara, S., Tonegawa, S. Ventral ca1 neurons store social memory. Science. 353 (6307), 1536-1541 (2016).
  6. Lai, W. S., Ramiro, L. L., Yu, H. A., Johnston, R. E. Recognition of familiar individuals in golden hamsters: A new method and functional neuroanatomy. J Neurosci. 25 (49), 11239-11247 (2005).
  7. Cordero, M. I., Sandi, C. Stress amplifies memory for social hierarchy. Front Neurosci. 1 (1), 175-184 (2007).
  8. Kong, E., Lee, K. H., Do, J., Kim, P., Lee, D. Dynamic and stable hippocampal representations of social identity and reward expectation support associative social memory in male mice. Nat Commun. 14 (1), 2597(2023).
  9. Kent, K., Butler, K., Wood, R. I. Ethanol induces conditioned social preference in male mice. Alcohol Clin Exp Res. 38 (4), 1184-1192 (2014).
  10. Wood, R. I., Rice, R. Ethanol-induced conditioned partner preference in female mice. Behav Brain Res. 243, 273-277 (2013).
  11. Toth, I., Neumann, I. D., Slattery, D. A. Social fear conditioning: A novel and specific animal model to study social anxiety disorder. Neuropsychopharmacology. 37 (6), 1433-1443 (2012).
  12. Larosa, A., et al. Social valence dictates sex differences in identity recognition. bioRxiv. , (2024).
  13. Marwick, K., Hall, J. Social cognition in schizophrenia: A review of face processing. Br Med Bull. 88 (1), 43-58 (2008).
  14. Sachs, G., Steger-Wuchse, D., Kryspin-Exner, I., Gur, R. C., Katschnig, H. Facial recognition deficits and cognition in schizophrenia. Schizophr Res. 68 (1), 27-35 (2004).
  15. Whittaker, J. F., Deakin, J. F., Tomenson, B. Face processing in schizophrenia: Defining the deficit. Psychol Med. 31 (3), 499-507 (2001).
  16. Griffin, J. W., Bauer, R., Scherf, K. S. A quantitative meta-analysis of face recognition deficits in autism: 40 years of research. Psychol Bull. 147 (3), 268-292 (2021).
  17. Carver, L. J., Dawson, G. Development and neural bases of face recognition in autism. Mol Psychiatry. 7 Suppl 2, S18-S20 (2002).
  18. Klin, A., et al. A normed study of face recognition in autism and related disorders. J Autism Dev Disord. 29 (6), 499-508 (1999).
  19. Minio-Paluello, I., Porciello, G., Pascual-Leone, A., Baron-Cohen, S. Face individual identity recognition: A potential endophenotype in autism. Mol Autism. 11 (1), 81(2020).
  20. Peca, J., et al. Shank3 mutant mice display autistic-like behaviours and striatal dysfunction. Nature. 472 (7344), 437-442 (2011).
  21. Piskorowski, R. A., et al. Age-dependent specific changes in area ca2 of the hippocampus and social memory deficit in a mouse model of the 22q11.2 deletion syndrome. Neuron. 89 (1), 163-176 (2016).
  22. Xu, Q. W., Larosa, A., Wong, T. P. Roles of ampa receptors in social behaviors. Front Synaptic Neurosci. 16, 1405510(2024).
  23. Cai, D. J., et al. A shared neural ensemble links distinct contextual memories encoded close in time. Nature. 534 (7605), 115-118 (2016).
  24. Mathis, A., et al. Deeplabcut: Markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  25. Zoicas, I., Slattery, D. A., Neumann, I. D. Brain oxytocin in social fear conditioning and its extinction: Involvement of the lateral septum. Neuropsychopharmacology. 39 (13), 3027-3035 (2014).
  26. Ieraci, A., Mallei, A., Popoli, M. Social isolation stress induces anxious-depressive-like behavior and alterations of neuroplasticity-related genes in adult male mice. Neural Plast. 2016, 6212983(2016).
  27. Kogan, J. H., Frankland, P. W., Silva, A. J. Long-term memory underlying hippocampus-dependent social recognition in mice. Hippocampus. 10 (1), 47-56 (2000).

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Pami spo ecznadyskryminacja spo ecznaasocjacja walencyjnamyszy C57BL 6nowo spo ecznainterakcja spo ecznamodele mysie autyzmupoznanie spo eczne

Powiązane artykuły